微毛诃子对家兔胸主动脉环的作用及其机制

目的： 研究微毛诃子甲醇提取物和乙醇提取物对家兔离体胸主动脉环的作用并探讨其可能的作用机制。 方法： 采用累积加药法,观察0.01~0.08 g·mL^-1微毛诃子对家兔离体胸主动脉环血管张力的影响;观察乙酰胆碱、酚妥拉明预处理对0.01 g·mL^-1微毛诃子缩血管作用的影响;采用Ca²⁺剥夺和复加法,观察0.01 g·mL^-1微毛诃子对细胞内钙释放和外钙内流动脉收缩作用的影响。 结果： 微毛诃子甲醇提取物浓度依赖性对内皮完整的家兔胸主动脉环收缩幅度低于内皮不完整的收缩幅度（P<0.05）,乙醇提取物对内皮完整的家兔胸主动脉环收缩幅度高于内皮不完整的收缩幅度（P<0.05）,且具有浓度依赖性;0.01 g·mL^-1的微毛诃子的甲醇提取物或乙醇提取物均可使乙酰胆碱（Ach,1×10^-5mol·L^-1）、酚妥拉明（10 mg·L^-1）预舒张的血管条收缩;维拉帕米（1×10^-7 mol·L^-1）预处理可消除0.01 g·mL^-1微毛诃子甲醇提取物的缩血管作用;在无Ca²⁺液中,0.01 g·mL^-1的微毛诃子甲醇提取物对去内皮主动脉环的收缩幅度显著低于有Ca²⁺液中的收缩幅度（P<0.05）。 结论： 微毛诃子甲醇提取物和乙醇提取物对家兔离体胸主动脉均有收缩作用;其缩血管作用可能与M受体及α受体有关;微毛诃子甲醇提取物的收缩作用具有内皮依赖性,可能与其促使血管平滑肌细胞外Ca²⁺内流进入细胞有关。     

金线吊乌龟提取物的抗炎 镇痛 抗氧化和抑制亚硝化活性研究

目的 研究和比较金线吊乌龟Stephania cepharantha Hayata不同提取部位的抗炎、镇痛、抗氧化和抑制亚硝化活性。方法 采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、醋酸扭体法和热板法考察金线吊乌龟不同提取部位的抗炎、镇痛活性;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除法和2,2-联氮基-双-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）自由基清除法测定金线吊乌龟不同提取部位的抗氧化活性;采用盐酸萘乙二胺法和α-萘胺法测定金线吊乌龟不同提取部位的抑制亚硝化活性。结果 与空白组小鼠比较,水提取物对耳廓肿胀抑制率为36.57%,扭体抑制率为49.14%,且给药后1、2 h小鼠对热板的痛阈值分别提高47.40%和67.35%,其余各组差异均具有统计学意义（P<0.05）;乙酸乙酯提取物清除DPPH自由基［半数抑制浓度（IC₅₀）=（0.084±0.008）mg·mL^–1］和ABTS自由基［IC₅₀=（0.063±0.005）mg·mL^–1］的能力最强,并显著强于其他提取部位（P<0.05）;水提取物清除亚硝酸盐［IC₅₀=（4.35±0.15）mg·mL^–1］和阻断亚硝胺［IC₅₀=（11.08±0.27）mg·mL^–1］的能力均著强于其他提取部位（P<0.05）。结论 金线吊乌龟不同提取部位均具有一定的抗炎、镇痛、抗氧化和抑制亚硝化活性,其中水提取物的抗炎、镇痛和抑制亚硝化活性最强,乙酸乙酯提取物的抗氧化活性最强。     

