真武汤对肾阳虚型慢性肾功衰竭模型大鼠肾组织AQP1表达的影响

[目的]观察CRF大鼠肾组织AQP1表达变化,研究真武汤对肾阳虚型CRF大鼠肾组织AQP1表达的影响。[方法]健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组和真武汤组,采用腺嘌呤灌胃法建立肾阳虚慢性肾衰大鼠模型。成模后模型组及真武汤组大鼠每日上午继续灌服腺嘌呤,下午分别灌服生理盐水和真武汤连续21天后,采用免疫组化方法检测肾组织AQP1表达。[结果]与对照组比较,模型组大鼠肾组织AQP1表达水平降低(P<0.05);与模型组比较真武汤组大鼠肾组织AQP1表达明显升高(P<0.05)。[结论]CRF大鼠肾组织AQP1表达降低,真武汤能够提高慢性肾衰大鼠肾组织AQP1的表达水平。     

硫普罗宁对急性坏死性胰腺炎伴发心肌细胞损伤研究

 目的通过建立急性坏死性胰腺炎(ANP)动物模型,探讨硫普罗宁对ANP胰腺和心肌细胞的保护作用。方法将大鼠随机分为3组,A组ANP生理盐水组;B组ANP巯基物质(硫普罗宁)处理组;C组正常对照组(假手术组)。各组动物模型分别于诱发ANP后4,6,12h处死,检测胰腺和心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果A,B组胰腺组织SOD含量均明显低于C组(P<0.01),B组高于A组(P<0.05,12h组P<0.01);A,B组胰腺组织MDA含量明显高于C组(P<0.01,P<0.05),B组明显低于A组(P<0.01)。A,B组心肌组织SOD含量明显低于C组(P<0.01),B组高于A组(P<0.05);A,B组心肌组织MDA含量均明显高于C组(P<0.01),B组低于A组(P<0.05)。结论ANP胰腺和心肌组织中SOD减少,MDA含量增加明显;外源性巯基物质——硫普罗宁作为抗氧化剂,可使ANP上述胰腺和心肌组织的病变减轻,对胰腺细胞和心肌细胞有一定的保护作用。     

标本配穴针灸对腹泻型肠易激综合征大鼠血清心脏ANP BNP的影响

目的 探讨标本配穴针灸对IBS大鼠血清、心脏ANP、BNP的影响。方法 随机将40只SD大鼠分为对照组、模型组、标本配穴组、常规配穴组。采用急、慢性应激结合的方法制备IBS-D模型。治疗组给予针刺结合艾灸干预，1次/d,共28 d。4组大鼠进行内脏敏感阈值测定、行为学观察，检测血清、心脏ANP、BNP含量。结果 模型组大鼠内脏疼痛阈值低于对照组(P<0.01),提示造模成功。模型组大鼠出现焦虑、抑郁状态，标本配穴组大鼠焦虑、抑郁状态改善。标本配穴组、常规配穴组大鼠血清ANP、BNP含量低于模型组(P<0.01);常规配穴组大鼠心脏组织ANP、BNP含量高于标本配穴组(P<0.05)。结论 标本配穴针灸能够抑制ANP、BNP活性，改善大鼠精神心理状态。     

