热加工暗纹东方鲀肌肉中呈味肽分离鉴定及呈味特性研究

为明确养殖暗纹东方鲀煮制时关键呈味肽的结构序列,本文对热加工暗纹东方鲀肌肉中呈味肽进行分离鉴定并对其呈味特性进行研究。热加工暗纹东方鲀肌肉水提物经超滤(3 ku)、纳滤(200 u)及Sephadex G-15凝胶过滤色谱分离得到4个多肽组分(F1、F2、F3和F4),感官评价结合电子舌分析筛选出滋味特性最强组分F2。利用半制备RP-HPLC对F2组分进一步分离得到3个组分(F2-1、F2-2和F2-3),电子舌评价F2-1组分鲜味较强。对组分F2-1中呈味肽的氨基酸序列采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF MS/MS)进行测定,得到了两种新的呈味五肽和六肽结构:Cys-Ala-Leu-Thr-Pro(CA,503.9253 u)及Arg-Pro-Leu-Gly-Asn-Cys(RP,659.7747 u),2条肽链中均含有的亲水性Cys残基,可能是造成肽具有浓厚感和鲜味的关键。两个肽段经固相合成后测定其呈味特性,肽段RP具有较强鲜味,且肽段RP还与氯化钠和谷氨酸钠具有滋味协同作用,可增强鲜味强度。     

结合感官评价与电子舌技术优化酶水解养殖暗纹东方鲀肌肉制备呈味肽

国内外关于河豚滋味的研究主要集中在游离氨基酸、无机离子、核苷酸及其关联物上,而对构成其鲜美浓郁和圆润香滑味感的呈味肽研究较少。因此应用酶生物技术挖掘滋味特性突出的暗纹东方鲀肌肉呈味肽,并应用于食品中具有重要的研究意义与潜在的经济价值。以养殖暗纹东方鲀肌肉为原料,采用中性蛋白酶、风味蛋白酶、水解蛋白酶及复合蛋白酶制备呈味肽,以水解度、寡肽含量和电子舌结合感官评价的方法筛选不同酶解条件下的最优酶制剂。结果表明:风味蛋白酶酶解液水解度最大而水解蛋白酶酶解液寡肽含量最高;电子舌能够明确区分出不同蛋白酶酶解液;电子舌分析结果与感官评价结果存在一定的相关性,但电子舌提供的鲜味、咸味和酸味相对强度与感官评定的结果存在一定的差异。最终确定中性蛋白酶为酶解暗纹东方鲀肌肉制备呈味肽最佳酶制剂。     

养殖暗纹东方鲀肌肉中呈味肽的分离鉴定

本文旨在从生鲜暗纹东方鲀肌肉中提取呈味肽从而对暗纹东方鲀肌肉中的呈味肽的结构特性进行相应研究。将生鲜养殖暗纹东方鲀肌肉水提物经Sephadex G15凝胶柱分离,得到3个多肽组分(分别为0-F1、0-F2和0-F3),感官评价结合电子舌选择出具有最强烈的鲜味和kokumi感的组分0-F1。采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对其进行进一步分离得到2个组分0-F1-1和0-F1-2,电子舌鉴定显示0-F1-1组分有较强的鲜味。最后利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对RP-HPLC分离得到组分0-F1-1中呈味肽氨基酸序列进行测定,鉴定得到一种新的呈味七肽结构:Pro-A-Ala-B-Met*-Cys-Arg(810.9046 Da,A和B均为氨基酸代码,Met*表示氧化型甲硫氨酸)虽然肽段中含有大量的疏水性氨基酸,但该肽不具有苦味,而且有显著的浓厚感,其中含有的Cys残基可能是其具有kokumi感的关键。     

