dsP21-625 通过激活P21 基因表达抑制前列腺癌细胞的增殖

目的:探讨人工合成小分子双链RNA-625（double-stranded RNA-625,dsP21-625）对前列腺癌细胞P21 基因的激活作用及对细胞增殖的影响。方法: 将人工合成的dsP21-625（dsP21-625 组）和dsCtrl 质粒（dsCtrl 组）分别转染至前列腺癌细胞株PC-3 和DU-145。用实时荧光定量PCR和Western blotting 分别检测转染后各组前列腺癌细胞中P21、细胞周期素E（Cyclin E）和细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）mRNA及蛋白的表达水平,流式细胞术、MTT实验和克隆形成实验分别检测细胞周期分布、细胞增殖和克隆形成能力。结果: 与dsCtrl 组比较,dsP21-625 组PC-3 和DU-145 细胞中P21 mRNA水平升高(均P<0.01),Cyclin E和CDK2 mRNA表达水平下调（均P<0.01）;dsP21-625 组PC-3 和DU-145 细胞中P21 蛋白表达上调(均P<0.01),Cyclin E和CDK2 蛋白表达下调（均P<0.01）;dsP21-625 组细胞S 期和G2/M 期的细胞比例减少（均P<0.05）,G0/G1 期的细胞比例增加（均P<0.01）;dsP21-625 组细胞增殖活力降低（均P<0.05）、克隆形成数减少（均P<0.05）。结论: dsP21-625 上调前列腺癌细胞中P21 mRNA及蛋白的表达,下调Cyclin E和CDK2 mRNA及蛋白的表达,抑制前列腺癌细胞的增殖能力。     

HHIP基因CpG岛高甲基化水平参与胃癌的发生

目的：观察人胃癌、癌旁组织与胃癌AGS细胞中人音猬因子相互作用蛋白（human hedgehog interacting protein,HHIP）基因启动子区域CpG岛的甲基化水平,探索其与胃癌发生的关系。方法：RT-PCR检测30例人胃癌组织、癌旁组织及AGS细胞中HHIP mRNA的表达,免疫组织化学方法和甲基化特异性PCR（methylation specific PCR,MSP）分别检测胃癌组织和癌旁组织的HHIP表达和HHIP基因启动子区域甲基化状态。AGS细胞予甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷（5-Aza-2′-deoxycitydine,5-Aza-dc）处理前后,RT-PCR、MSP和硫化测序PCR（bisulfite sequencing PCR,BSP）分别检测AGS细胞中HHIP mRNA表达、启动子区域甲基化水平变化、CpG岛甲基化位点数量的变化;分析HHIP基因启动子区CpG岛甲基化水平变化与HHIP mRNA表达水平变化之间的相关性。结果：胃癌组织中的HHIP mRNA（0.82± 0.38 vs 1.60±0.26,P=0.000）和蛋白（0.51±0.03 vs 0.83±0.27,P<0.05）的表达均低于癌旁组织,并且与年龄、性别、TNM分期、分化程度、淋巴结转移均无显著相关性（均P>0.05）。癌旁组织中HHIP基因启动子区甲基化水平显著低于胃癌和AGS细胞\[（17.7±3.59）% vs （62.9±614）%、（99.7±0.67）%,均P<0.05\]。AGS细胞在5-Aza-dc干预后HHIP mRNA表达明显增高（4.68±022 vs 0.21±012,P<0.01）,HHIP基因启动子区甲基化水平明显下降\[（10.1±0.21）% vs （90.2±0.67）%,P<0.01\], CpG岛甲基化位点明显减少,并且HHIP基因启动子区甲基化水平与mRNA表达呈负相关（r=-0.693,P=0.00）。结论：HHIP基因启动子区CpG岛的高甲基化水平可能通过抑制HHIP基因表达参与胃癌的发生。     

