子痫前期患者胎盘组织中E-选择素的表达

目的:探讨子痫前期患者胎盘组织中E-选择素(E-selectin)的表达情况.方法:用免疫组化法对20例正常孕妇(对照组)和40例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度16例,重度24例)的胎盘组织进行E-selectin定位,并用计算机图像分析系统进行定量分析比较.结果:子痫前期组中胎盘绒毛合体滋养细胞E-selectin的表达(53.5±0.5)低于对照组(53.8±0.4)(P＜0.05),而在胎盘绒毛毛细血管内皮细胞中E-selectin的表达(63.0±0.5)高于对照组(62.6±0.4)(P＜0.05);轻度、重度子痫前期间胎盘绒毛合体滋养细胞和毛细血管内皮细胞中E-selectin的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论:E-selectin可能参与了子痫前期的发病过程.     

重度子痫前期患者胎盘组织vasohibin和VEGF的表达及意义

目的 通过比较正常孕妇和重度子痫前期患者胎盘组织vasohibin和VEGF的表达变化及相互关系,探讨vasohibin及VEGF在子痫前期的表达及意义.方法 采用免疫印迹法对30例正常妊娠胎盘组织和30例重度子痫前期患者胎盘组织中vasohibin和VEGF蛋白的相对表达量进行检测,运用免疫组织化学法对vasohibin在胎盘组织中进行定位测定.结果 正常对照组和重度子痫前期组胎盘vasohibin蛋白的相对表达量分别为0.91±0.12和0.58±0.09,VEGF蛋白的相对表达量分别为0.65±0.20和0.24±0.13,两组比较vasohibin及VEGF的表达差异均具有统计学意义(P<0.05),且二者具有正相关关系(r=0.262,P<0.05);vasohibin选择性表达于胎盘血管内皮细胞,未见合体滋养细胞、细胞滋养细胞和绒毛间质细胞等其他细胞组分有vasohibin阳性表达.结论 重度子痫前期患者胎盘组织vasohibin及VEGF的表达降低可能与重度子痫前期的发生有关.     

TGFβ1，Bcl-2与妊娠期高血压疾病胎盘细胞凋亡的关系

目的:研究妊娠期高血压疾病患者胎盘组织的细胞凋亡以及TGFβ1和Bcl-2与细胞凋亡的关系,进一步探讨妊娠期高血压疾病发病机制.方法:收集妊娠期高血压疾病患者胎盘组织45例(15例妊娠期高血压,15例子痫前期轻度,15例子痫前期重度)和正常孕妇对照组45例.应用免疫组织化学染色法(SP法)检测胎盘绒毛滋养层TGFβ1和Bcl-2蛋白的表达;应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL法)检测胎盘绒毛组织中滋养层细胞凋亡情况,并测定凋亡率.结果:妊娠期高血压疾病组较对照组胎盘绒毛组织中滋养层细胞凋亡率及TGFβ1表达明显增高,而Bcl-2表达明显减低(均P＜0.01).随病情加重,妊娠期高血压组、子痫前期轻度组、子痫前期重度组细胞凋亡率及TGFβ1表达呈上升趋势,Bcl-2表达呈下降趋势(均P＜0.01).子痫前期重度组、子痫前期轻度组胎盘绒毛细胞凋亡发生率与TGFβ1呈正相关;与Bcl-2表达呈负相关(均P＜0.05).子痫前期重度组、子痫前期轻度组TGFβ1与Bcl-2表达呈负相关(均P＜0.05).结论:妊娠期高血压疾病胎盘细胞凋亡率明显增高,TGFβ1在滋养层细胞表达增高,Bcl-2在滋养层细胞表达降低,TGFβ1和Bcl-2平衡失调可能导致妊娠期高血压疾病的发生.     

