3种血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C试剂的比较

目的:对3种血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C试剂盒性能进行评价。方法:比较3种试剂盒的稳定性、精密度、准确度、线性范围及抗干扰能力。结果:3种Cys C试剂盒试剂空白CV分别为:2.56%、5.71%、0.62%;总精密度的CV分别为2.39%、8.50%、5.17%,不同试剂盒检测结果差异明显(P<0.001);平均回收率分别为96.65%、104.41%、62.80%;校准验证的偏差分别为:3.44%、-7.17%、3.05%;在0.5~6.0 mg/L范围内线性良好;黄疸、溶血和脂血对CysC测定均无明显干扰。结论:3种Cys C试剂盒性能均存在不足之处,尚不能满足临床实验室需求。     

新生儿脐带血乙肝两对半模式分析

目的 通过对母亲为乙肝表面抗原阳性所生的婴儿脐带血进行乙肝两对半检测,了解婴儿乙肝感染率及乙肝两对半模式情况,为控制母婴垂直传播,降低乙肝感染率提供参考依据.方法 将标本离心分离出血清进行乙肝两对半酶联免疫吸附实验(ELISA)检测.结果 1 233例脐带血中乙肝两对半全部为阴性的705例,占57.18%,能检测出一项(或多项)为阳性的共计528例,总感染率为42.82%,将乙肝两对半模式情况进行列表并与同期我室所检测的5 572例血清标本乙肝两对半模式进行配对资料的t检验,P值＜0.01,显示有显著性差异.结论 婴儿脐带血乙肝两对半模式与临床血清标本乙肝两对半模式有较大差别.脐带血中HBeAb与HbcAb阳性者126例,占感染率的23.86%,为主要模式,HBeAg与HbcAb阳性者58例,占感染率的10.98%,为较次要模式,与临床血清标本相应模式比较P＜0.01,亦与文献报道[1]的检验标本两对半模式出现率差异巨大.脐血中HBsAg阳性总数128例,占感染率的24.24%,阳性率明显降低,这可能是乙肝感染者母亲在孕娠期间注射乙型肝炎免疫球蛋白及采用其他针对性防治措施进行母婴阻断[2]的积极结果,也使控制乙型肝炎母婴垂直传播降低乙肝感染率成为可能.     

磁珠法结合实时荧光PCR试剂检测HBV-DNA临床性能验证

目的 分析磁珠法提取核酸结合实时荧光定量PCR试剂检测HBV-DNA的性能及其临床应用价值,有助于选择试剂。方法 按照CNAS-CL36能力验证要求,收集四川省人民医院乙肝病人血清样本,对三家磁珠法核酸提取实时荧光定量PCR试剂（A、B、C试剂）的精密度、正确度、检出限、可报告范围、抗干扰能力等等性能参数进行方法学性能验证和评价。结果 试剂A和B均能检出HBV-DNA,检出率100%,试剂C的检出率为83.3%,与厂家公布的定量检测下限20 IU/ml不一致。试剂A检测低浓度和高浓度标本的批内变异系数（CV）均低于5%;试剂B检测低浓度标本的批间CV≥5%,高浓度标本批间CV≤5%,试剂C检测低浓度和高浓度标本的批间CV均≥5%。3种试剂在分析测量范围内均线性关系良好。干扰试验显示,3种试剂均受到严重溶血、脂血标本的影响,但不受轻微溶血、脂血标本的影响。结论 通过对3种试剂的性能验证,达安基因公司的一步法（磁珠法）HBV-DNA定量检测试剂灵敏度高,有利于乙肝筛查和临床疗效的监测、随访。     

应用重组致密颗粒抗原6检测诊断弓形虫病的研究

目的以纯化的重组致密颗粒抗原6作为检测抗原,建立检测弓形虫IgM和IgG抗体的ELISA新方法,为临床治疗提供参考依据。方法 2007年1月-2011年12月对59份弓形虫阳性血清标本进行检测,并与进口弓形虫ELISA-IgM和IgG试剂盒进行比较,数据采用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果 ELISA法优化检测条件为包被抗原浓度为40μg/ml;敏感度比较表明血清稀释度在1∶10~1∶80为优;特异性试验表明IgM阳性的抑制率为97.36%、IgG阳性的抑制率为97.98%;用rGRA6-IgM-ELISA对混合弓形虫IgM阳性和阴性血清的精密度检测表明,IgM阳性的变异系数(CV值)为2.76%,IgM阴性混合血清的CV值为0.45%;用rGRA6-IgG-ELISA对混合弓形虫IgG阳性和阴性血清的精密度检测表明,IgG阳性的变异系数(CV值)为2.89%,IgG阴性混合血清的CV值为1.65%;rGRA6-IgM-ELISA与进口试剂盒的总符合率为91.01%,rGRA6-IgG-ELISA与进口试剂盒的总符合率为94.59%。结论重组抗原rGRA6能被弓形虫感染患者血清IgM和IgG抗体所识别,用重组抗原rGRA6构建的试剂盒诊断弓形虫病具有较高的特异性、敏感性。     

