热原检查中家兔降温及反复测试结果的测试分析

摘要目的对250批药品热原检查中家兔降温现象进行分析，探讨药品内毒素含量与家兔降温的内在关系。建议将3只家兔中有2只或2只以上降温0．6℃或超过0．6℃判定的不符合规定。方法按照目前国内尚不统一的家兔降温判断标准，将有降温的检验结果与重做后的结果进行测试分析。结果引起家免降温的检品有19批，占检品总数7．6%，其中体温下降超过0.6℃为6%，下降在0．45-0．55℃的为0．16％。对于体温下降超过0．6℃的检品，按照药典规定取了3只家免重做后有62%判定为不符合规定，有38％检品仍有体温下降超过0．6℃，需要再次重做，或由于3只家免体温升高总和超过1．4℃，而需另取5只家免重做。体温下降在0．45-0．55℃范围的栓品，重做后符合规定。结论测试分析表明，热原检查中家兔降温有其体质的自身因素、实验环境温度变化和技术操作等外界因素。但降温的主要原因还是药品中超热限剂量的内毒素引起的热限形成造成的。家免降温的幅度及降温家免的数量与重做后判断为不符合规定的几率相关。参照国家生物制品热原检查判断标准，为减少过多的重做或复试，确保药品的质量，建议将3只家免中的2只或2只以上降温0.6℃即不符合规定的条款加入热原判断标准中。     

热原质对家兔体温的影响

中国药典(1977年版)附录热原检查法项下规定,单只家兔体温升高不超过0.6℃作为供试品中所含热原的允许限度,但在日常检验中,常常遇到家兔体温下降间题,有的下降达     

现行版中、美、英、欧、日五部药典中热原检查法比较

热原检查法是通过将一定剂量的供试品,静脉注入家兔体内,在规定时间内,观察家兔体温升高的情况,以判定供试品中所含热原物质的限度是否符合规定的一种方法。注射剂如果含有热原物质可引起机体热原反应,严重时可危及生命,因此各国药典都在各论中对需制定热原检查的注射剂热原限度做了规定,并且在附录中均对热原检查法的所用动物、环境条件、实验步骤和结果判断等做了详细规定。     

用于试管内检验内毒素的鲎试验法

自从临床采用注射剂以来就要求生产无热原制剂,并对此加以相应的检查。目前各国卫生部门所确认的热原检查法系家兔体内生物学试验法,即取家兔3只,自耳静脉注入规定剂量的供试品溶液,隔一定时间测量其体温。如果体温升高度数超过一定数值就认为供试品溶液含有热原。假如体温升高度数适在某一范围内,则须用更多的动物复试。以上方法操作困难,需有经验的人员和具空调设备的房间,因而试验费用较多。同时试验     

热源检查不等于细菌内毒素检查

在药品监督检查中，常发现许多医院制剂室的检验报告书或医院总结质控项目时，把细菌内毒素检查写上“热源检查”，笔者认为不妥。中国药典1995年版对热源检查和细菌内毒素检查均做了规定．热源检查是将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，在规定时间内，观察家兔体温升高的情况，以判定供试品中所含热源的限度是否符合规定，而细前内毒素检查是用尝试剂与细菌内毒素产生磨集反应的机理，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法，前者用家兔体温升高来控制．后者用内毒素单位EU来控制．1988年以来，由于尝试剂的广泛应用…     

发展中的热原检查法

药品注射剂的热原检查 ,是保证输注药品安全的重要检验项目之一。各国药典附录中的《热原检查法》及其方法学的研究 ,反映了各国建立药品标准和检验方法的水平和某个国家的综合国力。 194 2年美国率先将家兔热原检查法载入第 12版药典 ,相继世界各国均将这一方法载入药典 ,作为检查药品注射剂中污染热原的法定方法。该法是将一定剂量的供试品溶液 ,静脉注射家兔体内 ,在规定的时间内 ,观察家兔体温升高的情况 ,以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。 195 2年世界卫生组织 (ＷＨＯ)生物标准化专家委员会邀请一些国家协作 ,试图建立热原…     