吲哚胺2,3-双加氧酶在子痫前期病人胎盘组织表达

目的探讨吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)在胎盘组织表达与子痫前期发病的关系。方法采用免疫组化法分别检测30例轻度子痫前期病人、30例重度子痫前期病人和38例正常晚孕妇女胎盘组织IDO蛋白表达,并采用Motic Med 6.0数码医学图像分析系统分析各组图片IDO阳性细胞的平均吸光度值;RT-PCR法检测各组孕产妇胎盘组织IDO mRNA的表达水平;彩色超声多普勒检测各组孕妇胎儿脐动脉血流阻力指数(RI),并分别测量各组新生儿出生体质量。结果各组孕产妇胎盘组织均有IDO蛋白表达,且主要表达于胎盘合体滋养细胞的胞质中,胎盘间质细胞及血管内皮细胞胞质中也可见少量表达。轻度子痫前期组及重度子痫前期组孕产妇胎盘组织IDO阳性细胞平均吸光度明显高于正常晚孕组,差异有显著性(F=462.895,q=3.474、11.002,P<0.01);重度子痫前期组高于轻度子痫前期组,差异有统计学意义(q=22.491,P<0.01)。轻度及重度子痫前期组胎盘组织IDOmRNA表达水平较正常晚孕组显著降低,差异均有统计学意义(F=90.032,q=8.457、16.913,P<0.01);且重度子痫前期组胎盘组织IDO mRNA表达水平明显低于轻度子痫前期组,差异有统计学意义(q=8.000,P<0.01)。子痫前期组孕产妇胎盘组织IDO mRNA表达水平与其胎儿脐动脉RI呈负相关(r=-0.445,P<0.01),与其新生儿出生体质量呈正相关(r=0.449,P<0.01)。结论子痫前期病人胎盘组织IDO表达下降可能是子痫前期发病的原因之一。     

子痫前期患者胎盘组织中内皮分化基因2的表达

目的:探讨子痫前期患者胎盘组织中内皮分化基因(Edg)2蛋白和mRNA的表达及意义。方法:应用免疫组化SP和RT-PCR方法检测20例正常晚孕妇女、20例子痫前期轻度和20例子痫前期重度患者胎盘组织中Edg2蛋白和mRNA的表达。结果:3组胎盘绒毛滋养和蜕膜细胞中Edg2蛋白以及胎盘组织Edg2mRNA的表达差异有统计学意义(F/χ2=19.063、19.063和2232.999,P<0.001),子痫前期轻度和重度组高于正常晚孕组,子痫前期重度组高于子痫前期轻度组。结论:胎盘组织中Edg2的异常表达可能与子痫前期的发生和发展有关。     

子痫前期患者胎盘组织中细胞间黏附分子1的表达

目的:检测子痫前期患者和正常孕妇胎盘组织中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达水平,探讨其在子痫前期发病机制中的作用.方法:采用免疫组化PV-9000法检测50例子痫前期患者(其中轻度子痫前期20例,重度子痫前期30例)和30例正常孕妇子宫胎盘绒毛合体滋养细胞ICAM-1的表达情况.结果:重度子痫前期患者胎盘绒毛合体滋养细胞ICAM-1的表达明显高于正常孕妇组和轻度子痫前期组(P＜0.05),轻度子痫前期组与正常孕妇组ICAM-1的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论:重度子痫前期患者胎盘绒毛合体滋养细胞ICAM-1的表达增强,可能通过引起母胎界面炎症反应而参与子痫前期的发病.     

STAT4、STAT6在子痫前期胎盘组织中的表达及意义

目的:探讨子痫前期患者胎盘组织中信号转导和转录激活因子(STAT)4以及STAT6的表达及意义.方法:采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SABC)法和Western blot法检测30名正常妊娠晚期孕妇(对照组)和50例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度22例、重度28例)胎盘组织中STAT4、STAT6的蛋白定位和表达.结果:STAT4主要表达于绒毛滋养细胞的胞质,胞核多数无明显着色;轻、重度子痫前期组胎盘组织中STAT4的表达均明显高于对照组(P<0.01);STAT6主要表达于绒毛滋养细胞的胞质,胞核多数无明显着色;轻度、重度子痫前期组均显著低于对照组(P<0.01),且轻、重度子痫前期组STAT4和STAT6表达水平差异均有统计学意义(P<0.01).子痫前期组和正常妊娠组绒毛组织中STAT4与STAT6的表达水平均呈负相关关系(r=-0.509,r=-0.617;P<0.01).结论:STAT4、STAT6共同参与子痫前期的病理生理改变,并与病情严重程度有一定关系.     