桥接整合因子1通过AKT-mTOR通路诱导非小细胞肺癌H1975细胞周期阻滞

目的：研究桥接整合因子1（bridging intergrator 1,Bin1）基因过表达后对非小细胞肺癌细胞株H1975细胞周期的影响及其作用机制。方法：构建携带Bin1基因的CMV-MCS-GFP-SV40-Neomycin-Bin1质粒,并转染H1975细胞（Bin1+组）,另设置空白质粒转染组（Bin1-组）及空白对照组（Ctrl组）,利用RT-PCR和Western blotting分别检测3组细胞中Bin1在mRNA和蛋白质水平的表达情况。流式细胞术检测不同处理组H1975细胞周期的变化,Western boltting分别检测各组中AKT、mTOR磷酸化水平及细胞周期相关蛋白（周期蛋白D1、CDK4、Rb）的表达情况。结果：与Bin1-组、Ctrl组比较,Bin1+组H1975细胞中Bin1在mRNA、蛋白水平表达明显上调（均P<0.05）; H1975细胞阻滞在G1期\[（60.53±1.89）% vs（46.14±1.56）%、（47.33±2.07）%,均P<0.05\]; Bin1+组H1975细胞内p-AKT、p-mTOR表达下调（均P<0.05）,AKT、mTOR表达变化无统计学差异（P>0.05）;周期蛋白D1、CDK4的表达量均明显下调(P<0.05),Rb表达量明显增加（P<0.05）。结论：Bin1基因在H1975细胞株过表达后明显诱导细胞周期阻滞,其机制可能是通过抑制AKT-mTOR通路及其细胞周期相关蛋白实现的。     

表观遗传修饰介导抑制SOSTDC1表达促进宫颈癌细胞的恶性生物学行为

目的：探究含硬化蛋白域蛋白1（SOSTDC1）对宫颈癌细胞恶性生物学行为的调控及其分子机制。方法：收集2020年8 月至2022 年5 月间在福建省肿瘤医院活检或手术切除的53 例宫颈癌组织和相应的癌旁组织标本,免疫组化法检测SOSTDC1 蛋白在宫颈癌组织及相应癌旁组织中的表达,qPCR 法检测正常宫颈细胞、宫颈癌细胞中SOSTDC1 mRNA 表达;将SOSTDC1 过表达慢病毒（OE-sostdc1）和对照空病毒（NC）感染宫颈癌细胞SiHa 及CaSki,将其分为SiHa-OE-sostdc1、SiHa-NC、CaSki-OE-sostdc1、CaSki-NC 组,采用WST-1法、细胞集落形成实验、Transwell 实验和WB法检测转染各组SiHa 及CaSki 细胞的增殖、集落形成、迁移和侵袭能力和BMP、Wnt/β-catenin 信号途径相关蛋白及上皮-间充质转化（EMT）相关蛋白的表达。用DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂2''-脱氧胞苷（5''-Aza-CdR）处理宫颈癌细胞后采用qPCR和WB法检测SOSTDC1 mRNA及蛋白的表达变化,用甲基化特异性PCR（MSP）检测5 例配对宫颈癌组织与癌旁组织中SOSTDC1 基因启动子区甲基化水平,同时qPCR 检测其SOSTDC1 mRNA水平。结果：与癌旁组织比较,SOSTDC1蛋白在宫颈癌组织中呈低表达（P<0.01）,且与淋巴结转移与FIGO分期有关联（均P<0.05）;与正常宫颈HUCEC细胞比较,SOSTDC1 mRNA 在宫颈癌C33A、HeLa、SiHa、CaSki 细胞中均呈低表达（均P<0.01）。过表达SOSTDC1显著抑制SiHa 及CaSki 细胞的增殖、迁移和侵袭能力（均P<0.05）。WB法结果检测显示,过表达SOSTDC1 显著抑制 SiHa 及 CaSki 细胞中磷酸化 Smad、Dvl2/3、β -catenin、VIM、N-cadherin、Snail 蛋白的表达（均P<0.05）,5''-Aza-CdR 处理后的SiHa 及CaSki 细胞中SOSTDC1 mRNA和蛋白水平均显著增加（均P<0.05）,MSP检测结果显示,相较于癌旁组织,宫颈癌组织中SOSTDC1基因启动子区呈高度甲基化,且SOSTDC1 mRNA水平降低（P<0.01）。结论：SOSTDC1在宫颈癌组织中呈低表达且与肿瘤的恶性进展关联,其表达下调与其基因启动子区高度甲基化有关,过表达SOSTDC1 可能通过阻断BMP及Wnt/β-catenin信号通路从而抑制SiHa、CaSki细胞的增殖、侵袭和迁移能力。     