基于KEAP1/NRF2信号通路探讨柴黄清胰活血颗粒改善重症急性胰腺炎模型大鼠胰腺微循环障碍的机制北大核心CSCD

目的:观察柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎模型大鼠胰腺微循环障碍、血管内皮细胞损伤及氧化应激的作用,并基于KEAP1/NRF2信号通路探讨其作用机制。方法:将实验大鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、柴黄清胰活血颗粒3.15 g/kg组,每组16只。以5%牛磺胆酸钠制备重症急性胰腺炎(SAP)模型,各组灌胃相应药物或生理盐水,次/6 h,术后12 h和24 h分别采集8只大鼠动脉血及胰腺组织。HE染色观察胰腺组织病理变化;生化法检测各组大鼠血清淀粉酶(AMY)、丙二醛(MDA)及胰腺组织一氧化氮(NO)活力或含量;RT-PCR法检测胰腺组织Keap1、Nrf2 mRNA的表达;ELISA法检测血清血栓调节蛋白(TM)、超氧化物歧化酶(SOD)及胰腺组织内皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-K-PGF1α)含量,并计算ET/NO、TBX2/6-K-PGF1α值;Western Blot法检测胰腺组织kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(KEAP1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达。结果:与假手术对照组比较,模型对照组大鼠胰腺组织出现明显病理损伤,AMY、MDA、NO活力或含量明显升高(P<0.05);ET、TXB2、6-K-PGF1α值、TM含量、ET/NO、TBX2/6-K-PGF1α值明显升高,SOD含量明显降低(P<0.05);KEAP1、NRF2蛋白及mRNA表达明显上调(P<0.05);与模型对照组比较,柴黄清胰活血颗粒3.15 g/kg组胰腺组织病理损伤明显缓解,AMY、MDA、NO活力或含量明显降低(P<0.05);ET、TXB2、6-K-PGF1α值、TM含量、ET/NO、TBX2/6-K-PGF1α值明显降低,SOD含量明显升高(P<0.05);Keap1 mRNA及蛋白表达明显下调,Nrf2 mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论:柴黄清胰活血颗粒可能通过调控KEAP1/NRF2信号通路减轻SAP模型大鼠氧化应激,保护血管内皮细胞,从而改善胰腺微循环障碍。     

攻下清热活血中药对重症胰腺炎大鼠血清TNF-αIL-1β的影响

目的：观察攻下清热活血中药对重症胰腺炎大鼠血清TNF-α、IL-1β的影响。方法：胰胆管逆行注射建立大鼠模型后,分别以不同剂量的攻下清热活血中药灌胃治疗,以奥曲肽皮下注射为对照。取胰腺组织HE染色观察大鼠胰腺组织学改变,酶法测定大鼠血清淀粉酶含量,酶联免疫吸附法（ELISA法）检测血清中TNF-α、IL-1β的含量。结果：模型组大鼠胰腺组织病理评分及血清淀粉酶明显高于正常对照组（P〈0.01）;应用大、小剂量组中药和奥曲肽治疗后大鼠胰腺组织病理评分及血清淀粉酶较模型组明显下降（P〈0.05）。模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β含量明显高于正常对照组（P〈0.05）;应用中药治疗后大、小剂量组和奥曲肽后大鼠血清TNF-α、IL-1β含量较模型组明显下降（P〈0.05）。结论：攻下清热活血中药能明显改善重症胰腺炎大鼠胰腺组织病理和血清淀粉酶,抑制大鼠血清TNF-α、IL-1β含量可能是其作用机理之一。     

大黄牡丹汤对重症急性胰腺炎大鼠肝肾功能及肝肾病理影响

目的:分析大黄牡丹汤对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝肾功能及肝肾病理影响。方法:选取SPF级Wistar雄性大鼠30只,随机数字表法将大鼠分成三组,正常组(10只)、对照组(10只)及观察组(10只),观察组及对照组大鼠制备SAP模型,成功造模30分钟后观察组大鼠给予40g/kg大黄牡丹汤灌胃,对照组和正常组大鼠给予等剂量生理盐水灌胃;给药12小时后大鼠处死,心脏穿刺取血,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-10 (IL-10)、白细胞介素-1 (IL-1)、脂肪酶及淀粉酶含量,全自动生化分析检测血清总胆红素(TBil)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、天冬氨酸转氨酶(AST)及丙氨酸转氨酶(ALT)含量,免疫组化法检测肝脏与胰腺组织内NF-κBP56蛋白的表达状况。结果:观察组和对照组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-10、IL-1、脂肪酶及淀粉酶含量较正常组显著升高,观察组升高幅度低于对照组,差异有统计学意义(P0. 05);观察组和对照组大鼠血清Cr、BUN、ALT、TBil及AST含量较正常组显著升高,观察组升高幅度低于对照组,差异均有统计学意义(P0. 05);观察组和对照组大鼠肝脏、胰腺组织内NF-κBP56阳性率较正常组显著升高,观察组升高幅度低于对照组,差异均有统计学意义(P0. 05)。结论:大黄牡丹汤可显著降低SAP大鼠血清内炎性因子含量,改善其肝脏和胰腺病变组织,对肝肾起到保护作用。     

