中药尿酸利仙含药血清对TNF-a诱导的人血管内皮细胞VCAM-1mRNA表达的影响

目的:观察中药尿酸利仙(含药血清)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人血管内皮细胞(ECV)血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)mRNA表达的影响。方法:①体外培养人血管内皮细胞,分别用不同浓度(12.5、25、50μg/ml)的TNF-α刺激;②体外培养人血管内皮细胞,培养液中加入TNF-α至终浓度为25μg/ml,分别孵育细胞8、16、24、48小时。③用25μg/ml的TNF-α孵育细胞16小时,同时用含不同浓度(2.5%、5%、10%)中药尿酸利仙含药血清的培养液进行干预,用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术测定血管内皮细胞VCAM-1mRNA表达。结果:低、中、高浓度TNF-α刺激均可显著上调血管内皮细胞VCAM-1mRNA表达(P0.01),各刺激组间差异无统计学意义(P0.05)。25μg/ml的TNF-α在16、24和48小时均可显著上调血管内皮细胞VCAM-1mRNA表达(P0.01),各干预组间差异无统计学意义(P0.05)。低、中、高浓度的中药尿酸利仙含药血清干预均可显著降低VCAM-1mRNA表达(P0.05,P0.01)。结论:中药尿酸利仙含药血清可抑制VCAM-1mRNA过度表达,可能是减轻TNF-α诱导的人血管内皮细胞炎症损伤及抑制炎症反应的机制之一。     

Protective Effects of Alismatis Rhizoma on H2O2-induced Damage of Vascular Endothelial Cells

目的 观察泽泻含药血清对H2O2诱导损伤的血管内皮细胞活性、形态学、SOD及NO的影响,探讨泽泻含药血清抗氧化损伤的可能机理.方法 100μmol/L H2O2造成血管内皮细胞氧化应激损伤模型,cck-8法检测各组细胞增殖情况;黄嘌呤氧化酶法和硝酸还原酶法检测各组细胞上清液中SOD的活力和NO含量.结果 100μmol/LH2O2可抑制血管内皮细胞活性,降低SOD活力和NO的分泌,而泽泻则能改善100 μmol/L H2O2对血管内皮细胞的损伤,对血管内皮细胞具有一定的保护作用.结论 泽泻可以通过调控抗氧化损伤机制保护血管内皮细胞,这可能是泽泻抗氧化损伤机理所在.     

蓝莓花青素提取物对H2O2诱导人胃癌

目的 在细胞水平上分析蓝莓花青素提取物的抗氧化活性.方法 用6.25 μg/mL、12.5 μg/mL、25 μg/mL、50 μg/mL和100 μg/mL蓝莓花青素提取物预处理人胃癌BGC-823细胞24 h后,再加入1 mmol/L H2O2诱导损伤2h.按不同处理分为对照组、H2O2处理组和蓝莓花青素保护组.采用MTT比色法检测细胞活力、相差显微镜观察细胞形态、荧光探针DCFH-DA测定细胞活性氧(ROS)生成量、比色法和可见光法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活性,分析不同浓度的蓝莓花青素提取物预处理对H2 O2诱导BGC-823细胞氧化损伤的影响.结果 与H2O2处理组相比较,6.25 μg/mL、12.5 μg/mL、25 μg/mL、50μg/mL和100 μg/mL蓝莓花青素提取物预处理均能增加BGC-823细胞活力(P＜0.05).25 μg/mL和100μg/mL蓝莓花青素提取物预处理能阻止H2O2诱导的BGC-823细胞形态损伤,抑制ROS生成,增加GSH-Px和CAT的活性.结论 蓝莓花青素提取物对H2O2诱导人胃癌BGC-823细胞氧化损伤具有保护作用.     