重度子痫前期胎盘滋养细胞中Fas/FasL及血管内皮生长因子的表达

目的:检测重度子痫前期患者胎盘滋养细胞中单克隆抗体Fas、Fas的配体(FasL)及胎盘血管内皮生长因子(VEGF)的表达.方法:采用免疫组织化学,过氧化物酶标记的链霉素抗生物素-过氧化酶连接法(SP法)检测24例正常晚期妊娠妇女(对照组)及24例重度子痫前期患者(重度子痫前期组)胎盘组织中Fas、FasL及VEGF表达强度.结果:Fas、FasL及VEGF主要表达于胎盘绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞的胞质及胞膜内.与对照组比较,FasL、VEGF在重度子痫前期组中的表达显著降低(t=71.84,t=130.23,P＜0.01);而Fas在重度子痫前期组中的表达水平显著增加(t=118.8,P＜0.01).Fas、FasL及VEGF在重度子痫前期组胎盘的表达与新生儿出生体质量、胎盘质量均有明显相关性.结论:Fas、FasL及VEGF在重度子痫前期组胎盘滋养细胞表达失衡,使母-胎免疫耐受机制遭到破坏,引发胎盘绒毛发育不全、功能下降等一系列免疫病理改变,可能与重度子痫前期的病因及病理过程有关.     

VEGF蛋白在子痫前期胎盘中的表达及意义

目的：检测子痫前期胎盘的VEGF蛋白表达水平,探讨子痫前期的发病机制。方法：采用免疫组织化学方法结合病理图像分析技术,定量分析10例正常妊娠组、17例轻度子痫前期组和13例重度子痫前期组胎盘VEGF蛋白表达。结果：VEGF蛋白主要表达与胎盘绒毛滋养细胞的胞膜及胞浆内。与正常妊娠组比较,子痫前期组胎盘VEGF蛋白表达显著减少,轻度、重度子痫前期组比较,有显著性差异。结论：子痫前期患者胎盘滋养层细胞VEGF蛋白表达减少可能是子痫前期的发病机制之一,从而为临床治疗子痫前期提供新的方向。     

血管紧张素转换酶在子痫前期胎盘组织中的表达及活性变化

目的:探讨血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)在子痫前期发病机制中的作用.方法:原位杂交法检测30例子痫前期产妇(子痫前期轻度15例,重度15例)和12例正常产妇胎盘组织ACE mRNA的表达及分布;紫外分光光度法测定胎盘局部以及外周静脉血ACE活性.结果:ACE mRNA在各组产妇胎盘绒毛血管内皮细胞、滋养细胞中均可见表达.子痫前期组(3.12±0.94)明显高于对照组(1.65±0.67)(P＜0.05);子痫前期重度组和子痫前期轻度组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).子痫前期组胎盘组织及外周静脉血ACE活性明显高于对照组(P＜0.05),子痫前期重度组和子痫前期轻度组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).胎盘局部ACE活性与外周静脉血ACE活性呈正相关(r=0.781,P＜0.05).结论:胎盘局部ACE的表达及活性增高与子痫前期发病及病情发展密切相关.     

