新生儿脐带血CD4+CD25high调节性T细胞Foxp3的表达

目的:检测新生儿脐带血CD4 CD25high调节性T细胞(Treg)数量及胞内转录因子Foxp3的表达,探讨Treg细胞在新生儿期的表达特点.方法:采集新生儿脐带血(n=15)和成人外周血(n=12),密度梯度离心法获取单个核细胞用荧光标记单克隆抗体(mAb)作表面和胞内染色后,在流式细胞仪上检测CD4 CD25highTreg细胞的数量及其胞内转录因子Foxp3的表达.结果:脐带血Treg细胞占CD3 CD4 T细胞的比例(3.86%±1.63%)明显高于成人外周血(0.87%±0.74%,P<0.01);而脐带血Treg细胞中表达Foxp3的比例明显低于外周血Treg细胞(23.21%±8.9%vs71.3%±11.6%,P<0.01).结论:虽然新生儿脐带血CD4 CD25highTreg细胞数量明显高于成人外周血,但Foxp3 细胞数量明显低于成年人,提示在功能上可能尚未成熟.     

CD4~+CD25~(high) Foxp3~+调节性T细胞在新生儿脐血及成人外周血的比较

目的:检测新生儿脐血及成人外周血中CD4+CD25~(high) Foxp3+调节性T细胞(Treg)的比例,探讨Treg在新生儿脐血中的临床意义.方法:采用流式细胞术(FCM)检测30例新生儿脐血单个核细胞中CD4+T细胞、CD4+CD25+/CD4~+、CD4~+CD25~(high) /CD4~+T细胞百分比以及绝对计数,进一步分析CD4~+CD25~+及CD4~+CD25~(high) T细胞中Foxp3~+的百分比,以及利用RT-PCR方法检测Foxp3 mRNA表达水平,并与27例成人外周血单个核细胞(PBMC)中的上述指标进行比较.结果:与成人PBMC比较,新生儿脐血单个核细胞中CD4~+T细胞百分比及绝对计数均增高(P＜0.01＝;CD4~+CD25~+/CD4~+及CD4~+CD25~(high) /CD4~+百分比减低(P＜0.05＝,但绝对计数增高(P＜0.01＝;新生儿脐血CD4~+CD25~+ 及CD4~+CD25~(high) T细胞中Foxp3~+表达较成人外周血减低(P＜0.01＝;新生儿脐血Foxp3 mRNA表达水平亦较成人外周血减低(P＜0.05＝.结论:新生儿脐血中存在单纯且数量较多的CD4~+CD25~(high) 调节性T细胞,但Foxp3的表达水平低于成人外周血,它们可能具有独特的免疫调节作用,但功能尚未成熟.     

类风湿性关节炎患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞检测及意义

目的:研究CD4 CD25 FoxP3 调节性T细胞在类风湿关节炎患者(RA)外周血中的比例改变,并探讨其在疾病进程中的意义.方法:选取活动期及稳定期RA患者,采用细胞内染色的流式细胞术及定量PCR的方法,分别在蛋白质和mRNA水平检测FoxP3表达,并与正常人进行比较.结果:RA患者CD4和CD25双阳性细胞所占比例与对照组没有明显差异,而活动期患者外周血CD4 CD25high和CD4 CD25 FoxP3 细胞明显低于稳定期和对照组(P＜0.05).FoxP3 mRNA表达水平与蛋白质表达水平变化相一致.结论:类风湿性关节炎活动期时CD4 CD25 FoxP3 调节性T细胞明显减少,这群调节性T细胞可能参与了类风湿性关节炎的病理进程.     