硫胺素和核黄素对H2O2诱导的DNA氧化损伤的影响

目的 探讨硫胺素和核黄素对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞ECV304的DNA氧化损伤的影响.方法 于细胞培养液中分别加入硫胺素(终浓度为10、100、500、1000 mg/L)或核黄素(终浓度为20、100、300、500 nmol/L)预处理24 h,给予H2O2(终浓度为25 μmol/L)反应30 min,采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)分析DNA氧化损伤情况.以不加H2O2、硫胺素和核黄素者为阴性对照组;以加H2O2而不加硫胺素、核黄素者为阳性对照组.结果 H2O2诱导ECV304细胞DNA断裂损伤,SCGE分析显示,阳性对照组拖尾细胞率、彗星尾长、尾部DNA含量和Olive尾矩等指标均较阴性对照组升高;经10、100、500 mg/L硫胺素或20、100、300 nmol/L核黄素预处理后,各DNA损伤指标均较阳性对照组显著下降(P<0.05或P<0.01);经1000 mg/L硫胺素或500 nmol/L核黄素预处理后,各DNA损伤指标与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 适宜浓度的硫胺素和核黄素能降低H2O2诱导的DNA氧化损伤,高浓度的硫胺素和核黄素不能保护H2O2诱导的DNA氧化损伤.     

硫胺素和核黄素对H2O2诱导的DNA氧化损伤的影响

目的 探讨硫胺素和核黄素对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞ECV304的DNA氧化损伤的影响.方法 于细胞培养液中分别加入硫胺素(终浓度为10、100、500、1000 mg/L)或核黄素(终浓度为20、100、300、500 nmol/L)预处理24 h,给予H2O2(终浓度为25 μmol/L)反应30 min,采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)分析DNA氧化损伤情况.以不加H2O2、硫胺素和核黄素者为阴性对照组;以加H2O2而不加硫胺素、核黄素者为阳性对照组.结果 H2O2诱导ECV304细胞DNA断裂损伤,SCGE分析显示,阳性对照组拖尾细胞率、彗星尾长、尾部DNA含量和Olive尾矩等指标均较阴性对照组升高;经10、100、500 mg/L硫胺素或20、100、300 nmol/L核黄素预处理后,各DNA损伤指标均较阳性对照组显著下降(P<0.05或P<0.01);经1000 mg/L硫胺素或500 nmol/L核黄素预处理后,各DNA损伤指标与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 适宜浓度的硫胺素和核黄素能降低H2O2诱导的DNA氧化损伤,高浓度的硫胺素和核黄素不能保护H2O2诱导的DNA氧化损伤.     

加减清营汤对H2O2损伤的血管内皮细胞保护作用研究

目的：观察加减清营汤对H2O2损伤的血管内皮细胞的保护作用。方法：体外培养内皮细胞ECV304,用380μmol／LH2O2损伤细胞,大鼠随机分成正常组、模型组、加减清营汤组和阳性药物对照组,用血清药理学方法给药,检测各项指标。结果：与模型组比较,加减清营汤含药血清组的NOS活性、T-AOC显著提高,MDA含量、LDH活力显著降低（P〈0．05）。结论：加减清营汤可降低H202对ECV304的损伤程度,具有明显的保护作用,其机理可能与维持细胞膜结构的完整性、提高抗氧化能力以及提高NOS活性等途径有关。     

白花九里明醇提物对H_2O_2诱导ECV304细胞损伤的保护作用

目的研究白花九里明醇提物对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞(ECV304细胞)氧化损伤的保护作用。方法体外培养ECV304细胞,以H2O2诱导ECV304细胞氧化损伤为模型,将白花九里明醇提物(终浓度为100、200、400μg/ml)作用于细胞24h后,MTT法检测细胞存活率,收集细胞上清液,分别测定SOD和NO含量。比较各组细胞的存活率、SOD及NO的表达水平。结果白花九里明醇提物能显著提高氧化损伤细胞的存活率,与H2O2组比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。白花九里明醇提物能提高SOD、NO的表达水平,其中白花九里明醇提物高剂量组与H2O2组比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论白花九里明醇提物对H2O2诱导的ECV304细胞氧化损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高SOD、NO水平有关。     

冠心活血胶囊有效提取部位研究

目的通过正交设计,观察冠心活血胶囊不同提取部位含药血清对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞(ECV304)氧化损伤的影响.方法 利用血清药理学方法制备冠心活血胶囊不同提取部位的含药血清,在体外H2O2干预建立ECV304细胞氧化损伤模型.四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测冠心活血胶囊不同提取部位对H2O2诱导的ECV304细胞氧化损伤的影响.结果 冠心活血胶囊中挥发油和丹参等四味药材的醇提物具有抗氧化作用,丹参等四味药材的水提物和檀香等药材的水提物没有抗氧化作用.结论 得出冠心活血胶囊原药中发挥抗氧化作用的活性部位,进而可以考虑优化制备工艺.     

