丹参麦冬煎剂对过氧化氢所致血管内皮细胞凋亡保护机制的研究

目的研究丹参与麦冬的水提浓缩液1部位（MD-1）对过氧化氢H2O2损伤人脐静脉血管内皮细胞株HUVEC凋亡的保护作用及机制。方at体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,以H2O2行内皮细胞凋亡造模后,再加入不同浓度的MD—1作用24h。用M1rr法检测细胞生长活力,流式细胞仪检测凋亡率,Westem Blot检测抗凋亡Bcl-2蛋白含量变化。结果H2O2造模后,细胞增殖明显受抑,流式细胞检测出明显凋亡峰,Bcl-2的表达量有明显的下降,而加药组的Bcl-2表达量一定程度回升与正常组相比P〈0．01,具有明显的统计学意义。结论丹参与麦冬的丹参与麦冬的水提浓缩液MD-1保护内皮细胞,抗内皮细胞凋亡。     

复方薤白胶囊抗内皮细胞凋亡与信号转导通路的研究

目的 研究复方薤白胶囊提取液对过氧化氢(H2O2)诱导的凋亡内皮细胞的保护作用,及对凋亡相关基因及信号转导通路的影响,来探讨其作用的分子机制.方法 以过氧化氢(H2O2)行人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡造模,分别以不同浓度复方薤白胶囊提取液作用,运用MTT法检测细胞增殖情况、流式细胞检测凋亡率、Western Blot检测抗凋亡基因Bcl-2含量变化、罗丹明123(Rh123)染色检测线粒体膜电位、免疫组织化学检测信号转导通路NF-κB、Caspase-3的表达.结果 复方薤白胶囊组可明显促进HUVEC的增殖,减少内皮细胞凋亡,增加Bcl-2基因、线粒体跨膜电位的表达,下调NF-κB、Caspase-3的表达.结论 复方薤白胶囊可通过多条信号转导路径,促进Bcl-2基因的表达,抗内皮细胞凋亡.     

丹参素对H2O2诱导的内皮细胞氧化损伤的保护作用研究

目的:探讨丹参素对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用。方法:采用MTT法测定丹参素对正常和H2O2损伤HUVEC活性的影响,筛选出最低有效剂量,并确定丹参素保护HU-VEC氧化损伤的浓度。通过活体探针标记、流式细胞术定量分析丹参素对损伤HUVEC细胞内活性氧(ROS)和线粒体膜电位的影响。结果:丹参素对正常HUVEC的活性无影响;而丹参素(25、50、250μmol/L)能显著降低H2O2诱导的HUVEC活性,具有一定的剂量依赖性,细胞活性分别为H2O2损伤组的120.72%、177.48%和736.48%(P<0.01)。丹参素可明显降低H2O2诱导的HUVEC内ROS水平(P<0.01)和提高线粒体膜电位(P<0.05,P<0.01)。结论:丹参素对H2O2诱导HUVEC损伤的保护作用可能是通过抑制细胞内ROS产生、减少线粒体膜损伤而发挥抗氧化作用。     

大蒜素对人脐静脉细胞抗氧化损伤保护作用

目的：研究大蒜素（Allicin）对过氧化氢（H2O2）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）凋亡的保护作用及其作用机理。方法建立H2O2诱导HUVEC细胞的氧化应激凋亡模型;采用MTT、RT-PCR、Western-blot等方法检测来探究大蒜素对其保护作用与可能作用机制。结果大蒜素能够减少H2O2诱导HUVEC的凋亡;使基因eNOS的表达显著增加;使凋亡相关PARP蛋白切割减弱、前体Caspase-3蛋白表达增加,Bax蛋白表达减弱。结论大蒜素对H2O2诱导HUVEC凋亡具有较好的保护作用,对氧化应激状态下的HUVEC细胞起保护作用。     

