人白介素6在CHO细胞中的克隆与表达

本研究通过引物设计、转译优化、ＤＮＡ体外重组等技术，构建了ｐＳＶ２·ＩＬ６重组质粒，利用磷酸钙共沉淀法转染中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷型（ＣＨＯｄｈｆｒ－）株，经选择培养基筛选及逐渐提高甲氨蝶呤（ＭＴＸ）的浓度加压基因共扩增法，获得一株稳定表达人ＩＬ６的细胞株，用ＩＬ６依赖的杂交瘤细胞株７ＴＤ１测定细胞上清液的ＩＬ６生物学活性为１．９×１０５Ｕ／（１０６细胞·ｄ）。     

截肢伤小鼠巨噬细胞对T细胞的直接接触抑制作用

利用小鼠截肢伤模型，观察创伤小鼠巨噬细胞对Ｔ细胞的直接接触抑制作用。结果显示：以２５μｇ／ｍｌ的丝裂霉素Ｃ处理巨噬细胞３０ｍｉｎ，可阻断巨噬细胞白介素１（ＩＬ－１）、白介素６（ＩＬ－６）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）及前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）的合成与分泌。创伤小鼠巨噬细胞经丝裂霉素Ｃ处理后，可明显抑制正常Ｔ淋巴细胞转化活性、白介素２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ及ＩＬ－２受体（ＩＬ－２Ｒα）ｍＲＮＡ水平、ＩＬ－２     

混合骨髓移植后短期IL-2治疗增强移植物抗白血病效应的实验研究

目的：增强混合骨髓移植（ＭＢＭＴ）后移植物抗白血病（ＧＶＬ）效应，减少ＭＢＭＴ后白血病的复发率。方法：研究了同基因骨髓混合Ｈ２半相合异基因骨髓移植后腹腔短期注射白介素２（ＩＬ２）对Ｐ３８８小鼠白血病生存的影响。结果：ＭＢＭＴ后白血病小鼠的生存较同基因ＢＭＴ者显著延长，而ＭＢＭＴ＋ＩＬ２治疗组的生存率又显著较ＭＢＭＴ组高，所有小鼠临床皆未发生明显ＧＶＨＤ。结论：ＭＢＭＴ后短期ＩＬ２治疗能显著提高ＧＶＬ效应，为临床治疗恶性血液病提供了新的途径     

金属硫蛋白与辐射关系的研究现状及展望

１９５７年Ｍａｒｇｏｓｈｅｓ和Ｖａｌｅｅ［１］首次从马肾中分离出金属硫蛋白（Ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ,ＭＴ）,以后发现ＭＴ广泛存在于动植物及微生物的组织中。由于ＭＴ的独特结构及功能的多样性,故引起国内外学者的关注。近２０年来,已举行了４次ＭＴ国...     

金属硫蛋白的抗电离辐射作用

金属硫蛋白（ＭＴ）是一类广泛存在于生物界、低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白，具有重金属解毒、调节机体应激反应及必需微量元素代谢等功能。本文简要综述ＭＴ的生物化学和功能特性、ＭＴ清除自由基、抗辐射作用以及辐射诱导ＭＴ合成的生物学特性的研究进展。     

金属硫蛋白的抗电离辐射作用

金属硫蛋白（ＭＴ）是一类广泛存在于生物界、低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白，具有重金属解毒、调节机体应激反应及必需微量元素代谢等功能。本文简要综述ＭＴ的生物化学和功能特性、ＭＴ清除自由基、抗辐射作用以及辐射诱导ＭＴ合成的生物学特性的研究进展     

IL1,TGFβ和BMP在骨性关节炎的关节软骨中的表达

采用免疫组织化学染色技术，检测白细胞介素１（ＩＬ１），转化生长因子β（ＴＧＦβ）和骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）在骨性关节炎的关书软骨中的表达。结果显示：（１）ＩＬ１与ＴＧＦβ在病损的关节软骨表浅层细胞中表达，ＴＧＦβ还在病损的关节软骨中由发生族集的软骨细胞表达。（２）在关节软骨病损达软骨下骨部位，ＢＭＰ，ＴＣＦβ和ＩＬ１在新生的软骨组织的一些细胞中表达。我们的结果提示，ＩＬ１，ＴＧＦβ和ＢＭＰ以自分泌和（或）旁分泌的形式，在骨性关节炎的病理过程中起重要作用，涉及关节软骨的病损及修复。     