N-硬脂酰酪氨酸对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的影响

目的研究N-硬脂酰酪氨酸（NsTyr）预处理对过氧化氢（H2O2）诱导的PC12细胞氧化应激损伤的影响。方法体外培养传代的PC12细胞分为空白对照组、H2O2损伤组（不同浓度H2O2诱导16h）和NsTyr预处理组（不同浓度NsTy预处理30min后加入100μmol／LH2O2诱导16h）。流式细胞仪检测细胞凋亡率及活性氧类（ROS）生成,Westernblotting检测Bax和Bcl-2的表达。结果与H2O2（100μmol／L）损伤组比较,5、10μmol／LNsTyr预处理组PC12细胞存活率显著升高（P〈0．01）,凋亡细胞率降低（P〈0．05）,细胞内ROS生成减少（P〈0．05,P〈0．01）,Bcl-2／Bax比值升高（P〈0．05）。结论NsTyr能提高PC12细胞的抗氧化应激损伤能力,上调Bcl-2表达和下调Bax表达,抑制细胞凋亡。     

康寿灵含药血清对H2O2诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用

目的观察康寿灵含药血清对过氧化氢(H2O2)诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。方法采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞H2O2损伤模型。通过观察细胞形态,测定细胞存活率(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,检测康寿灵含药血清对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。结果同模型组比较,体积分数为0.05、0.10、0.15的康寿灵含药血清能减轻H2O2引起的SH-SY5Y神经细胞的损伤,明显提高细胞的存活率,减少LDH的释放量。结论康寿灵含药血清对H2O2诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤具有明显的保护作用。     

Pro MMP-2和 MMP-2在大鼠脑梗塞模型中的表达

摘要目的：探讨Pro MMP-2和MMP-2在大鼠脑梗塞模型中的表达。方法：以线栓法制备大鼠脑梗塞模型并用酶谱法检测病灶中Pro MMP-2和MMP-2。结果：聚丙烯酰胺凝胶电泳显示Pro MMP-2进行性增高，MMP-2于2天后开始升高并于第5天达到高峰，第7天呈下降趋势。结论：Pro MMP一2和MMP-2在脑梗塞中表达增加。     

新西兰大白兔PetCO2与PaCO2相关性的研究

目的观察新西兰大白兔的呼气末二氧化碳分压（partial pressure of carbon dioxide at end-trial,PetCO2）和动脉血二氧化碳分压（arterial carbon dioxide partial pressure,PaCO2）的关系,探讨无创PetCO2监测用于新西兰大白兔的可行性和准确性。方法新西兰大白兔33只,麻醉后行气管切开插管后机械通气,呼吸次数40/min,调整潮气量使PetCO2在25～35 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）,每增加1 mmHg为1组,共11组,每组3只动物。持续监测有创血压（blood pressure,BP）、心电图（electrocardiogram,ECG）和PetCO2。PetCO2数值稳定30 min后行动脉血气分析,记录pH值、PaCO2、HCO3-、P（a-et）CO2[P（a-et）CO2=PaCO2-PetCO2]。结果新西兰大白兔在PetCO2为25～35 mmHg区间时,PetCO2与PaCO2呈高度正相关（P〈0.01）,相关系数r=0.905。线性方程为y=1.87 x-15.85,其中y为PaCO2,x为PetCO2。P（a-et）CO2=（9.72±3.97）mmHg。结论持续无创的PetCO2监测能有效反映新西兰大白兔动脉血PaCO2,可用于指导新西兰大白兔机械通气,其合理的PetCO2在28～32 mmHg。     