玉叶金花提取液对动物模型抗炎抑菌作用研究

目的: 选择玉叶金花提取液对动物模型进行抗炎、抑菌作用研究分析。方法: 将小鼠随机分为对照组、阳性对照组和玉叶金花提取液高、中、低剂量组(24,12,6 g·kg^-1)灌胃给药,采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、棉球肉芽肿、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀等炎症模型,以及体外抑菌实验,评价玉叶金花提取液的抗炎、抑菌作用。结果: 玉叶金花提取液明显抑制小鼠耳廓肿胀(P<0.05)、大鼠棉球肉芽肿以及大鼠足跖肿胀的形成(P<0.05);玉叶金花提取液对多种致病菌均有明显的抑制作用(P<0.05)。其半数抑菌浓度(MIC₅₀)金黄色葡萄球菌0.95 μg·mL^-1、大肠埃希菌0.75 μg·mL^-1、肺炎球菌0.65 μg·mL^-1、链球菌0.50 μg·mL^-1、痢疾杆菌0.25 μg·mL^-1。结论: 玉叶金花提取液对急慢性炎症有明显的抑制及体外抑菌作用。     

瘤果黑种草子总黄酮抗炎及平喘作用

目的：观察瘤果黑种草子总黄酮（TFNG）的抗炎及平喘作用。方法：选择昆明种小鼠、SD大鼠及健康豚鼠为实验动物,随机分为生理盐水组、阳性药对照组、TFNG低、高剂量组（小鼠100,400 mg·kg^-1,大鼠71.5,286 mg·kg^-1）。采用二甲苯致小鼠耳 廓肿胀、大鼠棉球肉芽肿实验观察总黄酮抗炎作用;采用整体动物小鼠喷雾致喘实验、离体豚鼠肺支气管灌流实验及离体回肠实验考察总黄酮的平喘作用。结果：TFNG 100,400 mg·kg^-1可明显抑制小鼠二甲苯所致的耳廓肿胀度,TFNG 71.5,286 mg·kg^-1可抑制大鼠棉球肉芽肿（P<0.01）;TFNG 100,400 mg·kg^-1可明显延长小鼠哮喘反应的潜伏期（P<0.01）;TFNG 3,6,12 g·L^-1可明显增加豚鼠肺灌流量,降低豚鼠回肠平滑肌收缩张力（P<0.01）。结论：瘤果黑种草子总黄酮具有一定的抗炎及平喘作用。     

川芎水煎剂和挥发油对大鼠血流动力学的影响

 目的在离体状态下观察川芎水煎剂和川芎挥发油对大鼠血流动力学的影响。方法应用Langendorff离体心脏灌流模型,在去除神经、体液因素影响的情况下,观察注射川芎水煎剂和川芎挥发油对大鼠心脏的影响。结果低剂量(02mg·mL^-1)、中剂量(2mg·mL^-1)组的川芎水煎剂在LVSP,LVEDP,HR,CF,+dp/dt_max,-dp/dt_max等各项血流动力学指标无明显改变,但中剂量(2mg·mL^-1)组的水煎剂能显著地减少CF;高剂量川芎水煎剂(20mg·mL^-1)可显著降低离体大鼠心脏的LVSP,+dp/dt_max,CF,HR,显著地升高-dp/dt_max;1,2,3μL挥发油对血流动力学各指标影响不明显。结论高浓度川芎水煎剂对离体大鼠心脏有负性变力和负性变时作用,并可使CF降低;川芎挥发油对大鼠心脏的血流动力学作用不明显。     

基于ITS2和psbA-trnH序列鉴别金线兰及其近缘种

目的 应用ITS2和psbA-trnH条形码鉴定金线兰Anoectochilus roxburghii及其近缘种。方法 提取金线兰及其近缘种的DNA,对ITS2和psbA-trnH序列进行扩增和测序,计算物种种内、种间遗传距离,构建邻接法（neighbor-joining,NJ）系统聚类树直观反映鉴定结果。结果 经PCR扩增后测序,金线兰及其近缘种ITS2序列长度为250～254 bp,GC含量为48.2%～51.6%;psbA-trnH序列长度为636～704 bp,GC含量为31.8%～32.0%。根据K2P遗传距离计算,金线兰的种内遗传距离明显小于种间遗传距离。基于ITS2序列构建的NJ树结果显示,除长片金线兰A.longilobus外,金线兰与其余混伪品可以明显区分。基于psb A-trnH序列构建的NJ树结果显示,除长片金线兰和丽蕾金线兰A.lylei外,金线兰与其余金线兰属近缘种可以明显区分。结论 ITS2和psb A-trnH序列可以鉴别金线兰与其遗传距离较远的近缘种。     