抗CD25单克隆抗体对CD4+CD25high调节性T细胞的影响

目的 评价抗CD25单克隆抗体对活体肾移植受者外周血CD4 CD25high调节性T细胞(Treg)的影响.方法 观察14例活体肾移植受者外周血CD4 CD25high T细胞百分比和FoxP3mRNA表达水平的变化,应用流式细胞仪FACS Calibur和CellQuest软件行双色流式细胞计数和结果分析,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对肾移植受者外周血单个核细胞(MNC)的FoxP3基因水平进行检测.结果 在移植术后3d、13d,CD4 CD25high T细胞占CD4 比例显著升高;在移植后1个月内,CD4 CD25high T细胞比例升高约至原来的3倍.移植术后13d、17d、27d时外周血FoxP3 mRNA表达明显高于移植术后3d.在肾移植术后的不同时间抗CD25单克隆抗体使用组受者的CD25 T细胞百分比明显低于对照组(未使用抗CD25单克隆抗体).抗CD25单克隆抗体使用组与对照组两组间比较,术后3d、13d,抗CD25单克隆抗体组CD4 CD25high T细胞占CD4 的比例明显降低,术后3d对照组、抗CD25单克隆抗体使用组分别为1.24%±0.15%、2.25%±0.24%,P=0.00;术后13d为3.75%±0.38%、7.28%±0.51%,P=0.00.然而,术后17d、27d后,抗CD25单克隆抗体使用组的CD4 CD25high T恢复到对照组水平,两组间CD4 CD25high T细胞占CD4 的比例无统计学差异,即第17d为3.72%、0.26%、4.43%、0.44%,P=0.17,27d为9.00%±0.30%、8.31%±0.33%,P=0.16.在肾移植术后不同时间,受者外周血FoxP3mRNA表达水平在两组之间相似,无统计学差异,说明FoxP3mRNA表达水平并没有受到体内注射抗CD25单克隆抗体影响.结论 抗CD25单克隆抗体的使用对活体肾移植受者外周血CD4 CD25high调节性T细胞在一定时间具有暂时性的影响,而FoxP3 mRNA表达水平没有受到影响.     

肺癌患者CD4+ CD25+调节性T细胞的检测及临床意义

目的:检测肺癌患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞的分布并探讨相关机制.方法:采用流式细胞仪分析66例肺癌患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞占CD4 T淋巴细胞的比例.结果:66例肺癌患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞占CD4 T淋巴细胞的比例为(16.2±2.4)%,与对照组(6.19±1.5)%比较差异有显著性(P＜0.05). 25例鳞癌、29例腺癌、12例小细胞癌患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞比例分别为(18.3±2.9)%、(15.6±1.8)%、(17.3±2.2)%,各组间比较差异无显著性(P＞0.05);均显著高于对照组(6.19±1.5)%,P＜0.05;34例Ⅲ期,14例Ⅳ期肺癌患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞比例为(15.3±2.6)%,(20.4±3.1%),均显著高于18例Ⅱ期患者(9.4±1.3)%,P均＜0.05.结论:肺癌患者外周血中有CD4 CD25 调节性T细胞比例增高,且与分期有关.它可能与肺癌患者免疫功能受损有关,可作为评估肺癌患者预后的一项指标.     

脐带血、成人外周血中CD4+CD25high调节性T细胞分布的比较

目的比较成人外周血及新生儿脐带血中CD4 CD25 调节性T细胞(Tr细胞)的数量。方法采集成年人外周血和新生儿的脐带血,以荧光素分别标记的抗CD4/抗CD25/抗CD3和抗CD4/抗CD8/抗CD3mAb染色后,流式细胞术进行分析。结果成人外周血中CD4 CD25highTr细胞的数量为(9.09±3.05)个/μL,占CD3 CD4 T细胞的(1.40±0.37)%。新生儿脐带血中CD4 CD25-T细胞和CD4 CD25highTr细胞的绝对数及其占CD3 CD4 T细胞的百分率,均明显高于成人外周血(P<0.01);而CD4 CD25intT细胞的绝对数及其占CD3 CD4 T细胞的百分率,则明显低于成人外周血(P<0.01)。结论新生儿脐带血中CD4 CD25highTr细胞、CD4 CD25intT细胞及CD4 CD25-T细胞的数量明显有异于成人外周血。     