Bin1甲基化对食管鳞状细胞癌TE13细胞侵袭能力的影响

目的:检测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞株TE13中(bridge integration factor1,Bin1)甲基化状态,分析去甲基化药物5-Aza-dC去甲基化前后Bin1表达水平、甲基化状态及细胞生物活性的变化,探讨ESCC发生的可能机制及治疗策略.方法:采用qRT-PCR方法检测去甲基化前后TE13细胞Bin1 mRNA的表达,MSP法检测ESCC细胞株TE13中Binl启动子区甲基化状态,划痕实验及Transwell实验分别检测去甲基化对TE13细胞迁移及侵袭能力的影响,Western blotting法检测Bin1与基质金属蛋白酶2(MMP-2)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达变化.结果:TE13细胞株中Bin1表现为完全甲基化状态,Bin1 mRNA呈低表达,经5-Aza-dC处理后Bin1 mRNA表达显著升高(P＜0.01);划痕试验及Transwell试验显示去甲基化处理可明显降低TE13细胞迁移、侵袭能力(P＜0.01);经5-Aza-dC处理后Bin1蛋白表达显著升高(P＜0.01),MMP-2和MMP-9蛋白表达显著降低(均P＜0.01).结论:DNA甲基化是Bin1低表达或缺失的重要机制之一,并可能通过调节MMP-2和MMP-9蛋白的表达,影响食管鳞状细胞癌细胞株TE13迁移、侵袭能力.     

沉默 ABCE1 基因对人食管癌EC109细胞凋亡、增殖、侵袭及迁移的影响

目的：探讨电转法沉默ATP结合盒转运子E1（ATP-binding cassette protein E1, ABCE1 ）基因的表达对人食管癌EC109细胞凋亡、增殖、侵袭及迁移的影响。方法：合成靶向 ABCE1 的siRNA序列（ABCE1-siRNA）以及阴性对照序列（NC-siRNA）,电转法转染至EC109细胞,分别形成ABCE1-EC109、NC-siRNA-EC109细胞。RT-PCR、Western blotting检测转染后EC109细胞中 ABCE1 mRNA与蛋白的表达情况,流式细胞术检测EC109细胞周期及凋亡,CCK-8法、划痕愈合实验、Transwell法分别检测EC109细胞的增殖、迁移以及侵袭的能力。结果： ABCE1-EC109细胞中 ABCE1 mRNA和蛋白表达较NC-siRNA-EC109细胞明显降低\[(0.47±0.04) vs (0.67±0.05),(0.63±0.09) vs (0.86±0.11);均P<0.05\]。与NC-siRNA-EC109细胞相比,ABCE1-EC109细胞的增殖速度明显减慢\[（2.20±0.10） vs （2.91±0.13）,P<0.05\],细胞周期阻滞在G0/G1期细胞数目明显增多\[（76.5±3.1)% vs (56.1±2.7)%, P<0.05）\];细胞的凋亡率明显升高\[（15 .46±3.12）% vs (0.54±024）%,P<001\],迁移、侵袭能力均显著下降\[迁移：（8.12±0.23） vs （1.91±0.11）μm,P<0.05;侵袭：（42.56±4.68） vs (68.78±6.98)个,P<001\]。结论：电转法沉默 ABCE1 基因的表达可促进食管癌EC109细胞的凋亡,抑制其体外增殖、侵袭及迁移。     