人参内生细菌NJ13在宿主体内定殖特性及对人参黑斑病的防治效果

为明确人参内生生防细菌NJ13在宿主体内的定殖特性,该研究通过抗生素诱导获得了同时对利福平和硫酸链霉素具有稳定抗性的双抗标记菌株NJ13-R,分析了菌株在宿主体内的定殖特性,并研究了NJ13对人参黑斑病的田间防治效果。结果表明,菌株在人参根、茎、叶部均可定殖,而且定殖量与接种浓度呈正相关。菌株可在人参不同部位侵染植株并在体内进行转移,在根部和叶部定殖量表现为先升后降的变化趋势,而在茎部呈先升高后平缓趋势。研究还发现,生防细菌NJ13表现出对宿主特定部位具有一定的偏好性,随着时间推移在茎部的定殖量高于其他部位。田间试验证明,生防细菌NJ13对人参黑斑病具有较好的防治作用,其中0.76×10⁸ cfu·mL^-1发酵液防效达75.62%,高于对照药剂0.67 mg·L^-1 50%嘧菌环胺WG的防效（73.06%）。     

黄连解毒汤有效成分对缺氧/复氧时脑微血管内皮细胞的保护作用

目的:研究栀子苷、黄芩苷和小檗碱对大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用。方法:建立离体大鼠脑微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤模型,用1.024,0.512,0.256,0.128,0.064,0.032,0.016,0.008μmol.mL^-1栀子苷,0.224,0.112,0.056,0.028,0.014,0.007,0.003μmol.mL^-1黄芩苷和0.192,0.096,0.048,0.024,0.012,0.006,0.003μmol.mL-1小檗碱分别作用于正常组和模型组细胞。细胞活性用MTT比色法检测。结果:0.128,0.064,0.032μmol.mL^-1栀子苷,0.028,0.014,0.007μmol.mL-1黄芩苷和0.024,0.012,0.006μmol.mL^-1小檗碱能够比较理想的保护缺氧4 h复氧12 h损伤的大鼠脑微血管内皮细胞。结论:适当浓度的栀子苷、黄芩苷和小檗碱等黄连解毒汤主要成分可以保护脑微血管内皮细胞。     

萎胃康治疗慢性萎缩性胃炎的拆方研究

目的: 探讨萎胃康及其拆方对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠的治疗作用。方法: 将70只Wistar大鼠随机抽取12只为正常对照组(正常组), 其余58只采用多重刺激6周复制大鼠CAG模型。确定造模成功的50只随机分为5组,即模型组、萎胃康全方组(全方组)、拆方Ⅰ号组(补益组)、拆方Ⅱ号组(祛邪组)、维霉素对照组(西药组), 分别ig 0.9%生理盐水(10 mL ·kg^-1)、萎胃康水煎液(8 g ·kg^-1)、拆方Ⅰ号水煎液(5.5 g ·kg^-1)、拆方Ⅱ号水煎液(2.5 g ·kg^-1)和维霉素混悬液(0.3 g ·kg^-1),1次/日。给药30 d后,观察对大鼠胃黏膜组织形态及血清超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量的影响。结果: 全方组大鼠胃黏膜组织接近正常组。与正常组SOD(239.88±6.32)U ·mL^-1,MDA(3.17±0.02)μmol ·L^-1比较,模型组SOD(174.59±12.81)U ·mL^-1明显降低(P<0.01),MDA(5.14±0.15)μmol ·L^-1明显升高(P<0.01)。与模型组比较, 各用药组大鼠血清SOD明显升高,MDA 显著降低(P<0.01或P<0.05);与全方组SOD(233.91±9.03)U ·mL^-1,MDA(3.11±0.19)μmol ·L^-1比较,补益组、祛邪组大鼠血清SOD明显降低,MDA 显著升高;与补益组SOD(221.58±5.71)U ·mL^-1比较, 祛邪组大鼠血清SOD(209.89 ±5.27) U ·mL^-1活力明显降低(P<0.05)。结论: 萎胃康能改善和逆转实验性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜萎缩。其中益气养阴药物起主要作用,祛邪药物起协同作用,其机制可能与抗自由基损伤有关。     