荆芥、防风对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜AQP4和AQP8表达的影响

探讨荆芥、防风对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)大鼠结肠黏膜水通道蛋白(aquaporin,AQP)4和AQP8表达的影响。SD雄性健康大鼠共35只,随机分为正常组、模型组和风药(荆芥、防风免煎颗粒1∶1)低、中、高剂量组(6,12,24 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组7只。除正常组外,其余组大鼠均采用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液连续自由饮用复制UC大鼠模型,造模10 d后予以灌胃给药,正常组和模型组均予以生理盐水,连续灌胃10 d,实验期间观察大鼠一般状况,分别于10 d后结束实验时采集结肠组织,测量各组大鼠结肠长度,评估结肠黏膜损伤指数(CMDI)及结肠病理变化评分,ELISA法检测血清IL-1和IL-8含量变化,免疫组化法检测结肠组织内AQP4和AQP8蛋白表达情况,PCR法检测结肠黏膜AQP4和AQP8 mRNA的表达情况。与正常组比较,模型组大鼠结肠长度明显短缩(P0.01),CMDI及病理评分显著增加(P0.01),血清IL-1和IL-8含量明显增加(P0.05),免疫组化结果显示蛋白表达较低,颜色为淡黄色或棕色,AQP4和AQP8 mRNA表达明显降低(P0.01);与模型组比较,风药组CMDI及病理评分、血清IL-1和IL-8含量明显降低(P0.01,P0.05),免疫组化结果显示蛋白表达较强,颜色为棕褐色或深褐色,结肠长度及AQP4和AQP8 mRNA表达增加(P0.01,P0.05)。荆芥和防风对UC模型大鼠症状及病理组织有明显的改善作用,促进肠黏膜修复,其机制可能与上调结肠AQP4和AQP8表达相关。     

鼻敏康合剂对变应性鼻炎大鼠IgE、AQP5表达的影响

目的 探究鼻敏康合剂对变应性鼻炎大鼠血清IgE、OVA-sIgE、AQP5表达的影响。方法 60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、氯雷他定组(0.9 mg/kg)以及鼻敏康合剂低、中、高剂量组(2.53、5.06、10.12 g/kg),每组10只。除对照组外，其余各组大鼠均采用卵清蛋白(OVA)致敏法建立变应性鼻炎大鼠模型。造模结束后，各组大鼠灌胃给予相应药物，连续2周。采用叠加量化法记录各组大鼠症状积分，ELISA法检测血清IgE、OVA-sIgE、AQP5水平，免疫组化及RT-qPCR法检测鼻黏膜AQP5蛋白及mRNA表达。结果 与对照组比较，模型组大鼠症状积分，血清IgE、OVA-sIgE、AQP5水平，鼻黏膜AQP5蛋白及mRNA表达升高(P<0.05);与模型组比较，氯雷他定组与鼻敏康合剂各剂量组症状积分，血清IgE、OVA-sIgE、AQP5水平，鼻黏膜AQP5蛋白及mRNA表达降低(P<0.05),且鼻敏康合剂各剂量组与氯雷他定组比较，各指标无显著差异(P>0.05)。结论 鼻敏康合剂可通过抑制IgE、OVA-sIgE、AQP5表达，改善鼻腔局部水液代...     

