炎调方通过Fas/FasL通路抑制ATⅡ细胞凋亡的研究

目的体外观察炎调方通过Fas/FasL通路延缓LPS诱导II型肺泡上皮细胞(ATII)凋亡的作用。方法原代分离与培养ATII细胞,运用脂多糖(LPS)干预ATII进行体外ALI细胞造模,结合药物血清技术,观察炎调方对ATII细胞凋亡的影响。Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡形态,流式细胞仪检测ATII细胞凋亡率,Western blot方法检测Fas、FasL、caspase-8、caspase-3表达。结果 LPS降低了ATII细胞存活率,炎调方对LPS诱导的细胞凋亡有显著的抑制作用;LPS能明显激活caspase-8和caspase-3活性,提高Fas和FasL的水平;炎调方能减弱caspase-8和caspase-3活性,降低Fas和FasL表达。结论炎调方能延缓ATII凋亡,其机制可能与抑制Fas/FasL通路活性有关。     

青蒿琥酯对人慢性粒细胞白血病K562细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达的影响

目的研究中药青蒿琥酯体外诱导K562细胞凋亡的作用及其Fas/FasL蛋白的表达。方法采用MTT法、光学显微镜、透射电镜技术、流式细胞术对青蒿琥酯诱导K562细胞凋亡进行了系统观察,并应用流式细胞术检测了Fas/FasL蛋白表达水平的改变。结果青蒿琥酯抑制K562细胞的增殖,IC50值为12.41μg/ml,其有时间、剂量-效应关系;50μg/ml的青蒿琥酯可诱导K562细胞凋亡,且具有时间-效应关系,同时上调K562细胞Fas蛋白的表达,下调FasL的表达。结论青蒿琥酯可诱导K562细胞凋亡,Fas/FasL表达的改变可能是青蒿琥酯诱导K562细胞凋亡的机制之一。     

佐太、β-HgS、HgCl_2对PC12细胞活性和凋亡相关基因表达影响的比较

目的比较佐太、β-HgS、HgCl_2对PC12细胞活性和凋亡相关基因表达的影响。方法 MTT法测定3种药物对细胞活性的影响,实时荧光定量PCR法检测Bax、Bak、Bcl2、Fas、FasL表达。结果 0.250 g/L佐太作用2 h后细胞活性下降约10%,等汞量β-HgS使其下降12%左右,而含汞量只有佐太1/10的HgCl_2却导致其下降约70%;佐太降低Bax、Bak、Bcl-2、FasL表达,β-HgS降低Bax、Bak、Fas、FasL表达,HgCl_2降低Bcl-2表达而增加Fas、FasL表达。结论佐太、β-HgS对PC12细胞的毒性远小于HgCl_2,两者可能对细胞中线粒体凋亡通路的激活有抑制作用,而HgCl_2可能通过激活死亡受体通路诱导细胞凋亡。     

莱菔硫烷诱导人肝癌HepG2细胞凋亡与Fas/FasL途径的相关性研究

目的 研究莱菔硫烷对人肝癌HepG2细胞Fas、FasL、Bid蛋白表达的影响,探讨其诱导HepG2细胞凋亡过程中Fas/FasL途径的作用.方法 Caspase-8试剂盒检测莱菔硫烷对HepG2细胞Caspase-8活性的影响;流式细胞仪检测莱菔硫烷对HepG2细胞中Fas、FasL、Bid蛋白表达的影响.结果 莱菔硫烷10、20、40 μmol/L作用于HepG2细胞48 h,可显著升高HepG2细胞Caspase-8活性(P＜0.01);可使HepG2细胞Fas、FasL蛋白的表达显著升高(P＜0.01);莱菔硫烷20、40 μmol/L时,可显著提高Bid蛋白的表达(P＜0.01),上述作用均呈剂量相关性.结论 激活Fas/FasL途径可能是莱菔硫烷诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的重要机制之一.     

