linc00675在肺癌组织和细胞中的表达及其抑制肺癌细胞迁移和侵袭的机制

目的:探讨linc00675在肺癌组织和细胞中的表达以及其对肺癌细胞迁移、侵袭的影响。方法:采用qRT-PCR检测linc00675在35例肺癌组织和癌旁组织及肺癌细胞株SPCA1、A549、NCI-H446和人肺正常上皮细胞BEAS-2B中的表达。利用细胞转染实验对肺癌细胞SPCA1进行LV-linc00675和siRNA-linc00675及相关阴性对照的转染,采用qRT-PCR检测linc00675的表达水平。采用Transwell实验检测过表达及干扰linc00675表达对SPCA1细胞迁移和侵袭能力的影响。通过Western blot实验检测细胞上皮标志蛋白 E-钙黏蛋白（E-cadherin）、间质标志蛋白 N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）的表达水平。结果:linc00675在肺癌组织中的表达显著低于癌旁组织,在肺癌细胞株中的表达显著低于人肺正常上皮细胞。转染LV-linc00675可显著增加linc00675在肺癌细胞中的表达,转染siRNA-linc00675可显著降低linc00675在肺癌细胞中的表达。Transwell实验结果显示,过表达linc00675可显著抑制肺癌细胞的迁移和侵袭能力,干扰linc00675表达可显著增强肺癌细胞的迁移和侵袭能力。Western blot实验结果显示,过表达linc00675可显著抑制SPCA1细胞上皮间质转化（EMT）的发生,干扰linc00675表达后SPCA1细胞发生了明显的EMT。结论:linc00675在肺癌细胞中发挥抑癌作用,linc00675可能通过抑制肺癌细胞EMT的发生从而减弱其迁移和侵袭能力,提示linc00675可能成为肺癌治疗的新靶点。     

miR-506通过调控MCL-1抑制耐阿立替尼非小细胞肺癌A549细胞上皮间质转化的作用机制

目的:探究miR-506通过调控MCL-1对耐阿立替尼非小细胞肺癌A549细胞上皮间质转化（epithelial mesenchymal transformation,EMT）及侵袭转移的影响和作用机制。方法:收集2017年12月至2018年12月我院肿瘤科收治的经PET-CT结合组织病理活检及药敏试验确诊为耐阿立替尼的74例非小细胞肺癌患者的癌及癌旁组织以及人非小细胞肺癌A549细胞为研究对象,分别采用细胞转染、免疫组化染色（IHC）、qRT-PCR和Western Blot法检测上述临床组织和细胞样本中miR-506、MCL-1、BAX/Bcl-2凋亡信号途径及EMT标志蛋白表达水平;此外,采用Transwell细胞实验观察miR-506过表达和MCL-1敲减对A549细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:免疫组化（IHC）结果显示肺癌患者癌组织中浸润性坏死性病理损伤较癌旁组织明显加重,且癌组织中MCL-1的阳性表达率为94.64%,明显高于癌旁组织的23.27%（P＜0.05）。qRT-PCR和Western Blot结果显示,肺癌组织中miR-506、BAX和E-cadherin的表达明显低于癌旁组织,而MCL-1、Bcl-2和N-cadherin的表达显著高于癌旁组织（P＜0.05）。细胞实验结果表明miR-506过表达和MCL-1敲减能够明显上调BAX和E-cadherin的表达,同时抑制Bcl-2和N-cadherin的表达（P＜0.05）;此外,miR-506过表达和MCL-1敲减均能显著抑制肺癌A549细胞的迁移和侵袭能力（P＜0.05）。结论:miR-506可能通过抑制BAX/Bcl-2/MCL-1凋亡途径发挥抑制耐阿立替尼非小细胞肺癌A549细胞EMT及诱导细胞凋亡作用,有望为临床抗肺癌转移及凋亡抑制靶向治疗提供新分子和靶点。     