醒脑静注射液对大鼠脑出血模型血脑屏障通透性及相关蛋白的影响

目的 观察醒脑静注射液对脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠血脑屏障通透性及其相关蛋白表达的影响。方法 将27只雄性SD大鼠随机分为假手术组9只和模型组18只,采用右侧尾状核微量注射胶原酶Ⅶ的方法制备大鼠脑出血模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组和醒脑静组,每组9只。连续给药3天后,采用伊文思蓝(evens blue,EB)法观察各组大鼠血脑屏障通透性;透射电镜观察脑组织的超微结构并分析计算星形胶质细胞足突的水肿面积;免疫组化法检测脑组织水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测脑组织AQP4、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白(tight junction protein,ZO-1)的表达。分别比较假手术组与模型组、模型组与醒脑静组血脑屏障的EB渗透程度、足突水肿面积以及血脑屏障相关蛋白的表达。结果(1)与假手术组相比,模型组大鼠脑出血后血脑屏障EB渗透性增加;与模型组相比,醒脑静组大鼠脑组织血脑屏障EB渗透性降低。(2)与假手术组相比,模型组大鼠脑组织中星形胶质细胞足突水肿面积明显增加,星形胶质细胞和血管内皮细胞结构明显被破坏,AQP4、VEGF蛋白表达升高(P 0. 05);与模型组相比,醒脑静组大鼠脑出血后脑组织水肿减轻,星形胶质细胞以及血管内皮细胞的结构有所改善,AQP4、VEGF蛋白表达显著降低(P 0. 05)。(3)与假手术组相比,模型组大鼠脑组织Occludin、ZO-1表达降低(P 0. 05);与模型组相比,醒脑静组大鼠脑组织Occludin、ZO-1蛋白表达升高(P 0. 05)。结论 醒脑静注射液可通过减轻星形胶质细胞足突水肿,改善血脑屏障结构和相关蛋白表达,降低血脑屏障通透性可能是其减缓脑出血后脑组织损伤的作用机制。     

黄芪叶对损伤胰腺的保护作用

目的:考察黄芪叶对大鼠胰腺损伤的保护作用。方法:采用胰被膜下浸润法制备大鼠胰腺炎模型,分别观察空白对照组、模型组、治疗组和阳性对照组6、12、24 h大鼠血清淀粉酶含量;观察胰腺组织光镜下病理改变情况,统计大鼠48 h存活率。结果:治疗组在12 h和24 h血清淀粉酶分别由(3510±69)和(4282±59)降至(2688±69)和(2950±63),治疗组与模型组比较P<0.01,与阳性对照组比较P>0.05;胰组织光镜下病理切片显示,治疗组与模型组比较P<0.01,与阳性对照组比较P>0.05。结论:黄芪叶对大鼠胰腺损伤有保护作用,可明显降低血清淀粉酶含量和大鼠死亡率。     

大承气汤合大柴胡汤治疗急性胰腺炎的临床观察

目的观察在常规处理基础上加服大承气汤、大柴胡汤治疗急性胰腺炎患者的疗效。方法患者56例随机分为观察组和对照组各28例。对照组予常规处理,观察组在此基础上加用大承气汤合大柴胡汤,比较两组治疗效果。结果观察组患者腹痛缓解时间、体温恢复正常、首次排便以及血液淀粉酶恢复正常时间均明显提前,观察组整体疗效优于对照组（P〈0．05）。结论大承气汤合大柴胡汤辅助治疗急性胰腺炎可有效提高治疗效果。     

大柴胡汤联合连续血液净化治疗重症急性胰腺炎疗效及对免疫功能的影响

目的 观察大柴胡汤联合连续血液净化(CBP)治疗重症急性胰腺炎(SAP)疗效及对免疫功能的影响.方法 选取64例SAP患者为研究对象,采用随机数字表法将其分为观察组与对照组各32例.两组患者予以基础治疗,对照组患者予以CBP治疗,观察组在对照组基础上增用大柴胡汤,治疗7d为1个疗程.观察两组临床疗效、治疗前后的症状评分...     

加味清胰汤对坏死性胰腺炎细菌移位抑制的实验研究

目的观察中药加味清胰汤对实验性细菌移位的影响.方法选取Wistar大鼠56只,随机分成对照组、加味清胰汤组、泰能组、环丙沙星组4组.给药时间为造模前2 h、造模后6、18 h,各组动物分别于造模后12、24 h处死,取门静脉血测定血内毒素、淀粉酶水平;取胰腺、脾、肠系膜淋巴结、肝、肺组织做细菌学检查;取末端回肠组织做病理学检查.结果加味清胰汤组细菌移位发生的时间延迟,并见各脏器细菌量及血中内毒素水平明显低于其他组.结论加味清胰汤可以明显减轻实验性急性坏死性胰腺炎肠粘膜的病理损害,对防治急性坏死性胰腺炎后细菌移位有重要作用.     