养殖暗纹东方纯肌肉中呈味肽的分离鉴定

本文旨在从生鲜暗纹东方纯肌肉中提取呈味肽从而对暗纹东方纯肌肉中的呈味肽的结构特性进行相应研究。将生鲜养殖暗纹东方鱼屯肌肉水提物经Sephadex G15凝胶柱分离,得到3个多肽组分（分别为0-F1、0-F2和0-F3）,感官评价结合电子舌选择出具有最强烈的鲜味和kokumi感的组分0-F1。采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）对其进行进一步分离得到2个组分0．F1．1和0．F1．2,电子舌鉴定显示O．F1．1组分有较强的鲜味。最后利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）对RP-HPLC分离得到组分0-F1-1中呈味肽氨基酸序列进行测定,鉴定得到一种新的呈味七肽结构：Pro-A-A1a-B-Met＊-Cys-Arg（810．9046 Da,A和B均为氨基酸代码,Met＊表示氧化型甲硫氨酸）虽然肽段中含有大量的疏水性氨基酸,但该肽不具有苦味,而且有显著的浓厚感,其中含有的Cys残基可能是其具有kokumi感的关键。     

乳蛋白酶解产物呈味肽序列的研究

能够引起味觉浓厚感的物质命名为“kokumi”类物质。通过对乳蛋白酶解得到的水提产物经凝胶柱Sephadex G-15 进行分离,得到6 个主要组分分离峰(分别命名为P1、P2、P3、P4、P5 和P6)。将6 个组分分别收集冻干后进行感官评定,选择浓厚感(kokumi)强度最大的P4 组分利用反向高效液相色谱(RP-HPLC)进行进一步分离。最后利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对RP-HPLC 分离得到组分P4 中主要呈味肽序列进行测定,分析鉴定得到11 个主要由8～9 个氨基酸残基组成的肽链,其中大部分肽链来自于β - 酪蛋白的酶解产物,并且鉴定得到肽链序列中Glu 和Cys 的含量较高,与kokumi 类呈味肽类物质组分的研究报道相符。     

木糖及氧化猪脂对热反应产物滋味的影响及滋味活性肽组分分离

以猪肉酶解物为原料,设计“酶解物”（空白）、“木糖-酶解物”、“氧化猪脂-酶解物”、“木糖-氧化猪脂-酶解物”4个热反应体系,通过分析反应液在420 nm处的紫外吸收、色度、pH,发现反应体系中添加木糖对褐变反应的影响远大于添加氧化猪脂,而木糖或氧化猪脂的添加均可使反应产物的鲜味、肉味、醇厚感、持续性增强。相比之下,前者更多地贡献于鲜味、肉味的增强,而后者更多地贡献于持续性、醇厚感的增强。除“酶解物”体系外,其它三体系反应液分别经超滤分离,收集<1 ku呈味组分。对收集的<1 ku呈味组分分别用G-15葡聚糖凝胶色谱柱分离,共收集到12个呈味组分。从中选取3个主要呈味组分分别用反相高效液相色谱分离制备,收集到9个主要呈味组分。从中选取2个较纯的呈味组分采用基质辅助激光解析电离一级及二级质谱分析,最终鉴定出3个呈味肽的结构。     

不同提取方法对灰树花呈味物质释放的影响

目的：研究不同处理方法（酶解、高压蒸煮及闪式高速提取器处理）对灰树花呈味物质释放的影响。方法：采用高效液相色谱法分析可溶性糖、有机酸、游离氨基酸含量和分子质量分布,采用电子舌分析灰树花呈味物质的呈味特性,采用主成分分析（principal component analysis,PCA）法对不同提取方法制备的产物进行统计分析。结果：和原液相比,所有的处理方式样品可溶性糖的总量都显著性降低（P＜0.05）,尤其采用闪式高速提取处理后的高压蒸煮制备液降低最多;相反,有机酸总量在处理后都呈现显著性增加（P＜0.05）,且在经过闪式高速提取器处理后呈一定程度增加;两种酶解作用后样品的游离氨基酸总量都有所增加,高压蒸煮样品的游离氨基酸总量减少,复合酶酶解制备液的鲜味氨基酸、甜味氨基酸以及苦味氨基酸含量均显著增加（P＜0.05）;两种酶解制备液肽分子质量分布中小于3 000 Da的组分含量最多,经过闪式高速提取后其含量减少,说明闪式高速提取不利于游离氨基酸的提取。PCA分析发现无论酶解还是高压蒸煮处理,味感及呈味物质都与原样存在明显差异,闪式高速提取处理后其味感及呈味物质也发生了明显改变。结论：灰树花的呈味特性与其特定的呈味物质关系密切,而呈味物质的高效制备取决于提取方法,本研究可为后续灰树花调味品的开发和呈味肽的制备提供理论指导。     