CD4~+CD25~+CD127~(low)识别人外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的优势

目的:探索可用于检测人外周血中CD4+CD25+Treg 细胞的最佳标记物.方法:以 52 名健康人和 47 名非血液系统肿瘤患者为研究对象,采用多色免疫荧光素标记和多参数流式细胞术同时检测外周血中CD4+CD25high、CD4+CD25+FoxP3+和 CD4+CD25+CD127lowT 细胞,并以经典指标CD4+CD25high 和 CD4+CD25+FoxP3+为标准,分析和比较CD4+CD25+CD127low作为识别CD4+CD25+ Treg 细胞的可行性及其优势.结果:健康人和肿瘤患者外周血 CD4+CD25high、CD4+ CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CDl27+lowT 细胞占CD4+T 细胞百分比分别为(1.769±O.682)%和(2.958±1.392)%;(2.905±1.772)%和(5.128±2.227)%以及(5.396±1.306)%和(7.175±2.565)%.三者呈相同的趋势,即肿瘤患者组>健康人组,且三者之间呈显著正相关(P<0.05).用两种不同标记法高纯度分选CD4+ CD25high 和 CD4+CD25+CD127lowT 细胞群后,FoxP3 阳性率分别为90.9%和92.7%.结论:CD4+CD25+CD127low 三标记法可以帮助识别 CD4+CD25+Treg 和部分激活的 CD4+T 细胞,提高CD4+CD25+Treg细胞的可检出数量,并且不影响细胞活性度,是反映CD4+CD25+Treg 细胞更理想的指标.     

免疫磁珠法分离人外周血CD4+CD25+调节性T细胞

目的 建立人外周血单个核细胞中CD4 CD25 调节性T细胞(regulatery T cells,Treg)免疫磁性细胞分离力(megnetic activated cell sorting,MACS),并鉴定其分离效率.方法 采用免疫磁珠两步法(即阴性分选和阳性分选2步)分离人周血单个核细胞中的CD4 CD25 调节性T细胞,首先采用生物素标记的鸡尾酒抗体和抗生物素标记的磁珠阴性分选CIM细胞,再用抗CD25 的磁珠阳性分选CD4 CD25 T细胞.分离后的细胞经抗体染色后再通过流式细胞仪检测其分离纯度;内因子染色检测其转录因子FOXV3的表达频率;台盼蓝染色检测细胞的存活率;3H-TdR掺入法检测其对CD4 CD25-T细脆殖抑制效应.结果 阴性分选CD4 T细胞的纯度为(92.2±1.7)%,阳性分选后CD4 CD25 Treg细胞的纯度(95.1±1.2)%.胞内因子染色FOXF3在CD4 CD25 Treg细胞中的表达率为(80.4±1.2)%,台盼蓝染色细胞存活率为(95.6±3.3)%.3H-TdR掺入法检测其对CIM CD25-T细胞具有明显的抑制作用.结论 采用免疫磁性细胞分离技术能够高效、快地得到一群纯度高并且细胞活力好的CD4 CIY25 Treg,为进一步研究其功能提供了方便.     

SLE患者外周血中Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞的分析

目的分析SLE患者外周血中Foxp3 CD4 CD25 调节性T细胞和T细胞亚群上GITR的表达,以初步阐述其在SLE患者免疫稳态调节中的作用和意义。方法以流式细胞术检测SLE患者外周血中Foxp3 CD4 CD25 调节性T细胞和T细胞亚群上GITR的表达。结果稳定期及活动期SLE患者外周血中Foxp3 CD4 CD25 调节性T细胞比例显著低于健康对照(P<0.05),且活动期SLE患者Foxp3 CD4 CD25 调节性T细胞比例高于稳定期SLE患者(P>0.05)。SLE患者外周血CD3 CD4 T细胞和CD3 CD8 T细胞上GITR表达显著增加(P<0.05);随着疾病活动性增加,CD3 CD4 T细胞上GITR表达降低(P>0.05),CD3 CD8 T细胞上GITR表达增加(P>0.05)。结论SLE患者外周血中Foxp3 CD4 CD25 调节性T细胞表达降低,而患者T细胞亚群上GITR表达增加,其共同作用在诱导SLE患者外周耐受障碍中具有重要意义。     