围全麻诱导插管期SpO_2及PEtCO_2变化的临床观察

本组观察了２２例全麻病人诱导插管期间ＳｐＯ_２和ＰＥｔＣＯ_２的变化。按插管无通气时限的不同分为Ａ组（１ｍｉｎ）和Ｂ组（２ｍｉｎ）。通过面罩吸氧和手法人工通气，Ａ、Ｂ两组病人ＳｐＯ_２分别由９６±０．４５％和９６±０．２０％升至９８±０．２８％和９８±０．１６％，ＰＥｔＣＯ_２分别由４．５４±０．６３ｋＰａ和４．６３±０．４０ｋＰａ降至３．４１±０．６０ｋＰａ和３．５８±０．４７ｋＰａ，前后比较有明显差异，两组间无差异。插管后Ａ、Ｂ两组ＳｐＯ_２均维持在９８％以上，ＰＥｔＣＯ_２则分别升到４．７８±０．５５ｋＰａ和４．９３±０．５８ｋＰａ，与插管前比较有显著差异，虽仍在正常范围内，但已呈明显上升趋势。提示了在插管无通气状态下１～２ｍｉｎ内，缺氧不是主要的危险，而二氧化碳蓄积所带来的危害值得警惕和避免。     

血府逐淤汤对小鼠血清中IL-2和SIL-2R水平的影响

血府逐淤汤高浓度下可降低免疫超常小鼠血清过高的IL－2含量至正常水平;低浓度下可使免疫低下小鼠血清IL－2增高至正常水平;对免疫功能正常状态小鼠血清IL－2含量无影响。高浓度血府逐淤汤可使异常降低的SIL－2R水平升至正常;低浓度血府逐淤汤可使异常升高的SIL－2R水平降低,但血府逐淤汤对正常水平SIL－2R无影响。提示血府还淤汤对机体细胞免疫应答的影响具有剂量依赖性及双向性调节的特点,并且取决于机体当时的状态。     

胃管状腺癌组织中基质金属蛋白酶-2、组织金属蛋白酶抑制因子-2的表达

目的 :探讨胃管状腺癌组织中基质金属蛋白酶 - 2 (MMP - 2 )和基质金属蛋白酶抑制因子 - 2 (TIMP - 2 )的表达。方法 :采用免疫组化S -P法对 4 7例管状腺癌进行MMP - 2和TIMP - 2的检测。结果 :MMP - 2和TIMP -2均在胃癌细胞浆内呈阳性表达 ,阳性表达率分别为 2 1 .3%和 78.7% ;MMP - 2和TIMP - 2表达与胃管状腺癌淋巴结转移 (P <0 .0 5 )及浆膜浸润相关 (P <0 .0 5 )。结论 :MMP - 2和TIMP - 2表达可作为判断胃癌恶性行为重要生物学标志。     

环氧合酶-2在骨肉瘤中的表达及其意义

目的　探讨环氧合酶 2 (COX 2 )在骨肉瘤中的表达及其意义。方法　应用免疫组织化学染色研究人骨肉瘤组织、骨类肿瘤样病变 (骨纤维结构不良 )及正常骨组织中COX 2的表达 ,分析其表达差异性。结果　COX 2在正常骨组织中不表达 ,在骨肉瘤中表达阳性率为 6 7.7% ,骨纤维结构不良表达阳性率为 2 3.5 % ,后两者间的差异具有极显著性意义 (P <0 .0 1) ;在发生转移的骨肉瘤中COX 2表达阳性率为 82 .4 % ,明显高于未发生转移组 (5 0 .0 % ) ,两者差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论　骨肉瘤组织中存在COX 2的高表达 ,COX 2与骨肉瘤的发生发展有密切关系。     