两种白喉IgG抗体酶联免疫吸附试验检测试剂盒的评价

目的 对IBL公司和Virion公司白喉IgG抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒进行评价,以获得试剂盒的稳定性和准确度的相关数据.方法 购买IBL和Virion公司的白喉IgG抗体 ELISA 检测试剂盒,检测标本来自31份健康从业人员体检血清以及试剂盒内标准品.标准品同时进行10孔检测.血清样品双孔检测,标准品每天检测1次,共检测3次.分析试剂盒检测结果的批内差异及批间差异以检测其稳定性,将标准品的测得浓度与实际浓度相比较,评价试剂盒的准确度.结果 IBL 试剂盒标准品检测的批内变异系数(Coefficient of Variation,CV)为13.550 7%,批问CV为9.989 0%;血清样品检测的批内CV为14.527 0%,批间CV为11.003 9%.Virion试剂盒标准品检测的批内CV为5.9541%,批间CV为2.472 8%;血清样品检测的批内CV为11.0612%,批间CV为8.030 0%,标准品的测得浓度与实际浓度之间的CV:IBL试剂盒为17.688 9%,Virion试剂盒为1.396 6%.IBL和Virion试剂盒检测结果与间接血球凝集试验(IHA)检测结果的符合率均为65%.结论 两公司试剂盒的检测结果均满足试剂盒自身的质量控制标准,CV满足 ELISA 的常规质量控制标准(CV<20%).标准品的测得值和实际值之间比较,Virion试剂盒的CV较小.与IHA相比,两种试剂盒的符合率相同.     

模板提取方法对HBV DNA实时荧光定量PCR检测的影响

目的:研究模板纯化与否对血浆HBV DNA实时荧光定量PCR检测线性范围、重复性、灵敏度的影响。方法:采用国产离心柱法DNA纯化试剂盒及实时定量PCR试剂盒提供的直接煮沸裂解法处理107～10110倍浓度梯度稀释的血浆样本和标准品及乙肝窗口期患者的血清标本,用国产HBV PCR荧光定量扩增试剂盒检测,比较其检测结果线性范围、重复性、灵敏度及乙肝窗口期患者HBV DNA阳性检出率。结果:离心柱纯化组和煮沸裂解组的检测线性范围分别为107IU/ml～101IU/ml和107IU/ml～103IU/ml;灵敏度分别为24 IU/ml～48 IU/ml和1200 IU/ml～2400 IU/ml;104IU/ml、103IU/ml、102IU/ml样品的批内变异系数(CV)离心柱纯化组为2.5%、2.3%、1.8%,煮沸裂解组为1.9%、1.6%、12%,批间变异系数(CV)离心柱纯化组为2.3%、2.9%、5.4%,煮沸裂解组为1.7%、4.5%、7.7%;离心柱纯化组和煮沸裂解组的窗口期患者血清标本阳性检出率分别为83.9%和3.6%。结论:HBV血清样品经离心柱纯化可以极大地改善乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测结果。     

铁蛋白定量检测试剂盒性能评价

目的评价以量子点荧光免疫发光法为原理的铁蛋白定量检测试剂盒的性能指标。方法根据铁蛋白定量检测试剂盒技术要求中规定的检验方法,测定试剂盒的线性、准确度、精密度(批内精密度、批间精密度)、分析特异性。结果线性结果在1~400 ng/ml线性范围内,线性相关系数r=1.00;准确度结果为测试铁蛋白国家标准物质,高浓度样品相对偏差分别是-1.7%、-2.8%、-6.8%,低浓度样品相对偏差分别是2.6%、-3.4%、-0.7%;批内精密度结果为CV高值:2%,CV低值:4%,批间精密度结果为R高值:1%,R低值:5%;分析特异性结果为含干扰物胆红素浓度≤10 mg/dl时,B高:-1%,B低:-3%,含干扰物甘油三酯浓度≤900 mg/dl时,B高:0.05%,B低:-0.3%,含干扰物血红蛋白浓度≤200 mg/dl时,B高:-0.4%,B低:-5%。结论被检验铁蛋白定量检测试剂盒,各方面性能指标符合要求,适于临床使用。     