白英提取液对Hela细胞凋亡及Fas/FasL基因表达的影响

目的:探讨白英提取液对Hela细胞凋亡及Fas/FasL基因表达的影响。方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测凋亡,二步法免疫组化检测Fas蛋白表达,半定量RT-PCR检测Fas和FasL mRNA表达。结果:白英提取液对Hela细胞增殖有较强的抑制作用,且这种作用呈一定的剂量-时间依赖性;细胞凋亡率明显升高;Fas基因mRNA和蛋白表达显著上升,FasL mRNA表达明显下降。结论:白英提取液通过上调Fas基因和下调FasL基因表达,诱导细胞凋亡,从而抑制Hela细胞增殖。     

参麦注射液及氨茶碱对肺气肿大鼠小气道平滑肌细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的；探讨参麦注射液及氨茶碱对木瓜蛋白酶致大鼠肺气肿小气道平滑肌细胞凋亡及其Fas/FasL系统表达的影响。方法：采用免疫组织化学及TUNEL法，检测气管内注入木瓜蛋白酶后肺气肿模型1、3、5、7、15、30天组和正常对照组，小气道平滑肌细胞凋亡及其Fas/FasL系统表达，以及参麦注射液和氨茶碱对其影响。结果：正常对照组小气道平滑肌细胞Fas、FasL表达很低，阳性率分别为（2．31±0．55）％、（1．28±0．47）％，气道内注入木瓜蛋白酶后，空白组小气道平滑肌细胞（SASMC）Fas、FasL表达随着注酶时间的延长而阳性率也明显增加，参麦注射液有抑制大鼠SASMC Fas 、FasL表达的作用，而氨茶碱作用不明显。同时，发现正常对照组大鼠SASMC凋亡百分率也很低（0．87±0．32）％，气道内注入木瓜蛋白酶后，空白组SASMC凋亡百分率随着注酶时间的延长而凋亡百分率也明显增加，用参麦注射液治疗后可使大鼠SASMC凋亡降低，而氨茶碱作用不明显。结论：在肺气肿形成过程中，Fas和FasL参与了小气道平滑肌细胞的凋亡调控，参麦注射液可能通过抑制炎性介质释放，影响Fas和FasL蛋白表达和减少小气道平滑肌细胞的凋亡，对肺气肿有一定的治疗作用。     

乙型肝炎血清可溶性Fas与FasL的检测

FasL和Fas是介导细胞凋亡的一对重要的细胞膜表面死亡分子及其受体，表达FasL的细胞可介导表达Fas的靶细胞发生凋亡。细胞毒性T细胞（CTLs）介导的细胞免疫在乙型肝炎的发病机制中起着重要作用，其主要机制是通过FasL介导Fas阳性的肝细胞凋亡。因此，Fas／FasL介导的细胞凋亡机制与乙型肝炎的发生发展有着密切关系。迄今，有关肝病Fas和FasL的研究大多限于肝组织原位，     

基于Fas/FasL途径的金匮肾气丸对肾阳虚模型睾丸细胞凋亡的影响

目的以"劳倦过度、房室不节"肾阳虚小鼠为模型,从Fas/FasL途径探讨肾阳虚小鼠睾丸组织细胞凋亡发生机制及金匮肾气丸的治疗作用。方法以Colldege效应诱导雄性小鼠房室不节,用强迫小鼠游泳法造成劳倦过度,建立肾阳虚小鼠模型。4周后,分别用普通光学显微镜和电子显微镜进行睾丸组织的形态学观察,TUNEL法测定小鼠睾丸生殖细胞的凋亡率,利用RT-PCR检测小鼠睾丸组织Fas/FasL mRNA表达,用免疫组织化学分析Fas、FasL蛋白表达差异。结果1模型组小鼠睾丸组织曲细精管内支持细胞及各级生精细胞层次不清,结构破坏明显,金匮肾气丸组和睾酮组小鼠睾丸生殖细胞较模型组有一定程度改善。2在透射电镜下,模型组小鼠睾丸细胞中,可以观察到处于凋亡不同阶段的初级精母细胞,凋亡小体。3模型组TUNEL阳性细胞较正常组显著增加,主要为精原细胞和初级精母细胞,并可见精子细胞凋亡。金匮肾气丸治疗组睾丸细胞凋亡率明显低于模型组,但高于正常组,凋亡细胞类型以精原细胞和初级精母细胞为主。4模型组与正常组相比,Fas/FasL的mRNA表达量明显增高,金匮肾气丸组和睾酮组Fas、FasL mRNA表达较正常组稍高,但与模型组比较,明显降低。5模型组Fas在支持细胞和精原细胞及初级精母细胞高表达增多,精子细胞高表达增加明显;模型组FasL高表达细胞明显增多,在支持细胞、各级生精细胞及精子细胞、精子中均有分布,无明显定位特异性;金匮肾气丸组和甲基睾酮对肾阳虚模型小鼠的Fas/FasL均有明显的抑制作用。结论房劳-倦劳所致肾阳虚小鼠的睾丸内生殖细胞凋亡率上升,通过Fas、FasL的外源性死亡通路引起生殖细胞凋亡。金匮肾气丸可以通过调节Fas/FasL表达,降低小鼠睾丸生殖细胞凋亡。     

