地衣芽孢杆菌XY—2的筛选及其培养基的优化

从土壤中筛选出3株具有较强抑菌活性的菌株,其中XY-2菌株对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、灰霉葡萄孢菌、变形链球菌和大肠杆菌的抑制作用最强。根据对XY-2菌株形态特征、培养特征、生理生化特征的分析,初步鉴定为地衣芽孢杆菌。最后通过正交实验对地衣芽孢杆菌XY-2的发酵培养基成分配比进行了选择和优化,为以后工业化生产提供依据。结果表明当培养基质量浓度配比为:ρ(玉米淀粉)20 g/L、ρ(豆饼粉)90 g/L、ρ(玉米浆)7 g/L时菌体的培养效果最好。在最佳配比下培养基中活菌浓度可以达到9.67×10~8 cfu/mL。     

交替假单胞杆菌RS-2培养基优化

用响应面法对交替假单胞杆菌RS-2(pseudoalteromonas paragorgicola)的液体培养基进行优化.首先,采用了Plackett-Burman实验设计研究,确定了对菌体浓度主要影响组分蛋白胨、酵母粉、NaCl.第二步,通过最陡爬坡实验逼近以上三种因素最优水平,最后用响应面设计法对培养基进行了优化,实验结果表明培养基最佳组分为蛋白胨0.6698g/100 mL,酵母粉0.3296g/100 mL,NaCl24.38g/L,Fe2(PO4)3 0.01g/L,MgSO4·7H2O 6.92g/L,MgCl2·6 H2O5.51g/L,CaCl2·H2O 1.45g/L,KCl0.67g/L,在此条件下发酵,得到菌体浓度为1.067×109 cfu/mL.而原始2116E培养基达到8.7×108 cfu/mL,优化后提高1.22倍.     

鼠李糖乳杆菌L7-13增菌培养基的优化

对分离到的鼠李糖乳杆菌L7-13进行增菌培养研究：采用单因素实验和正交试验的方法,通过对其吸光度和活菌数的测定来优化鼠李糖乳杆菌L7-13的培养基.结果表明：葡萄糖65 g/L、酵母粉15 g/L、牛肉粉28 g/L、大豆蛋白胨30 g/L、KH2PO43 g/L、无水乙酸钠3 g/L、柠檬酸铵2 g/L、Tween80 1.5 mL/L、MgSO4.7H2O 1.0 g/L、MnSO4.4H2O 0.5 g/L,培养28 h,所得鼠李糖乳杆菌L7-13的最大菌体密度约1010cfu/mL.此增殖优化培养基适于鼠李糖乳杆菌L7-13的生长繁殖.     

产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌发酵条件的响应面优化

采用实验室前期构建的能够高产纳豆激酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌株,对其液体发酵条件进行优化。通过单因素实验和响应面Box-Behnken模型优化液体发酵培养参数,五因素三水平的响应面分析表明最佳发酵培养条件为:蛋白胨26.05 g/L,葡萄糖29.29 g/L,MgSO4 1.5 g/L,CaCl2 0.74 g/L,NaCl 10 g/L,pH 9.0,接种量3 %。在最优发酵培养条件下,纳豆激酶最高酶活达到2 186.17 IU/mL,比优化前提高了269 % ,这表明响应面法优化枯草芽孢杆菌工程菌能够明显的提高纳豆激酶活性,为该菌株规模化生产纳豆激酶提供了基础应用参考。     

产细菌素干酪乳杆菌发酵培养基的响应面法优化

采用响应面法对培养基的10个组分和起始pH值共11个因素进行优化.通过Plackett-Burman试验(PB试验)从11个因素中筛选出主要影响因子,再利用中心组合设计确定主要影响因子的最佳浓度,并对主要影响因子间的交互作用进行研究与探讨.经过PB试验确定蛋白胨、葡萄糖、乙酸钠、吐温80和柠檬酸三铵为主要影响因子;中心组合试验确定主要影响因子的最佳水平,分别为蛋白胨19.67 g/L、葡萄糖35.01 g/L、乙酸钠9.24 g/L、吐温80 0.41mL/L、柠檬酸三铵1.37 g/L.     

枯草芽孢杆菌对草金鱼的毒害作用

通过在基础饲料中添加不同含量的枯草芽孢杆菌,制成枯草芽孢杆菌含量分别为0cfu/g,0.45×109cfu/g、0.9×109cfu/g、1.36×109cfu/g和1.81×109cfu/g的5种试验饲料,分别用以上5种饲料饲喂均重(19.0±0.5)g,均体长(8.2±0.3)cm草金鱼5 d,评估了饲料中不同枯草芽孢杆菌添加量对草金鱼的毒害作用。结果表明:在基础饲料中添加枯草芽孢杆菌的量低于0.9×109cfu/g时,试验前期(72 h之前)对草金鱼的毒害作用表现不明显,而72 h后其死亡率才出现明显的差异(P<0.05),而枯草芽孢杆菌含量高于0.9×109cfu/g的试验组中,整个过程中,草金鱼死亡率存在明显差异(P<0.05)。在本试验条件下,枯草芽孢杆菌对草金鱼在96 h的半致死含量为1.59×109cfu/g,120 h的半致死含量为1.23×109cfu/g,安全含量为0.22×109cfu/g。     