7TD1细胞及其克隆对IL—6的反应性和依赖性

比较了本院基因医学研究所和北京医科大学提供的两株７ＴＤ１细胞。选择北京医科大学提供的细胞株进行克隆，筛选出对ＩＬ－６增殖反应性和依赖性较强的３株细胞（７ＴＤ１ＭＣ１、７ＴＤ１ＭＣ４、７ＴＤ１ＭＣ５）。其中７ＴＤ１ＭＣ５细胞的反应曲线呈典型的“倒Ｓ”形，对ＩＬ－６的反应性和依赖性很好。ＭＴＴ比色法显示了与Ｔ３Ｈ－ＴｄＲ掺入法一致的结果，采用了７ＴＤ１ＭＣ５细胞及ＭＴＴ比色法测定ＩＬ－６生物活性，可减     

蒺藜总皂甙对TNF-α及IL-1β诱导内皮细胞粘附的抑制作用

目的：观察蒺藜总皂甙（ｇｒｏｓｓｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍ ＴｒｉｂｕｌｕｓｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓＬ,ＧＳＴＴ） 对肿瘤坏死因子－ α（ＴＮＦ－ α） 、白细胞介素－１β（ＩＬ－１β） 诱导的培养新生牛脑微血管内皮细胞（ＣＭＥＣ） 粘附大鼠血单核细胞（ＭＮＣ） 及中性粒细胞（ＰＭＮ） 的影响。方法：用ＴＮＦ－α和ＩＬ－１β分别诱导传代的ＣＭＥＣ,计粘附ＭＮＣ及ＰＭＮ的细胞数,并计算粘附率。结果：ＣＭＥＣ 经ＴＮＦ－ α处理４ｈ 后,ＣＭＥＣ与ＭＮＣ及ＰＭＮ的粘附率,分别增加到３１．３±０．５％ 和３２．１±０．５％ （对照组分别为１２ ．５±０ ．２％ 和１３ ．８±０ ．４ ％） ,经ＩＬ－１β处理２ｈ 后,则分别为４４．５ ±１．０ ％ 和４４．８ ±０．７ ％ （ 对照组分别为１２ ．９ ±０．６ ％ 和１４．７ ±０．６％ ）。在ＴＮＦ－ α（ＩＬ－ １β） 处理前,用ＧＳＴＴ与ＣＭＥＣ共孵育,预处理２ｈ,则ＧＳＴＴ可剂量依赖性地抑制ＴＮＦ－ α和ＩＬ－ １β的作用。结论：ＧＳＴＴ可抑制ＣＭＥＣ 与ＰＭＮ及ＭＮＣ的粘附。     

自杀基因治疗鼠C6脑胶质瘤模型的动态MRI研究

目的：用高分辨ＭＲＩ动态观察携带ＨＳＶＴＫ自杀基因的逆转录病毒载体及ＧＣＶ治疗系统对在体大鼠Ｃ６脑胶质瘤模型的治疗效果及ＭＲＩ表现的演变规律。材料与方法：３６只ＳＤ大鼠，使用颅内立体定向接种法制作模型。按接种细胞类型分４组：①Ｃ６胶质瘤；②Ｃ６ｔｋ；③Ｃ６＋Ｃ６ｔｋ（１∶１）；④Ｃ６＋ＰＡ３１７ｔｋ。瘤龄７天后腹腔注射ＧＣＶ３０ｍｇ／ｋｇ／天，共１４天。用１．５ＴＭＲ机行Ｔ１ＷＩ、Ｔ２ＷＩ和增强扫描，１次／１～２周；并行常规病理、免疫组化（ＧＦＡＰ和Ｓ１００蛋白）、凋亡和电镜检查。结果：ＭＲＩ显示①组瘤龄１４天时病灶呈圆形长Ｔ１长Ｔ２信号，明显强化，中心见坏死区，肿瘤平均１９６ｍｍ３，中位存活期１６天。②～④组，自然存活期大于１８０天，１４天时病灶平均体积３５ｍｍ３；２８天时肿瘤消失率８０％，１８０天肿瘤消失率９３％。结论：１．５ＴＭＲ扫描可清楚显示肿瘤的大小、形态和内部结构，与病理结果高度相关；ＭＲＩ动态观察可证实ＨＳＶＴＫ／ＧＣＶ系统治疗在体颅内胶质瘤有效     