山仙颗粒含药血清对大鼠S-180肉瘤细胞Fas/FasL基因表达的相关性研究

目的探讨山仙颗粒(SXG)含药血清对大鼠S-180肉瘤的抑制作用及肿瘤凋亡相关基因fas/fasl表达的影响,探讨其抗肿瘤发生和发展的机理。方法通过体外细胞培养扩增S-180肉瘤细胞制备细胞悬液,将其置入不同浓度的含药SD大鼠血清及正常SD大鼠血清中,分成对照组(1640培养液)、空白1组(10%正常鼠血清)、空白2组(100%正常鼠血清)、含药血清1组(10%鼠含药血清)和含药血清2组(100%鼠含药血清),分别培养24h、48h、72h后收集细胞计数并制成细胞涂片,免疫细胞化学(二步法)检测瘤组织中fas/fasl基因的表达情况对照分析。结果 1、各时间段的对照组及空白1、2组比较、含药血清1组与空白血清1组比较Fas基因及Fasl基因表达水平无显著差异(P>0.05);含药血清2组与空白血清2组比较Fas基因表达水平升高而Fasl基因表达水平下降(P<0.05)。2、含药血清2组各时间段比较,Fas基因表达水平48 h及72 h较24 h的Fas基因表达水平升高(P<0.05),而48 h与72 h比较无显著差异(P>0.05);Fasl基因表达水平各时间段无显著差异(P>0.05)。结论 SXG大鼠含药血清能显著使体外培养的S-180肉瘤的促凋亡基因Fas表达增强而抑凋亡基因Fasl表达减弱,从而诱导S-180肉瘤细胞的凋亡来抑制其生长。     

安胃汤含药血清调节Fas/FasL信号通路促进MC细胞凋亡的影响

目的探讨安胃汤含药血清对MC细胞[MNNG诱导人胃黏膜上皮细胞系(GES-1)恶性转化]Fas/FasL信号通路相关因子及细胞凋亡影响。方法根据中药复方血清药理学实验方法,以MC细胞为研究对象,设立空白组(A组)、安胃汤组(B组)、安胃汤+阻断剂组(C组)、阻断剂组(D组)。含药血清处理12 h、24 h、48 h后的各组细胞采用流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA检测细胞培养液上清FasL的含量;Western blot和Real-time PCR检测Fas、Bcl-2、Bax蛋白及mRNA的表达。结果 A组细胞凋亡率比较低,B、C、D组细胞凋亡率有所增加;24h和48h时,与A组比较,B、C、D三组细胞培养液上清中FasL的含量均有所增加(P0.01);与A组相比,B、C、D三组细胞内Fas、Bax基因及蛋白表达有所升高(P0.01或P0.05),Bcl-2基因及蛋白表达有所降低(P0.01或P0.05)。结论安胃汤能促进MC细胞细胞凋亡,可能与其通过调控Fas/FasL通路,调控Bcl-2、Bax mRNA及蛋白有关。     

病证关系及病证的重合与分离

论述了病证关系,分析了“病”与“证”的内涵,认为疾病是决定证候的内在稳定的因素,而证候是疾病的外在综合表现。辨证论治以证候处方用药,会产生病证重合与分离两种情况,病证重合时疗效就肯定,而病证分离时则疗效就会远离预期目标,这就是辨证论治疗效重复性差的客观原因。为了提高病证的重合,避免病证的分离,应该重视方药与疾病的联系,不能只讲“方”与“证”的联系。笔者认为,方药对疾病的疗效是根本的,而方药对证候的疗效是附属的,疾病与疾病证候具有不同的治疗意义。     

小青龙汤因机证治浅析

小青龙汤为温阳宣肺、蠲痰涤饮之剂,凡见哮喘、咳嗽、痰、饱胀、喘息和四肢水肿等因"外感风寒,内有寒饮"所致者,均可辨证应用小青龙汤。临证应用时注意:①寒邪不必拘泥外感;②"三水"的变化要审清;③但见寒饮,有无表证均可用此方;④注意痰饮在临床上的变化;⑤临床见喘未必治喘,要临证辨别。用此方,要抓住以下临床指征:①面色:"三水"之面色--黧黑之色;②脉象:弦脉或浮紧;③舌象:舌苔多水滑;④痰涎:咳痰较爽,痰涎清稀,泡沫状。以上"但见一证便是,不必悉俱",有效之后,应中病即止。     