不同处理方法对蟹味菇呈味物质释放的影响

为研究不同处理方法对蟹味菇呈味物质释放的影响,采用闪式高速提取法,并与蒸煮和2种酶解的方法结合处理蟹味菇子实体,以游离氨基酸、呈味核苷酸、可溶性糖及有机酸含量和味觉强度值为指标,通过电子舌对不同方法处理的蟹味菇进行感官特性评价,并基于电子舌检测进行主成分分析(principal component analysis,PCA)。结果表明:闪式高速提取法可以促进蟹味菇呈味物质的释放。蒸煮可以使蟹味菇游离氨基酸总量下降,有机酸和核苷酸总量显著增加(P0.05)。纤维素酶和风味蛋白酶组成的复合酶酶解会使蟹味菇呈苦味和无味的氨基酸以及葡萄糖含量显著增加(P0.05),呈甜味的氨基酸及有机酸含量显著降低(P0.05)。单一的水解酶酶解会增加呈鲜味氨基酸含量,降低呈苦味、甜味及无味氨基酸含量。电子舌雷达图能够反映不同方法处理的蟹味菇滋味特点。通过PCA提取2个主成分,其累计方差贡献率为87.79%,PCA结果表明不同方法处理的蟹味菇都与常温浸提的蟹味菇原样存在差异。不同处理方法对蟹味菇呈味物质释放具有不同的影响,可以根据对呈味的不同需求处理蟹味菇。     

热预处理对蓝蛤酶解及酶解液呈味特性的影响

以水解度、可溶性肽、呈味核苷酸、谷氨酸含量、滋味轮廓(电子舌分析)等为指标,在确定适宜蛋白酶种类的基础上,探究酶解前不同加热预处理条件(加热温度50、70、90、100、121℃和时间5、10、15、20、25、30 min)对蓝蛤酶解特性及酶解物呈味特性的影响,以期为贝类海鲜调味料呈味基料制备技术的创新提供参考。结果表明:采用质量比2∶1的中性蛋白酶与风味蛋白酶组合酶解,酶解液呈味特性良好。随着预处理温度的升高,酶解液水解度、可溶性肽含量、呈味核苷酸、谷氨酸含量、鲜味值均呈先下降后上升趋势,而苦味值则呈波动趋势。延长热预处理时间不利于蓝蛤蛋白的水解和呈味物质的积累,但有利于降低苦味值。加热预处理一定程度上可以改善蓝蛤酶解液的整体风味和色泽,较优的预处理条件为加热温度70℃、加热时间10 min。     

鲣鱼双酶酶解工艺优化及其产物动态变化研究

以鲣鱼为对象,优化了胰蛋白酶(trypsin)与木瓜蛋白酶(papain)复合酶解鱼肉蛋白的条件,研究了酶解过程中酶解液中游离氨基酸组成和含量、肽分子质量分布以及呈味核苷酸二钠含量的动态变化规律。结果表明:木瓜蛋白酶和胰蛋白酶双酶酶解鲣鱼最优条件为:最适比例1:3,总酶添加量3 000 U/g,底物浓度为25%。酶解过程中,酶解液中游离氨基酸总量不断增加,酶解6 h后,呈苦味氨基酸含量有所减少,而呈鲜味氨基酸大幅增加;对氨基酸呈味强度值(taste activity value,TAV)的分析表明,Glu、Met、Ile和His等几种氨基酸对酶解液的呈味特性起了关键作用。随着酶解时间的增加,大分子质量蛋白和肽类组分逐渐减少而小分子质量肽类组分逐渐增多,酶解6 h后分子质量小于0.5 ku的组分含量达到80.17%。呈味核苷酸二钠含量随酶解时间缓慢增加。     