左旋咪唑涂布剂防治小儿反复呼吸道感染35例临床分析

反复呼吸道感染（ＲＲＩ）为儿科常见病，它严重影响患儿的生长发育，智力发育及身心健康。多项研究表明，ＲＲＩ患儿细胞及体液免疫功能均有障碍，本试验使用免疫调节剂左旋咪唑涂布剂（ＬＭＳＬ），从提高机体免疫力的角度进行治疗，同时选用肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、白介素２（ＩＬ２）来监测ＬＭＳＬ治疗疗效观察１个疗程，疗效明显，现报告如下：１　资料与方法１－１　观察对象　１９９７年３月至１９９８年１２月我院住院及门诊ＲＲＩ患儿３５例，均符合１９８７年４月全国小儿呼吸道疾病学术会议制定的ＲＲＩ的诊断标准，３５…     

流式细胞仪在小鼠造血干细胞基因转移效率测定中的应用

目的探讨流式细胞仪在造血干细胞基因转移效率测定中的应用价值。方法以干细胞因子（ＳＣＦ）、白细胞介素（ＩＬ）３、ＩＬ６单独或联合作用（ＳＣＦ／ＩＬ３、ＳＣＦ／ＩＬ６、ＩＬ３／ＩＬ６、ＳＣＦ／ＩＬ３／ＩＬ６）后的Ｂａｌｂ／ｃ小鼠造血干细胞作为靶细胞,应用含有绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）基因的逆转录病毒载体ＧＣＧＰＸＳＮ介导的基因转移技术实施基因转移,采用ＦＡＣＳ型流式细胞仪测定基因转移效率。结果病毒上清转染的阳性对照组基因转移率为０．０６％,以不同细胞因子作用后基因转移效率提高至００７％～０．２０％,细胞因子作用前后比较,除ＳＣＦ／ＩＬ６组外,差异均有显著或非常显著意义（Ｐ＜００５或Ｐ＜００１）。其中以ＳＣＦ／ＩＬ３组与ＳＣＦ／ＩＬ３／ＩＬ６组的提高最为明显,均达０２０％,与其他各细胞因子组比较,差异也有非常显著意义（Ｐ＜００１）。结论应用流式细胞仪可测定出ＳＣＦ、ＩＬ３、ＩＬ６单独或联合作用对小鼠造血干细胞基因转移效率的不同影响,具有快速、方便、准确的优点。     

人参茎叶皂甙提高创伤小鼠T细胞功能的分子机制研究

目的研究人参茎叶皂甙（ＧＳＬ）提高创伤小鼠Ｔ细胞功能的分子机制。方法利用闭合性创伤小鼠模型，观察ＧＳＬ在体内外对创伤小鼠活化的Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）、ＩＬ－２受体α链（ＩＬ－２Ｒα）基因转录水平，ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量以及磷脂酰肌醇代谢的调节作用。结果ＧＳＬ体内应用（５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×４ｄ）可明显逆转创伤小鼠活化的Ｔ细胞ＩＬ－２ｍＲＮＡ、ＩＬ－２ＲαｍＲＮＡ、ＩＬ－２及ＩＬ－２Ｒα的受抑状态，降低细胞内ｃＡＭＰ含量，增加ｃＧＭＰ与三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量，升高激离钙［Ｃａ２＋］ｉ）浓度、钙调素（ＣａＭ）、ＣａＭ依赖的蛋白激酶（ＣａＭ－ＰＫ）及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的活性。０．１～１００μｇ／ｍｌ的ＧＳＬ在体外可升高创伤小鼠活化的Ｔ细胞ＩＬ－２ｍＲＮＡ及ＩＬ－２ＲαｍＲＮＡ水平，降低ｃＡＭＰ含量，升高ｃＧＭＰ含量、［Ｃａ２＋］ｉ浓度及ＰＫＣ活性。结论ＧＳＬ可通过调节Ｔ细胞内环核苷酸含量及促进磷脂酰肌醇代谢，进而增强创伤后活化的Ｔ细胞内ＩＬ－２及ＩＬ－２Ｒα的基因转录表达     