复方北豆根提取物胶体溶液的制备及抗人乳头瘤病毒的实验研究

 目的探讨复方北豆根提取物胶体溶液抗人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)的分子机制,研究中药胶体溶液制备工艺流程,开发出适合女性HPV感染的新型药物释放系统。方法从北豆根中提取总碱,从蚕蛹中提取复合氨基酸,与铜绿等矿物质络合成胶体溶液,采用荧光定量PCR技术检测胶体溶液对离体尖锐湿疣中HPV-DNA复制载量。结果复方北豆根提取物胶体溶液(1 g·mL^-1)及0.1倍稀释药物使HPV6/11和HPV16/18型DNA复制载量降为(1.5±1.0)copies·mL^-1,与阴性对照组HPV-DNA复制载量比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论北豆根总碱与蚕蛹复合氨基酸、铜绿等矿物质络合成复方北豆根提取物胶体溶液可抑制HPV-DNA复制,具有明显的高活性抗HPV作用。     

Antihyperglycemic activity of kinsenoside, a high yielding constituent from Anoectochilus roxburghii in streptozotocin diabetic rats

Different doses of kinsenoside, a high yielding constituent from Anoectochilus roxburghii, was orally administered to further investigate its biological activity and pharmacological mechanisms that involve in the hypoglycemic effect on streptozotocin (STZ) diabetic rats. Our study showed that this compound exhibited significantly antihyperglycemic activity at the dose of 15mg/kg body weight, which is speculated to be partially attributed to modulating the activity of enzymatic antioxidants, scavenging free radicals, and reducing the content of factor NO. Much more intact beta cells in the islets of Langerhans with denser insulin in kinsenoside-treated groups than the negative control were observed, which greatly supported the morphological and functional elucidation. These results displayed that kinsenoside could be useful for repairing beta cells in pancreatic islet injury as well as improving its function. The OGTT evidenced that this compound could promote the glucose tolerance of acute glucose increase in both diabetic and normal healthy rats.     

金线莲茎腐病菌的生物学特性及5种杀菌剂对其抑制作用

采用十字交叉法和血球计数板法分别测定不同培养温度、pH和光照条件对金线莲茎腐病菌菌丝生长状况和产孢量的影响;用菌丝生长速率法测定5种杀菌剂对金线莲茎腐病菌的抑制作用,为金线莲茎腐病的防治提供参考。结果表明该病菌菌丝生长、产孢的最适温度都为28 ℃,最适生长的pH为6~7,且光暗交替可促进菌落的生长和产孢。在5种杀菌剂中,戊唑醇乳油的EC₅₀为10.02 mg·L^-1,为多菌灵的92.50倍;其次是腈菌唑和福星乳油,EC₅₀分别为91.23,96.68 mg·L^-1。戊唑醇乳油对金线莲茎腐病菌的抑制作用最强,防治效果较好。     

金线莲栽培中多菌灵残留动态及安全使用标准研究

采用甲醇提取,液液分配净化,高效液相色谱分析多菌灵在金线莲根、茎、叶及栽培基质中的残留消解动态,并对其安全使用标准进行讨论。结果表明不同多菌灵添加浓度下的回收率为82.9%~95.7%,RSD为2.0%~6.3%,满足农药残留检测要求。田间试验分别采用推荐剂量(1.0 kg·hm-2)和1.5倍推荐剂量(1.5 kg·hm-2)进行处理,2年连续实验结果表明,多菌灵在金线莲栽培基质中的半衰期为7.01~8.51 d,在根中残留趋势为先升后降,半衰期为4.93~5.71 d,在茎和叶中的消解半衰期分别为3.58~4.27,3.50~3.91 d。若多菌灵在金线莲植株中的最高残留限量推荐值为0.5 mg·kg-1,每年以1.0 kg·hm-2的剂量喷施4次,最后一次施药和收获时间的安全间隔期可推荐为28 d。     