基于津液理论探讨改良枳术方对便秘大鼠AQP3/AQP9、MUC2的影响＊

目的 在津液理论指导下探讨改良枳术方对于便秘大鼠AQP3/AQP9、MUC2的影响。方法 48只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、莫沙必利组、改良枳术方低、中、高剂量组，每组8只。除空白组外，其他各组均采用洛哌丁胺灌胃制备慢传输便秘大鼠模型。改良枳术方低、中、高剂量组大鼠分别给予4.725、7.875、11.024 g/（kg·d）灌胃，莫沙必利组以1.56 mg/（kg·d）莫沙必利混悬液灌胃，空白组和模型组灌胃等剂量的蒸馏水。每天一次，共持续7天。检测各小组大鼠24 h粪便颗粒数，粪便含水量、肠道转运时间、肠道推进率、免疫组化和蛋白免疫印迹法（Western blot， WB）测定结肠水通道蛋白3（Aquaporin3， AQP3）、水通道蛋白9（Aquaporin9， AQP9）、黏蛋白2（Mucin 2， MUC2）蛋白表达。结果 与空白组比，模型组大鼠24 h粪便颗粒数及粪便含水量明显减少、肠道转运时间延长、肠道推进率降低，结肠AQP3蛋白表达升高、MUC2蛋白表达降低（P<0.05）；与模型组比，改良枳术方各组大鼠24 h粪便颗粒数及粪便含水量明显增加、肠道推进率增加，改良枳术方各组结肠AQP3表达下降、MUC2蛋白表达增加（P<0.05）；与模型组比，改良枳术方高剂量组结肠AQP9蛋白表达明显下降（P<0.05）。结论 AQP3/AQP9、MUC2介导的结肠“津”“液”代谢在便秘发生发展中发挥重要作用，改良枳术方用于便秘疗效确切，其中以中、高剂量效果更佳，可能的作用机制为通过AQP3/AQP9、MUC2从而调控结肠的“津”“液”代谢。     

黄芪增液汤对便秘大鼠结肠AQP9的表达影响

目的:采用复方地芬诺酯灌胃建立津亏便秘大鼠模型,观察黄芪增液汤对便秘模型大鼠水通道蛋白-9(Aquaporin 9,AQP9)表达的影响。方法:健康(Sprague-Dawley,SD)大鼠50只,随机分为5组,空白组、模型组、伊托必利组、黄芪增液汤高、中、低剂量组。模型组及各治疗组采用限水+复方地芬诺酯灌胃复制津亏便秘模型,造模成功后,模型组以0.9%氯化钠注(NaCl)灌胃,每日1次。治疗组分别给予设定剂量和配比的增液汤和莫沙必利,每日1次(剂量依体质量而定),连续12天。治疗结束后,采用免疫组织化学链霉亲和素-生物素复合物(Strept Avidin-biotin Complex,SABC)法检测空白组、模型组及治疗各组AQP9在结肠的表达情况,应用彩色病理图像分析系统对阳性表达的平均光密度值(Density Mean,MD)进行半定量比较分析。结果:①AQP9在各组大鼠结肠黏膜均有表达,主要表达于杯状细胞胞膜,部分杯状细胞淡然,染色呈棕褐色,胞核无染色;②模型组AQP9表达显著降低,着色浅,MD值显著下降,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05);③伊托必利组、中药高、中、低剂量组均较模型组细胞阳性表达量高,各组与空白组比较表达量低,MD值差异有统计学意义(P<0.05);④中药低、中剂量组、伊托必利组两两比较,表达量无统计学意义(P>0.05),中药高剂量组表达量较低、中剂量组、伊托必利组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:①便秘大鼠结肠黏膜AQP9表达量显著降低,这可能是肠道液体分泌减少,导致便秘"津亏"的根源所在。②黄芪增液汤能上调便秘大鼠结肠黏膜AQP9表达,尤其以黄芪增液汤高剂量组升高明显,提示黄芪增液汤可能是以通过提高结肠AQP9表达来达到其对便秘"增液行舟"机制的。     