152例乙肝检测结果分析

目的对乙肝五项检测情况进行分析。方法自2009年6月至2010年6月份本卫生服务中心对152例人员进行乙肝两对半检测。结果乙肝两对半共检查人员152例,其中大三阳2例,占1.32%;小三阳5例,占3.29%;一五阳8例,占5.26%;二五阳16例,占10.53%;单五阳（抗HBc阳性）15例,占9.87%。结论乙肝两对半检测是乙型肝炎诊断和治疗的重要指标,科学规范的检测操作对保证日常检验结果的准确性有重要意义。     

无偿献血人群乙肝“两对半”模式、HBV病毒载量及ALT特点的初步研究

目的探讨无偿献血人群乙肝"两对半"、HBV病毒载量及ALT的关系。方法对50例HBs Ag ELISA检测双试剂阳性的无偿献血标本进行乙肝"两对半"定量、HBV-DNA定量及ALT检测,分析不同乙肝"两对半"模式下年龄、性别、ALT和HBV-DNA定量结果的关系。结果 50例乙肝献血者中"小三阳"占86%(43/50)、"大三阳"占12%(6/50)。"大三阳"献血者HBV-DNA检出率为100%,高于"小三阳"组的47%(P<0.05)。HBV献血者中98%ALT在正常范围。"大三阳"组在年龄、ALT、HBs Ag定量、HBc Ab定量、HBV病毒载量及HBV病毒检出率上均高于"小三阳"组(P<0.05)。结论无偿献血者乙肝"两对半"模式多为"小三阳",肝损害程度相对较轻,这大大降低了HBV输血传播的风险,更有利地保障了血液安全。     

血液HBcAg检测的临床意义初探

武汉市第七医院研制的ＥＬＩＳＡ微板法检测ＨＢｃＡｇ，比一般“两对半”方法多两个步骤，但较简单适用。我们用该试剂盒对做“两对半”的４４０例血清进行了ＨＢｃＡｇ的检测。现将结果报告如下。一、材料及方法：病人血清标本系本院门诊及住院病人进行乙肝“两对半”检查的血清，收集后冷冻保存，集中检测。ＥＬＩＳＡ试剂盒为武汉第七医院１９９７年研制生产的。该试剂盒所用的微孔板为美国ＣＯＳＴＯＲ公司的聚氯乙烯板。ＮＰ－４０为德国产品，７％浓度。具体操作程序如说明书。二、结果与讨论：对４４０例检测乙肝“两对半”的血清标…     

梅毒抗体酶联免疫吸附法检测试剂盒性能验证及评价

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)检测中试剂盒的性能验证评价方法,并对该实验室梅毒抗体(anti-TP)检测中所使用的英科新创生产的ELISA试剂盒进行性能验证评价,以判断所用试剂盒是否能满足实验室检测工作的基本要求。方法利用全自动酶标仪进行ELISA检测,从试剂盒最低检出限、重复性、精密度、正确度四个方面,评价该试剂盒的性能指标,并对试剂盒的CUTOFF值进行验证,判断其是否适合本实验室常规检测人群。结果梅毒抗体(anti-TP)ELISA检测中,该实验室所用英科新创试剂盒最低检出限为0.25 NCU/m L,低于厂家声称的0.3 NCU/ml,适合大批量样本筛检,避免了漏检;批内精密度试验中,弱阳性浓度水平(0.5 NCU/m L)和临界值浓度水平的变异系数(CV)分别为4.0%和3.2%;批间精密度实验中,在弱阳性浓度水平(0.5 NCU/m L)和临界值浓度水平的CV为8.5%和7.6%,均低于厂家声明的标准;正确度验证方面,阴阳性符合率达到100%;CUTOFF值验证实验中,检测的样本OD值的x+3SD=0.027,小于试剂盒提供的CUTOFF值0.105.结论该梅毒抗体检测试剂盒的各项性能指标符合本实验室的要求,CUTOFF值适合本实验室日常检测工作和受检人群。     

ARCO PC全自动生化分析仪使用评价

ARCO PC是意大利生产的小型全自动生化分析仪,经一系列评价试验表明,其准确度、精密度良好,交叉污染小于1%,对定值血清测试结果与参考值的相对偏差最大为3.1%,批内CV最大为3.4%,日间CV最大为5.7%.性能可靠,使用方便.因为是单通道连续流动式自动分析仪,速度不高,适合中小医院日常标本的常规生化分析.     