银杏二萜内酯对缺氧处理人脐静脉内皮细胞凋亡和血管生成的影响及机制

目的 探讨银杏二萜内酯对缺氧处理的人血管内皮细胞株凋亡和血管生成的影响及分子机制。方法 在低氧状态下培养人血管内皮细胞株HUVEC 24 h,然后分别以低剂量(6.25mg/L)、高剂量(25.00 mg/L)银杏二萜内酯对HUVEC 进行处理。MTT法检测细胞活性情况;流式细胞术(FCM)检测各组细胞的凋亡情况;Transwell小室实验检测细胞的迁移能力;荧光实时定量RT-PCR(qPCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、P53、Bcl-2、Bax、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β(TGF-β)的mRNA和蛋白表达。结果 低氧培养后HUVEC细胞的活性明显低于正常氧培养组(P<0.05);低氧培养的HUVEC细胞凋亡率明显高于正常氧培养组,HIF-1α表达明显高于正常氧培养组(P<0.05)。银杏二萜内酯处理组的细胞活性明显高于对照组(低氧处理组),高剂量组的细胞活性高于低剂量组(P<0.05)。银杏二萜内酯处理组的细胞凋亡率明显低于对照组(低氧处理组),高剂量组的凋亡率低于低剂量组(P<0.05)。银杏二萜内酯处理组的细胞迁移能力明显高于对照组(低氧处理组),高剂量组的迁移能力高于低剂量组(P<0.05)。qPCR和Western blot结果显示,银杏二萜内酯处理组的细胞HIF-1α、Bax的mRNA和蛋白表达低于对照组,Bcl-2、VEGF、TGF-β的mRNA和蛋白表达高于对照组;高剂量组上述各基因表达变化程度比低剂量组更为明显(P<0.05)。结论 银杏二萜内酯能通过调控相关基因表达而改善缺氧处理的HUVEC细胞的凋亡及血管生成情况,可能成为治疗缺氧性血管疾病的新型药物。     

血管内皮细胞来源外泌体miR-214对H2O2诱导血管内皮细胞损伤的影响

探讨血管内皮细胞来源外泌体miR-214对过氧化氢(H2O2)诱导的血管内皮细胞损伤的影响。方法 体外培养人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）,并转染miR-214抑制物（in-miR-214）及其阴性对照（in-miR-NC）,分离并鉴定外泌体,同时检测miR-214表达。再次培养HUVEC,分为正常对照组（Control组）、氧化损伤组（H2O2组）、空白外泌体+氧化损伤组（exo NC+H2O2组）、in-miR-NC外泌体+氧化损伤组（exo in-miR-NC+H2O2组）和in-miR-214外泌体+氧化损伤组（exo in-miR-214+H2O2组）。qRT-PCR检测细胞中miR-214表达水平;MTT和流式细胞术检测细胞增殖、凋亡;划痕愈合实验检测细胞迁移;Western blot检测细胞增殖、凋亡、迁移相关蛋白水平。结果 成功从HUVEC 细胞中分离出外泌体,且转染in-miR-214可抑制外泌体中miR-214表达（P＜0.05）。H2O2诱导后,HUVEC细胞增殖活力和划痕愈合率降低,凋亡率增高;同时,细胞中miR-214表达水平增高,Cyclin D1、PCNA、Bcl2、MMP2和MMP9蛋白水平降低,Bax蛋白水平增高（P＜0.05）。添加HUVEC外泌体和外泌体来源的in-miR-214可部分削弱H2O2 对HUVEC细胞的损伤,且后者的效果要明显优于前者（P＜0.05）。结论 HUVEC来源外泌体通过低表达miR-214保护HUVEC免受H2O2诱导的细胞损伤     

Ghrelin抑制ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的机制

目的:研究ghrelin对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的抑制作用。方法:采用Ho-echst 33258荧光染色、Western blot法和硝酸还原酶法研究ghrelin对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的抑制作用。结果:Hoechst 33258染色荧光检测发现,与正常对照组相比,ox-LDL组HUVEC中出现大量凋亡细胞,凋亡率明显增加,与ox-LDL组比较,ghrelin预处理组HUVEC细胞凋亡率呈剂量依赖性下降;Western blot检测结果表明,与对照组比较,ox-LDL可上调内细胞中Caspase-3表达,而经过ghrelin预处理后能剂量依赖性降低Caspase-3蛋白表达;硝酸还原酶法结果显示,ox-LDL可显著减少内皮细胞培养液中NO含量,经过ghrelin预处理后,ghrelin能剂量依赖性增加NO含量。结论:ghrelin对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡有拮抗作用,可能与其抑制ox-LDL引起的细胞内Caspase-3蛋白水平升高及NO合成下降有关。     