附子理中汤对脾阳虚大鼠AQP4-ANP-pGC轴的影响

目的:从水通道蛋白4-心房利尿钠钛-非可溶性鸟苷酸环化酶(aquaporin4-atrial natriuretic peptide-particulate guanylate cyclase,AQP4-ANP-p GC)通路探讨附子理中汤温阳健脾祛湿的作用机制。方法:选清洁级Wistar大鼠120只,分为空白组、假手术组、模型组和附子理中汤高、中、低剂量组共6个组,每组20只。空白组常态饲养。假手术组与模型组采用"肩胛骨间棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)切除术+高脂饲料喂养+隔日寒冷环境刺激"方法造模(假手术组只找到BAT但不切除)。术后第1天始喂高脂饲料共30 d。在模型组基础上,高、中、低剂量各组分别予附子理中汤40,20,10 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,其他组给予等体积的生理盐水灌胃。于给药30 d后(其中模型组于造模成功后第1天)取材,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠胃窦与回肠组织病理形态学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测ANP含量;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测AQP4 mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测AQP4含量。结果:大鼠胃窦与回肠组织HE染色光镜下观察可见,附子理中汤各剂量组大鼠胃肠组织病理学改变均有不同程度的减轻,以高剂量组效果明显。与空白组和假手术组相比,模型组AQP4,ANP含量及AQP4 mRNA相对表达量降低(P0.05,P0.01)。与模型组相比,中、高剂量组AQP4,ANP含量及AQP4 mRNA相对表达量升高(P0.05,P0.01)。结论:附子理中汤可能通过影响AQP4-ANP-p GC通路中AQP4,ANP含量及AQP4 mRNA表达以参与脾阳虚证大鼠水液代谢的调节。     

抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠心肌纤维化相关蛋白表达的影响

目的:观察抗纤益心方对扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy, DCM)大鼠心肌纤维化的作用及可能的作用机制。方法:参照相关文献将雄性Wistar大鼠随机分为造模组和正常组,造模组大鼠用呋喃唑酮复制DCM大鼠模型,10周后根据心脏超声情况将造模成功大鼠随机分为模型组、抗纤益心方低、中、高剂量组与卡托普利组5组各10只。药物干预4周后检查大鼠心功能相关指标,Masson染色观察心肌组织病理变化,Real-time PCR法检测心肌组织心房利钠肽(atrialnatriureticpeptide, ANP)、B型利钠肽(brain natriuretic peptide, BNP)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)mRNA的表达水平,Weston blot法检测Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ,CoⅠ-1)、CTGF、α-SMA蛋白表达水平。结果:与模型组比较,抗纤益心方各组及卡托普利组射血分数(ejection fraction, EF)、左室短轴缩短率(fractional shortening, FS)明显升高(P<0.05,P<0.01),ANP、BNP、α-SMA、CTGF mRNA及相关蛋白表达水平都有不同程度降低(P<0.05,P<0.01),差异有统计学意义。结论:抗纤益心方能够抑制DCM模型大鼠心肌纤维化,可能与其抑制心肌成纤维细胞的增殖、转分化有关。     

通腑泻肺方对ALI/ARDS大鼠AQP1/a-ENaC表达的影响

[目的]探讨通腑泻肺方对ALI/ARDS大鼠肺水肿的可能作用机制。[方法]27只大鼠按体质量随机分为空白组、模型组、中药组,每组9只。模型组与中药组尾静脉注射内毒素8 mg/kg,空白组大鼠静脉注射生理盐水。中药组在造模完成后给予通腑泻肺中药灌胃,每次0.01 m L/g,每日1次,共7 d,空白组与模型组予等量生理盐水灌胃。通过病理切片观察各组大鼠肺组织损伤情况,免疫组化染色方法检测肺组织水通道蛋白1(AQP1)和上皮细胞钠通道(a-ENa C)表达。[结果]模型组大鼠肺组织中AQP1和a-ENa C表达水平显著下降(P0.01);与模型组相比,中药组AQP1和a-ENa C表达显著升高(P0.05)。[结论]通腑泻肺方能增强ALI/ARDS大鼠AQP1和a-ENa C表达而促进其肺部水液代谢,从而发挥其改善肺水肿的作用。     