lncRNA CCAT2 对宫颈癌CaSki细胞增殖及周期的影响

目的：研究长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）CCAT2 对宫颈癌细胞增殖、周期的影响。方法：采用qPCR法检测3 种宫颈癌细胞（HeLa、C-33A和CaSki）中CCAT2 的表达水平，选择表达水平最高的细胞进行后续实验。设计合成CCAT2 过表达及干扰载体，转染细胞后，qPCR检测转染效率。细胞分为5 组：对照组、干扰空载（sh-EV）组、过表达空载（overExp-EV）组、CCAT2 干扰（sh-CCAT2）组和CCAT2 过表达（overExp-CCAT2）组，MTT法检测各组细胞增殖活力，流式细胞术检测细胞周期，WB法检测细胞中Ki67、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）和周期蛋白依赖性激酶4（cyclin-dependent kinase 4，CDK4）表达水平。结果：在HeLa、C-33A和CaSki 3 种细胞系中，选择CCAT2 表达水平最高的CaSki 细胞为研究对象。CCAT2 过表达及干扰载体均成功转入细胞，转染效果明显。与对照组比较，sh-CCAT2 组细胞增殖活力显著降低（P<0.01）、G1 期细胞比例显著升高（P<0.01），Ki67、Cyclin D1 及CDK4 表达水平显著降低（均P<0.01）；而overExp-CCAT2 组与之相反，细胞增殖能力增强，且Ki67、Cyclin D1 及CDK4 表达水平显著升高（均P<0.01）。结论：CCAT2 通过调控细胞增殖及周期相关蛋白的表达，进而影响宫颈癌CaSki细胞的增殖和周期。     

Disabled －2基因去甲基化对肺癌细胞系 Wnt 通路及增殖能力的影响

目的：探讨 Dab2启动子区的甲基化状态及其对 Dab2表达的影响,对 Wnt 通路和肺癌细胞增殖能力的影响。方法：BSP 检测去甲基化试剂处理前后 BE1细胞启动子区 Dab2甲基化状态;Real －time PCR 检测去甲基化试剂处理前后 Dab2 mRNA 水平;Western blot 检测去甲基化试剂处理前后 Dab2变化和 Wnt 通路的变化;MTT 法检测 BE1细胞经去甲基化试剂处理后增殖能力的变化。结果：BE1细胞 Dab2基因启动子区处于高甲基化状态,经去甲基化试剂处理后 Dab2启动子区发生明显去甲基化（37％ vs 10．3％,P ＜0．01）,Dab2 mRNA 在去甲基化试剂处理后明显上调,Western blot 检测显示 BE1细胞经去甲基化试剂处理后 Dab2蛋白表达明显上调,而 Wnt 通路关键分子β－catenin 及其下游 Cyclin D1表达下调,BE1细胞经去甲基化试剂处理后增殖能力明显下调。结论：Dab2基因启动子区高甲基化抑制肺癌细胞中 Dab2转录水平和表达,Dab2基因去甲基化抑制 Wnt 通路,进而抑制肺癌细胞的增殖能力。     

RU486对前列腺癌细胞增殖相关基因表达的影响

目的:探讨米非司酮(RU486)对人前列腺癌PC-3和LNCap细胞增殖及相关基因Cyclin E、CDK2、p21和p27表达的影响.方法:体外培养前列腺癌PC-3和LNCap细胞,用RU486处理PC-3和LNCap细胞,CCK-8检测对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测对细胞周期的影响;RT-PCR法检测细胞增殖相关基因Cyclin E、CDK2,p21和p27mRNA的表达,蛋白质印迹法检测细胞增殖相关蛋白CDK2、pCDK2的表达.结果:RU486对PC-3和LNCap细胞体外增殖均有明显的抑制作用,且呈时间-剂量依赖性;25 μmol/L RU486处理PC-3和LNCap细胞24 h后,2种细胞均被阻滞在G1/S期;不同浓度的RU486处理PC-3和LNCap细胞24 h后,随着RU486浓度的增加,Cyclin E mRNA表达下降,p21和p27 mRNA表达增加,CDK2 mRNA表达无明显变化,但pCDK2表达呈下降趋势.结论:RU486能使前列腺癌LNCap和PC-3细胞周期阻滞在G1/S期,并能通过上调p21和p27 mRNA的表达,下调Cyclin E mRNA及磷酸化的CDK2蛋白而抑制细胞增殖.     