明胶酶A及其特异性组织抑制剂在胎膜早破中的作用

目的:通过检测自发性胎膜早破患者和正常分娩产妇及择期剖宫产产妇胎膜组织中明胶酶A(MMP 2)及其特异性组织抑制剂(TIMP 2) mRNA和蛋白质的表达,探讨明胶酶A及其特异性组织抑制剂在正常分娩前后和病理状态胎膜中的表达及其作用。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和SP法对8例自发性胎膜早破患者、8例正常分娩产妇以及8例择期剖宫产产妇的胎膜组织中 MMP 2 和 TIMP 2 mRNA和蛋白的表达及定位进行检测。用光镜观察胎膜组织形态学特征的改变。结果: MMP 2 蛋白和mRNA在胎膜早破组表达明显高于正常分娩组和剖宫产组,两者比较,差异有显著性(P<0.05),而在正常分娩组的表达与剖宫产组比较差异无显著性 (P>0.05)。TIMP 2蛋白和mRNA在剖宫产组表达最高,正常分娩组次之,胎膜早破组最低,两两比较差异有显著性(P<0.05)。MMP 2在羊膜细胞内表达,在羊膜细胞的间叶细胞个别表达,强表达于绒毛膜的光滑的滋养细胞;TIMP 2表达于羊膜上皮细胞、网状细胞、绒毛膜滋养层。胎膜早破组的胎膜结构发生了明显改变。结论:胎膜早破组的胎膜中MMP 2的表达明显增高,而 TIMP 2 的表达明显降低,MMP 2 和 TIMP 2 的表达失调将导致胎膜基质的降解增加并最终导致胎膜的破裂。     

基质金属蛋白酶-2及其组织抑制物-2在子宫内膜异位症的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和组织金属蛋白酶抑制物-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2 ,TIMP-2)在子宫内膜异位症发生发展中的作用. 方法采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶染色法(S-P法)检测22例子宫内膜异位症的异位内膜和在位内膜组织中MMP-2、TIMP-2的表达,并以20例正常子宫内膜为对照组. 结果在异位内膜组织的腺上皮细胞MMP-2呈高表达状态,与子宫内膜异位症在位内膜和正常子宫内膜相比,有非常显著性差异(P <0.01),TIMP-2在异位内膜组织中呈低表达,与子宫内膜异位症在位内膜和正常子宫内膜相比,差异有显著性(P<0.05),但MMP-2、TIMP-2在子宫内膜异位症在位内膜和正常子宫内膜中的表达,二者间没有显著性差别(P>0.05).MMP-2、TIMP-2的表达强度与子宫内膜异位症的严重程度无明显相关性. 结论异位内膜组织中MMP-2过度表达,而TIMP-2的表达下降,导致MMP-2/TIMP-2的比例增高,使异位内膜组织具有更强的侵袭力,可能在子宫内膜异位症的发生发展中起重要作用.     

妇科腹腔镜手术不同麻醉方法对SpO_2和P_(ET)CO_2的影响及护理对策

目的:比较妇科腹腔镜手术不同麻醉方法对脉搏、血氧饱和度(SpO2)及动脉血二氧化碳分压(PET鄄CO2)的影响,探讨围术期护理对策。方法:对30例腹腔镜下妇科手术患者随机选用硬膜外及全麻2种麻醉方法,在气腹前10min、气腹后20min、放气后20min分别监测其SpO2和PETCO2变化。结果:硬膜外组在气腹后20min,SpO2较气腹前明显降低,PETCO2较气腹前明显升高,有显著性差异(P<0.05),而全麻组变化不明显。结论:腹腔镜下妇科手术采用全麻方法较安全,术中应加强术中呼吸循环的监测,以保证患者安全渡过围手术期。     

MMP-2、TIMP-2在内毒素诱导性葡萄膜炎中的表达

目的　探讨基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )及其组织型抑制剂 (TIMP 2 )在内毒素诱导性葡萄膜炎 (EIU)模型中的表达及意义。方法　 2 0 0 μg伤寒杆菌内毒素注射于SD大鼠双后足垫 ,建立EIU模型。用免疫组织化学方法检测MMP 2、TIMP 2在内毒素注射后不同时间点 (0、 6、 12、 18、 2 4、 4 8、 72、 96h和 7d)的表达。结果　内毒素注射后 6h开始出现炎症 ,于 2 4h炎症达到高峰 ,以后逐渐减轻 ,7d时基本消退。虹膜、睫状体的上皮细胞和渗出的炎性细胞表达MMP 2和TIMP 2。MMP 2在 6h表达开始增高 ,18～ 2 4h达高峰 ,以后逐渐下降。TIMP 2于 12h出现表达 ,4 8h达高峰 ,以后逐渐下降。TIMP 2和MMP 2平均吸光度值的比值与炎症程度呈负相关。结论　MMP 2是与炎症反应相关的调节因子 ,其过量表达参与葡萄膜炎的发病。减低MMP 2的活性或降低MMP 2 /TIMP 2的比值可能为治疗葡萄膜炎的新思路。