热原检查过程家兔降温原因浅析

家兔法检查热原时,经常会出现供试家兔体温降低的现象。笔者根据多年药理工作经验,对降温现象作一分析。 1 测试方法 如果注射前抱兔测温,注射完毕又改为固定夹式测温,可引起家兔体温下降,平均降低0.36℃。因此注射检品前后的整个过程应采用用一种方法测温。 2 供试品的预热保温 在寒冷的冬季进行热原试验,供试品在恒温水浴中保持规定的温度,可使供试品注入家兔体温不降。而供试品未经加热或保温不佳,此时的供试品与家兔体温相差较大。如果注射速度过快,这样可引起家兔体温下降。热原检查时应将供试品预热至37℃左右,并缓慢注射。 3 药物品种 一些药物本身可引起家兔降温,如一些高渗注射液和钙制剂。麻醉药注射后对供试家兔中枢系统产生一定的抑制,造成代谢慢,致体温下降。因此在操作中应根据供试品的种类用无热原注射用水或输液稀释供试品,严格控制取样量,应尽量缓慢注射。 4 家兔饮食时间 热原检查时间较长,一般从早上8点至下午2点,如试验前家兔是隔夜喂的食,则会因家兔本身过分饥饿而引起降温。最好在试验前2～3h先适当喂一次含水量不太多的食物,避免家兔降温。 5 实验室与饲养室的温差 动物的饲养室温度适中(内有空调),而实验室的温度较低,尤其是受外界气温变化影响。两室温度相差过大,可引起家兔降温。因此要在实验前把室内温度调至与动物饲养室温度相同(药典规定17℃～28℃),整个实验过程中温度变化不得大于3℃。 由于家兔降温现象影响实验准确性,因此必须注意动物的科学化饲养、标准化管理、规范化操作。     

热原检查

<正> 本试验系将无菌供试品溶液,静脉注入家兔体内,观察家兔体温升高的情况。动物选择:供试用家兔应选用健康、体重在1.5kg以上的成年雌雄家兔,试验前1周内应饲喂不含抗生素的完全而又平衡的饲料,并且不表现出体重的减轻。下列家兔不能用作试验:(1)做过类似的试验不超过三天者。(2)做过类似的试验,供试品不符合规定的家兔不超     

热原检查结果中负值问题探讨

在用家兔法做热原检查试验中,发现家兔体温有时会出现下降的现象,即家兔体温升高值这一项目的检查结果,非但不出现升高的情况,反而出现较正常体温降低的现象,这就是所谓热原检查结果中负值问题。中国药典关于热原检查项下只规定了家兔体温升高值的限度,并未提到家兔体温降低值的问题,似乎这一问题可以不必考虑。然     

奥沙利铂注射液细菌内毒素检查方法的研究

目的:对奥沙利铂注射液进行细菌内毒素检查的干扰试验,并建立其细菌内毒素检查方法.方法:参照2000年版<中国药典(二部)>附录细菌内毒素检查法和细菌内毒素检查法应用指导原则进行试验.结果:通过干扰试验确证,按拟定标准检验,本品1个规格共3批供试品的细菌内毒素检查结果均符合规定.结论:本品1 mL含奥沙利铂2 mg的供试品及其稀释液对细菌内毒素检查无干扰.可用鲎试验法代替家兔热原检查法控制奥沙利铂注射液的热原.     

甘露醇注射液细菌内毒素检查方法的实验探讨

甘露醇注射液是医院制剂室常配制的注射剂之一。《中国药典》1995年版规定进行热原检查。由于受医院药检室设备条件限制，用家兔法检查热原，困难很大。本文参照《美国药典》23版[1]，用国产鲎试剂，对20％甘露醇注射液的细菌内毒素检查方法进行实验探讨，结果与家兔热原检查法一致。1实验材料1．1试药试剂：细菌内毒素工作标准品：10Eu·ml-1，批号970410；鲎试剂：0．5Eu·ml－1，批号970722、970827；细菌内毒素检查用水：2．0ml，批号970829（均为湛江中美生物有限公司产品）；20％甘露醇注射液：本院制剂室生产，共8批（四川绵竹制药…     

盐酸罗哌卡因注射液细菌内毒素干扰试验

盐酸罗哌卡因注射液由山东省医药工业研究所研制 ,按《中国药典》规定 ,其热原试验应用家兔法测试 ,为了日常检测时更简单、快捷 ,同时又能提高其质量 ,按《中国药典》2 0 0 0年版规定 ,对该产品进行细菌内毒素干扰试验 ,以确定该产品能否用鲎试剂法测热原。1 实验材料1 1　供试品 :盐酸罗哌卡因注射液 ,批号 :0 2 0 2 0 4 ,规格 :10ｍｌ/75ｍｇ(山东省医药工业研究所 )。1 2　鲎试剂 (ＴＡＬ) :批号 0 10 82 5 1,λ =0 5Ｅｕ/ｍｌ,0 5ｍｌ/支 ;批号 0 10 72 30 ,λ =0 2 5Ｅｕ/ｍｌ,0 5ｍｌ/支 ;批号 0 10 82 11,λ =0 12 5Ｅ…     