长链非编码RNA LINC01001 在乳腺癌中的表达及其对MCF-7细胞增殖的影响

目的：探讨长链非编码RNA LINC01001 在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌MCF-7 细胞增殖能力的影响。方法：筛选2016 年3 月至2017 年6 月于湖北医药学院附属人民医院甲状腺乳腺外科行手术切除的乳腺癌患者癌及癌旁组织12 例,qRTPCR检测乳腺癌组织及癌旁组织LINC01001 的相对表达量;通过重组质粒在人乳腺癌MCF-7 细胞中过表达LINC01001,采用流式细胞术和MTT 法检测过表达LINC01001 后MCF-7 细胞周期分布和增殖能力变化。qRT-PCR 检测miR-485-5p 和CDKN1A mRNA的表达变化,Western blotting 检测CDKN1A、CDK4、CDK6 和Cyclin D1 蛋白表达变化。结果：LINC01001 在乳腺癌组织中表达水平低于对应的癌旁组织（P<0.01）。LINC01001 重组质粒转染MCF-7 细胞后可显著抑制细胞周期进展（P<0.05）,抑制细胞的增殖能力（P<0.05）。过表达LINC01001 后,MCF-7 细胞的miR-485-5p 的表达水平降低（P<0.01）,CDKN1A mRNA表达水平升高（P<0.01）;可促进CDKN1A蛋白的表达和抑制CDK4、CDK6 和Cyclin D1 蛋白的表达。结论：LINC01001 在乳腺癌组织中表达降低,其可能通过下调miR-485-5p 的表达上调CDKN1A的表达来抑制乳腺癌MCF-7 细胞的增殖能力,为lncRNA 的临床应用提供实验基础。     

Implications of understanding cancer stem cell (CSC) biology in head and neck squamous cell cancer

Head and neck squamous cell cancer (HNSCC) is the sixth most common cancer in the world. Effective therapeutic modalities such as surgery, radiation, chemotherapy and combinations of each are used in the management of this disease. Efforts are ongoing throughout the world to improve early detection and prevention of HNSCCs. Often, treatment fails to obtain total cancer cure and this is more likely with advanced stage disease. In recent years it appears that one of the key determinants of treatment failure may be the presence of cancer stem cells (CSC) that 'escape' currently available therapies. CSCs form a minute portion of the total tumour burden but may play a disproportionately important role in determining outcomes. Molecular mechanisms which underlie the genesis of CSCs are yet not fully understood and their detection within the total tumour bulk remains a challenge. Specific markers like Aldehyde dehydrogenase 1 (ALDH1), CD44 and Bmi-1 have shown early promising results both in CSC detection and in guiding treatment protocols. CSCs have been shown to be relatively resistant to standard treatment modalities. It is hoped that developing robust in vitro and in vivo experimental models of CSCs might provide a means of devising more effective therapeutic strategies.     

