不同发育时期大鼠脑海马区胆固醇对发育与成熟的意义

背景：胆固醇可使体外培养的神经元自身突触数量增加，囊泡数量及递质释放效能亦明显增高。目的：建立大鼠脑海马组织中微量胆固醇的高效液相色谱检测方法，观察胆固醇在大鼠脑海马发育和成熟中的作用一设计：重复测量实验。材料：实验于2004—01／06在武汉大学人民医院神经科学研究室完成。选择健康雄性Wistar乳鼠（出生24h内）、幼鼠（28～30d．体质量40～60g）和成鼠（90～100d，体质量200～250g）各10只。方法：大鼠在麻醉状态下断头取海马称重，制备匀浆，离心，过滤后采用美国安捷伦公司反相色谱柱（ZORBAX XDB C184．6＊250mm5μm，Agilent），以乙腈-异丙醇（4：1）为流动相；流速0．8ml／min；检测波长208nm。VARIAN Prostar 325紫外检测器和美国VARIAN公司的LCWORKSTATl0N V6．2色谱数据处理系统检测和处理色谱数据，获得胆固醇色谱图。样品中胆固醇含量（mg／g）=10&;#215;0．996 5&;#215;样品中胆固醇的峰面积&;#215;标准胆固醇的含量（g／L）&;#247;标准胆固醇的峰面积主要观察指标：①乳鼠、幼鼠和成鼠脑海马胆固醇含量与其色谱峰面积的关系。（④乳鼠、幼鼠和成鼠脑海马胆固醇含量。结果：30只大鼠均进入结果分析。①胆固醇含量在0．1323～2．6472g／L时与其色谱峰面积呈良好的线性关系（r=0．99993）。②乳鼠、幼鼠和成鼠脑海马胆固醇含量：3组样品的胆固醇含量分别为（2．92&;#177;0．03），（11．20&;#177;3．41），（12．91&;#177;1．25）mg／g，差别均有极显著性意义（P〈0．01）。结论：用高效液相色谱法检测大鼠脑海马组织中的微量胆固醇灵敏，特异性好，且分析时间短。在大鼠发育过程中，脑海马中胆固醇含量渐增，说明胆固醇对大鼠脑海马结构、功能的发育和成熟可能发挥了关键性的作用。     

麻黄对去卵巢肥胖大鼠体质量、血脂、血糖及激素水平的影响

背景近年来,中药麻黄用于肥胖症的治疗并有一定的效果,但麻黄对围绝经期妇女的肥胖是否有效有待研究.目的观察口服麻黄水煎剂对去卵巢肥胖大鼠体质量、血脂、血糖及激素水平的影响.设计完全随机分组设计,对照实验.单位兰州大学基础医学院生理学和心理学研究所.材料实验于2006-02/06在甘肃省新药临床前研究重点实验室和兰州大学基础医学院生理学和心理学研究所实验室完成.选用健康雌性SD大鼠44只,随机分为4组,每组11只,分别为假手术组,去卵巢组,雌激素替代治疗组和麻黄组.方法①大鼠用氯胺酮(110 mg/kg)麻醉,除假手术组外全部行双侧去卵巢术.假手术组进行同样的手术过程,但不切除卵巢.②假手术组和去卵巢组大鼠术后每天皮下注射芝麻油(0.2 mL/只),持续到实验结束.③雌激素替代治疗组大鼠术后每天皮下注射雌激素(1 mg/kg),持续到实验结束.④麻黄组大鼠术后自然口服1%浓度的麻黄水煎剂,到第6天浓度逐渐增至8%,持续到实验结束.⑤每天测定大鼠的摄食量,每隔10天测定大鼠的体质量.⑥实验结束时,所有实验动物禁食12 h后,颈动脉取血测定血清指标.同时测定体质量和体长计算李氏指数[(g)×103/体长(cm)].主要观察指标①不同时间点各组大鼠体质量及李氏指数.②不同时间点各组大鼠摄食量结果.③大鼠血脂和血糖水平.④不同组别大鼠血清雌激素、孕激素和胰岛素水平. 结果大鼠44只全部进入结果分析.①不同时间点各组大鼠体质量及李氏指数结果去卵巢组大鼠实验开始第20,30,40,50天体质量分别为(256.4±14.3),(271.3±16.1),(276.4±12.7),(285.7±24.2)g,均大于假手术组大鼠相应时间点[(226.5±11.5),(241.8±12.6),(243.1±13.5),(251.1±22.4)g,P＜0.05～0.01],李氏指数大于假手术组(317.2±13.5,280.4±11.2,P＜0.01).雌激素替代治疗组实验开始第40,50天体质量分别为(243.7±14.8),(246.2±11.9)g,低于去卵巢组相应时间点(P＜0.05～0.01),李氏指数为289.9±13.5,小于去卵巢组(P＜0.01).麻黄组大鼠实验开始第40,50天体质量分别为(245.4±14.1),(252.4±14.9)g,李氏指数为294.4±11.0,小于去卵巢组(P＜0.05).②不同时间点各组大鼠摄食量结果麻黄组大鼠实验开始第30,40,50天摄食量分别为(17.8±2.4),(22.3±3.9),(26.1±3.5)g/d,与去卵巢组比减少[(25.9±4.7),(28.5±5.3),(32.8±5.5)g/d,P＜0.05].③大鼠血脂和血糖水平去卵巢组大鼠血清三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量分别为(1.73±0.32),(1.45±0.50),(0.78±0.19)mmol/L,高于假手术组[(0.94±0.29),(1.05±0.30),(0.08±0.11)mmol/L,P＜0.01].雌激素替代治疗后三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量及血糖浓度分别为(1.10±0.34),(1.14±0.30),(0.17±0.05),(5.88±1.21)mmol/L,低于去卵巢组(P＜0.05～0.01),高密度脂蛋白胆固醇含量高于去卵巢组[(1.11±0.31),(0.88±0.21)mmol/L,P＜0.05].麻黄组三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇含量分别为(0.97±0.16),(1.11±0.20),(0.59±0.07),(0.45±0.061)mmol/L,低与去卵巢组(P＜0.05～0.01).④不同组别大鼠血清雌激素、孕激素和胰岛素水平去卵巢组大鼠雌激素、孕激素水平分别为(17.09±9.00)ng/L,(28.51±7.99)μg/L,低于假手术组[(58.69±12.11)ng/L,(62.73±10.93)μg/L,P＜0.01],胰岛素含量高于假手术组[(31.74±6.69),(23.75±6.66)mU/L,P＜0.01].雌激素替代治疗组及和麻黄组雌激素水平为(36.03±8.83),(30.18±8.61)ng/L,高于去卵巢组(P＜0.05～0.01),胰岛素水平分别为(21.34±4.57),(24.86±6.20)mU/L,低于去卵巢组(P＜0.05～0.01),麻黄组孕激素水平为(17.68±6.19)μg/L,低于去卵巢组(P＜0.01).结论麻黄能明显降低去卵巢肥胖大鼠的体质量,降低血脂和胰岛素水平,增加血中雌激素水平.     