HLA-G在子痫前期患者胎盘中的表达及意义

目的 探讨人类白细胞抗原G(HLA-G)在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义.方法 收集重度子痫前期患者(试验组)和正常妊娠者(对照组)胎盘各20例,采用实时荧光定量PCR检测两组胎盘组织中HLA-G的表达水平,并观察两组胎盘的病理变化.结果 子痫前期患者胎盘组织中HLA-G基因表达水平低于正常妊娠组,两组差异有显著性(P=0.008);子痫前期组与正常妊娠组孕妇相比,胎盘绒毛间质血管数及绒毛数平均值减少,合体滋养细胞结节增多,绒毛间质纤维化及纤维索样坏死显著增多,细胞滋养细胞明显增生,干绒毛小动脉管腔直径变小;相关分析显示,HLA-G表达强度与胎盘绒毛血管密度呈正相关(P=0.000,R =0.900).结论 子痫前期患者胎盘HLA-G的表达明显下降,且与胎盘病理改变呈正相关,提示HLA-G可能与子痫前期的病理生理过程密切相关.     

HLA-G、Wnt5 a和 β-catenin蛋白在重度子痫前期胎盘组织中的表达及临床意义

目的:探究人类白细胞抗原G(HLA-G)、Wnt5a和β-catenin蛋白在重度子痫前期胎盘组织中的表达水平及临床意义.方法:80例重度子痫前期患者作为研究组,80名正常妊娠孕妇作为对照组.比较两组孕妇入院平均动脉压、24 h尿蛋白、胎儿出生体重等临床特征.Western blot和免疫组织化学法检测母体胎盘组织中HLA-G、Wnt5a蛋白、β-catenin蛋白的表达及定位情况.分析孕妇胎盘组织HLA-G、Wnt5a蛋白、β-catenin蛋白之间的关系及与患者临床特征的相关性.结果:研究组孕妇入院平均动脉压和尿蛋白水平均高于对照组(P<0.05).免疫组化发现HLA-G、Wnt5a、β-catenin蛋白在两组胎盘组织中均有表达,HLA-G和β-catenin蛋白主要定位于细胞滋养细胞的细胞质,Wnt5a蛋白主要定位于合体滋养细胞的细胞质.Western blot和免疫组织化学法结果显示研究组胎盘组织中HLA-G、Wnt5a和β-catenin蛋白的相对表达水平低于对照组(P<0.05).HLA-G、Wnt5a和β-catenin蛋白表达均呈正相关(P<0.05).孕妇入院平均动脉压和尿蛋白水平与胎盘组织中HLA-G、Wnt5a、β-catenin蛋白表达均呈负相关(P<0.05).结论:重度子痫前期的发生和发展可能与孕妇胎盘组织中HLA-G、Wnt5a和β-catenin蛋白的低表达密切相关.     

子痫前期患者胎盘组织中纤溶酶原激活物抑制剂-1的表达

目的:研究子痫前期患者胎盘组织中纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的表达情况.方法:采用免疫组织化学染色方法和图像分析系统分别对20例正常孕妇和48例子痫前期患者(轻度18例,重度30例)胎盘组织中PAI-1的表达进行检测.结果:PAI-1主要表达于胎盘绒毛小叶的滋养细胞、绒毛间质细胞和血管内皮细胞的胞核和胞质,以及蜕膜细胞的胞质.轻度子痫前期患者胎盘组织中PAI-1的表达水平(74.97±6.78)高于正常孕妇组的(67.85±3.65),重度子痫前期患者胎盘组织中PAI-1的表达水平(88.12±4.37)高于轻度子痫前期者,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:胎盘组织中PAI-1表达升高可能参与了子痫前期的发病.     

重度子痫前期胎盘组织中缺氧诱导因子-1α和转化生长因子-β3的表达

目的 研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和转化生长因子-β3（TGF-β3）在重度子痫前期胎盘组织中的表达及意义。方法 采用免疫组化方法和图像分析系统分别对20例正常孕妇（正常组）和30例重度子痫前期患者（重度子痫前期组）胎盘组织中的HIF-1仅和TGF—B，的表达进行分析。结果 ①HIF-1α主要表达于胎盘绒毛滋养细胞和蜕膜细胞,与正常组胎盘组织（68±6）比较，重度子痫前期组HIF-1仅的平均光密度（86±6）显著升高（P〈0.05）。②TGF—B，主要表达于胎盘绒毛滋养细胞和蜕膜细胞，与正常组胎盘组织（66±4）比较，重度子痫前期组TGF一艮的平均光密度（81±6）显著升高。③重度子痫前期组HIF-1α和TGF-β3的表达呈正相关性（r=0．501，P〈0．05）。结论 胎盘滋养细胞HIF-1仅和TGF—B，表达升高可能与重度子痫前期的发病有关。     