冲任与男科关系浅探

本文从生理、病理及治疗三个方面对冲任与男科的关系进行了探讨 ,具体阐述了冲任为男性生殖的枢纽 ,冲任失调为男性病的病理机转 ,以及从冲任着手的治疗原则、用药特点 ,为男性病的研究提供一条思路。     

谈人参在《伤寒论》中的应用

人参为五加科植物人参的根。最早见于《神农本草经》,列为上品,书云:“人参味甘微寒,主补五脏,安精神,定魂魄,止惊悸,除邪,明目,开心,益智。”其味甘、微苦,性微温。归脾(胃)、肺、心经。具有大补元气,补脾益肺,益气生津,宁心安神之功效。在《伤寒论》中,仲景应用人参共40次,入     

肠道菌群及针刺调节与动脉粥样硬化防治

肠道菌群存在于肠道,多种微生物拮抗共生、动态平衡,一旦平衡破坏,可引起宿主发生多种疾病。脑-肠轴理论提出肠道菌群与焦虑、抑郁等情绪障碍也有关系。动脉粥样硬化是冠心病、脑卒中等多种心脑血管病变的病理基础,与肠道菌群组成改变及功能失调之间可能存在一定联系。肠道菌群同黏膜免疫相互作用,代谢产物氧化三甲胺可能对AS形成有影响,短链脂肪酸可影响危险因素的出现,增加AS发生。动脉粥样硬化可归属"胸痹""真心痛""血脉病""痰饮""中风"等范畴,为本虚标实,本虚为气、血、阴、阳虚,可累及心、肝、脾、肾;气滞、寒凝、痰阻、血瘀为标。肠道菌群与宿主生理相关、病理相互影响,与中医学天人相应、整体观理念一致,与阴阳学说、脾胃有异曲同工之处。针刺防治AS着眼于整体调节,对肠道菌群也有调节作用,辨证取穴,从痰、瘀、毒论治,整体调节脏腑功能,通过对大脑、肠道菌群、骨髓的整体调节,可能是AS防治效应机制。针灸影响肠道菌群数量与结构,恢复宿主肠道内环境动态平衡,是AS防治重要着眼点。未来高通量测序、高效液相色谱、气相色谱等为研究肠道菌群与针刺治疗动脉粥样硬化关系提供了技术保证。     

从“方药离合”看中医学的方药共荣

通过对历代方剂与本草的应用演变和发展过程的论述,揭示了中医方药共荣关系,并以黄柏、升麻等药为例,强调方药配伍运用是方药共荣的核心环节.随后,结合中医发展的现实环境,分析了坚持方药共荣的正确方向,对于防止重药轻方的错误倾向,提高中医临床疗效,启迪现代研究思路,均具有重要的学术价值和现实意义.     

药物针灸综合治疗闭合性和化脓性骨髓炎

几年来采用药物和针灸并用治疗闭合性和化脓性骨髓炎 40例 ,取得满意疗效 ,现总结如下 :1　一般资料　　 40例病案都来自于门诊。其中男性 30例 ,女性 1 0例 ,年龄最大的 63岁 ,最小的 8岁 ,平均35岁 ;病程最长 40年 ,最短 7个月 ,平均病期 5年。 40位病人都多次经Ｘ光拍片确诊 ,并多次接受过手术治疗。手术次数最多的达 6次 ,最少的也有 2次。除了 4例存有死骨者以外 ,其他 36人均在药物和针灸的综合治疗下痊愈。2　治疗方法　　根据患者的病情及发展 ,采用全身与局部、内治与外治、中药与针灸相互协调、补充的辨证方法 ,以达到表去根除、…     

神阙穴与气、脏腑经络关系及现代医学认识和穴位贴敷初探

探析神阙穴与气及脏腑经络关系及现代医学对脐中的认识,介绍临床运用。     

益肾健脾涤痰散结法治疗心脑血管疾病的机制研究

"益肾健脾,涤痰散结"在心脑血管疾病中的应用,源于临床实践,又经过长期的临床与系列实验研究验证、深化,已广泛应用于冠心病心绞痛、心律失常、高血压病、中风等心脑血管疾病临证治疗中。其代表方补肾抗衰片能够明显改善肾虚痰瘀型冠心病心绞痛患者胸痹心痛证候,具有良好的抗氧化、抗酪氨酸硝基化的作用,而活性氧自由基(ROS)和活性氮自由基(RNS)可能是"痰"的物质基础。补肾抗衰片的系列研究,进一步证实了"脾虚生痰,痰瘀互结"是心脑血管病的病理基础,而"益肾健脾,涤痰散结"法具有减轻动脉粥样硬化类疾病的作用,成为指导心脑血管疾病防治的一个重要应用理论。