孕哺期幼鼠染铅对中枢神经系统的脂质过氧化作用

背景铅能促进活性氧自由基的产生,使许多组织系统处于氧化应激状态,尤其是脑组织的脂质过氧化过程.目的通过大鼠孕期及哺乳期不同剂量染铅得到幼鼠染铅模型,观察铅对中枢神经系统的脂质过氧化作用.设计随机对照实验.单位辽宁省妇幼保健院和辽宁省肿瘤研究所.材料实验于2003-06/08在中国医科大学实验室完成.选择成年Wistar大鼠150只,分笼饲养7 d后,按雌雄比21合笼,以次日凌晨在排泄物托盘中发现阴栓或镜检阴道分泌物发现精子定为已受孕鼠100只,并记妊娠0 d,随机将受孕鼠100只分为4组①对照组.②饮含0.5 g/L醋酸铅水组.③饮含1 g/L醋酸铅水组.④饮含2g/L醋酸铅水组,每组25只.各实验组从受孕当天起饮用各剂量醋酸铅水;对照组饮蒸馏水5 mL,直到仔鼠生后第21天.方法于幼鼠出生后第21天,每组取10只大鼠,在麻醉状态下断头采血,取脑组织,用于血铅、脑铅含量的测定.每组取15只大鼠,取脑组织,制成组织匀浆分别测定脂质过氧化物含量,还原型谷胱甘肽水平及超氧化物歧化酶、还原型谷胱甘肽过氧物酶、过氧化氢酶活性.主要观察指标①出生后第21天各组幼鼠血铅、脑铅含量.②出生后第21天各组幼鼠脂质过氧化物水平,还原型谷胱甘肽含量及超氧化物歧化酶、还原型谷胱甘肽过氧物酶、过氧化氢酶活性.结果100只幼鼠均进入结果分析.①出生后第21天各组幼鼠血铅、脑铅含量饮含0.5,1,2g/L醋酸铅水组血铅和脑铅含量均显著高于对照组(P＜0.01),且随着染铅剂量的升高而升高.②饮含1,2 g/L醋酸铅水组脂质过氧化物水平高于对照组[(34.56±6.96),(38.76±11.11),(23.33±5.23)mmol/g,P＜0.05～0.01]、超氧化物歧化酶活性低于对照组[(423.25±157.70),(426.92±161.53),(542.78±97.69)μkat/g,P＜0.05～0.01].结论中、高浓度重金属毒物铅可通过增强脑组织脂质过氧化过程而致发育期神经系统的损伤.     

摄入不同剂量大豆蛋白干预高胆固醇模型大鼠的血脂水平

目的:探讨膳食大豆蛋白摄入的不同剂量和时程对高血浆胆固醇模型大鼠血清胆固醇及有关血脂指标的影响。方法:实验于2004-02/05在沈阳医学院预防医学系进行,用含50g/kg猪油,10g/kg胆固醇和2.5g/kg胆盐的高脂饲料喂饲健康Wistar雄性大鼠,经2周诱发高血浆胆固醇以后,测血清总胆固醇,总三酰甘油,高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇浓度。然后,按体质量和血清胆固醇浓度均衡的原则,将36只动物随机分为4组,分别喂饲含有200g/kg大豆蛋白、200g/kg酪蛋白、300g/kg大豆蛋白和300g/kg酪蛋白的纯合成高脂饲料,并于实验第4周和第8周结束时采血,测定指标同前。实验结果用SPSS统计软件进行方差分析。结果:经2周诱导高血脂后,实验模型大鼠的血清总胆固醇水平为(4.55±1.25)mmol/L(n=36),而喂饲正常饲料的阴性对照鼠仅为(2.30±0.18)mmol/L(n=8),升高了近2倍。又经4周喂饲含有处理因素的饲料后,200g/kg大豆蛋白组、200g/kg酪蛋白组、300g/kg大豆蛋白组和300g/kg酪蛋白组大鼠的血清总胆固醇水平分别为(2.51±0.31),(3.45±0.67),(2.59±0.22),(3.67±0.87)mmol/L;低密度脂蛋白胆固醇为(1.21±0.16),(1.67±0.32),(1.25±0.10),(1.78±0.43)mmol/L,与同水平酪蛋白组相比,大豆蛋白组动物的血清总胆固醇,低密度脂蛋白胆     

大鼠脑挫裂伤后神经细胞凋亡的相关因素

背景脑海马区作为脑损伤后的选择性易损区,在伤后某些早期基因超表达、兴奋性氨基酸过度释放以及神经细胞延迟性死亡等方面对外源性刺激较为敏感.目的探讨脑挫裂伤后血清一氧化氮、内皮素改变与脑海马区神经细胞凋亡之间的相关性.设计观察对比动物实验,采用配对t检验及多元线性相关分析.单位华北煤炭医学院附属开滦医院神经外科.材料实验于2003-02/06在华北煤炭医学院分子生物学实验室完成.取二级健康雄性Wistar大鼠126只,体质量250～350 g,随机分成3组,即实验组60只、对照组60只和正常组6只,其中前两组又各自分成0.5,1,3,6,12,24,72,120,168,240h 10个时相组,每组6只大鼠.方法实验组按照改良Feeney自由落体脑损伤模型方式制作大鼠左顶叶脑挫裂伤模型;对照组动物只颅骨开窗,不致伤;正常组动物不做任何处理.各组大鼠脑挫裂伤后各时相点的血清一氧化氮、内皮素水平与脑海马区凋亡神经细胞数量检测采用硝酸还原酶法、酶联免疫吸附法及原位末端标记法.主要观察指标脑挫裂伤大鼠血清一氧化氮、内皮素水平与脑海马区神经细胞凋亡情况.结果126只大鼠全部进入结果分析.①实验组大鼠血清一氧化氮、内皮素与脑海马区c-fos mRNA表达水平均在脑挫裂伤后6 h达高峰[(81.45±2.41)mmol/L,(20.29±1.63)ng/L],伤后12 h开始逐渐回落[(66.11±1.97)mmol/L,(20.14±1.63)ng/L].大鼠脑挫裂伤后0.5 h至120 h一氧化氮水平、0.5 h至168 h内皮素水平与正常组和对照组各相应时间点比较,均明显升高(t=3.33～27.91,P＜0.01).②实验组大鼠脑海马区神经细胞凋亡情况于伤后168 h达到高峰(27.33±1.86)×102个/mm2,伤后240 h开始下降(21.67±2.07)×102个/mm2.正常组脑海马区神经细胞未见凋亡细胞,对照组脑海马区凋亡神经细胞数量极少.③实验组大鼠血清一氧化氮水平、内皮素水平与脑海马区神经细胞凋亡之间的关系存在显著正相关性(r=0.838,P＜0.01;r=0.281,P＜0.05).结论大鼠脑挫裂伤后血清一氧化氮、内皮素水平之间以及与脑海马区神经细胞凋亡之间存在着特定关系.一氧化氮与内皮素相互影响、相互作用,参与调控了脑挫裂伤后的病生理过程,从而诱导了脑海马区神经细胞的凋亡.     