鲎试剂检测乳酸钠林格注射液中细菌内毒素的研究

本文研究了乳酸钠林格注射液对鲎试剂灵敏度的影响，寻找消除干扰的方法。方法：使用不同灵敏度的TAL，用供试品及其稀释液将细菌内毒素工作标准品制成一系列浓度稀释液，观察有供试品与无供试品测得的TAL灵敏度有否改变，选择合适的TAL灵敏度与供试品稀释度，并将检查结果与家兔法热原检查进行对照。结果：原液对灵敏度标示值为0．5、0.25、0．125Eu／ml的鲎试剂有抑制作用；稀释液无干扰作用；经本法检验合格的产品，家兔法热原检查呈阴性，临床应用未见有输液反应。结论：选用灵敏度为0.125Eu／ml的鲎试剂，并将样品稀释2倍，即可消除供试品对鲎试剂的干扰作用。     

关于最低装量检查法的建议

《中国药典》2 0 0 0年版二部对 5 0 ml以上注射液的最低装量检查中规定 :取供试品 3瓶倾入预经标化的干燥量筒中 ,读出每个容器内容物装量 ,并求出其平均装量 ,均应符合规定。上法因量筒分度线宽度较大 ,对一些边缘产品的判断 ,其精密度不能达到 ,误差也较大。笔者作了一些改进 ,取供试品3瓶 ,倾入预经标化相应容量的干燥容量瓶中 ,如液面高于容量瓶刻度 ,则判定为符合规定。如低于液面 ,则用预经标化的滴定管准确加入供试品至容量瓶刻度 ,即可读出较准确的数据 ,然后按照药典规定作出判断。此法简易 ,误差小 ,适用于药厂及药检所关于最低…     

20%甘露醇注射液细菌内毒素检查方法的探讨

20％甘露醇是临床常用的注射液之一，《中国药典》1995年版规定此品种检查项目是热原检查，而《美国药典》23版采用了细菌内毒素检测方法。为此，笔者将20％甘露醇注射液经冷冻析出甘露醇后，取上清液及1→2稀释液，用细菌内毒素检测，探讨用细菌内毒素（BET）代替热原（PT）检查的方法。1实验材料1．1供试品：20％甘露醇注射液，荣成市人民医院提供。1．2家兔：东北大耳兔，体重23±0.23kg，雌雄兼用，雌兔无孕，由荣成市药检所动物室提供。1.3试剂：细菌内毒素工作标准品（批号960604，10Eu·ml-1）；鲎试剂（批号960618，灵敏度0．5Eu…     

细胞色素C注射液细菌内毒素检查方法的建立

目的建立细胞色素C注射液细菌内毒素检查方法.方法按中国药典2000年版二部方法和指导原则进行实验.结果干扰实验表明供试品稀释10倍可消除干扰.结论细胞色素C注射液细菌内毒素检查法可代替家兔法热原检查.     

乳酸钠氯化钠注射液中细菌内毒素的检测试验

乳酸钠氯化钠注射液 [1 ]由乳酸钠、氯化钠组成 ,本文利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的机理 ,进行了乳酸钠氯化钠注射液及其稀释液对凝集反应的干扰试验 ,并用细菌内毒素检查法 (L T) [2 ] 对乳酸钠氯化钠注射液进行检测 ,同时与药典家兔法 (RT)作对比试验 ,以证实 L T的可行性。1　方法与结果1.1　鲎试剂灵敏度的复核 :按 2 0 0 0年版药典附录细菌内毒素检查法中鲎试剂灵敏度复核进行。结果符合规定 ,λb=0 .5 EU/ml。1.2　干扰试验 :1.2 .1　增强 /抑制试验 :选用 RT热原检查合格的乳酸钠氯化钠注射液作为供试品 ,取未经稀释的乳…     

鲎试剂检测静脉注射液热原及体会

目前各国药典规定的热原试验法,均为家兔升温试验。此法需供试品多、试验前的准备要求较高、试验灵敏度易受多种因素的影响,试验操作较繁琐,故多年来各国均在寻找新的热原检测方法。近十年来,国外在检测药品热原方面使用了一种新技术—鲎试验(Limulus     

甘露醇注射液的细菌内毒素检查

甘露醇注射液为临床常用的脱水利尿剂,<中国药典>2000年版采用家兔法进行热原检查.细菌内毒素检查法因其简便快速、灵敏度高、重现性好等优点而得以快速发展,应用范围也不断扩大.笔者按<中国药典>2000年版细菌内毒素检查法应用指导原则规定,选用3个批号的供试品及2个生产厂家的鲎试剂,对甘露醇注射液进行了细菌内毒素检查法的研究,并将5个批号的样品细菌内毒素检查和热原检查结果进行比较.     

鲎试剂法检测平衡液中细菌内毒素

目的 建立平衡液的细菌内毒素检查方法。方法 参照中国药典2000年版细菌内毒素检查法及热原检查法。结 果 干扰试验表明,供试品对细菌内毒素检查法不存在干扰作用。结论 细菌内毒素检查法可代替家兔法进行平衡液热原 检查。