大肿瘤抑制激酶2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:检测大肿瘤抑制激酶2（large tumor suppressor kinase 2，LATS2)在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC)组织和细胞中的表达水平，对NSCLC细胞增殖、侵袭和患者临床特征的影响。方法:收集2017年6月-2019年6月在我院接受手术治疗的NSCLC患者260例，免疫组化实验检测NSCLC和癌旁组织中LATS2的表达水平；卡方检验分析LATS2的表达与患者临床特征的关系；qRT-PCR检测NSCLC组织和癌旁组织中LATS2 mRNA的相对表达水平；转染实验将LATS2质粒转染至A549细胞中；MTT实验检测LATS2对A549细胞增殖的影响；Transwell实验检测LATS2对A549细胞侵袭的影响。结果:LATS2在癌组织中的表达低于癌旁组织；LATS2的高表达率为72.3%（188/260），低表达率为27.7%（72/260）；LATS2高表达组与低表达组患者在性别、肿瘤类型、胸膜侵犯、血管侵犯、淋巴管侵犯和T分期之间无统计学差异，在年龄、肿瘤直径、淋巴转移和病理分级之间有统计学差异（P＜0.05）；NSCLC组织和细胞中LATS2 mRNA的相对表达水平显著低于癌旁组织和人正常肺上皮细胞HPAEpiC；LATS2质粒转染至A549细胞中使其表达水平升高，LATS2高表达组细胞的OD值和发生侵袭的细胞数显著降低。结论:LATS2与患者的年龄、肿瘤直径、淋巴结转移和病理分级有关，其表达水平增加后可显著抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭，有可能成为NSCLC治疗的新作用靶点。     

整合素连接激酶在非小细胞肺癌中过度表达及促进肺癌细胞的侵袭和迁移

目的:探讨整合素连接激酶（ILK）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及在侵袭和迁移中的作用和相关分子机制。方法:免疫组化法检测ILK蛋白在NSCLC患者中的表达,细胞转染、siRNA干扰、细胞划痕试验、实时定量PCR、Western blot方法探讨ILK在肺癌A549细胞中的表达及分子机制。结果:ILK蛋白在原发性NSCLC组织中过度表达30.6％（33/108）并且和TNM分期（P=0.001）、淋巴结转移（P=0.033）相关。ILK在A549细胞中过度表达并且通过下调E-cadherin,上调波形蛋白、纤维连接蛋白、Snail、Slug导致上皮-间质转化（EMT）。此外,NF-κB抑制剂BAY 11-7028和小干扰靶RNA（siRNA）NF-p65可诱导E-cadherin的表达下调。结论:ILK在原发性NSCLC组织中高表达并与TNM分期和淋巴结转移相关,其促进肺癌细胞的侵袭和迁徙机制可能是经NF-κB信号通路诱导EMT所致。     

羧肽酶A4促进非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT进程的 机制及其相关意义

目的：探究羧肽酶A4（ CPA4）促进非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖、迁移、侵袭和EMT进程的机制及其临床意义。方法：通过IHC和WB法检测2012年2月至2015年12月济南市中心医院收治的105例晚期或转移性NSCLC患者的癌组织及其癌旁组织标本,以及NSCLC细胞中CPA4的表达;c2检验分析CPA4表达与患者临床病理特征之间的关联,Kaplan-Meier法分析CPA4表达与患者OS之间的关系。采用细胞转染的方法分别构建稳定过表达和低表达CPA4的H1299与A549 NSCLC细胞,利用CCK-8法、细胞集落形成实验、划痕愈合实验和Transwell小室实验检测过表达或敲减CPA4后细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。建立裸鼠细胞移植瘤模型和尾静脉-肺转移肿瘤模型,检测过表达CPA4和敲减CPA4表达对在裸鼠体内成瘤和转移的影响,通过WB和IHC法检测移植瘤组织中上皮间质转化（EMT）相关标志物的变化。结果：与癌旁组织和正常肺上皮细胞比较,CPA4在 NSCLC 组织和细胞中均呈高表达（均 P?0.05）;CPA4 高表达 NSCLC 患者的OS显著短于低表达患者（P?0.05）,CPA4的高表达更多见于分化差、N2~N3淋巴结受累和TNM Ⅳ期（P?0.05或P?0.01）。过表达CPA4促进H1299细胞而敲减CPA4表达则抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭;过表达CPA4促进裸鼠H1299细胞移植瘤生长和肺的转移;过表达CPA4促进H1299细胞的EMT进程相关分子的变化。结论：NSCLC组织和细胞中CPA4均呈高表达,过表达CPA4可诱导EMT进程促进NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭且与肿瘤进展和预后有关,CPA4是一个预测NSCLC复发、预后及可用于靶向治疗的潜在标志物。     