天年饮对血脂及其代谢产物的调节效应

目的:采用D-半乳糖致亚急性衰老大鼠模型,观察天年饮对血脂及其代谢产物的调节效应。方法:实验于2003-04/07在承德医学院中心实验室完成。选择成年雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、衰老模型组、天年饮用药组和阴性对照组,每组10只。衰老模型组、天年饮用药组和阴性对照组均采用D-半乳糖200mg/(kg·d)连续腹腔注射40d制作亚急性衰老大鼠模型。衰老模型组大鼠于造模成功后不再作任何处理;天年饮用药组大鼠于造模成功后用天年饮(由何首乌15g,怀牛膝15g,肉苁蓉10g,淫羊藿10g,丹参25g,茯苓15g组成,每副含生药90g,按传统方法加水煎成溶液)8.1g/kg灌胃给药,1次/d,共30d;阴性对照组大鼠于造模成功后每天灌胃同等剂量的生理盐水,时间同天年饮用药组。正常组大鼠自由摄食、饮水,未加任何干预措施。所有大鼠经内眦于眶后静脉丛采血约2mL,检测血清总胆固醇、三酰甘油及高密度脂蛋白胆固醇的含量。结果:40只大鼠全部进入结果分析。①衰老模型组血清中总胆固醇、三酰甘油的含量明显高于正常组[(2.68±0.39),(1.19±0.45)mmol/L;[0.84±0.29),(0.44±0.23)mmol/L,(t=-3.470,P<0.01,t=-2.834,P<0.05)]。②天年饮用药组血清中总胆固醇、三酰甘油的含量明显低于衰老模型组[(1.91±0.53),(2.68±0.39)mmol/L;(0.44±0.12),(0.84±0.29)mmol/L,(t=3.108,P<0.01,t=3.256,P<0.05)]。③衰老模型组血清中高密度脂蛋白胆固醇的含量低于正常组[(1.03±0.17),(1.46±0.38)mmol/L,(t=2.709,P<0.05)]。④天年饮用药组血清中高密度脂蛋白的含量明显高于衰老模型组[(1.45±0.44),(1.03±0.17)mmol/L,(t=-2.371,P<0.05)]。结论:天年饮可降低衰老大鼠血清总胆固醇、三酰甘油的水平及提高高密度脂蛋白胆固醇的含量,说明天年饮可有效调节衰老大鼠血脂代谢紊乱。     

中药复方驱铅制剂对铅染毒大鼠脑海马齿状回及CA1区和CA3区一氧化氮合酶的影响

目的:观察中药复方驱铅制剂对铅染毒大鼠记忆改善的影响,并以依地酸钙钠做标准对照。方法:实验于2001-11/12在湖南师范大学生命科学院动物实验室完成。①选用健康SD大鼠60只,随机分成6个组,每组10只。阴性对照组、阳性对照组、驱铅灵(由党参15g、鸡血藤15g等组成)3.3g/(kg·d)组、驱铅灵6.6g/(kg·d)组、驱铅灵13.2g/(kg·d)组、依地酸钙钠组。②阳性对照组、依地酸钙钠组、驱铅灵各组均用20g/L的醋酸铅溶液以10μL/g体质量的剂量灌胃,1次/d,第11天停染1d,共3周。③停止染毒后第2天,驱铅灵各组分别用相应剂型的中药复方驱铅灵10μL/g体质量灌胃,1次/d,第11天停1d,共3周。④依地酸钙钠组用5g/L依地酸钙钠溶液以10μL/g体质量的剂量(50mg/kg)腹腔注射,1周注射4d,停3d,共3周。⑤阴性对照组、阳性对照组用蒸馏水灌胃,1次/d,第11天停染1d,共3周。⑥观察驱铅灵制剂对铅染毒大鼠脑海马组织结构的改善以一氧化氮合酶阳性细胞数目的多少及阳性细胞产物平均吸光度的大小作为评价指标,对大鼠海马结构形态学损伤以一氧化氮合酶阳性产物吸光度表示。结果:纳入60只,均进入结果分析,无缺失值。①铅染毒大鼠脑齿状回阳性产物吸光度情况:驱铅灵3.3g,6.6g,13.2g/(kg·d)组与依地酸钙钠组显著大于阳性对照组犤(0.0692±0.0043),(0.0707±0.0022),(0.0645±0.0027),(0.0720±0.0037),(0.0538±0.0068)A,(F=12.383,P<0.01)犦。②铅染毒大鼠脑CA1区阳性产物吸光度变化:驱铅灵3.3g,6.6g,13.2g/(kg·d)组与依地酸钙钠组的阳性产物吸光度显著大于阳性对照组犤(0.0638±0.0033),(0.0648±0.0027),(0.0613±0.0029),(0.0655±0.0037),(0.0605±0.0026),(F=10.585,P<0.01)犦。③铅染毒大鼠脑CA3区阳性产物吸光度变化:驱铅灵3.3g,6.6g,13.2g/(kg·d)组与依地酸钙钠组在脑CA3区显著大于阳性对照组犤(0.0682±0.0044),(0.0702±0.0047),(0.0630±0.0044),(0.0733±0.0051),(0.0545±0.0027),(F=18.867,P<0.01)犦。结论:中药复方驱铅制剂低、中、高各剂量组均能改善铅染毒大鼠脑海马结构的形态学损害,改善铅致学习记忆的损害,其效果与依地酸钙钠相似,不同剂量的驱铅制剂作用效果比较无显著差别。     