9株益生菌混合发酵条件的优化

对9株益生菌(4株芽孢杆菌、3株乳酸菌、1株酵母菌和1株光合细菌)混合发酵的培养基配方以及培养条件进行了优化。结果表明,最佳混合发酵的培养基配方为:葡萄糖10g/L,可溶性淀粉15g/L,蛋白胨10g/L,酵母膏2.5g/L,乙酸钠5g/L,柠檬酸三铵2g/L,K2HPO40.15g/L,MgSO40.2g/L,MnSO40.05g/L,吐温80 1mL,蒸馏水1L;最佳培养条件为接种量3%,发酵温度25℃,初始pH 6.5~7.0,装液量为250mL瓶装50mL液体,转速180r/min。微生态制剂活菌数可达4.4×109 cfu/mL,是优化前的2倍。     

枯草芽孢杆菌D—核糖摇瓶发酵条件的研究

对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）S21进行了摇瓶条件下的D－核糖发酵条件的研究,主要考察了添加木糖、pH、溶氧水平以及采用补糖方式对发酵的影响,确定了D－核糖发酵的最佳工艺条件：D－木糖50g／L初始pH7.0,初始葡萄糖浓度为150g／L,碳酸钙20g/L,并在发酵36h后,在装液置为35mL的500mL三角瓶中添加0.75g/mL的葡萄糖溶液2mL,S2菌可积累D－核糖达51.1g/L.     

水质净化芽孢杆菌的筛选及培养条件优化

从养殖池底的海泥筛选出两株具有净化水质的细菌T01、T02,对其进行生理生化鉴定,确定均为芽孢杆菌。对T01、T02及复合菌株(体积比1∶1)降解氨氮和亚硝酸盐氮能力进行测试,菌株T01、T02均具有降解氨氮和亚硝酸盐氮的能力。选择生长状况较好的T02进行培养条件优化,在葡萄糖10g/L、淀粉15g/L、蛋白胨5.0g/L、豆粕10g/L、磷酸氢二钾1.5g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、硫酸镁1.0g/L、碳酸钙1.0g/L的培养基条件下活菌数达到最高,为1.54×109 cfu/mL。在接种量1%、培养温度30℃、转速180r/min、装液量2/5时,活菌数达到最高,为1.63×109 cfu/mL。     

D—葡萄糖酸钠对D—核糖发酵的影响

枯草芽孢杆菌转酮酶缺陷突变株不能以D－葡萄糖酸为唯一碳源生长，但其作为D－核糖的前体则是有效的。固定碳源总量，利用D－葡萄糖与D－葡萄糖酸钠混合碳源发酵，在120g/L的D－葡萄糖酸钠浓度时，菌体生长明显受到抑制，发酵在40h时结束，D－核糖产量达18．8g/L；在30g/L的D－葡萄糖酸质量浓度时，发酵72h，D－核糖产量达68．5g/L。     

乳化法制备两歧双歧杆菌微胶囊

以两歧双歧杆菌BB01和BB28为试验菌株,活茵数及包埋产率为指标,研究了海藻酸钠浓度、CaCI：浓度、乳化时间及固定化时间对乳化法制备两歧双歧杆菌微胶囊的影响．结果表明：当两歧双歧杆菌BB01微胶囊制备的条件分别为海藻酸钠浓度2％、CaCl2浓度1％、乳化时间10min、固定化时间15min时,对应的活菌数分别为4．9×10^9cfu／mL、3．06×10^9cfu／mL、2．47×10^9cfu／mL和4．37×10^9cfu／mL,包埋产率分别为80％、56．7％、40．9％和54．1％;当两歧双歧杆菌BB28微胶囊制备的条件分别为海藻酸钠浓度2．5oA、CaCl。浓度1％、乳化时间15min、固定化时间15min时,对应的活菌数分别为4．0×10^9cfu／mL、41×10^9cfu／mL、1．59×10^9cfu／mL和5．55×10^9cfu／mL,包埋产率分别为80％、92％、87％和76．1％．     

酪酸梭状芽孢杆菌发酵培养基的优化

验证了高层半固体琼脂试管法比固体琼脂平板法更具有良好的厌氧性能,能准确地对酪酸梭状芽孢杆菌进行活菌计数．通过对发酵培养基中不同碳源、氮源、生长因子进行单因素研究,L9（3^3）正交实验进一步优化得到最佳培养基组成为（g／L）：胰蛋白胨10,葡萄糖8,酵母膏4．用此培养基在37℃培养24h,活菌数可达4．1×10^8mL^-1．培养基中添加K2HPO45g／L、MgSO4-7H2O0．2g／L、MnSO4·H2O0．2g／L、CaCO31g／L培养32h时,酪酸梭状芽孢杆菌芽孢转化率可达95％．     

