免疫组织化学技术中抗原修复的研究进展

免疫组织化学技术中抗原修复的研究进展熊正文免疫组织化学技术是免疫学与分子生物学技术和病理形态相结合的一门新兴学科,它用已知抗体（或抗原）检测组织细胞中的未知抗原（或抗体）的技术,具有操作简单、敏感性高、特异性强,能将形态、代谢和机能密切结合起来等优点...     

组织标本固定方法与免疫组织化学染色效果的关系

免疫组织化学技术是免疫学与分子生物学技术和病理形态学相结合的一门新兴学科 ,它是用已知抗体 (或抗原 )检测组织细胞中的未知抗原 (或抗体 )的技术。具有操作简单 ,敏感性高 ,特异性强 ,能将形态和机能密切结合起来等优点 ,已广泛用于病理诊断 ,鉴别诊断及组织胚胎 ,神经解剖等相关学科的研究之中。由于免疫组织化学试剂商品化进程加快 ,特别是即用型试剂和试剂盒的使用 ,使抗体的质量控制有可能规范化、标准化。然而在实际工作中 ,显示抗原抗体结合反应质量不稳定的情况时有发生 ,虽然影响免疫组织化学染色结果的因素较多 ,但作者认为如…     

抗原修复在免疫组化染色中的应用

免疫组织化学染色是利用抗原抗体特异性反应,对组织或细胞内的抗原物质进行定性和定位的标记方法。它对某些抗原物质的定位检测及某些疾病的临床病理诊断具有重要的指导作用。免疫组化染色对已知抗原的检测,其阳性程度不仅取决于抗体的效价及抗体的生物学活性,还取决于组织细胞中抗原决定簇的暴露程度及其稳定性。抗原决定簇是相应的抗体特异性结合的抗原部分。在临床病理诊断中常采用福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片标本,因固定液中所含的甲醛在固定过程中逐渐形成醛键或形成羟甲基,这些化学键可使蛋白与蛋白之间发生交联,从而封闭了抗原…     

人胚胎大脑标本石蜡制片及免疫组织化学方法

免疫组织化学是用标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分布进行定位,在组织原位显示抗原(或抗体),抗原、抗体反应具有较高的特异性,但其结合是不可见的,必须借助可见的组织化学手段显示其反应部位,因此,免疫组织化学是目前病理学、组织学、胚胎学等多学科领域研究的重要方法.但免疫组织化学是否成功?其关键因素之一就是制作标本石蜡制片.经查阅文献,目前有关人胚胎肠[1]组织石蜡制片有少数报道,但对人胚胎大脑标本石蜡制片过程及免疫组织化学方法的操作,未见报道.现就人胚胎大脑4个月标本为例,根据本实验室工作经验,对其流程及方法进行探讨.     

二次微波修复法和高压过修复法在免疫组织化学显色中的比较

正免疫组织化学是免疫学和形态学的完美结合。因其既能确定抗原在组织和细胞中的位置,还可进行半定量分析,已成为临床病理诊断的重要工具~([1])。随着抗体产品的完善和抗原修复方法的改进,免疫组织化学也被广泛运用至科学研究中,是检测目的蛋白在组织和细胞中表达的有效方法之一。临床病理科和实验室中免疫组织化学显色多运用甲醛固定、石蜡包埋组织,然后进行抗原修复。抗原修复是免疫组织化学实验过程中最关键的步骤。高压加热修复具有良好的稳定性及打开的抗原表位较     

Ⅰ抗孵育时间对免疫组织化学实验结果的影响

众所周知，抗原与抗体之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学技术应用这一原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究。在神经科学领域，此项技术是不可缺少的。免疫组织化学染色方法有多种类型，但在染色过程中都需要采取一些基本的技术方法，以增强抗原、抗体的特异性反应，降低或消除非特异性反应，     

高压锅在免疫组织化学中的应用

高压锅在免疫组织化学中的应用王晋芬，贾红萍，张建中石蜡包埋组织免疫组化染色是临床病理诊断最重要的辅助手段之一，由于常规组织处理过程造成的抗原封闭与结构改变使一些抗体不能用于石蜡切片或反应微弱。为了恢复组织的抗原性和提高组织对抗体的敏感性，我们采用高压...     

肝组织内HBsAg与血清中HBV标志的关系

病毒性肝炎的病原学诊断,除检测血清中的抗原、抗体等病毒感染标志外,目前还可以用多种组织化学和免疫组织化学的方法来显示肝组织中的病毒抗原。肝组织内HBsAg及血清HBVM与肝炎的临床特征亦有一定的关系,这对探索乙型病毒性肝炎的临床演变规律有一定的意义。材料和方法材料取自1981年以来90例临床和病理     

自制免疫组化简易湿盒技术

免疫组织(细胞)化学(immunohistoehemistry或immunocytochemistry)是将抗原、抗体问的免疫反应引入组织(细胞)标本，并通过对其所带有的特殊标记物的显示，藉以对组织(细胞)内某抗原或抗体作定性、定位以及定量检测。目前由于大量特异性抗体和标记抗体的面世以及检测方法日益稳定、简捷，免疫组化已广泛应用于实验研究和临床病理检验。免     

果蝇再生蛋白(rgn)多克隆抗体的制备及鉴定

目的制备具有高度特异性的抗果蝇再生蛋白(rgn)的多克隆抗体。方法利用PCR技术从果蝇W1118c DNA中获得rgn基因片段,构建重组质粒;将其转入JM109(DE3)菌株中诱导rgn融合蛋白表达,再利用Ni-NTA superflow层析柱法将其纯化;经Western blot法检测后,利用制备的抗原免疫SD大鼠,从血清中获得高纯度的抗rgn多克隆抗体,利用Western blot法和免疫组织化学染色法对抗体特异性进行鉴定。结果构建的pRSETA-rgn表达载体成功表达6×His-rgn蛋白,融合蛋白在大肠杆菌中大量表达并纯化后,作为抗原免疫SD大鼠,获得了抗rgn的多克隆抗体;免疫组织化学染色技术证实rgn定位在果蝇三龄幼虫血细胞的细胞质。结论成功获得了特异性较高的大鼠抗rgn多克隆抗体。     