氯胺酮诱导不同年龄大鼠脑海马区热休克蛋白70表达的量效依赖性

背景研究证实,热休克蛋白70家族的蛋白质对细胞有保护作用.氯胺酮可导致患者出现幻觉、谵妄等精神症状,可对大鼠边缘系统神经元产生损害,在这些受损的神经元内用免疫组化染色方法可检测到热休克蛋白70的表达.目的观察不同剂量的氯胺酮在不同年龄大鼠海马中诱导热休克蛋白70的表达,探讨氯胺酮对神经损害的作用.设计随机对照实验.单位四川大学华西医院麻醉学与危重医学教研室.材料实验于2000-01/05在四川大学华西医院麻醉学与危重医学教研室实验室完成.选择SD大鼠70只,雌雄不限,清洁级.方法35只成年SD大鼠随机分为对照组和氯胺酮20.0,40.0,60.0,80.0,100.0,120.0 mg/kg 6个实验组,每组5只,分别给予生理盐水和氯胺酮20.0,40.0,60.0,80.0,100.0,120.0 mg/kg腹腔内注射.另取0～10,11～20,21～30,31～45,46～60,61～90,91～120 d年龄阶段大鼠35只,每个年龄段5只,分别腹腔内注射氯胺酮80.0 mg/kg.给药后正常喂养24 h后,在麻醉状态下快速断头取脑,于海马取5 μm冠状切面切片,应用免疫组化染色检测大鼠海马中热休克蛋白70的表达.主要观察指标大鼠海马热休克蛋白70阳性细胞百分率、密度和灰度值.结果70只大鼠均进入结果分析.①不同剂量氯胺酮对大鼠脑海马区热休克蛋白70表达对照组,20.0,40.0,60.0,80.0,100.0,120.0mg/kg剂量氯胺酮组诱导热休克蛋白70表达的阳性细胞密度分别为0,8.12±1.82,27.07±5.98,45.35±5.84,78.51±7.34,74.16±8.17,60.84±6.27.可见氯胺酮剂量在80.0 mg/kg以内,随剂量的增加,热休克蛋白70阳性细胞密度显著增加(P＜0.01);氯胺酮剂量在80.0mg/kg以上,随剂量的增加,热休克蛋白70阳性细胞密度显著降低(P＜0.01).②氯胺酮对不同年龄段大鼠脑海马区热休克蛋白70表达20 d以下的幼鼠神经细胞热休克蛋白70阳性细胞密度为0;在21～30 d,31～45 d,46～60 d,61～90 d大鼠海马中热休克蛋白70阳性细胞密度分别为34.17±6.18,55.42±4.80,78.51±7.34,83.16±11.10,与前一年龄组相比,随着年龄的增加,热休克蛋白70阳性细胞密度显著增加(P＜0.01);61～90 d和91～120 d大鼠海马中热休克蛋白70阳性细胞密度分别为83.16±11.10和85.83±9.33(P＞0.05).结论氯胺酮可诱导热休克蛋白70在大鼠脑海马区表达,提示海马区的神经元可能受到损害;随剂量的增加,其损害作用加强;氯胺酮对成年大鼠的脑损害作用大于幼鼠.     

反复心理应激大鼠下丘脑及脑海马氨基酸含量变化及调肝方、健脾方、补肾方、人参总皂苷作用的比较

背景人体处于应激状态时,脑内的一些氨基酸作为神经递质对脑功能和心理行为具有重要的调节作用,传统中药治疗能够调整人体的应激状态.目的通过观察反复心理应激大鼠下丘脑和海马的谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸、牛磺氨酸的含量变化,探讨调肝方、健脾方、补肾方及人参总皂苷对其影响.设计随机分组,对照观察实验.单位广州中医药大学基础医学院中医基础理论教研室.材料实验于2002-03/2003-01在广州中医药大学实验动物中心完成.选取Wistar大鼠60只,随机分为6组正常组,模型组,调肝组,补肾组,健脾组,人参总皂苷组,10只/组.调肝方药组成及剂量柴胡5 g,山栀5 g,白芍15 g,枸杞子15 g,枳壳6 g,干地黄18 g,石决明30 g.肾气丸组成及剂量干地黄30 g,山药15 g,山茱萸15 g,泽泻10 g,茯苓10 g,丹皮10 g,桂枝4 g,附子4 g.四君子汤组成及剂量党参20 g,白术15 g,茯苓15 g,炙甘草6 g.方法①常规煎煮取汁后调肝方药浓缩至含生药1.69g/mL,肾气丸浓缩至含生药1.76 g/mL,四君子汤浓缩至含生药1.01 g/mL,人参总皂苷配制成水溶液7 g/L.正常组及模型组灌服9.0 g/L氯化钠注射液2 mL,调肝组、补肾组、健脾组及人参总皂苷组均于限制制动刺激前1 h相应给予调肝方药、肾气丸煎剂、四君子汤煎剂及人参总皂苷溶液各2 mL灌胃.②除正常组外,其余各组均进行心理应激反应模型的复制.将大鼠置于限制制动筒内,通过移动插片而逐步缩小大鼠的活动空间,调节到其不产生强烈反抗的紧张程度,每天限制制动1次,每天限制制动时间不同,第1天为4 h,其后每次增加30～60 min,连续14 d.③将各组大鼠断头取全脑,采用OPA高效液相色谱分析法进行下丘脑和海马中谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸、谷氨酸含量的检测.主要观察指标各组大鼠下丘脑与海马中谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸、牛磺氨酸含量的变化.结果实验纳入大鼠60只,全部进入结果分析.①各组大鼠下丘脑与海马中谷氨酸含量的变化与正常组比较,调肝组、健脾组、补肾组、人参总皂苷组下丘脑中含量均明显下降[(21.85±8.19),(15.76±1.80),(14.68±7.91),(21.46±5.45),(13.43±7.68)μmoL/g];与模型组比较,调肝组、健脾组、补肾组、人参总皂苷组海马中含量均明显升高[(11.04±3.65),(11.78±2.17),(18.67±2.98),(20.91±3.96),(17.71±1.83)μmoL/g,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05].②各组大鼠下丘脑与海马中天冬氨酸含量的变化与模型组比较,健脾组和人参总皂苷组下丘脑中含量均明显下降[(8.65±1.18),(5.72±1.32),(4.67±1.88)μmoL/g,P＜0.01,P＜0.01],而健脾组、补肾组、人参总皂苷组海马中含量均明显升高[(2.58±0.87),(3.93±0.49),(4.52±0.98),(3.83±0.41)μmoL/g,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05].③各组大鼠下丘脑与海马中γ-氨基丁酸含量的变化与模型组比较,调肝组、健脾组、补肾组、人参总皂苷组下丘脑中含量均明显下降[(20.92±4.96),(15.87±2.90),(13.84±2.63),(14.94±3.98),(10.94±3.68)μmoL/g,P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01],而海马中含量均明显升高[(4.12±1.66),(4.18±1.04),(6.67±1.29),(6.11±0.99),(6.37±0.78)μmoL/g,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01].④各组大鼠下丘脑与海马中牛磺氨酸含量的变化与模型组比较,调肝组、健脾组、人参总皂苷组下丘脑中含量均明显下降[(10.24±1.72),(7.82±1.14),(8.00±2.05),(6.42±3.17)μmoL/g,P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01],而健脾组和人参总皂苷组海马中含量均明显升高[(12.61±3.51),(17.03±2.74),(18.04±2.14)μmoL/g,P＜0.01,P＜0.01].结论调肝方药的中枢作用部位可能主要在下丘脑,可能与下调氨基酸水平有关;而健脾、补肾方药及人参总皂苷的中枢作用部位可能包括海马和下丘脑,主要与上调氨基酸水平有关,通过增强海马对应激的整合作用,从而达到抗应激损伤的目的.     