金线莲形态学性状与产量形成关系的多重分析

以13份金线莲种质为研究对象,对其9个性状（株高、地径、叶长、叶宽、植株叶面积、叶片鲜重、叶片数、高径比、植株鲜重）进行相关、通径和主成分分析。不同种源金线莲形态学性状变异系数为2.96%~12.59%,相关性研究表明植株鲜重与地径、株高和叶片数呈极显著正相关,与叶片鲜重呈显著正相关。通径分析表明株高对植株鲜重有最大的正向直接作用,并通过叶片鲜重和叶片数对植株鲜重有不同程度的间接作用。通过主成分分析,将金线莲形态学性状分为“高产型形态决定因子”和“产量的叶部决定因子”。在实际生产及良种选育过程中,应关注金线莲株高、叶片鲜重和叶片数等性状。     

种苗级别对金线莲生长发育及产量和品质的影响

对金线莲种苗的株高、地径、叶片数、全株鲜重和高径比5个形态指标进行检测,并进行主成分分析确定分级指标,采用逐步聚类分析方法聚类分级;进行不同等级种苗盆栽试验,对植株生长指标,药材产量和品质指标进行测定。结果表明可以选用株高和地径为种苗分级的质量指标,并初步制定了金线莲种苗质量分级标准;不同级别金线莲种苗对植株生长发育,药材产量有影响,Ⅰ级苗的株高和地径要比Ⅱ级、Ⅲ级苗高,且药材产量也显著高于Ⅱ级、Ⅲ级苗药材产量,而对药材内在品质无明显影响,为金线莲规范化栽培提供依据。     

金线莲基原植物花粉活力和柱头可授性及结实特征研究

采用TTC法和过氧化物酶法测定花粉活力及寿命,用联苯胺-过氧化氢法测定柱头可授性,并对不同授粉方式的植株进行结实特征调查。结果表明:1金线兰与台湾金线莲在花粉活力上表现出相同的趋势,先上升后下降;贮藏温度与贮藏时间对金线莲花粉活力存在显著的影响,随着贮藏时间的延长,花粉活力降低,4℃冰箱贮藏可适当延长花粉活力。2柱头于开花当天就具有可授性,第4天最强,随后逐渐降低,金线兰于花后第8天不具可授性,而台湾金线莲于花后第10天不具可授性。3不同授粉方式对金线莲结实率影响显著,人工异花授粉的结实率远远高于人工自花授粉。因此,采集花后第3天花粉对花后第4天的柱头进行人工异花授粉杂交,可显著提高结实率,为金线莲新品种的选育和良种繁育提供技术保证。     

Antiplasmodial activity of extracts from seven medicinal plants used in malaria treatment in Cameroon

Aim of the study

In a search for new plant-derived biologically active compounds against malaria parasites, we have carried out an ethnopharmacological study to evaluate the susceptibility of cultured Plasmodium falciparum to extracts and fractions from seven Cameroonian medicinal plants used in malaria treatment. We have also explored the inhibition of the Plasmodium falciparum cysteine protease Falcipain-2.

Materials and methods

Plant materials were extracted by maceration in organic solvents, and subsequently partitioned or fractionated to afford test fractions. The susceptibility of erythrocytes and the W2 strain of Plasmodium falciparum to plant extracts was evaluated in culture. In addition, the ability of annonaceous extracts to inhibit recombinant cysteine protease Falcipain-2 was also assessed.

Results and discussion

The extracts showed no toxicity against erythrocytes. The majority of plant extracts were highly active against Plasmodium falciparumin vitro, with IC₅₀ values lower than 5 μg/ml. Annonaceous extracts (acetogenin-rich fractions and interface precipitates) exhibited the highest potency. Some of these extracts exhibited modest inhibition of Falcipain-2.

Conclusion

These results support continued investigation of components of traditional medicines as potential new antimalarial agents.     