结核病患者外周血中CD4~+ CD25~+调节性T细胞水平的检测

探讨CD4~+CD25~+调节性T细胞及其转录因子Foxp3在结核病发病机制中的作用。研究对象为肺结核患者22例(病例组)以及健康对照者23例(对照组)。采用FACS检测外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的百分率,采用real-time PCR检测外周血单个核细胞Foxp3mRNA的表达以及CD4~+CD25~+调节性T细胞与CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、IFN-γ和IL-4的相关性。结核病患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞占CD4~+T细胞的百分率,病例组(3.38±1.23)%高于对照组(1.97±0.62)%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。血清单个核细胞Foxp3 mRNA相对表达水平为134.54±6.76,高于对照组(40.98±2.34,P0.05)。CD4~+CD25~+调节性T细胞与CD4~+T细胞、CD8~+T细胞以及与IFN-γ和IL-4的表达呈负相关。结核病CD4~+CD25~+调节性T细胞数量增加、特异性转录因子Foxp3 mRNA表达上升,由此引发的免疫抑制效应可能是结核病发生发展的重要原因之一。     

初发系统性红斑狼疮患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+和CD4~+CD25~-Foxp3~+T细胞

目的：研究初发系统性红斑狼疮患者（Systemic lupus elythematosus，SLE）外周血CD4^＋T细胞中CD25和Foxp3表达及其在SLE发病中的意义。方法：根据SLE疾病活动积分（SLEDAI）将初发SLE患者分为活动组（10例）和不活动组（11例），流式细胞仪检测治疗前后外周血CD4^＋T细胞中CD25、Foxp3和CD127表达百分率，并对其与SLE临床活动度、尿蛋白、补体和anti-ds-DNA相关性进行研究。结果：初发活动组和不活动组SLE患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞表达百分率分别为（1．91％～6．75％）和（2．74％～7．01％），与正常对照（2．11％～9．90％）相比没有统计学差异（P=0．524，P=0．794）；且初发SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞在体外增殖反应和增殖抑制功能与正常对照相比无明显差别（P=0．174，P=0．689）；外周血CD4^＋CD25^-Foxp3^＋T细胞百分率在初发活动组（3．71％～10．94％）和不活动组（2．97％～7．69％）SLE患者均比正常对照（1．01％～3．62％）显著增高（P〈0．01和P〈0．01）；而CD4^＋CD2^＋Foxp34^-T百分率在初发活动组SLE患者（1．19％～9．23％）显著低于正常对照（2．67％～11．26％）和初发不活动组SLE患者（3．73～8．27％）（P=0．039，P=0．048）；与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞类似，90％左右的CD4^＋CD25一Foxp3^＋T细胞不表达或低表达CD127，其百分率与anti-ds-DNA浓度呈正相关，且尽管未达到统计学意义，但激素和免疫抑制治疗后其水平下降。结论：初发未经治疗的SLE患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞数量和功能无明显异常，而CD4^＋CD25^-Foxp3^＋T细胞数量增多，与SLE疾病活动相关，可能具有调节功能。     