疏肝理肺方对应激条件下哮喘大鼠脑海马形态的影响

目的:探讨束缚应激哮喘大鼠应用疏肝理肺方药后脑海马形态结构的变化。方法:实验于2002-03/2003-01在上海中医药大学国家重点实验室完成。选择SD雄性大鼠56只,随机分为7组,正常组、哮喘组、应激组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组各8只。正常组和应激组大鼠给予1mL生理盐水腹腔注射,其余各组分别腹腔注射等量抗原液致敏,致敏第8天开始,每日将应激组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组大鼠双后肢用绷带立式固定2h给予束缚应激刺激,共进行3周;同时每日分别给予地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组大鼠地塞米松(0.75mg/片)1g/(L·kg)、理肺方(麻黄、桂枝、炙甘草、细辛、干姜、半夏、五味子及白芍均9g)28g/(mL·kg)和疏肝理肺方(在理肺方基础上增加柴胡9g及炙枳实9g)36g/(mL·kg)灌胃。在致敏第15天开始,每日给予哮喘组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组大鼠卵蛋白20g/L雾化吸入3min,共雾化2周。造模及治疗结束后,麻醉大鼠抽取腹主动脉血,测定血浆皮质酮水平应用放射免疫法。抽血后,开颅取大鼠脑,采用光镜及透射电镜检测大鼠脑海马的形态结构。结果:56只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①各组大鼠血浆皮质酮水平比较:哮喘组和应激组大鼠的血浆皮质酮水平均较正常组显著升高犤(532.48±115.28),(323.32±100.40),(235.27±46.64)μg/L,(P<0.01,0.05)犦。疏肝理肺方组大鼠较哮喘应激组显著降低犤(309.50±46.52),(569.89±72.32)μg/L(P均<0.01)犦。疏肝理肺方组较理肺组(528.60±130.72)μg/L显著降低(P<0.01)。②各组大鼠光镜下脑海马形态结构的比较:正常组大鼠脑海马锥体细胞排列规则,细胞核圆而大,核仁清晰。哮喘应激组、地塞米松组和理肺组大鼠相似脑海马锥体细胞排列不规则,在CA3区可见大量的锥体细胞核固缩。疏肝理肺组大鼠脑海马锥体细胞排列比较规则,在CA3区核固缩神经元明显减少。③各组大鼠电镜下脑海马形态结构的比较:正常组大鼠脑海马锥体细胞核形态规则,核膜光滑,核异染色质分布均匀,线粒体丰富,嵴排列规则。哮喘应激组和理肺组大鼠相似,脑海马锥体细胞核形态不规则,核异染色质明显增多,胞浆疏松,多数线粒体扩张,出现空泡、嵴排列紊乱。地塞米松组大鼠脑海马锥体细胞形态不规则,细胞器变性。疏肝理肺组大鼠脑海马锥体细胞核形态较规则,核膜光滑,核异染色质分布较均匀,胞浆疏松,线粒体丰富但致密。结论:慢性束缚应激会诱发或加重哮喘,导致哮喘大鼠血浆皮质酮水平升高,从而损伤脑海马神经元形态。疏肝理肺方可以通过抑制应激条件下哮喘大鼠的血浆皮质酮分泌,对脑海马神经元形态起一定的保护作用。     

吡拉西坦影响幼年大鼠慢性癫痫与学习记忆复合动物模型脑海马乙酰胆碱含量和胆碱乙酰转移酶活性变化的量效作用

背景:脑内投射至海马结构的胆碱能系统与学习记忆有关.吡拉西坦具有保护和修复大脑神经细胞的作用,可抵抗因物理因素、化学因素所致的脑功能损伤,改善学习记忆能力.目的:制备幼年慢性癫痫与学习记忆复合动物模型,观察大鼠脑海马乙酰胆碱含量、胆碱乙酰转移酶活性变化以及吡拉西坦的干预效应.设计:随机对照实验,非盲法评估.单位:河北医科大学第二医院儿科,河北医科大学中医药研究院.材料:实验于2004-07/12在河北医科大学及河北师范大学生命科学学院完成.选择Wistar幼年大鼠50只,清洁级,雌雄各半.方法:肌注马桑内脂注射液复制大鼠慢性癫痫大发作模型.每间隔3天重复肌注1次,在造模期间连续3次出现后肢站立的全身阵挛性惊厥或站立伴摔倒或全身强直-阵挛性发作的动物改为每隔14天肌注1次.选取10只大鼠为正常对照组,不进行造模,其余40只大鼠造模3个月时随机分为4组:吡拉西坦2.4 g/L组、吡拉西坦4.8 g/L组、苯妥英钠6 g/L±吡拉西坦4.8 g/L组、造模组,每组10只.各组于造模3个月开始连续灌胃给药,1次/d,10 mL/kg.吡拉西坦2.4g/L,4.8g/L组分别灌服吡拉西坦混悬液2.4 g/L,4.8 gg/L;苯妥英钠6 g/L+吡拉西坦4.8g/L组灌服苯妥英钠6 g/L及吡拉西坦悬浮液4.8g/L.造模组、正常对照组灌服10 mL/kg生理盐水.用药1个月后进行相关指标检测.Morris水迷宫测试癫痫大鼠发现平台时间及搜索距离,连续测试3 d,2次/d.水迷宫实验结束后,断头取脑,测定双侧海马乙酰胆碱含量,胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱脂酶活性用放射免疫法.主要观察指标:①Morris水迷宫测试各组大鼠发现平台时间及搜索距离.②各组大鼠海马乙酰胆碱含量,胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱脂酶活性.结果:50只大鼠全部进入结果分析.①各组大鼠搜索平台时间比较:造模组各组次相应平均搜索时间比正常对照组有不同程度的增加[(63±11)s,(40±8)s;(61±9)s,(38±7)s;(57±8)s,(36±9)s;(55±11)s,(33±10)s;(52±7)s,(30±9)s;(49±9)s,(27±6)s,P＜0.01].苯妥英钠6 g/L+吡拉西坦4.8g/L组,吡拉西坦4.8g/L组6次搜索时间均比造模组有不同程度的减少[(44±9)s,(45±9)s;(43±9)s,(42±8)s;(42±7)s,(42±7)s;(40±9)s,(39±9)(s;(38±7)s,(35±9)s;(35±6)s,(34±8)s,t=2.352～4.029,＜0.05～0.01].各给药组内随训练次数增加平均搜索时间逐渐减少.②各组大鼠平均搜索距离比较:造模组各组次相应平均搜索距离较正常对照组明显增加[793±74)cm,(420±81)cm;(763±89)cm,(418±57)cm;(690±67)cm,(382±69)cm;(623±81)cm,(356±71)cm;(592±98)cm,(330±69)cm;(550±54)cm,(301±97)cm,P＜0.01].苯妥英钠6 g/L+吡拉西坦4.8 g/L组,吡拉西坦4.8g/L组6次平均搜索距离均比造模组有不同程度的减少[(586±1)cm,(510±89)cm;(566±70)cm,(497±76)cm;(521±84)cm,(455±56)cm;(480±74)cm,(421±63)cm;(437±51)cm,(396±79)cm;(392±79)cm,(385±48)cm,t=2.364～4.230,P＜0.05～0.01].各给药组随训练次数增加平均搜索时间逐渐减少.③各组大鼠脑海马乙酰胆碱含量及胆碱乙酰转移酶和乙酰胆碱脂酶活性:造模组均较正常对照组明显降低[(2.2±0.7)nmol/g,(3.8±0.9)nmol/g;(503.3±103.3)pkat/g,(778.3±125.0)pkat/g;(190.0±51.7)μkat/g,(368.3±86.7)μkat/P＜0.01].苯妥英钠6 g/L+吡拉西坦4.8g/L组,吡拉西坦4.8 g/L组脑海马乙酰胆碱含量和乙酰胆碱脂酶活性明显高于造模组[(2.7±0.6) mol/g,(2.9±0.6)nmol/g;(256.7±58.3)μkat/g,(306.7±88.3)μkat/g,t=3.445～4.148,P＜0.01].吡拉西坦4.8 g/L组脑海马胆碱乙酰转移酶活性[(668.3±118.3)pkat/g]明显高于造模组(P＜0.01).吡拉西坦2.4g/L组各指标与造模组基本一致.结论:慢性癫痫大鼠大发作模型具有空间学习、记忆能力下降的特点,同时伴有脑海马乙酰胆碱含量及胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱脂酶活性降低,说明已是学习功能障碍的良好复合模型,应用4.8g/L吡拉西坦后可增加模型大鼠脑海马乙酰胆碱含量及胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱脂酶活性,改善学习和记忆能力,但2.4 g/L吡拉西坦效果不明显.     