黏蛋白1多肽通过small-MUC1蛋白抑制肿瘤细胞生长

目的：探讨黏蛋白1（mucin 1,MUC1）串联重复序列多肽(简称黏蛋白1多肽,MUC1多肽)对肿瘤细胞生长抑制的作用机制。方法：MUC1多肽与多种肿瘤细胞Jurkat、Raji、U937、MCF7、SMMC7721及活化的T细胞、小鼠巨噬细胞RAW264.7共同培养,观察MUC1多肽对上述细胞生长的影响;建立BABL/c小鼠Jurkat细胞皮下移植瘤动物模型,应用MUC1多肽进行治疗;采用GST免疫沉降实验鉴定与MUC1多肽结合的肿瘤细胞表面蛋白。结果：MUC1多肽对Jurkat、Raji、U937、MCF7和SMMC7721细胞的生长均有抑制作用,对活化的T细胞和小鼠RAW264.7细胞生长无明显抑制作用。MUC1多肽对BABL/c小鼠皮下Jurkat细胞移植瘤的生长均有明显抑制作用（P<0.05）。GST免疫沉降实验显示,Jurkat 和MCF7细胞裂解上清中与MUC1多肽结合的蛋白可与两种抗MUC1串联重复序列抗体（GP1.4和HMPV）及抗胞内段抗体（Ab5）发生反应,相对分子质量大约115 000,提示可能是MUC1新的同种型,命名为small MUC1（sMUC1）。结论：MUC1多肽可通过与肿瘤细胞表面small MUC1蛋白的相互作用向细胞传导生长抑制信号     

食管鳞状细胞癌患者外周血PD-1和PD-L1的表达及其临床意义

目的:检测食管鳞癌患者外周血中程序性死亡分子1 (programmed cell death 1,PD-1)、程序性死亡分子1配体(pro-grammed cell death ligand 1,PD-L1)及IFN-γ表达情况,并分析其临床意义.方法选取2016年6月至2017年4月河北医科大学第四医院胸外科90例食管鳞状细胞癌患者(其中50例患者行手术治疗)和40例健康对照者为研究对象,收集研究其外周血液标本,采用酶联免疫吸附方法检测血清中可溶性PD-1 (sPD-1)、可溶性PD-L1 (sPD-L1)及IFN-γ的表达水平.采用SPSS 24.0软件对数据进行检验和相关性分析.结果:食管鳞癌组血清中sPD-l、sPD-L1及IFN-γ水平均明显高于正常对照组(P＜0.05);食管鳞癌组手术前血清sPD-L1、IFN-γ水平均明显高于术后(P＜0.05),而sPD-1水平两组比较无明显差异(P＞0.05).sPD-1、sPD-L1的表达水平与临床病理特征无明显相关(P＞0.05),IFN-γ的表达水平与淋巴结转移情况相关(P＜0.05),与T分期、TNM分期、肿瘤体积大小、肿瘤部位、组织分化程度、性别、年龄无明显相关(P＞0.05).血清中sPD-L1表达水平与IFN-γ无明显相关(P＞0.05).结论:食管鳞癌患者血清中sPD-L1较正常人表达升高,且术后表达较术前减少,说明血清中sPD-L1表达水平与病情发展变化有一定相关性.     

食管鳞状细胞癌YES-2细胞顺铂耐药致其恶性生物学行为及PD-L1表达的变化

目的：探讨食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）YES-2 细胞顺铂（cis-dichlorodiammine platinum，CDDP）耐药后（YES-2/CDDP-R）细胞恶性生物学行为的变化和程序性死亡受体-配体1（programmed cell death-ligand 1 ，PD-L1）表达的变化。方法：用CDDP 由低质量浓度到高质量浓度（0.25~2.0 μg/ml）间断冲击（间隔15~25 d）的方法处理YES-2 细胞，建立CDDP耐药细胞株YES-2/CDDP-R。倒置显微镜下观察YES-2/CDDP-R 细胞的形态学变化，MTT法检测细胞对CDDP敏感性的变化，划痕愈合实验检测耐药前后细胞迁移能力的变化，qPCR和Western blotting 检测耐药前后细胞中PD-L1 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果：经过CDDP梯度给药9 个月后成功建立YES-2/CDDP-R 细胞。显微镜下见YES-2/CDDP-R 细胞的形态大小不一、胞内空泡及黑色颗粒明显增多且出现巨大细胞。与YES-2 细胞比较，YES-2/CDDP-R细胞的IC50值显著升高，表明其对CDDP的敏感程度降低（P<0.05）；YES-2/CDDP-R 细胞的增殖和迁移能力显著增强（P<0.05 或P<0.01），PD-L1 mRNA和蛋白表达水平显著升高（均P<0.01）。结论：成功建立的CDDP耐药细胞株YES-2/CDDP-R 对CDDP的敏感程度降低，其增殖和迁移能力增强。YES-2/CDDP-R 细胞中PD-L1 表达水平升高，提示CDDP耐药可能通过上调YES-2细胞PD-L1表达水平促进免疫逃逸。     