lncRNA MAGI2-AS3在非小细胞肺癌组织中的表达及生物学作用

目的:评价lncRNA MAGI2-AS3 在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）组织中的表达及生物学作用。方法:收集63例非小细胞肺癌患者癌组织及其癌旁组织,检测lncRNA MAGI2-AS3在癌与癌旁组织中的相对表达量并分析其与患者临床特征的关系;在A549细胞中过表达lncRNA MAGI2-AS3,分析其与NSCLC细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移能力之间的关系。结果:lncRNA MAGI2-AS3 在NSCLC组织中呈现低表达状态,与正常肺组织相比,差异具有统计学意义;lncRNA MAGI2-AS3 在NSCLC组织中低表达,与患者的年龄、病理类型、肿瘤大小、临床分期、吸烟指数有关;lncRNA MAGI2-AS3 能够抑制肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移。结论:检测lncRNA MAGI2-AS3 与NSCLC病理类型、临床分期有一定的相关性,可以作为一种潜在的肺癌标志物指导临床诊断。lncRNA MAGI2-AS3 能够抑制肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移,有可能成为肺癌治疗的潜在靶点用于临床。     

非小细胞肺癌中ARL4C的表达及其在EGFR-TKI耐药中的作用

目的 探讨非小细胞肺癌中ARL4C的表达及其与临床病理特征的关系以及在EGFR-TKI耐药中的作用。方法 收集63例NSCLC患者的癌组织和癌旁组织，qRT-PCR法检测ARL4C的表达并分析其与临床病理特征之间的关系。qRTPCR和Western blot法检测ARL4C在各细胞株中的表达，MTS检测细胞活性及IC50的变化，Transwell侵袭实验检测ARL4C表达变化对细胞侵袭能力的影响。结果 非小细胞肺癌组织中ARL4C表达水平低于癌旁组织（P<0.05），其表达水平与淋巴结转移、TNM分期和肺膜侵犯密切相关（P<0.05）。TKI耐药细胞株HCC827/ER中ARL4C在mRNA以及蛋白表达水平相较对照细胞株HCC827显著下调（P<0.05）；ARL4C过表达细胞株HCC827/ER/ARL4C-OEIC50显著下降（P<0.05），Transwell分析结果显示过表达ARL4C后肺癌细胞的侵袭能力受到抑制（P<0.05）。结论 ARL4C异常表达与非小细胞肺癌淋巴结转移、TNM分期和肺膜侵犯密切相关。过表达ARL4C能提高非小细胞肺癌细胞对EGFR-TKI药物的敏感度并抑制非小细胞肺癌细胞的侵袭能力。     