替比夫定对慢性乙型肝炎患者外周血CD4~+ CD25~+ CD127~(low) T和CD8~+ CD25~+ T细胞频率的影响及临床意义

目的探讨核苷类药物替比夫定对慢性乙肝患者(CHB)外周血中CD4+CD25+CD127lowT细胞和CD8+CD25+T细胞比例的影响,并结合临床指标分析其临床意义。方法替比夫定抗病毒治疗22例CHB患者,在治疗前及治疗后3,6个月时,分别以流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+CD127lowT细胞和CD8+CD25+T细胞比例,实时荧光定量RT-PCR检测Foxp3 mRNA的表达水平,荧光定量PCR检测血清HBV DNA水平,酶联免疫吸附法检测HBV标志物,全自动生化分析仪检测ALT水平。结果 CHB患者外周血中CD4+CD25+CD127lowT细胞和CD8+CD25+T细胞比例显著高于对照组。替比夫定治疗3个月时,这两群细胞比例显著下降,Foxp3 mRNA的表达也显著下降;HBV DNA水平降至检测水平以下的CHB患者,其CD4+CD25+CD127lowT细胞也降至正常水平。治疗3、6个月时,HBeAg阴转率分别为9.1%和18.2%,发生HBeAg血清学转换者的CD4+CD25+CD127lowT细胞和CD8+CD25+T细胞比例均降至正常水平。结论替比夫定能快速有效抑制CHB患者的病毒复制...     

Comparison of lymphokine secretion and mRNA expression in the CD45RA+ and CD45RO+ subsets of human peripheral blood CD4+ and CD8+ lymphocytes

Flow cytometric analysis of human peripheral blood T lymphocytes demonstrated that the majority of the CD4⁺ cells were CD29⁺ or CD45RO⁺ “mature” cells while the CD8⁺ cells were primarily CD45RA⁺ “naive” cells. After an initial separation into CD4⁺ and CD8⁺ cells and a secondary separation into CD45 subsets, lymphokine secretion was assessed after phorbol 12-myristate 13-acetate and ionomycin or fixed anti-CD3 stimulation. Within the respective CD45 subsets, CD4⁺ cells produced more interleukin (IL)-2, IL-4, and IL-6; but the CD8⁺ cells secreted more interferon-γ and granulocyte/macrophage-colony-stimulating factor. Tumor necrosis factor-α secretion was similar in the matched CD45 subsets. Northern analysis revealed a parallel pattern of lymphokine mRNA expression in the four lymphocyte subsets. These results suggest that human CD8⁺ peripheral blood lymphocytes have a significant capacity to secrete lymphokines, and that the low lymphokine production observed in unseparated CD8⁺ cells reflects the higher percentage of less functional CD45RA⁺ cells.     

Graves病患者外周血树突状细胞和CD4+CD25+CD127low/-Tr细胞的变化

目的 观察Graves病患者外周血树突状细胞(dendritic cells,DC)和CD4+ CD25+CD127low/-调节性T细胞(Tr)在疾病过程中的水平变化.方法 根据临床表现以及血清游离甲功三项(FT3、FT4、TSH),将患者分为治疗前组、临床缓解组和稳定组,并设正常对照组.采用流式细胞术测定研究对象外周血(EDTA-K2抗凝)中DC及髓样DC(myeloid dendritic cell,MDC)和浆细胞样DC(plasmacytoid dendritic cell,PDC)两个亚群以及CD4+CD25+CD127low/-Tr细胞占CD4+T细胞的百分比,观察它们在病程中的变化,再进一步探讨检测指标与游离甲功三项的相关性.结果 (1)治疗前组、临床缓解组、稳定组和正常对照组的总DC、MDC和MDC/PDC逐渐下降,各组间比较均有统计学差异;(2)治疗前组、临床缓解组、稳定组和正常对照组的PDC依次呈下降趋势,治疗前组仅与正常对照组有统计学差异;(3)治疗前组、临床缓解组、稳定组和正常对照组的CD4+ CD25+ CD127low/-Tr细胞逐渐升高,治疗前组仅与正常对照组有统计学差异;(4)治疗前组PDC和CD4+CD25+CD127kw/-Tr细胞有相关性;(5)在治疗前组,DC及其亚群与游离甲功三项有相关性,而CD4+CD25+CD127low/-Tr细胞只与FT3和FT4有相关性.结论 Graves病患者总DC、MDC、MDC/PDC比值明显增高,抗甲亢治疗随着病情好转而下降,因此DC及其亚群的检测有望用来监测Graves病患者病情;而CD4+CD25+CD127low/-Tr细胞可作为Graves病发病的新指标.     