长链非编码RNA UCA1 靶向调控miR-185-5p 对非小细胞肺癌A549 细胞的作用及其机制

[摘要] 目的：探究长链非编码RNA（ long non-coding RNA,lncRNA)尿路上皮癌抗原1 ( urothelial carcinoma associated 1,UCA1) 调控非小细胞肺癌(NSCLC) A549 细胞增值、侵袭和迁移的作用及其机制。方法：NSCLC A549 细胞培养及慢病毒转染完成后,RT-PCR检测A549 细胞UCA1 表达水平,荧光素酶实验验证UCA1 和miR-185-5p 的靶向关系,MTT检测A549 细胞活性,Transwell 和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;Western blotting 检测Wnt1/β-catenin 信号通路蛋白的表达。结果：sh-UCA1 能显著抑制UCA1 表达并促进miR-185-5p 表达(均P<0.05),miR-185 inhibitor 可减弱sh-UCA1 对miR-185-5p 表达的促进作用(P<0.05),UCA1 能明显抑制miR-185-5p 表达(P<0.05),miR-185 mimic 可减弱UCA1 对miR-185-5p 表达的抑制作用(P<0.05)。荧光素酶报告实验表明UCA1 序列上有miR-185-5p 的结合位点。sh-UCA1 能显著抑制A549 细胞增殖、侵袭和迁移(均P<0.05),并能降低信号通路蛋白Wnt1、β-catenin 信号和TCF-4 表达水平(均P<0.05);miR-185 inhibitor 能显著减弱sh-UCA1 对A549 细胞的增殖、侵袭、迁移及对Wnt1/β-catenin 通路蛋白表达的抑制作用(P<0.05)。结论：UCA1 可通过靶向miR-185-5p 促进NSCLC细胞的增殖、侵袭和迁移,其作用机制与Wnt1/β-catenin信号通路激活有关。     

RASA1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨Ras p21 蛋白活化子1（RASA1）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与临床病理特征的关系。方法 收集2013年3月至2016年1月202例NSCLC组织和60例癌旁组织。采用免疫组织化学SP法及组织芯片技术检测上述组织中RASA1蛋白的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。结果 RASA1在NSCLC组织中的高表达率为74.8％（151／202）,低于癌旁组织中的93.3％（56／60）,差异有统计学意义（P=0.002）。RASA1在NSCLC组织中的表达与病理类型有关（P=0.000）,而与性别、年龄、淋巴结转移及临床分期均无关（P＞0.05）。结论 RASA1在NSCLC组织中低表达,其可能在NSCLC的发生、发展中发挥抑癌蛋白的作用。     

免疫检查点PD-1／PD-L1通路在小细胞肺癌中的作用

小细胞肺癌（SCLC）主要的特点为生长迅速且早期易发生广泛转移。尽管SCLC对于化疗和放疗敏感,但几乎所有的患者均在治疗后发生复发转移,预后差。免疫检测点抑制剂,尤其程序化细胞死亡受体-1（PD-1）／程序化细胞死亡配体-1（PD-L1）拮抗剂在SCLC的临床前和临床研究中均获得了良好效果,并且能够延长患者生存。免疫检测点疗法作为一种新兴的方法在未来可能会改变SCLC治疗模式。此外,有限的数据显示出PD-L1表达可能成为筛选获益人群一个有效的生物标记物。本文总结PD-L1作为标记物的发展历程,并同时阐述PD-1／PD-L1抑制剂在SCLC治疗中的进展。