Th1和Th2细胞检测及临床应用

应用ＣＤ４和ＣＤ８单抗可将Ｔ细胞分为两个主要亚群,即ＣＤ４＋细胞及ＣＤ８＋细胞。目前的研究已证明,ＣＤ４＋辅助细胞诱导亚群（ＣＤ４＋Ｔｈ细胞）是一个不均一的亚群,可分为Ｔｈ１和Ｔｈ２。Ｔｈ１细胞主要分泌ＩＬ２、ＴＮＦβ和ＩＦＮｒ,主要介导细胞免疫,Ｔｈ２细胞主要分泌ＩＬ４、５、６,主要介导体液免疫。正常机体Ｔｈ１／Ｔｈ２细胞处于平衡,疾病时这种平衡被破坏。１　Ｔｈ１和Ｔｈ２细胞的基础理论研究１９８６年Ｍｏｓｍａｎｎ等［１］在研究小鼠ＣＤ４Ｔｈ细胞克隆时发现了两种不同的细胞因子模式：Ｔｈ…     

人白介素-1β及其突变体的克隆、表达与活性研究

人白介素１（ＩＬ１）是一种多功能细胞因子,其生物作用非常广泛,可能有一定的开发前景。但Ｉ期临床试验结果表明ＩＬ１具有促炎症、发热、寒颤、低血压等严重副作用〔１〕,限制了其临床应用。我们根据已有研究结果,通过定点突变来改变ＩＬ１β的一级结构,以期改变其某些生物活性,从而达到减小其毒副作用的目的。ＩＬ１结构与功能关系的研究表明,分子中９２～１２４位氨基酸和ＩＬ１β热原活性关系密切。国外ＩＬ１β定点突变研究证明,１０５、１１３位氨基酸与发热有关,但１０５位和１１３位的突变体在热原活性降低…     

头低位(-6°)卧床对人细胞免疫功能的影响

目的探讨头低位（－６°）卧床对人淋巴细胞增殖能力和某些细胞因子产生的影响。方法６名健康男性青年头低位（－６°）卧床６ｄ,卧床前１ｄ、３ｄ、６ｄ各采血一次,测定免疫指标。结果卧床３ｄ,α干扰素（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎα,ＩＦＮα）产生明显降低（Ｐ＜０．０５）,ＮＫ细胞（ｎａｔｕｒａｌｋｉｌｅｒｃｅｌ,ＮＫ）杀伤活性明显增强（Ｐ＜０．０５）,γ干扰素（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎγ,ＩＦＮγ）的产生和白细胞介素２受体（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ２ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＩＬ２Ｒ,又称ＣＤ２５）表达功能均呈降低趋势。卧床６ｄ,ＩＦＮα产生和ＮＫ杀伤活性均恢复至卧床前的水平,ＩＦＮγ产生和ＣＤ２５则明显降低（Ｐ＜０．０５）。随着卧床时间的延长,Ｔ淋巴细胞增殖能力和ＩＬ２的产生则逐渐降低,而ＩＬ６的产生则逐渐增加。结论头低位（－６°）卧床对细胞免疫功能有一定的影响。     