银杏叶提取物改善学习记忆障碍老龄大鼠痴呆模型的作用途径

背景近年研究显示,银杏叶提取物是一种天然的自由基清除剂,可保护机体免受自由基引起的损害,改善脑循环障碍和神经元的功能,而关于银杏叶提取物对认知功能等高级神经功能活动影响的实验或临床研究相对滞后.目的探讨银杏叶提取物对中枢神经系统高级功能活动的作用,为临床应用银杏叶提取物治疗认知功能障碍提供实验依据.设计随机对照实验.单位华中科技大学同济医学院附属精神病医院老年科,华中科技大学同济医学院病理生理教研室,华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科.材料实验于2002-06在华中科技大学同济医学院基础部完成.选择Wistar大鼠40只,随机分为5组正常老龄对照组、模型组、银杏叶提取物75 mg/kg组、银杏叶提取物150 m/kg组,银杏叶提取物500 mg/kg组,每组8只.方法采用东莨菪碱致老龄大鼠学习记忆障碍的拟老年性痴呆动物模型,其中正常老龄对照组和模型组以相同体积的生理盐水灌胃,银杏叶提取物各组分别按75,150,500 mg/kg银杏叶提取物灌胃,50～400g/次,单次连续给药5 d,于第6天测试水迷宫及避暗试验,测试期间停止灌药,以水迷宫和避暗实验等学习记忆行为训练及生化检测方法,观察用药前后动物学习记忆行为和脑海马区乙酰胆碱及蛋白质含量的变化.主要观察指标①各组大鼠游迷宫所需时间.②各组大鼠游迷宫错误次数.③各组大鼠避暗试验所需时间及错误次数.④各组大鼠脑海马区乙酰胆碱及蛋白质含量.结果银杏叶提取物150 mg/kg组中除1只大鼠不明原因死亡外,银杏叶提取物75,500 mg/kg组各有1只大鼠在灌胃时逃走,最终进入结果分析大鼠为37只.①银杏叶提取物各剂量组造模大鼠游迷宫所需时间和途中错误次数均明显少于模型组(P＜0.05或P＜0.01),模型组大鼠游迷宫所需时间和途中错误次数明显高于正常老龄对照组(P＜0.01).②银杏叶提取物500,150,75 mg/kg组大鼠为达到暗环境被动回避试验内容,学习过程明显短于模型组[(156.78±25.97),(172.66±13.56),(198.54±17.12),(208.34±28.56)s,P＜0.05或P＜0.01].模型组学习时间较正常老年对照组显著延长[(208.46±28.56),(127.46±11.03)s,P＜0.01];银杏叶提取物500,150,75 m/kg组发生电击的错误次数也明显少于模型组[(3.41±0.26),(6.97±0.35),(7.23±0.62),(8.38±0.92)次,P＜0.01],银杏叶提取物500mg/kg组电击次数显著少于150mg/kg组(P＜0.01),150mg/kg组明显少于75mg/kg组(P＜0.05).③银杏叶提取物500,150,75 mg/kg组造模大鼠海马乙酰胆碱含量明显高于模型组[(421.89±36.32),(387.45±32.76),(380.17±41.25),(36528±11.42)mg/g,P＜0.05或P＜0.01],而银杏叶提取物500 mg/kg组的海马乙酰胆碱含量显著高于银杏叶提取物150,75 mg/kg组(P＜0.01).另外,与正常老龄对照组比较,东莨菪碱致学习记忆障碍模型组大鼠海马脑区的蛋白质含量显著降低[(41.75±3.82),(95.13±6.34)mg/kg,P＜0.01],在给予银杏叶提取物后,造模后的实验大鼠海马脑区蛋白质含量虽有所增加,但差异无显著性意义(P＞0.05).结论银杏叶提取物呈剂量依赖性显著改善实验动物的学习记忆能力,并显著增加海马脑区乙酰胆碱含量.     

睡眠剥夺引起大鼠海马神经元凋亡及相关基因表达的变化

背景:睡眠剥夺是否引起细胞变性,其信号传导是否与某些基因调控有关。目的:探讨睡眠剥夺引起的神经元凋亡与相关基因表达的变化。设计:随机对照实验研究。地点和材料:实验地点:郑州大学医学院生理学实验室。成年健康SD大鼠,雌雄不限,体质量(200±20)g,由河南省实验动物中心提供。干预:采用TUNEL染色观察了快眼动睡眠剥夺大鼠海马神经元形态学变化,应用原位杂交检测了快眼动睡眠剥夺大鼠海马bcl-2,baxmRNA表达。主要观察指标:睡眠剥夺大鼠海马神经元形态学变化;海马bcl-2和baxmRNA表达。结果:快眼动睡眠剥夺大鼠海马CA1,CA3区神经元阳性凋亡细胞数增多,异相睡眠剥夺组海马CA1～CA4区细胞凋亡率分别为(6.60±2.24)%,(1.69±0.45)%,(6.87±1.32)%,(1.74±0.98)%。CA1,CA3区细胞凋亡率和CA2,CA4区相比较差异有显著性意义(t=5.26～6.95,P<0.05)。bcl-2mRNA阳性信号表达积分值较强,四个区之间差异无显著性意义,baxmRNA表达增强犤CA1为(211.12±59.85);CA3为(205.56±56.99)犦与CA2和CA4区犤(123.42±22.80),(124.21±20.47)犦比较差异有显著性意义(t=3.20～4.36,P<0.05)。结论:睡眠剥夺可引起大鼠海马神经元凋亡,与凋亡相关的bcl-2,baxmRNA基因表达的变化可能涉及神经元的凋亡机制。     