补骨脂盐炙前后对肾阳虚大鼠肝肾功能及水通道蛋白表达的影响

目的观察补骨脂盐炙前后对肾阳虚大鼠肝肾功能及口腔唾液腺水通道蛋白5(AQP5)、结肠AQP4、肾脏AQP2基因表达的影响,分析阐明盐炙缓和补骨脂毒副作用的机制。方法采用sc氢化可的松的方法复制大鼠肾阳虚模型,以化学试剂法测定大鼠血清中总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)的量,荧光定量PCR(q RT-PCR)法测定口腔唾液腺AQP5、结肠AQP4、肾脏AQP2 m RNA的表达。结果与模型组比较,补骨脂生品和盐炙品组大鼠血清中的ALT、AST量显著升高,Alb量显著降低(P0.05);补骨脂盐炙品组ALT、AST水平低于生品组;各给药组BUN及Scr水平显著高于模型组(P0.05)。q RT-PCR结果显示,与对照组比较,模型组大鼠AQP2、AQP4 m RNA表达明显降低(P0.05),AQP5的m RNA表达明显增加(P0.05);与模型组比较,补骨脂生品组大鼠AQP4 m RNA表达显著升高(P0.05),AQP5 m RNA表达显著降低(P0.05);与补骨脂生品组比较,补骨脂盐炙品组AQP2、AQP5 m RNA表达明显升高(P0.05),AQP4 m RNA表达明显降低(P0.05)。结论补骨脂盐炙后可缓解药物对肾阳虚大鼠肝肾功能的副作用;同时缓解生品的燥性,盐炙对药物燥性的缓解作用可能与其对体内AQP的基因表达调控有关。     

小续命汤改善心肺复苏后大鼠神经功能及脑保护作用

[目的]研究小续命汤对心肺复苏后大鼠的脑保护作用及机制研究。[方法]将63只SPF级SD雄鼠按照随机数字表分为对照组(8只)和建模组(55只)。建模大鼠使用经皮心外膜电刺激法建立大鼠心脏骤停模型,将建模成功大鼠进行心肺复苏,当大鼠恢复自主循环表示大鼠心肺复苏建模成功。将建模成功的大鼠随机分为5组,小续命汤高、中、低剂量组、二甲基亚砜(DMSO)组和模型组。大鼠心肺复苏后10 min,小续命汤高、中、低剂量组灌胃300、150、75 mg/kg小续命汤。DMSO组灌胃100 mg/kg的DMSO,模型组和对照组均灌胃等体积生理盐水,每日1次,治疗7 d。治疗前后对大鼠神经功能进行评分;通过苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠脑海马组织病变;用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组大鼠脑海马组织氧化应激指标脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)浓度;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测大鼠脑海马组织胞浆蛋白伴侣分子(Keap1)、核因子E2相关因子(Nrf2)和血红素氧合酶1(HO-1)mRNA表达水平;通过蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠脑海马组织中Keap1、Nrf2和HO-1蛋白表达水平。[结果]大鼠治疗后神经功能评分,模型组高于对照组(P<0.05),DMSO组和小续命汤高、中、低剂量组均低于模型组(P<0.05);对照组脑海马区组织神经元无明显病变,模型组可见神经元排列稀疏且凌乱,神经元出现明显水肿,细胞核肿胀,胞浆空泡样变,DMSO组、小续命汤高、中、低剂量组病变均出现好转;大鼠脑海马组织MDA含量模型组高于对照组(P<0.05),DMSO组和小续命汤高、中、低剂量组均低于模型组(P<0.05);SOD含量模型组低于对照组(P<0.05),DMSO组和小续命汤高、中、低剂量组均高于模型组(P<0.05);Keap1 mRNA和蛋白相对表达量模型组均低于对照组(P<0.05),DMSO组和小续命汤高、中、低剂量组均低于模型组(P<0.05);Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白相对表达量模型组高于对照组(P<0.05),DMSO组、小续命汤高、中、低剂量组均高于模型组(P<0.05)。[结论]小续命汤可改善心肺复苏大鼠神经功能,减轻脑海马组织损伤,抑制氧化应激,推测其机制可能与激活Keap1-Nrf2/HO-1信号通路,下调Keap1 mRNA和蛋白表达,上调Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白表达水平有关。