泰山白花丹参对人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的研究泰山白花丹参对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株ECV304,在培养液中预先加入不同浓度(0、0.3、0.6、0.9g/L)的白花丹参制剂后,以0.001%过氧化氢诱导内皮细胞损伤,通过光镜观察细胞形态,以四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞存活数量,用流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡变化。结果血管内皮细胞受到氧化损伤后,细胞存活率明显降低,而预先加入白花丹参制剂可改善上述结果,它能抑制H2O2引起的血管内皮细胞减少,降低凋亡细胞比例。结论泰山白花丹参对内皮细胞氧化应激损伤有保护作用。     

丹酚酸B配伍丹皮酚对H_2O_2诱导的人脐静脉内皮细胞氧化损伤模型Bcl-2、Bax、caspase-3 mRNA及蛋白表达的影响

目的探讨丹酚酸B配伍丹皮酚对过氧化氢（H2O2）诱导的人脐静脉内皮细胞氧化损伤模型Bcl-2、Bax、caspase-3 mRNA及蛋白表达的影响。方法采用H2O2造成人脐静脉内皮细胞氧化损伤模型,利用SYBR GreenRT-PCR方法检测药物作用内皮细胞后凋亡相关基因Bcl-2、Bax、caspase-3 mRNA的表达变化,Western blot法检测内皮细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3的表达。结果丹酚酸B配伍丹皮酚能够使损伤内皮细胞中Bcl-2基因mRNA水平上升,而Bax、caspase-3基因的表达降低,与Western blot方法检测蛋白含量的结果较为一致,且数据比较差异有高度统计学意义（P〈0.01）。结论丹酚酸B配伍丹皮酚是通过调节Bcl-2、Bax基因及蛋白的表达,抑制下游分子caspase-3的活化而起到保护血管内皮细胞的作用。     

蜕皮甾酮对同型半胱氨酸诱导人血管内皮细胞凋亡的影响

目的 探讨蜕皮甾酮对同型半胱氨酸(Hcy)诱导人脐静脉内皮细胞株CRL-1730凋亡的影响.方法 体外常规培养人血管内皮细胞CRL-1730,细胞计数试剂盒法检测蜕皮甾酮对CRL-1730细胞增殖活力的影响;Hcy处理人血管内皮细胞CRL-1730建立损伤模型,分组为空白对照组、蜕皮甾酮高剂量组(Hcy+1.5μmol/L蜕皮甾酮)、蜕皮甾酮中剂量组(Hcy+1.0μmol/L蜕皮甾酮)、蜕皮甾酮低剂量组(Hcy+0.5μmol/L蜕皮甾酮)、Hcy组;流式细胞术检测CRL-1730细胞凋亡率,并利用荧光染色进行细胞凋亡形态学观察;RT-PCR法检测CRL-1730细胞内Bax、Bcl-2及Caspase-3基因的表达;采用Western blot法检测CRL-1730细胞内Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3蛋白表达.结果 所选浓度蜕皮甾酮对CRL-1730细胞增殖活性无明显影响;流式细胞术结果显示经Hcy处理后的CRL-1730细胞凋亡率明显增高,但经过不同浓度的蜕皮甾酮处理后,Hcy诱导的CRL-1730细胞凋亡率明显下降;与空白对照组比较,Hcy组CRL-1730细胞Bax和cleaved-Caspase-3的表达明显增高,Bcl-2的表达明显降低,差异有统计学意义.与Hcy组比较,经过低、中、高剂量蜕皮甾酮处理后,Hcy诱导的CRL-1730细胞Bcl-2表达上调,Bax和cleaved-Caspase-3表达下调;与空白对照组比较,Hcy组CRL-1730细胞Bax mRNA和Caspase-3 mRNA的表达明显增高,Bcl-2 mRNA的表达明显降低,差异有统计学意义.与Hcy比较,经过低、中、高剂量蜕皮甾酮处理后,CRL-1730细胞Bcl-2 mRNA表达上调,Bax mRNA和Caspase-3 mRNA表达下调.结论 蜕皮甾酮对Hcy诱导人脐静脉内皮细胞CRL-1730凋亡具有保护作用,这为其治疗心血管疾病提供了依据.     