长链非编码RNA MSC-AS1通过调控miR-302c-3p/SSX2IP促进非小细胞肺癌细胞增殖

目的:检测长链非编码RNA肌蛋白反义RNA1（musculin antisense RNA 1,MSC-AS1）在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）组织和细胞中的表达,研究其对肿瘤细胞增殖的影响并探索其机制。方法:采用qRT-PCR技术检测NSCLC肿瘤组织、癌旁组织、肺癌细胞及正常肺上皮细胞中MSC-AS1的表达;分析患者的临床病理资料与MSC-AS1表达的相关性。利用LipofectamineTM2000对肺癌细胞进行转染;MTT及克隆形成实验测定细胞的增殖能力;同时利用qRT-PCR测定细胞中miR-302c-3p及SSX2IP的表达变化。生物信息学方法预测MSC-AS1及miR-302c-3p的下游靶基因;双荧光素酶报告实验验证基因间的靶向结合关系。结果:MSC-AS1在肺癌组织及肺癌细胞(A549、SPC-A1和SK-MES-1)中较癌旁组织及正常肺上皮细胞BEAS-2B中表达升高（P＜0.05）;MSC-AS1的表达水平与癌肿TNM分期、肿瘤大小及淋巴结转移密切相关（P＜0.01）,并提示患者的预后不良（P＜0.01）;敲低MSC-AS1能够抑制肿瘤细胞的增殖（P＜0.05）。MSC-AS1通过miR-302c-3p/SSX2IP轴调控NSCLC细胞的增殖。结论:LncRNA MSC-AS1能够促进NSCLC细胞的增殖并可能成为潜在的治疗靶点。     

FBXW7调控非小细胞肺癌上皮间质转化的作用机制

目的:研究FBXW7在非小细胞肺癌上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)过程中发挥的作用。方法:收集100对非小细胞肺癌组织和对应的癌旁组织，利用免疫组化检测FBXW7在癌组织和癌旁组织中的表达。利用Western blot检测FBXW7在细胞系中的表达及FBXW7对EMT部分标志蛋白的影响。利用Transwell实验检测FBXW7对NSCLC细胞迁移能力的影响。免疫共沉淀实验和泛素化的Western blot验证FBXW7与Snail1的关系。结果:FBXW7在NSCLC组织中的表达明显低于对应癌旁组织中的表达。FBXW7在正常肺上皮细胞中的表达也明显高于4种非小细胞肺癌细胞系中的表达。FBXW7过表达显著抑制A549细胞的迁移能力。FBXW7过表达也明显抑制NSCLC细胞的EMT。机制研究发现，FBXW7可以直接结合并泛素化降解Snail1蛋白，并且Snail1部分逆转FBXW7对NSCLC细胞EMT标志蛋白的影响。结论:FBXW7对NSCLC细胞EMT的调控部分依赖于泛素化降解Snail1蛋白。     

白血病抑制因子对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响及其机制

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor, LIF）对细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法 采用荧光定量PCR和Western blot检测LIF在人NSCLC组织和癌旁组织中的表达;应用重组LIF因子处理非小细胞肺癌细胞系A549和Z793, MTT技术检测重组LIF因子对细胞增殖的影响; Transwell实验检测重组LIF因子对细胞侵袭的影响;Western blot检测重组LIF因子对肿瘤细胞中AKT/mTOR信号通路的影响。结果 LIF在肺癌组织中的表达水平较正常癌旁组织显著上调（P=0.0078）。重组LIF处理A549和Z793细胞后,肿瘤细胞增殖较对照组明显增加（P<0.01）;肿瘤细胞的侵袭能力较对照组明显增强（P<0.01）;AKT蛋白的磷酸化水平明显增加,且其下游底物mTOR的表达显著上调。结论 LIF在非小细胞肺癌中表达上调,并通过激活AKT/mTOR信号通路促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭。     

piR-9994对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其机制

目的 探讨piR-9994对胃癌细胞生物学行为的影响及可能机制。方法 qRT-PCR检测piR-9994在胃癌细胞系（MGC803和AGS）和正常胃上皮细胞（GES-1）中的表达情况;构建过表达和敲低piR-9994的MGC803胃癌细胞株,MTT、克隆形成实验检测piR-9994表达变化对细胞增殖能力的影响,划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力。qRT-PCR和Western blot检测细胞增殖和EMT相关基因表达。结果 piR-9994在胃癌细胞MGC803中表达水平显著高于正常人胃黏膜上皮细胞GES-1（P<0.05）。piR-9994过表达促进胃癌细胞增殖、侵袭和转移,敲低则作用相反。piR-9994表达与细胞周期密切相关,特别是S期。piR-9994过表达促进增殖相关基因PCNA、CCND1、Bcl-2表达,抑制凋亡基因c-PARP表达,促进EMT相关基因N-cadherin、MMP7、Twist和Vimentin表达及抑制E-cadherin表达;敲低则作用相反。结论 piR-9994异常表达影响胃癌细胞增殖、侵袭、转移及EMT进程。piR-9994可能是胃癌新的标志物和治疗靶点。     