恶性肿瘤患者CD4+CD25+/CD4+CD25high调节性T细胞的研究

目的：探讨恶性肿瘤患者外周血CD4^＋CD25^＋/CD4^＋CD25^high调节性T细胞（Regulatory T cell，Treg）水平的特点及其临床意义。方法：采用流式细胞术检测Treg水平，并进行分层分析。结果：62例恶性肿瘤患者外周血中CD4^＋CD25^＋/CD4^＋CD25^high Treg占T细胞的百分比分别为19.61%±8.17%和4.20%±1.90%，高于正常对照组（分别为P〈0.05和P〈0.001），它们与NK细胞呈负相关（r分别为-0.2361和-0.306）。随疾病进展，CD4^＋ CD25^＋Treg水平升高，肿瘤进展期（IV期）与前3期比较有极显著差异（P〈0.001）。CD4^＋CD25^high Treg占CD4＋T细胞的百分比率逐渐升高，中期（Ⅲ期）患者与早期患者、正常对照组比较有极显著差异（P〈0.001）；晚期患者与中期患者比较有极显著差异（P〈0.001）。结论：恶性肿瘤患者外周血CD4^＋CD25^＋/CD4^＋CD25^high Treg水平的升高，与恶性肿瘤免疫功能低下及肿瘤的发生发展密切相关。     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞CD8+CD38+的检测意义

目的：通过测定慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞CD8^＋CD38^＋的表达及门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）、凝血酶原时间（PT），旨在为治疗慢性乙型肝炎提供有用的参考指标。方法：流式细胞术检测38例慢性乙型肝炎、14例肝硬化患者外周血淋巴细胞CD8^＋CD38^＋细胞的百分率；同时测定AST、TBIL和PT。结果：（1）慢性乙型肝炎组CD8^＋CD38^＋、CD38^＋细胞均明显高于正常组（P〈0．01，P〈0．01），肝硬化组CD8^＋CD38^＋、CD38^＋细胞均明显高于正常组（P〈0．05，P〈0．05）。肝硬化组CD8^＋CD38^＋、CD8^＋细胞均明显低于慢性乙型肝炎组（P〈0．05，P〈0．05）。（2）慢性乙型肝炎轻、中、重各组之间比较，中度组CD8^＋CD38^＋高于轻度组（P〈0．05），重度组CD8^＋CD38^＋、CD8^＋、CD38^＋均高于轻度组（P〈0．05，P〈0．05，P〈0．05）；重度组CD38^＋高于中度组（P〈0．05）；肝硬化组CD8^＋CD38‘均明显低于轻、中、重各组（P〈0．05，P〈0．01，P〈0．01），肝硬化组CD8^＋低于重度组（P〈0．01）。（3）慢性乙型肝炎患者AST、TBIL、PT不正常组CD8^＋CD38^＋均高于AST、TBIL、PT正常组。结论：慢性乙型肝炎患者CD8^＋CD38^＋细胞明显升高，表明慢性乙型肝炎患者细胞免疫处于异常激活状态，并与肝功能损伤有一定的相关性。慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞CD8^＋CD38^＋的测定，对病情分析和诊断有一定的临床参考价值。     