初三学生9667名乙肝表面抗原检测结果分析

目的了解北京市朝阳区2009年初三学生乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性率,为开展乙型肝炎防治工作提供参考依据。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法对9667名初三学生进行HBsAg检测,乙型肝炎病毒标志物检测试剂盒(乳胶法)进行乙肝两对半检测;使用日历7180全自动生化分析仪进行ALT检测。结果9667名学生乙肝表面抗原阳性率为1.13%,其中男生为1.42%,女生为0.83%,男生明显高于女生。在所有阳性标本中,大三阳占47.71%,小三阳占20.18%。结论朝阳区初三学生乙肝感染率较低,但大三阳比例较高。家庭、学校、社会高度关注,坚持做好乙肝疫苗接种工作,及早进行一级防御,是进一步降低学生乙肝感染率的有效机制。     

核酸检测与酶免检测在宁夏地区无偿献血者血液筛查中的应用

目的:对ELISA和NAT检测结果进行分析,找出两种检测方法在血液筛查中的优势、劣势。方法:收集宁夏地区2016年1月到2016年12月无偿献血者标本,进行ELISA和NAT检测,并对检测数据进行比对分析。结果:两种检测方法比对中共检测标本60958份,酶免检测总阳性数为477份,阳性率为0.78%,NAT检测阳性数154份,阳性率为0.25%。ELISA双试剂阳性标本与核酸检测结果的符合率为65.14%,单试剂阳性标本与核酸检测结果的符合率为2.17%,灰区阳性标本与核酸检测结果符合率为0。ELISA检测阴性标本NAT检测阳性数为57例,全为HBV DNA阳性,经电化学发光检测乙肝两对半结果为50例是隐匿性乙肝感染,7例检测结果为阴性。结论:NAT检测假阳性率较ELISA低,ELISA方法漏检主要为隐匿性乙肝感染的漏检。NAT检测方法在献血者血液筛查中优于ELISA检测方法。     

快速定量检测试剂盒(热消解)法测定尿中碘

目的了解尿碘快速定量检测试剂盒(热消解)法测定尿碘的准确度、精密度和检出限。方法对低、中、高三种不同浓度的尿样做精密度试验和准确度试验,并与国家标准方法进行比对。结果试剂盒法的检出限为7.90μg/L;低、中、高三种不同浓度(75.20μg/L、207.50μg/L、315.00μg/L)的尿样,8次测定结果的相对标准偏差分别为3.10%、1.60%、1.20%;加标回收率为96.60%～104.00%;试剂盒法和国标法的测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论尿碘快速定量检测试剂盒法测定尿碘精密度和准确度高,操作简单,不需要特殊仪器和设备,适合基层开展尿碘测定使用。     

可溶性人胎盘生长因子ELISA检测试剂盒的建立及性能分析

目的:研发人血清及尿液可溶性胎盘生长因子(sPLGF)的ELISA检测试剂盒并进行性能测试。方法:以抗人PLGF单克隆抗体包被微孔板,加入重组sPLGF和生物素标记的检测抗体,形成抗原抗体复合体,加入链亲合素辣根过氧化物酶和底物TMB实现比色反应;从线性范围、准确度、精密度、样品基质及样品前处理方法等指标进行性能评价,并与市售进口同类产品进行比较。结果:捕获抗体的最适包被量为400ng/well,包被条件为4℃孵育16~20h,检测抗体的最适工作浓度为1μg/ml,样品最适反应条件为37℃孵育2h,适合的封闭液及样品稀释液组合为3%BSAPBS和0.1%BSA-PBS;验证该试剂盒的有效检测范围为15.6~2000pg/ml,准确度为85%~115%;批次内变异系数CV≤10%,批次间变异系数CV≤15%;其检测范围、准确度、精密度、灵敏度及样品适用范围等与市售进口试剂盒基本一致。结论:本项目开发的人sPLGF检测试剂盒实现了人血清和尿液中的内源sPLGF的定量检测,其检测性能稳定、可靠,具有比进口试剂盒检测范围更广、价格更低的优势,可用于临床检测血液及尿液中的内源性sPLGF水平。     