微波处理在多重免疫酶组织化学染色中的应用

微波处理在多重免疫酶组织化学染色中的应用梁英杰杨念生穆威蓝辉耀在外科病理诊断和研究中，往往需要进行双重或多重免疫酶组化染色，在同一切片上同时观察不同抗原的表达。我们在多重染色之间利用微波技术，消除多重染色之间抗体及其复合物的交叉反应，避免了后一种染色...     

荧光显微镜摄影技术

当前在组织细胞学的实验研究中 ,广泛地应用着利用抗原 -抗体反应的免疫组织化学 (Imm unohistochem istry)技术进行对组织、细胞内活性物质的定位和对它们的存在状态的观察。而免疫组织化学方法又包括着荧光抗体法、酶抗体法、重金属标记抗体法等。这些方法中 ,荧光抗体法 (Immunoflu-orescence)是用荧光物质标记的抗原 -抗体反应的方法 ,近年来由于新的荧光标记物质的出现和染色技术的发展 ,可以用多种荧光色素标记而作成多重荧光染色标本。由于在多重荧光染色的标本上 ,使用了多种荧光标记物质 ,可以在同一标本上获取多种信息 ,因而 ,目…     

胃肠道间质瘤CD117、CD34和DOG1免疫组化染色的最适修复方法

正免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色是一种通过利用已知抗原或抗体来特异性标记待测组织中蛋白的方法,是目前病理诊断中不可或缺的重要手段。胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GIST)是一种常发生于胃肠道的间叶源性肿瘤~([1])。近年来发现,联合应用CD117、CD34和DOG1等一系列抗体的免疫组化检测,在GIST的诊     

免疫组织化学技术的某些进展

随着免疫组织化学技术的广泛应用,最近几年来又出现了一些新的制剂,标记技术及染色方法,进一步提高了该技术的特异性,灵敏性及定位精确性。本文仅就其中一些主要者作一简介。一、有关制剂 (一)单克隆抗体单克隆抗体是指每个B细胞纯系产生的抗体。每个B细胞表面的抗原受体只特异地识别一种抗原决定簇,因此产生的抗体非常纯。这些以一株单细胞系产生的抗体称为单克隆抗体,简称McAb。 McAb用于免疫组织化学有下列优点:1.特异性较常规抗体高。单克隆抗体只同一单个抗原     

免疫组织化学在临床病理学中的应用

免疫组织化学在临床病理学中的应用谭旭东邵阳市中心医院病理科免疫组织化学（ｌｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，简称免疫组化）是用标记的抗体追踪抗原，以确定组织和细胞中的某种化学物质。自Ｃｏｏｎｓ在１９５０年用荧光素标记抗体获得成功，开创了免疫组化...     

重视免疫组织化学的质量控制和标准化

免疫组织化学技术作为病理诊断的辅助技术,已成为目前临床组织病理诊断不可或缺的手段之一。免疫组织化学技术的应用大大提高了病理诊断的水平,使原来很多很难诊断的疾病,通过免疫组织化学技术的发展而得以解决。如对于形态上不典型,又无色素的恶性黑色素瘤,HMB45和MelanA或S-100的免疫组织化学技术染色,可很容易帮助病理医生确定诊断。很多软组织肉瘤,     

免疫组织化学染色常见问题及解决方法

免疫组织化学将传统形态学与传统免疫学结合起来,既可以在光镜下或电镜下观察组织或细胞的形态,实现组织或细胞定位;同时又发挥了免疫学中对特异抗原抗体定性定量的作用.     

介绍一种新的相分离免疫测定技术

免疫标记技术是一项微量免疫测定技术,它把标记物的高灵敏度和血清学反应的高度特异性结合起来,大大提高了方法的敏感性和特异性。目前,这项技术已广泛地应用于各个领域。常用的免疫标记技术有:放射免疫测定法(RIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光技术等等。这些方法首先需要把已知的抗原或抗体固定在特定的固相上,然后加上含有相应抗体或抗原的溶液,因此,溶液中的抗体或抗原只能与包被于固相上的抗原或抗体的游离的结合部位发生反应,这就限制了抗原抗体作用的面     

抗核抗体谱的检测在自身免疫性疾病诊断中的价值

自身免疫性疾病是指人体免疫系统对自身成分产生免疫反应，导致自身组织损害的病理变化。一般情况下，人类对自身成分不产生免疫应答，但当身体抗原变性、损伤、移位及免疫功能失调，免疫耐受破坏，原发或继发性免疫缺陷或障碍和免疫识别紊乱时，会对自身抗原产生抗体，即自身抗体，从而造成免疫性病理损伤或功能障碍，引发自身免疫性疾病。     

免疫组化在恶性淋巴瘤诊断中的正确应用与评价

免疫组织化学技术应用于病理诊断起始于20世纪70年代。随着单隆抗体的问世，抗原修复和检测系统技术的不断改进，免疫组化技术在敏感性与特异性方面有了很大的提高。目前此项技术已广泛应用于病理诊断中，成为病理诊断中不可缺少的检测手段，特别在淋巴网状组织肿瘤的诊断、分型和鉴别诊断中，与分子遗传学检测技术一起成为重要的辅助手段。