子痫前期患者胎盘组织中VCAM—1和E—Selectin表达的研究

目的探讨子痫前期患者胎盘组织中VCAM-1和E-selectin的表达。方法用免疫组化法对20例正常孕妇(对照组)和40例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度16例、重度24例)的胎盘组织进行VCAM-1和E-Selectin定位,并用计算机图像分析系统进行定量分析比较。结果①子痫前期组与对照组比较,VCAM-1和E-Selectin在胎盘绒毛合体滋养细胞的表达,子痫前期组明显低于对照组,两组差异有统计学意义(P<0.05),VCAM-1和E-Selectin在轻度、重度子痫前期患者间的表达差异无统计学意义(P>0.05);②E-Selectin在胎盘绒毛毛细血管内皮细胞的表达子痫前期组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),轻度、重度子痫前期间差异无统计学意义(P>0.05)。结论VCAM-1和E-Selectin可能参与了子痫前期的发病过程。     

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶-1和缺氧在子痫前期发病作用的研究

目的：研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶-1（serum and glucocorticoids-inducible kinase-1,SGK1）在子痫前期胎盘组织中的分布和表达,以及缺氧对胎盘滋养细胞SGK1表达的影响。方法：选择2012年12月至2013年11月在重庆医科大学附属第二医院剖宫产分娩的50例子痫前期孕妇为研究对象,其中子痫前期轻度组25例,子痫前期重度组25例,以同期行择期性剖宫产术的25例正常孕妇为对照组。免疫组化检测SGK1在胎盘组织的分布及表达,Western blot检测SGK1在胎盘组织蛋白水平的表达。在常氧条件下（21% O2、5% CO2）和缺氧条件下（1% O2、5% CO2）培养HTR-8/SVneo滋养层细胞,Western blot检测SGK1蛋白的表达。结果：免疫组化结果表明子痫前期轻度组、重度组SGK1的蛋白表达量均较对照组明显增加（P=0.000）,子痫前期重度组SGK1的蛋白表达量较子痫前期轻度组明显增加（P=0.028）。Western blot结果表明子痫前期轻度组、重度组SGK1的蛋白表达量均较对照组明显增加（P=0.000）,子痫前期重度组SGK1的蛋白表达量较子痫前期轻度组明显增加（P=0.000）。Masson染色结果显示子痫前期轻度组、重度组的纤维化率均较对照组明显增加（P=0.000）,子痫前期重度组纤维化率较子痫前期轻度组明显增加（P=0.000）。细胞实验部分：Western blot结果表明缺氧组SGK1的蛋白表达量较常氧组明显增加（P=0.000）;缺氧组CTGF的蛋白表达量较常氧组明显增加（P=0.001）。Masson染色结果显示缺氧组纤维化率较常氧组明显增加（P=0.000）。结论：SGK1在子痫前期胎盘组织表达明显升高,提示SGK1可能在子痫前期的发病中发挥重要作用,缺氧通过刺激SGK1表达升高,参与子痫前期的发生。     