小檗碱对D-半乳糖诱导糖基化模型大鼠脑损害的干预作用

背景:蛋白糖基化反应是糖尿病的发生机制之一,探讨小檗碱对体内蛋白糖基化反应的抑制作用以及对蛋白糖基化造成脑细胞损害的保护作用将有助于糖尿病相关疾病的治疗。目的:观察小檗碱对D-半乳糖诱导的糖基化模型大鼠并发脑损害的干预作用。设计:随机分组设计、对照动物实验。单位:厦门中医院眼科。材料:实验于2005-06/10在暨南大学药学院药理实验室完成。选择6周龄SD大鼠90只。按随机数字表法分为4组,正常对照组、模型组、盐酸氨基胍组和小檗碱高(300mg/kg)、中(150mg/kg)、低(75mg/kg)剂量组,每组15只。采用腹腔注射D-半乳糖诱导糖基化模型。实验用药:小檗碱(广东万基药业有限公司);D-半乳糖(上海源聚生物科技有限公司)。方法:正常对照组腹腔注射生理盐水,持续8周;其他组动物每天腹腔注射5%D-半乳糖(150mg/kg),持续8周。第3周开始,盐酸氨基胍组开始灌胃盐酸氨基胍(150mg/kg),小檗碱组分别灌胃相应剂量的小檗碱,正常对照组和模型组动物均灌胃蒸馏水,连续给药6周。灌胃容积为10mL/kg。第8周末采用考马斯亮蓝法测定红细胞醛糖还原酶活性,采用硫代巴比妥酸比色法测定糖化血红蛋白含量,采用硝基四氮唑蓝比色法测定血清果糖胺。测定血清中晚期糖基化终末产物含量及脑组织中晚期糖基化终末产物、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性及脑神经细胞内钙离子水平,并以透射电镜观察脑内海马神经元线粒体的变化。主要观察指标:①血清中晚期糖基化终末产物、糖化血红蛋白、果糖胺含量,红细胞醛糖还原酶活性。②脑组织中晚期糖基化终末产物含量。③脑神经细胞内钙离子水平。④脑组织中丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性。⑤脑内海马神经元线粒体结构变化。结果:纳入动物90只,均进入结果分析。①血清中红细胞醛糖还原酶活性和糖化产物含量:D-半乳糖处理8周后,模型组大鼠红细胞醛糖还原酶活性和果糖胺、糖化血红蛋白、晚期糖基化终末产物水平高于正常对照组(P<0.01);小檗碱高、中剂量组处理6周后,红细胞醛糖还原酶活性和果糖胺、糖化血红蛋白(每10g血红蛋白的吸光度值)、晚期糖基化终末产物水平均低于模型组[分别为(1.07±0.39),(1.22±0.47),(1.76±0.30)nkat/g,t=5.052,5.484,P<0.01;(0.740±0.142),(0.862±0.131),(0.958±0.083)mmol/L,t=7.829,P<0.01,t=2.404,P<0.05;58.434±12.135,64.614±13.418,83.747±7.990,t=4.922,6.748,P<0.01;(3.104±0.814),(2.937±0.514),(4.156±0.860)U/mg,t=4.104,3.440,P<0.05];小檗碱低剂量组红细胞醛糖还原酶活性低于模型组(P<0.05),对糖化产物未见明显影响。②脑组织内晚期糖基化终末产物含量:盐酸氨基胍组、小檗碱高、中剂量组大鼠脑组织内晚期糖基化终末产物含量低于模型组[分别为(10.52±1.22),(10.95±1.75),(11.95±2.27),(14.26±3.51)U/mg,t=-3.892,-3.263,P<0.01,t=-2.139,P<0.05],小檗碱低剂量处理影响不明显(P>0.05)。③脑神经细胞内钙离子水平:盐酸氨基胍组、小檗碱高剂量组大鼠脑组织内脑神经细胞内钙离子水平低于模型组[分别为(271.52±32.71),(293.84±31.58),(337.15±58.49)nmol/L,t=-3.421,P<0.01,t=-2.275,P<0.05],小檗碱低剂量处理影响不明显(P>0.05)。④脑组织内丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性:盐酸氨基胍组、小檗碱高、中剂量组脑组织内丙二醛含量显著低于模型组,超氧化物歧化酶活性显著高于模型组[分别为(2.09±0.16),(2.12±0.22),(2.41±0.12),(2.54±0.21)μmol/g,t=6.601,5.348,P<0.01,t=2.082,P<0.05;(8.79±1.09),(8.80±1.52),(7.90±1.48),(6.48±1.34)mkat/g,t=4.571,4.254,P<0.01,t=2.226,P<0.05]。⑤脑内海马神经元线粒体结构:透射电镜显示,模型组大鼠脑海马细胞线粒体出现明显肿胀,线粒体嵴断裂,结构紊乱,甚至出现明显的大空泡。盐酸氨基胍组和小檗碱高、中剂量组线粒体肿胀不明显,仅有少量线粒体出现小空泡,小檗碱低剂量组线粒体肿胀明显,嵴断裂,结构紊乱,并有空泡出现。结论:D-半乳糖诱导的糖基化模型大鼠脑线粒体损害可能与脑组织中晚期糖基化终末产物形成、脑细胞内钙稳态失调以及氧化应激有关,小檗碱具有抑制D-半乳糖诱导的蛋白糖基化反应,并对糖基化状态并发的脑神经细胞损害具有保护作用。     