同时蒸馏萃取和固相微萃取与气相色谱/质谱法结合分析巴马火腿的风味成分

采用同时蒸馏提取(SDE)和固相微萃取(SPME)2种前处理分离方法,以及气相色谱和质谱联用分析鉴定技术,对巴马火腿的挥发性风味进行了研究,共鉴定出99种成分,其中主要为醛类和醇类化合物,其次为酮、酯、酸、烃类化合物,另有少量含硫及杂环化合物,表明醛类和醇类化合物对巴马火腿的风味贡献较大。比较了SDE法和SPME法对风味成分的影响,结果发现,SDE法提取的巴马火腿主要成分为十六醛、3-羟基-2-丁酮、乙酸乙酯等;SPME法提取的巴马火腿主要成分为己醛、3-甲基丁醛、3-羟基-2-丁酮等。发现了9种新物质,如十六二烯酸甲酯、4-甲基苯酚和6-甲基-1-辛烯等。     

Characterization and differentiation of Italian Parma,San Daniele and Toscano dry-cured hams: A multi-disciplinary approach

This study aimed at characterizing the sensory quality of Italian PDO dry-cured Parma, San Daniele and Toscano hams, applying a multi-disciplinary approach. Ham sensory profile as well as physico-chemical, aromatic, morphological and textural characteristics was investigated. There was a great difference between Toscano ham and Parma and San Daniele hams, which were more similar even though differentiated. Toscano ham showed higher scores for pork-meat odor, saltiness, dryness, fibrousness and hardness; accordingly, this ham was described by a high NaCl content and by high values of instrumental hardness, cohesiveness, gumminess and chewiness. Parma ham was characterized by a cured flavor, whereas San Daniele ham showed a wider fatty area and higher pH values. Parma and San Daniele hams were also described by higher values of sweetness, RGB color values and water activity. Sensory characteristics evaluated by trained assessors were correlated to instrumental measures, indicating that instrumental devices can be effectively applied for dry-cured ham characterization.     

Quantitative determination of Zn protoporphyrin IX,heme and protoporphyrin IX in Parma ham by HPLC

We measured the contents of Zn protoporphyrin IX (ZPP), heme and protoporphyrin IX (PPIX) in Parma ham by simultaneous analysis using high-performance liquid chromatography (HPLC). Extraction with ethyl acetate–acetic acid (4:1) was suitable for the quantitative analysis of ZPP. The contents of heme, ZPP and PPIX in Parma ham were 15.0–29.9, 27.7–47.0 and 0.4–1.1 μg/g, respectively, and total content of porphyrin was 43.7–76.6 μg/g. The amount of ZPP in Parma ham was larger than that of heme, and ZPP accounted for 60–70% of all porphyrins.     

波纹巴非蛤生物活性肽的分离与提纯研究

以波纹巴非蛤为原料,根据最佳酶解条件制备酶解液。通过凝胶层析柱(Sephadex G-25)分离水解所得粗品波纹巴非蛤酶解液,并用紫外可见分光光度计测定收集后的各管溶液,然后根据各吸光度值绘制的管数-吸光度曲线图得出第三个峰附近的管数为小分子段。根据标准曲线计算出活性肽的分子量为753.58D,最后通过反相高效液相色谱-质谱联用技术测出活性肽的分子量为679.4D。     

巴马火腿红色色素的研究进展

综述了巴马火腿红色色素研究的最新进展。巴马火腿在腌制时不添加硝酸盐或亚硝酸盐 ,经过长期的加工过程 ,巴马火腿肉具有稳定的红色。巴马火腿的红色色素与添加硝酸盐或亚硝酸盐腌制的普通火腿的红色色素具有不同的吸收光谱、颜色稳定性和抗氧化性。根据巴马火腿红色色素的吸收光谱、荧光光谱、高压液相色谱和高分辨率电喷雾电离质谱 ,证实了巴马火腿的红色色素是锌 原卟啉IX。     

基于R-型聚类分析的金华火腿主导风味的识别

为了弄清金华火腿的主导风味成分,随机取5条不同等级金华火腿的股二头肌为样品,利用固相微萃取(SPME)和气质联用(GC/MS)系统进行风味成分研究。结果发现,四级火腿中共检测到116种成分,在1-4级火腿中分别检出84,84,83和92种成分。经过设定类群数目进行R-型聚类分析,最终得到13种主导风味成分,分别为:丁酸、已醛、丁酸乙酯、乙酸、戊醛、2-甲基丁醛、3-甲基丁醛、丙酮、3-甲基丁酸、2,3-丁二醇、2-甲基丙酸、苯酚和丙酸。     