改良R.E.N.A.L.肾肿瘤评分系统的临床应用价值

目的 探讨改良R.E.N.A.L.肾肿瘤评分系统的临床应用价值.方法 回顾性分析2009年10月至2014年12月海南省人民医院泌尿外科收治的122例肾肿瘤患者的影像学资料和手术方案.依据术前CT,由二位泌尿外科医师按改良系统标准独立评分,其中1例在两周后再次评分.验证系统在同一观察者及不同观察者中的稳定性,并分析改良系统与手术方案选择的关系.结果 同一观察者对直径、外凸率、与肾窦距离、与集合系统距离、纵向位置、侧别、肾动脉数、侵犯肾蒂血管与否、改良系统复杂度一致性的Kappa值分别为0.876、0.541、0.633、0.680、0.812、0.560、0.757、0.827、0.772.不同观察者一致性的Kendall值分别为0.886、0.537、0.430、0.449、0.772、0.202、0.440、0.731、0.681.122例肾肿瘤患者中28例行开放性肾切除术、51例腹腔镜肾切除术、4例行开放性部分切除术、39例行腹腔镜部分切除术,改良系统与术式选择显著相关(P<0.05).结论 改良R.E.N.A.L.评分系统具有较好的稳定性,并能指导肾肿瘤手术方式的选择.     

珠子参地下及地上部分的显微鉴别研究

目的：通过对珠子参地上部分及地下部分的显微鉴别研究，为珠子参及其同属植物的鉴别提供依据。方法：采用显微鉴别方法对其地下及地上部分作了系统的研究，分别对地下部分的节和节间横切面、粉末，地上部分的茎、叶横切面、粉末及叶片的上下表面观等显微特征进行了描述。结果：详细描述了珠子参各部分的显微特征。结论：本研究不仅提高和完善了珠子参地下部分的显微研究，而且为珠子参地上部分的质量标准研究、开发利用、扩大药用资源提供了理论依据。     

冷水七醇提物的体外抗菌活性研究

目的 检测冷水七醇提物的体外抗菌活性,探讨其治疗细菌性肠炎痢疾的机制.方法 采用纸片琼脂扩散法测定冷水七醇提物的体外抗菌活性.结果 冷水七醇提物对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、痢疾志贺菌无抑制活性,对白假丝酵母菌具有一定的抗菌活性.结论 冷水七醇提物用于治疗细菌性肠炎痢疾并非通过体外抑制供试菌的机制.     

CT三维重建改良R.E.N.A.L.评分系统在50例腹腔镜肾部分切除术中的应用

目的 探讨基于CT三维重建技术改良R.E.N.A.L.评分系统在腹腔镜肾部分切除术中的应用价值。 方法 选取山东大学附属山东省立医院泌尿外科2018年9月至2019年11月间进行的T1期肾细胞癌腹腔镜肾部分切除术50例,所有纳入患者术前均行CT三维重建,并分别按照传统R.E.N.A.L.评分系统以及CT三维重建改良R.E.N.A.L评分系统进行术前评分,结果与手术实际难度进行比较,并利用 Spearman秩相关分析改良R.E.N.A.L.评分系统与患者手术时间、住院天数、术中热缺血时间(WIT)、术后血红蛋白下降、术后血肌酐及术后血尿素氮水平之间的相关性。 结果 CT三维重建改良R.E.N.A.L评分与患者的手术时间、WIT以及术后血红蛋白下降程度之间呈正相关(r_s分别为0.570、0.802、0.903,P<0.001),并且改良R.E.N.A.L评分系统的灵敏度、特异度以及约登指数均明显优于传统R.E.N.A.L.评分系统。 结论 CT三维重建改良R.E.N.A.L.评分系统对患者的手术难度的评估较传统R.E.N.A.L.评分系统更加准确,同时对患者围手术期指标有预测作用。     