水飞蓟宾对抗大鼠酒精性脂肪肝改善肝功能的作用

背景:水飞蓟宾(素)可产生抗自由基活性、抗脂质过氧化、抗脂氧酶、抗还原性谷胱甘肽排空、抗肿瘤以及降血脂等广泛的药理效应。在临床上,水飞蓟宾也常用于酒精性肝病的治疗。目的:探讨水飞蓟宾对大鼠酒精性脂肪肝作用的药理学机制。设计:随机对照实验。单位:广州市中医医院。材料:实验于2003-08/10在广东省药物研究所无特殊病原菌级动物实验室完成,选用无特殊病原菌级SD大鼠57只,雌雄各半,体质量(150±10)g。益肝灵片主要成份为水飞蓟宾,38.5mg/片,湖南省株洲市制药三厂生产。方法:在57只SD大鼠中随机选出18只作为正常对照组,给予生理盐水灌胃,饮用蒸馏水代替乙醇,普通饲料喂养10周。其余大鼠自由饮用100mL/L乙醇,加高脂高热量饲料喂养6周,构建大鼠酒精性脂肪肝模型,经相关指标检测确定模型成立。将剩余大鼠随机分成模型对照组18只和水飞蓟宾组21只,模型对照组给予蒸馏水灌胃,水飞蓟宾组给予水飞蓟宾100mg/kg。同时继续给予100mL/L乙醇和高营养饲料,4周后在麻醉状态下处死大鼠,取大鼠肝块进行病理观察,测定三酰甘油、超氧化物歧化酶、还原性谷胱甘肽和丙二醛水平。主要观察指标:大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶活性和三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇、高密度脂蛋白-胆固醇、大鼠肿瘤坏死因子α、大鼠转化生长因子β1的含量。结果:57只无特殊病原菌级SD大鼠全部纳入结果分析。水飞蓟宾能够抑制病鼠血清天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶活性(2550.5±400.1),(533.4±100.0),(2217.1±750.2)nkat/L,与模型组比较(3600.7±666.8),(800.2±100.0),(2900.6±1333.6)nkat/L,差异有显著性意义(P<0.05～0.01);水飞蓟宾组三酰甘油、低密度脂蛋白-胆固醇、大鼠肿瘤坏死因子α和大鼠转化生长因子β1含量(1.8±0.8),(0.17±0.04),(6.66±1.38),(24.1±4.1)mmol/L明显低于模型组(2.8±1.4),(0.20±0.05),(7.81±1.06),(28.8±6.3)mmol/L,两组比较差异有显著性(P<0.05～0.01);水飞蓟宾能够提高高密度脂蛋白-胆固醇含量;降低肝匀浆三酰甘油和丙二醛含量(P<0.05～0.01),增强超氧化物歧化酶活性以及改善肝细胞水变性和脂肪变性(P<0.01),但对还原型谷胱甘肽的含量则未见明显改变(P>0.05)。结论:水飞蓟素阻止大鼠酒精性脂肪肝形成,其作用机制包括抗氧化、清除自由基代谢产物,抑制脂质过氧化反应,调血脂、减少脂肪在肝脏的沉积,抗免疫性炎症和抗增殖。     

他克莫司对创伤性脑损伤大鼠神经行为和记忆能力的影响

背景目前他克莫司对周围神经保护作用的研究比较多,而其是否具有促进中枢神经再生和保护作用.目的通过神经行为学观察和检测突触素的表达及细胞凋亡数量,探讨他克莫司对大鼠脑液压伤后神经行为和记忆的影响.设计随机分组,平行对照(自我前后对照、相互对照)实验.单位大连医科大学附属第二医院神经外科和复旦大学附属中山医院神经外科.材料实验于2002-11在上海长征医院神经外科实验室完成.选择由复旦大学实验动物科学部提供的雄性SD大鼠24只为观察对象,体质量(200±20)g,用抽签法随机分为对照组、损伤组和治疗组,每组8只.干预伤前24 h以20 g/L戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔麻醉,损伤组和治疗组模型制备参照美国Dixon建立的大鼠脑液压损伤模型,打击能量为151.95～172.21 kPa,相当于中度颅脑损伤,对照组只埋管不打击.治疗组伤后5 min以1 mg/kg腹腔注射他克莫司,1次/d,连续7 d.损伤组和对照组腹腔注射生理盐水.伤前、伤后3 d和伤后1周分别进行行走试验、平衡试验和记忆试验.于伤后1周全部大鼠断头取脑,分别取海马、伤灶周围额叶皮质、基底核部位进行免疫组织化学检测,图像定量分析技术检测突触素在海马各区以及伤灶周围的额叶皮质与基底节的分布,用流式细胞仪检测凋亡细胞计数.主要观察指标①各组动物于伤前、伤后3 d和伤后1周时行走试验、平衡试验和记忆试验成绩.②各组动物皮质、海马、基底核区突触素表达定量分析结果.③各组动物皮质、海马、基底核区细胞凋亡百分率.结果24只大鼠全部进入结果分析.①治疗组伤后3 d和伤后1周时行走试验成绩和平衡试验成绩低于损伤组[行走试验成绩(7.5±2.5)s,(5.5±2.1)s,(10.5±2.5)s,(8.2±2.5)s.平衡试验成绩(3.4±0.5)分,(2.5±0.2)分,(5.7±0.2)分,(5.0±0.5)分,P＜0.05～0.01],治疗组伤后3 d和伤后1周时记忆实验成绩高于损伤组[(4.9±1.7)s,(6.2±2.3)s,(4.0±1.5)s,(4.4±2.6)s,P＜0.05～0.01].②治疗组皮质、海马、基底核区突触素表达量显著高于损伤组(140.36±3.87,45.52±2.16,31.67±2.35,96.25±2.85,24.35±2.47,20.49±2.08,P＜0.01);对照组显著高于治疗组(162.24±3.52,50.58±2.31,42.69±2.53,P＜0.01).③治疗组海马、皮质、基底节的细胞凋亡率显著低于损伤组[(10.37±2.12)%,(18.39±2.87)%,(12.78±2.45)%,(21.14±4.85)%,(38.57±3.78)%,(21.18±4.59)%,P＜0.01].损伤组海马、皮质、基底核的细胞凋亡率显著高于对照组[(3.85±2.56)%,(4.96±2.15)%,(3.52±2.17)%,P＜0.01].结论他克莫司治疗后能促进大鼠海马、皮质及基底核区突触素表达,减少海马和皮质及基底核区神经细胞凋亡,对实验动物脑损伤后神经行为和记忆的恢复有促进作用.     

慢性应激对大鼠海马长时程增强和氨基酸神经递质的影响

背景:严重或持久的应激是很多身心疾病的诱发因素,明显损害机体的认知功能。目的:观察应激状态下海马氨基酸的变化及慢性应激对大鼠海马长时程增强的影响。设计:完全随机对照动物实验。单位:汕头大学精神卫生中心。材料:实验于2000-12在汕头大学医学院完成。实验动物为SD成年雄性大鼠16只,随机分为对照组和应激组,每组8只。方法:应激组强迫游泳4周建立慢性应激模型,采用离体海马脑片(500μm)结合电生理的方法观测海马CA1区长时程增强的变化。在海马CA3区Schaffer侧支施加高频刺激后,观察CA1区锥体神经元群体峰电位幅值和场兴奋性突触后电位斜率的改变。应用高效液相色谱紫外检测法对海马氨基酸神经递质进行定量分析。主要观察指标:①以群体峰电位的幅值和场兴奋性突触后电位的斜率作为观察长时程增强变化的指标。②海马氨基酸含量变化。结果:实验第2周应激组大鼠溺水死亡1只,给予补充,其余全部进入结果分析。①对照组的群体峰电位幅值和场兴奋性突触后电位斜率在高频刺激后增大的幅度明显高于应激组(P<0.05)。②对照组天冬氨酸和谷氨酸的水平明显低于应激组,[(2.425±0.211),(4.746±0.609)μmol/g,P<0.01];[(6.016±0.677)(8.094±1.035)μmol/g,P<0.01],而两组间γ-氨基丁酸的含量接近,差异无显著性[(4.229±0.449),(4.249±0.463)μmol/g,P>0.05]。结论:慢性应激抑制海马CA1区长时程增强的形成,提高海马组织天冬氨酸和谷氨酸的水平,而对γ-氨基丁酸的含量没有影响。慢性应激所引起的海马兴奋性氨基酸的堆积可能是学习和记忆能力损害的神经生化基础。