Thermal and photochemical degradation of myoglobin pigments in relation to colour stability of sliced dry-cured Parma ham and sliced dry-cured ham produced with nitrite salt

Lipophilic and hydrophilic extracts of the red pigments from Parma ham and nitrosylated pigment of dry-cured ham produced with nitrite salt were prepared with acetone/water (75/25 v/v %) solution and aqueous phosphate buffer, respectively. The spectral characteristics differed for both the lipophilic and the hydrophilic Parma ham pigment compared with the dry-cured ham produced with nitrite salt. The red lipophilic pigment(s) extractable from Parma ham was(were) found to be very stable towards thermal degradation in acetone/water (75/25 v/v %) solution for temperatures up to 70 °C in contrast to the lipophilic pigment(s) extractable from dry-cured ham produced with nitrite salt, which was(were) found to have an energy of activation of 99 kJ/mol for thermal degradation. In contrast, quantum yields for photodegradation of the lipophilic ham pigments exposed to 366 nm (420 nm) monochromatic light were larger for Parma ham than for nitrite-cured ham [1.6×10^–5 (6.9×10^–6) versus 1.6×10^–6 (2×10^–6) mol einstein^–1] as determined for acetone/water (75/25 v/v %) solution. In agreement with these findings for the extracted lipophilic pigments, sliced Parma ham showed better colour stability than sliced dry-cured ham produced with nitrite salt, when stored in the dark at low oxygen concentration, in contrast to a faster initial discolouration for Parma ham when exposed to light, as shown for chilled storage for 35 days under retail conditions for the two products each packed at two oxygen levels (0.4 and 21%).     

白腐乳中呈味肽的分离与鉴定

目的:从白腐乳中寻找呈味肽,分析其氨基酸序列,人工合成肽样品,研究其滋味特性。方法:白腐乳提取液经过超滤、Sephedex G-15葡萄糖凝胶过滤层析,分离出3个呈味组分,通过感官评价筛选出呈鲜效果最优的组分,采用反相高效液相色谱对其进一步分离纯化,选择峰面积最大的组分,使用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱结合De Novo软件分析呈味肽的氨基酸序列,人工合成肽样品,对合成肽样品的呈味特性进行分析。结果:在白腐乳中发现并确定序列的肽链3条,其氨基酸序列分别为:Asp-Phe-Lys-Arg-Glu-Pro、Asp-Arg-Glu-Lys-Phe-AspGlu、Asp-Glu-Asp-Phe-Lys-Arg-Glu-Pro。其中肽Asp-Phe-Lys-Arg-Glu-Pro具有鲜味,肽Asp-Glu-Asp-Phe-Lys-ArgGlu-Pro兼具鲜味与酸味,肽Asp-Arg-Glu-Lys-Phe-Asp-Glu虽无明显特征滋味,但在味精溶液中则体现出较强的增鲜效果。结论:腐乳的鲜味不仅仅来自于谷氨酸等氨基酸成分,还与小分子肽类的呈鲜作用有关。     

Changes in Zn-porphyrin and proteinous pigments in italian dry-cured ham during processing and maturation

Substitution of iron with zinc in myoglobin during maturation of Parma ham to yield zinc porphyrin extractable by 75% vol/vol acetone/water solution and detectable by fluorescence spectroscopy, was found to occur concomitant with protein modification in myoglobin. The content of zinc porphyrin increases throughout the whole processing and maturation of Parma ham, from I(fl) 0.1±0.06 for green ham to I(fl) 84.4±48.8 for fully matured Parma ham. In an aqueous extract of Parma ham with pH 6.0 protein alteration in myoglobin, as detected by size-exclusion chromatography, is initiated during the resting period following salting and seems to precede formation of zinc porphyrin. During maturation the results indicate that the modified myoglobin could undergo polymerization, and it is suggested that initial protein denaturation or degradation facilitates substitution of iron with zinc. The pigment polymerization may be a result of non-covalent protein association to zinc porphyrin in denatured or partly degraded myoglobin.     

巴马火腿的现代生产技术和研究进展

就意大利巴马火腿的现代化生产技术、风味物质、呈色物质、主要的质量问题及其防止方法等方面进行了阐述。