高产S-腺苷蛋氨酸的酿酒酵母发酵条件的响应面法优化

利用Design Expert软件,采用Plackett-Burman(PB)设计和响应面法(RSM)对产S-腺苷蛋氨酸(SAM)的酵母菌株的发酵条件进行优化,PB实验设计及分析结果表明,接种量、L-Met质量浓度、发酵时间是影响SAM胞内产量的3个显著因素。在此基础上通过最陡爬坡实验逼近最大响应区域,并采用Box-Behnken实验设计及响应面分析确定了发酵产SAM的最佳条件为接种量10%,L-Met质量浓度为4.0g/L,发酵时间56h,发酵温度30℃,pH为6.0,在250mL三角瓶中装液量60mL,种龄24h,摇床转速180r/min。最终优化后的SAM胞内产量达到287.615 7mg/g,比初始产量提高1.38倍。     

兔肉发酵火腿的研制

以兔腿肉为原料,经腌制、发酵,采用L9（3）^4正交试验,研制兔肉发酵火腿,测定其pH值、游离氨基酸和三甲胺-氮含量,建立发酵菌株的最佳组合。结果表明当菌株L26、C18、Y163之间的比例为3：3：2,接种量为3×10^7cfu／g、3×10^7cfu／g、2×10^7cfu／g,发酵温度30～35℃时,火腿中的游离氨基酸含量高,品质最好。     

半纤维素水解液中抑制物对发酵生产木糖醇的影响

以木糖为底物发酵生产木糖醇,考察了葡萄糖、阿拉伯糖、果糖等半纤维素糖类对木糖醇发酵动力学行为的影响,并确定了适宜起始木糖质量浓度为100 g/L.当发酵液中乙酸与糠醛的质量浓度分别超过1 g/L时,抑制作用逐渐增强,通过调节半纤维素水解液的起始pH值从4.0到6.0,可有效减轻乙酸对发酵的抑制作用.适量的K+、Mg2+、Na+等微量元素和H2PO4-离子对酵母具有较强的代谢调控作用,其中以Mg2+的影响最为显著.无机盐质量浓度在0～4 g/L内有利于木糖醇发酵.以合成培养基为底物发酵生产木糖醇,与半纤维素水解液的发酵结果相比,两者的动力学曲线较为符合,为进一步研究木糖醇发酵动力学提供了实验依据.     

酿酒酵母SC408转化3-甲硫基丙醇条件的研究

研究了一株产3-甲硫基丙醇的产香酵母菌Saccharomyces cerevisiae SC408的培养基组分和转化条件.均匀试验设计优化后的培养基组分为：氨基酸4.0 g/L、KH2PO48.0 g/L、K2HPO46.0g/L、MgCl20.01 g/L、FeCl20.02 g/L、ZnSO40.03 g/L、酵母膏0.8 g/L、葡萄糖30.0 g/L和NaCl 2.0g/L;接种量和培养条件对3-甲硫基丙醇产生一定影响,在摇床培养30℃,转速200 r/min,SC408发酵132 h,其3-甲硫基丙醇产量达到1.6 g/L,氨基酸的摩尔转化率约为72%.     

蛹虫草菌产腺苷的培养基优化

以蛹虫草菌丝体中腺苷含量为指标,进行发酵培养,优化液体发酵培养基。通过单因素实验结果,选出最适宜的碳源是玉米淀粉,氮源是玉米浆粉和NH4Cl,金属离子是ZnSO4;然后采用9因素2水平Plackett-Burman设计实验得出对蛹虫草发酵水平影响显著的因素,分别为玉米淀粉、玉米浆粉和MgSO4;最后运用响应面分析方法对3个因素3个水平进行优化,获得最优组合浓度为玉米淀粉13.35g/L、玉米浆粉45.74g/L、MgSO4为0.40g/L,此时菌体腺苷含量为4 751μg/g。验证结果表明蛹虫草腺苷含量提高了210%,优化效果极为显著。     

不同总糖浓度木薯全渣乙醇分批发酵过程的研究

为研究不同初始总糖浓度对木薯全渣乙醇发酵过程中糖消耗、酵母细胞生长以及乙醇积累的影响,采取分批发酵方式,间隔6 h取样检测.结果表明：初始总糖浓度253.75 g/L时,发酵效率最高（88.93%）,乙醇生成速率、糖消耗速率、酵母数在初总糖浓度183.75 g/L时最大,分别为7.10 g/（L·h）,13.88 g/（L·h）,4.94×108个/mL;提高初始总糖浓度,糖消耗的终点时间、酵母生长到达最大值的时间、乙醇发酵时间延长,糖消耗速率、糖利用、酵母数、乙醇生成速率下降,乙醇发酵效率先升高后下降.