大鼠支持细胞功能的离体和在体辐射效应

目的：研究支持细胞（ＳＣ）功能对６０Ｃｏγ射线的应答。方法：①离体实验是从２０日龄ＳＤ大鼠分离获得高纯度的ＳＣ,培养３天后照射３～４８Ｇｙ（剂量率为２．１５Ｇｙ／ｍｉｎ）,随后换新鲜培养液分别培养２、６、１２、２４及４８小时,离心后于－８０℃贮存,用以测定转铁球蛋白（ＴＦ）、白细胞介素－１（ＩＬ－１）及白细胞介素－６（ＩＬ－６）浓度;另一实验是照后０、２４及４８小时,换含或不含双丁酰环腺苷酸［（Ｂｕ）２ｃＡＭＰ］（０．０１～１ｍｍｏｌ／Ｌ）新鲜培养液,２４小时后离心并于－８０℃贮存供检测ＴＦ用。…     

白介素6生物活性简易测定法及其临床应用

报道了应用白介素６（ＩＬ－６）依赖细胞株７ＴＤ１，以及ＭＴＴ比色法测定ＩＬ－６生物活性的简便方法。本法测定结果和￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法一致；检测灵敏度为１ｐｇ或１Ｕ／ｍｌ以下；可用于正常人或病人血清中ＩＬ－６水平的测定。采用本法检测了我国正常成人５５例，血清ＩＬ－６活性为６．７５±２．９８Ｕ／ｍｌ；而１１例肺结核排菌者和１２例肺癌患者的血清ＩＬ－６活性分别为１４．２９±８．４６和１７．１４±９．１２Ｕ／ｍｌ，与正常人有显著差别（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．００１），为进一步临床应用奠定了基础。     

电离辐射对T淋巴细胞IL-2分泌和细胞毒活性的影响

正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）体外经１～６Ｇｙγ射线照射后，间接免疫荧光法分析受照Ｔ细胞Ｔ细胞抗原受体（ＴＣＲ）、ＣＤ＿３及ＣＤ＿（２３）阳性细胞百分率，Ｈ￣３－ＴｄＲ掺入及释放法测定白细胞介素－２（ＩＬ－２）分泌及Ｔ细胞细胞毒活性，免疫细胞化学法分析Ｔ细胞内ＴＣＲ及ＣＤ＿３表达．结果表明，Ｔ细胞ＴＣＲ、ＣＤ．及ＣＤ＿（２５）表达及ＩＬ－２分泌和细胞毒活性皆呈照射剂量依赖性降低．受照Ｔ细胞ＩＬ－２分泌及细胞毒活性抑制在一定程度上与细胞表面ＴＣＲ、ＣＤ＿３及ＣＤ＿（２５）表达减少、活性损伤有关，而细胞表面ＴＣＲ和ＣＤ＿３表达降低可能与大量ＴＣＲ及ＣＤ＿３在受照细胞胞浆内堆积有关．     

99Tcm(Ⅴ)-DMSA显像诊断卵巢良恶性肿瘤的价值

目的探讨９９Ｔｃｍ（Ⅴ）二巯基丁二酸钠（ＤＭＳＡ）显像鉴别诊断卵巢良恶性肿瘤的临床价值。方法对２４例临床疑卵巢肿瘤的患者进行９９Ｔｃｍ（Ⅴ）ＤＭＳＡ显像,并与手术病理结果进行对照。结果２４例卵巢肿瘤患者经病理证实卵巢恶性肿瘤１５例,良性肿瘤９例。１５例卵巢恶性肿瘤,９９Ｔｃｍ（Ⅴ）ＤＭＳＡ显像阳性１４例,假阴性１例;９例良性肿瘤,显像阴性７例,假阳性２例。９９Ｔｃｍ（Ⅴ）ＤＭＳＡ诊断卵巢恶性肿瘤的灵敏度为９３３３％,特异性为７７７８％,阳性预测值为８７５０％,阴性预测值为８７５０％,假阳性为１４２９％,假阴性为６６７％,准确性为８７５０％。结论９９Ｔｃｍ（Ⅴ）ＤＭＳＡ显像在鉴别卵巢良恶性肿瘤方面具有重要的临床价值。