S.T.A.B.L.E项目在危重新生儿转运中应用的效果分析

目的探究S.T.A.B.L.E项目在危重新生儿转运中应用的效果。方法我院与本地区17家医院建立危重新生儿转运网络,自2012年7月至2013年7月共转运危重新生儿300例,按转运先后顺序排号,采用随机数字表随机分为实验组和对照组各150例,对实验组在转运过程应用S.T.A.B.L.E项目,并对新生儿进行为期一年的跟踪监测,对照组实施常规救护。治疗结束后,检测治疗前后新生儿的死亡率及危重新生儿的概率,及血糖、体温、呼吸、血压、血气分析结果检测指标。结果 1治疗后两组患儿死亡率和危重新生儿的概率均有所下降,实验组仅有12%仍处于危重,对照组有近43%的患儿处于危重,实验组脱离危重的患儿明显高于对照组,且实验组死亡率下降明显并高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2治疗后两组患儿各临床指标均有所改变并接近正常,且实验组血糖、体温、呼吸、血压、血气分析结果指标改善明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 S.T.A.B.L.E项目能够有效降低新生儿病死率、减少伤残对临床具有指导意义,值得临床推广。     

当代美国博士生教育存在的问题

通过对美国当代博士教育所处时代背景的分析,简要地论述了其博士教育存在的一些问题。     

高压氧配合中西药治疗慢性疲劳综合征

高压氧医学是一门新兴的临床学科,在现代医学中起着重要的作用。笔者近年来应用高压氧配合中、西药治疗慢性疲劳综合征（ＣＦＳ）,取得了很好的疗效,现报告如下。１　临床资料 选择１９９８年４月～１９９９年８月急症、门诊观察的ＣＦＳ患者３２例,男１４例,女１８例;年龄２８～５２岁,平均４０．２岁;病程９个月～３年,平均１８．５个月。诊断标准符合美国疾病控制中心（ＣＤＣ）的标准［１］。２治疗方法２．１高压氧治疗　采用０．２５Ｍｐａ压力,吸氧６０ ｍｉｎ,每日治疗１次,１０次为１个疗程。一般治疗不少于２个疗程。…     

羽叶三七植物性状及生长动态分析

目的：对移植的羽叶三七植物性状生长发育进行动态分析,掌握其生物学特性,应用于规范化种植生产。方法：记录两个植物生长周期各个时期生长数据,进行植物各器官生长情况的分析。结果：表明株高、主茎粗、叶柄长、叶片宽呈上升抛物线,以二年期的最高,在7月10日～20日达到最大,其后动态曲线趋于稳定;叶片数、分蘖数无明显变化。结论：移栽一年期株高的表型多样性丰富,二年期变异幅度高。     

雌激素与钙制剂对绝经后妇女骨代谢的影响

目的：观察雌激素与钙制剂对绝经后妇女骨代谢的影响。方法：６０例绝经后妇女随机分２组,Ａ组３０例,加钙剂（４５０ｍｇ／ｄ）的同时口服尼尔雌醇（ＣＤＥ３）２ｍｇ／２周,Ｂ组３０例,单纯用钙剂（４５０ｍｇ／ｄ）。结果：１年后,Ａ组,桡骨远端骨密度增加１．１％,血清骨钙素下降（Ｐ〈０．０１）,尿钙肌酐比值下降（Ｐ〉０．０５）,Ｂ组,桡骨远端骨密度下降３．３％,血清骨钙素下降（Ｐ〈０．０５）。结论：雌激素仍     

泰山白花丹参不同部位微量元素的分析比较

目的分析比较泰山白花丹参不同部位微量元素含量。方法用电感耦合等离子发射光谱仪分别测定泰山白花丹参根、茎、叶、花四个部位16种微量元素的含量，对不同部位微量元素含量进行分析比较。结果白花丹参根中镁元素含量最高，其次为铜和钡；茎中只有铬元素含量略高于根，其他测定的16种微量矿质元素含量均低于其他三个部位；叶中锌、铬、硼、锶4种元素含量略高于其他三个部位；而花中镍、铁、钛等微量元素含量显著高于根、茎、叶三个部位。另外，花中的锰、钒、锡、铅、镉、锂等6种微量元素含量也均高于其他三个部位。结论从微量元素角度分析，白花丹参的花也具有一定的药用价值。