金银花类药用植物IspE和IspH基因克隆和生物信息学分析

目的:克隆金银花类药用植物4-二磷酸胞苷-2-C-甲基赤藓糖激酶(4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol kinase,IspE)和4-羟基-3-甲基-2-邻苯基二磷酸还原酶(4-hydroxy-3-methylbut-2-enyl diphosphate reductase,IspH)基因,并对其基因序列、蛋白特性和转录活性进行分析、比较.方法:从忍冬Lonicera japonica转录组测序结果中分析获得了IspE,IspH基因.分别以忍冬、红白忍冬L.japonica var.chinensis、红腺忍冬L.hypoglauca和水忍冬L.dasystyla新鲜花蕾为材料,利用RT-PCR技术克隆获得了4种金银花类药用植物IspE和IspH基因的全长cDNA.运用生物信息学分析软件,预测编码蛋白的结构和功能,并通过RT-PCR检测IspE和IspH在忍冬、红白忍冬、红腺忍冬、水忍冬花蕾中的转录情况.结果:金银花类药用植物IspE基因含有1个完整的开放阅读框,长度为1 221 bp,编码406个氨基酸;IspH含有一个完整的开放阅读框,长度为1 380 bp,编码459个氨基酸.IspE和IspH均为非分泌蛋白,均定位于叶绿体中.RT-PCR分析结果表明在忍冬、红腺忍冬和水忍冬的花蕾中IspE,IspH基因的转录水平没有显著差异,但红白忍冬花蕾中IspE,IspH基因的转录水平均显著高于忍冬.结论:克隆获得忍冬、红白忍冬、红腺忍冬和水忍冬中IspE,IspH基因,并证实了其在不同金银花类药用植物中的表达,为进一步研究IspE,IspH基因对萜类化合物生物合成和花香气以及颜色的影响奠定了基础.     

列当属、肉苁蓉属和草苁蓉属植物传统药物学调查

通过野外资源调查、整理各大标本馆标本原始记录和查阅文献记载等方法,系统整理、总结、归纳了列当属、肉苁蓉属和草苁蓉属民族药用植物种类、功效及民间使用情况,结果表明列当属6种药用植物在4个少数民族间作为7种民族药应用,草苁蓉属2种药用植物在8个少数民族间作为10种民族药应用,肉苁蓉属2种药用植物在3个少数民族间作为3种民族药应用,且同种药用植物常作不同民族药;发现3属植物的传统疗效主要集中在补肾壮阳、止血和止痛3个方面,并且该传统疗效与现代药理研究结果基本吻合。因此深入研究植物种类丰富的列当属植物资源对缓解肉苁蓉植物资源匮乏局面和扩大药源具有积极意义。     

α-Glucosidase inhibitory activity of selected Philippine plants

Ethnopharmacological relevance

Antidesma bunius Spreng. (Phyllantaceae), Averrhoa bilimbi L. (Oxalidaceae), Biophytum sensitivum (L.) DC. (Oxalidaceae), Ceriops tagal (Perr.) C.B. Rob. (Rhizophoraceae), Kyllinga monocephala Rottb. (Cyperaceae), and Rhizophora mucronata Lam. (Rhizophoraceae) are used as remedies to control diabetes. In the present study, these plants were screened for their potential α-glucosidase inhibitory activity.

Materials and methods

The 80% aqueous ethanolic extracts were screened for their α-glucosidase enzyme inhibitory activity using yeast alpha glucosidase enzyme.

Results

Except for A. bilimbi with IC₅₀ at 519.86±3.07, all manifested a significant enzyme inhibitory activity. R. mucronata manifested the highest activity with IC₅₀ at 0.08±1.82 μg mL⁻¹, followed by C. tagal with IC₅₀ at 0.85±1.46 μg mL⁻¹ and B. sensitivum with IC₅₀ at 2.24±1.58 μg mL⁻¹.

Conclusion

This is the first report on the α-glucosidase inhibitory effect of the six Philippine plants; thus, partly defining the mechanism on why these medicinal plants possess antidiabetic properties.