lncRNA LOC440173在非小细胞肺癌组织中的表达及其对癌细胞恶性生物学行为的影响

目的：检测lncRNA LOC440173在NSCLC组织和细胞中的表达及探讨其对癌细胞恶性生物学行为的影响。方法：选取河北医科大学第四医院生物标本库中2014至2017年手术切除的72例NSCLC患者的癌及癌旁组织标本,应用qPCR法检测NSCLC组织和癌旁组织中,以及6种NSCLC细胞株（H520、H358、A549、HCC827、H1703和H1299）中LOC440173的表达水平;构建LOC440173的敲低及过表达载体,分别转染H520 和 H1703 细胞,应用 MTS、克隆形成及Transwell小室迁移和侵袭实验分别检测敲低及过表达LOC440173对 NSCLC 细 胞 增 殖 、迁移及侵袭能力的影响,qPCR法检测 LOC440173 对于 EMT 过程相关标志物（E-cadherin、N-cadherin 及 vimentin）mRNA表达水平的影响,WB法检测其对 E-cadherin、N-cadherin 蛋白表达的影响。结果：LOC440173在NSCLC组织中的表达明显高于癌旁组织（P<0.01）,并与淋巴结转移、组织学分化程度、TNM 分期和肿瘤大小有关联（P<0.05 或 P<0.01）。敲低 LOC440173 可以抑制 H520 细胞的体外增殖、迁移和侵袭（P<0.05 或 P<0.01）,过表达LOC440173可显著促进 H1703 细胞的增殖、迁移和侵袭（P<0.05 或 P<0.01）。在转录水平上,敲低LOC440173后,E-cadherin的表达水平升高 ,间充质相关标志物 N-cadherin、vimentin 的表达水平降低（P<0.05 或 P<0.01）;而过表达 LOC440173 后,E-cadherin 的表达水平降低,间充质相关标志物 N-cadherin、vimentin 的表达水平升高（P<0.05 或 P<0.01）。在转录后水平上,LOC440173负向调节E-cadherin蛋白的表达、正向调节N-cadherin的蛋白表达（均P<0.05）。结论：LOC440173在NSCLC组织中的异常高表达可能与NSCLC的发生发展有关,LOC440173可显著提高NCSCL细胞的体外增殖、迁移、侵袭能力,且其作用机制可能与调控EMT相关基因表达有关。     

环状RNA ciRS-7在三阴性乳腺癌中的表达及其对细胞侵袭和迁移的影响

 目的 探讨环状RNA ciRS-7在三阴性乳腺癌（TNBC）中的表达及其对细胞侵袭和迁移的影响。方法 通过qRT-PCR法检测乳腺癌组织和细胞中ciRS-7的表达水平,分析其与乳腺癌患者临床病理指标之间的关系。用划痕实验和Transwell实验检测沉默ciRS-7后MDA-MB-231和BT-549细胞的迁移和侵袭能力的变化。利用动物实验在体内进行验证。结果 TNBC组织中ciRS-7的相对表达量为（6.52±0.38）,显著高于Luminal型（1.56±0.17）（P<0.001）和HER2过表达型乳腺癌组织（2.27±0.66）（P<0.001）以及癌旁正常组织（0.83±0.09）（P<0.001）。ciRS-7表达与分子分型、肿瘤浸润和淋巴结转移明显相关（均P<0.05）;而与患者年龄、肿瘤直径和病理分级无关（均P>0.05）。沉默ciRS-7后,MDA-MB-231和BT-549细胞的迁移和侵袭明显减弱（均P<0.05）。ciRS-7敲低组肺转移瘤数明显减少（P<0.05）。结论 ciRS-7在TNBC中高表达,并可能增强TNBC细胞的侵袭和迁移。     