慢性乙型肝炎患者外周血细胞CD40+、CD40L+及CD8+/CD28+表达的研究

目的检测慢性乙型肝炎(简称慢乙肝)患者外周血淋巴、单核细胞表面CD40+、CD40L+及淋巴细胞表面CD8+/CD28+、CD8+/CD28-的表达,评价患者的细胞免疫状态,为临床治疗提供指导.方法流式细胞仪测定慢乙肝患者单核细胞、淋巴细胞表面CD40+、CD40L+表达的百分率及淋巴细胞表面CD8+/CD28+、CD8+/CD28-表达的百分率.结果慢乙肝组外周血淋巴、单核细胞表面CD40+、CD40L+及淋巴细胞表面CD8+/CD28+的表达明显低于正常对照组(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05,P＜0.01),乙肝肝硬化组(简称肝硬化)均明显低于正常对照组(均P＜0.01),而慢乙肝组、肝硬化组CD8+/CD28-的表达高于正常对照组(P＜0.05,P＜0.01).慢乙肝组与肝硬化组均无显著差异(均P＞0.05).慢乙肝轻、中、重度和肝硬化三组间均无显著差异(均P＞0.05).相关性分析结果显示,慢乙肝患者淋巴、单核细胞表面CD40+和CD40L+的表达之间存在正相关,淋巴细胞CD40+、CD40L+表达与CD8+/CD28+表达存在正相关,而与CD8+/CD28-表达相关性不明显.结论慢乙肝患者外周血淋巴、单核细胞CD40+、CD40L+及淋巴细胞CD8+/CD28+表达低下,而CD8+/CD28-的表达增加.检测外周血CD40+、CD40L+及CD8+/CD28+的表达可评估患者的细胞免疫状态,对临床的抗病毒治疗提供新思路.     

Haemodialysis monocytopenia: differential sequestration kinetics of CD14+CD16+ and CD14++ blood monocyte subsets

In peripheral blood the majority of circulating monocytes present a CD14highCD16- (CD14++) phenotype, while a subpopulation shows a CD14lowCD16+ (CD14+CD16+) surface expression. During haemodialysis (HD) using cellulosic membranes transient leukopenia occurs. In contrast, synthetic biocompatible membranes do not induce this effect. We compared the sequestration kinetics for the CD14+CD16+ and CD14++ monocyte subsets during haemodialysis using biocompatible dialysers. Significant monocytopenia, as measured by the leucocyte count, occurred only during the first 30 min. However, remarkable differences were observed between the different monocyte subsets. CD14++ monocyte numbers dropped to 77 +/- 13% of the predialysis level after 15 min, increasing to > or = 93% after 60 min. In contrast, the CD14+CD16+ subset decreased to 33 +/- 15% at 30 min and remained suppressed for the course of dialysis (67 +/- 11% at 240 min). Approximately 6 h after the end of HD the CD14+CD16+ cells returned to basal levels. Interestingly, the CD14+CD16+ monocytes did not show rebound monocytosis while a slight monocytosis of CD14++ monocytes was occasionally observed during HD. A decline in CD11c surface density paralleled the sequestration of CD14+CD16+ monocytes. Basal surface densities of important adhesion receptors differed significantly between the CD14+CD16+ and CD14++ subsets. In conclusion, during HD the CD14+CD16+ subset revealed different sequestration kinetics, with a more pronounced and longer disappearance from the blood circulation, compared with CD14++ monocytes. This sequestration kinetics may be due to a distinct surface expression of major adhesion receptors which facilitate leucocyte-leucocyte, as well as leucocyte-endothelial, interactions.     

慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的变化和意义

目的 观察慢性乙型肝炎感染者外周血CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)的频率,特征性表型及与临床指标的相关性.方法 采集44例慢性乙型肝炎,29例健康人外周血,多色流式分析Treg的频率,CD4 CD25 Foxp3 调节性T细胞的频率.所有病例均经酶联免疫吸附实验(ELISA)检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb,实时荧光定量RT-PCR检测血清HBV DNA载量及肝功能的检测.结果 慢性乙型肝炎组Treg的频率(5.02%±2.07%)显著高于正常对照组(3.35%±1.51%,P＜0.05);Foxp3在Treg上特异性表达,慢性乙型肝炎组CD4 CD25 Foxp3 调节性T细胞的频率(2.05%±1.03%)显著高于正常对照组(1.30%±0.68%,P＜0.05);慢性乙型肝炎组Treg的频率与病毒载量呈正相关.结论 Treg在慢性乙型肝炎感染者中明显增高,并与病毒载量相关,提示Treg在慢性乙型肝炎中担负着重要的免疫调节作用,可能是造成乙肝病毒感染慢性化的重要因素.