TGF-β1及TGF-β3在妊娠期高血压疾病中的作用

目的探讨转化生长因子-β1,β3(TGF-β1,TGF-β3)在妊娠期高血压疾病发生和发展中的作用。方法60例为妊娠期高血压疾病患者(妊娠期高血压患者20例,轻度子痫前期患者20例,重度子痫前期患者20例),采用免疫组织化学方法检测分娩后胎盘滋养细胞及蜕膜细胞TGF-β3和TGF-β1的表达,20例正常妊娠孕妇为对照组。取重度子痫前期患者剖宫产后分娩胎盘绒毛体外培养24h,然后分别收集培养后1,4,12,24h上清液,采用ELISA法检测胎盘滋养细胞TGF-β1和TGF-β3的分泌。结果妊娠期高血压疾病组绒毛滋养层细胞和蜕膜细胞TGF-β3阳性表达率和表达程度明显高于对照组,TGF-β1阳性表达率和表达程度明显高于对照组,差异均有显著性(P<0.05)。重度子痫前期组分娩后胎盘绒毛体外培养24h后,于1,4,12,24h分别收集上清液中TGF-β1和TGF-β3的分泌均显著高于正常孕妇组,差异有显著性(P<0.05)。结论妊娠期高血压疾病患者胎盘绒毛滋养层细胞的TGF-β3,TGF-β1表达异常在妊娠期高血压疾病的发生发展过程中起重要作用。     

HGF在妊娠子痫前期患者胎盘中的表达及临床意义

①目的探讨肝细胞生长因子（HGF）在正常妊娠妇女及妊娠期子痫前期患者胎盘组织中的表达及妊娠期子痫前期的发病过程中的作用。②方法选择同期不同程度子痫前期晚孕孕妇和正常妊娠晚孕孕妇作为研究组和对照组。正常晚孕组临产前行剖宫产的孕妇35例;轻度子痫前期晚孕期孕妇37例;重度子痫前期晚孕期孕妇34例。3组孕妇均为第一胎临产前行剖宫产手术结束分娩。胎盘娩出后30分钟内取胎盘母面中央绒毛组织块约1cm×1cm×1cm,避开钙化区及坏死区。留取胎盘组织。生理盐水充分清洗,10％中性福尔马林溶液固定24小时以上,常规石蜡包埋41,tm连续切片。免疫组织化学sP法检测胎盘组织中HGF的表达强度,根据细胞内染色强度和阳性细胞数分级。③结果妊娠期子痫前期患者胎盘组织中HGF定位与正常晚孕组相同。正常晚孕组孕妇胎盘组织中HGF表达阳性表达率为71．43％;轻度子痫前期患者胎盘组织中HGF阳性表达率为64．86％;重度子痫前期患者胎盘组织中HGF阳性表达率为35．29％。正常晚孕组和子痫前期组胎盘组织中HGF表达有明显差异（P〈0．05）。轻度子痫前期组HGF表达与对照组比较无明显差异（P〉0．05）,重度子痫前期组HGF表达与对照组比较有显著差异（P〈0．01）,而轻度子痫前期组与重度子痫前期组HGF表达比较也有显著差异（P〈0．05）。④结论HGF在胎盘组织中主由绒毛问质细胞分泌,子痫前期病情严重程度和该因子的表达呈负相关。     

胎盘组织KiSS-1 mRNA及其蛋白肽metastin表达在子癎前期发病中的意义

目的:探讨胎盘组织中KiSS-1mRNA及其蛋白肽metastin表达在早发重度子癎前期发病中的作用。方法:采用RT-PCR、Western blot、免疫组化方法检测57例子癎前期患者(轻度15例和重度42例,其中早发重度12例,晚发重度30例)和30例正常晚期妊娠者胎盘组织中KiSS-1mRNA及其蛋白肽metastin的表达水平和定位。结果:胎盘组织中蛋白肽metastin主要表达在绒毛的合体滋养细胞和细胞滋养细胞。子癎前期组胎盘组织中KiSS-1mRNA及蛋白肽metastin表达分别为(1.73±0.24)和(78.41±7.96)μg/100μg总蛋白,显著高于正常晚期妊娠组(P均<0.01),以早发重度子癎前期组尤为显著。结论:子癎前期存在KiSS-1mRNA及其蛋白肽metastin表达增强,且早发重度子癎前期组表达显著增高,可能是早发重度子癎前期发病的主要原因之一。