miR-145通过靶向AP4对非小细胞肺癌A549细胞迁移侵袭的影响

 目的 探讨miR-145对非小细胞肺癌迁移与侵袭能力的影响及其可能的作用机制。方法 qRTPCR法检测非小细胞肺癌组织中miR-145和激活增强子结合蛋白4（activating enhancer binding protein4, AP4）mRNA的表达。A549细胞转染miR-145 mimic或者AP4 siRNA后，划痕实验与Transwell小室法分别检测A549细胞的迁移与侵袭能力，qRT-PCR法与免疫印迹法（Western blot）检测A549细胞中AP4 mRNA与蛋白表达水平；双荧光素酶报告基因法检测AP4 mRNA与miR-145的关系。结果 与癌旁正常组织相比，非小细胞肺癌组织中miR-145表达明显降低（P<0.05），而AP4 mRNA和蛋白表达均明显升高（均P<0.05）；与对照组相比，转染miR-145 mimic后，A549细胞中miR-145表达明显升高（P<0.05），AP4 mRNA和蛋白水平明显降低（P<0.05）；A549细胞的迁移数与侵袭能力均显著下降（均P<0.05）；双荧光素酶报告基因法验证AP4 mRNA是miR-145的靶基因。A549细胞转染AP4siRNA后，A549细胞的迁移数与侵袭数显著下降（均P<0.05）。结论 上调miR-145能抑制A549细胞的迁移与侵袭能力，可能与其抑制靶基因AP4表达有关。     

Knockdown of Long Noncoding RNA ENST457720 Inhibits Proliferation of Non-Small Cell Lung Cancer Cells In Vitro and In Vivo

Non-small cell lung cancer (NSCLC) represents the leading cause of cancer-related mortality worldwide. More and more reports have identified important roles for long noncoding RNAs (lncRNAs) in cancer development. ENST457720 expression was upregulated in lung adenocarcinoma in a microarray-based lncRNA screen. We determined the expression levels of ENST457720 in NSCLC tissues with quantitative real-time PCR and then studied their clinical significance. We explored the biological significance of ENST457720 with gain- and lossof-function analyses in vitro and in vivo. In this study, ENST457720 was expressed at higher levels in NSCLC tissues than in paired normal tissues. Higher ENST457720 expression was associated with larger tumor sizes, lymph node metastasis, and advanced TNM stage. ENST457720 silencing suppressed NSCLC cell proliferation in vitro and in vivo. Moreover, ENST457720 knockdown inhibited NSCLC invasion and reversed the epithelial-to-mesenchymal transition. ENST457720 promoted NSCLC proliferation and invasion, which may be a novel potential therapeutic target for NSCLC.     

乳腺癌中组蛋白去甲基化酶JMJD3与上皮间质转化相关蛋白表达的相关性及临床意义CSCD

目的探讨乳腺癌组织中组蛋白去甲基化酶JMJD3与上皮细胞-间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin、Vimentin和N-cadherin的表达及其相关性。方法收集120例乳腺癌及对应癌旁组织标本,采用免疫组织化学SP法检测乳腺癌组织中JMJD3、E-cadherin、Vimentin和N-cadherin的表达,并分析上述蛋白与乳腺癌临床病理特征的关系及相关性。结果乳腺癌组织中JMJD3和E-cadherin阳性率(56.67%和65.00%)显著低于癌旁组织(73.33%和83.33%)(均P<0.05),Vimentin和N-cadherin阳性率(54.17%和58.33%)显著高于癌旁组织(23.33%和20.83%)(均P<0.05)。JMJD3、E-cadherin、Vimentin及N-cadherin的表达与乳腺癌组织学分级、TNM分期和淋巴结转移均相关(均P<0.05),JMJD3与肿瘤直径相关(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,乳腺癌中JMJD3与E-cadherin表达呈正相关(r=0.204,P=0.025),与Vimentin和N-cadherin表达均呈负相关(r=-0.467,r=-0.500,均P=0.000)。结论乳腺癌中JMJD3可能通过调节乳腺癌细胞上皮-间质转化途径调控乳腺癌侵袭转移。     