乙肝两对半检测的临床意义和影响因素分析

目的:分析研讨乙肝两对半检测的临床意义和影响因素。方法:随机从我院2016-02～2017-10期间收治的携带乙肝病毒患者986例进行回顾分析,患者均接受乙肝两对半检测,分析乙肝两对半检测的临床意义,以及影响因素,为此后临床检测提供依据。结果:986例患者均接受乙肝两对半检测,共935例患者检测结果为阳性,其中包含HBsAb(+)阳性者763例、HBsAg(+)阳性者74例、HBeAg(+)阳性者55例、HBeAb(+)阳性者20例、HBcAb(+)阳性者23例。结论:建议临床检测乙肝病毒可采用乙肝两对半检测方式,且检测过程中尽量排除干扰性因素,如操作、实际、标本采集和处理等因素,以确保鉴别的准确性。     

基于微流控芯片的微型生化分析仪的性能验证

目的 评估基于微流控芯片的微型生化分析仪与全自动生化分析仪检测结果的可比性。方法 使用质控血清并按照临床和实验室标准协会（CLSI）操作规程对微型生化分析仪进行精密度验证;收集天津中医药大学第一附属医院与天津市人民医院的274例标本为试验样本,将两家医院日常使用的全自动生化分析仪作为对照,采用配对t检验、组间相关系数、Passing-Bablok回归分析、Bland-Altman散点图统计分析进行检测结果的相关性及一致性检验。结果 微型生化分析仪低值质控血清批内精密度的变异系数（CV）为0.51%～1.51%,日间精密度的CV为2.29%～5.20%;高值质控血清批内精密度的CV为0.65%～2.25%,日间精密度的CV为1.49%～3.74%。全自动生化分析仪与微型生化分析仪的血浆检测结果比较,以及微型生化分析仪的血浆、全血检测结果比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;各项指标检测结果的组间相关系数ri均>0.9;但尿素（UREA）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、γ-谷氨酰胺转肽酶（GGT）和白蛋白（ALB）4个指标的检测结果偏倚均存在系统误差或随机误差,且UREA的误...     

半乳糖血症全自动筛查试剂盒的性能分析

目的:对一种检测新生儿滤纸干血片样品中总半乳糖含量的全自动检测试剂盒进行性能分析。方法:采用荧光分析法检测总半乳糖含量,评判试剂盒的性能指标。结果:该试剂盒的有效检测范围为2.5~70mg/dl,检测试剂盒的分析灵敏度为0.1mg/dl。批内、批间的不精密度分别为≤10%与≤15%,校准品的不精密度≤20%。试剂盒在37℃放置7d后荧光值变化≤15%,稳定性好。本试剂盒检测结果与国外公司的同类试剂盒有很好的相关性,差异无统计学意义(P0.05)。结论:该试剂盒对比国外产品,操作简单快速,已实现自动化,适合应用于新生儿半乳糖血症大批量样本的筛查。     

基于TaqMan-MGB荧光定量PCR技术检测 HIV-1 DNA基因方法的建立

目的建立一种基于TaqMan-MGB荧光探针为特点的荧光定量PCR方法检测人类免疫缺陷病毒(human immanodeficiency virus,HIV-1)感染者外周血中HIV-1 DNA的含量。方法根据HIV-1病毒基因序列设计特异性引物和TaqMan-MGB荧光探针,建立TaqMan-MGB实时荧光定量PCR检测方法和定量标准曲线,优化反应方案,分析方法的灵敏度、准确性、重复性和精密度。采用该方法对20份HIV-1感染者和10份正常人的外周血进行HIV-1 DNA检测分析,并将结果与罗氏HIV DNA检测试剂盒作比较。结果成功建立了检测HIV-1 DNA TaqMan-MGB双标记探针实时荧光定量检测方法。灵敏度:该体系最低检出限可达10拷贝/ml,标准曲线方程为:Y=-3.339X+45.883,R~2=1。准确性:20份HIV-1阳性样本,HIV-1 DNA检出率100.00%,10例HIV-1阴性的健康对照,检测结果全部阴性;该检测结果与罗氏试剂盒检测结果完全一致。重复性和精密度:对高值(3×10~6拷贝/ml),低值(3×10~2拷贝/ml)2个浓度进行批内批间验证,批内CV分别为2.53%、3.02%;批间CV分别为2.87%,4.52%,均10%。结论成功建立了HIV1-DNA的TaqMan-MGB荧光探针实时定量PCR方法;该方法具有较高的准确性、灵敏度以及精密度和重复性,能够为临床HIV1感染者提供早期诊断和治疗效果监测。