miR-211通过靶向下调SATB2表达促进非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移与侵袭

目的:探讨miR-211及SATB2基因在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织和细胞中的表达情况,探究miR-211在NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭过程中的作用及其相关机制。方法:双荧光素酶报告系统验证miR-211和SATB2的相互作用机制;qRT-PCR检测miR-211和SATB2在NSCLC组织及癌旁组织中的表达情况;向A549细胞中转染miR-211 mimics、miR-211 inhibitor和pcDNA3.1-SATB2,检验转染效率及转染后A549细胞中SATB2 mRNA和蛋白表达水平;采用CCK-8实验和Transwell小室分别检测miR-211和SATB2表达变化对A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:双荧光素酶报告系统结果提示SATB2 3' UTR是miR-211直接结合的靶位点。NSCLC组织中miR-211表达上调,SATB2表达下调,两者表达呈线性负相关(P＜0.05)。转染miR-211 mimics显著下调A549细胞中SATB2 mRNA和蛋白的表达水平(P＜0.05);转染miR-211 inhibitor和pcDNA3.1-SATB2使A549细胞中SATB2 mRNA和蛋白的表达水平增高(P＜0.05)。CCK-8实验显示,相较于对照组,miR-211过表达组的A549细胞增殖率显著增加(P＜0.05),miR-211抑制组和SATB2过表达组的A549细胞增殖能力下降(P＜0.05)。Transwell小室实验结果显示,与对照组相比,miR-211抑制组和SATB2过表达组的A549细胞迁移和侵袭能力明显降低(P＜0.05)。在miR-211过表达组共转染SATB2过表达,使miR-211介导的对A549细胞增殖、迁移及侵袭的促进作用受到抑制。结论:下调miR-211的表达可以增加NSCLC细胞中SATB2转录及转录后表达水平,从而抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。     

Snail和Claudin-3在非小细胞肺癌中的表达及意义

背景与目的 上皮-间质转化( epithelial mesenchymal transition,EMT)是肿瘤浸润和转移的关键步骤,上皮细胞极性丧失是其主要标志,表现为Claudin等上皮标记丢失.锌指转录因子Snail是调控EMT的重要转录因子,近年来对肿瘤侵袭转移机制研究发现Snail能提高多种肿瘤的侵袭能力.本研究旨在利用组织芯片技术探讨转录因子Snail和紧密连接蛋白(Claudin-3)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)及其淋巴结转移灶中的表达和意义.方法 分别采用免疫组织化学MaxVision法和EnVision法检测59例癌旁正常肺组织、302例NSCLC原发灶以及57例淋巴结转移灶中Snail和Claudin-3的表达.结果 Snail在癌旁正常肺组织、NSCLC原发灶以及淋巴结转移灶中的表达逐渐增强,差异具有统计学意义(P＜0.05);Claudin-3在癌旁正常肺组织、NSCLC原发灶以及淋巴结转移灶中的表达逐渐减弱,差异具有统计学意义(P＜0.05).在NSCLC原发灶中,Snail和Claudin-3的表达与肿瘤组织学类型有关(P＜0.05).Spearman等级相关分析显示Snail与Claudin-3的表达呈负相关(r=-0.178,P=0.002).Kaplan-Meier生存分析显示肿瘤大小、组织学类型、病理分级、有无癌转移、TNM分期、Snail的表达以及Snail与Claudin-3的差异性表达影响NSCLC患者的术后生存时间(P＜0.05).Cox回归分析提示肿瘤大小、组织学类型、病理分级、有无癌转移和TNM分期是影响NSCLC患者预后的独立危险因素(P＜0.05).结论 Snail和Claudin-3在NSCLC的浸润、转移中具有重要意义,有助于对NSCLC患者预后的评价.