胰腺癌错配修复基因的表达

目的探讨胰腺癌错配修复基因hMLH1的表达与临床病理特征的关系。方法分别取60例胰腺癌组织及60例正常胰腺组织标本,采用免疫组化SP法检测hMLH1在胰腺癌与正常胰腺组织的表达并比较其差异。结果胰腺癌hMLH1的强表达为0％,弱表达为31．7％（19／60）,缺失表达为68．3％（41／60）;正常胰腺组织hMLH1强表达为83．33％（50／60）,弱表达为16．67％（10／60）,缺失表达为0％,2组比较差异有统计学意义（P〈0．001）。胰腺癌hMLH1蛋白表达在患者年龄、胰腺癌的位置、病理类型等方面差异无统计学意义（P〉0．05）,在淋巴结转移（x2=8．579,P=0．004）、临床分期（X2=9．586,P=0．002）、病理分化程度（x2=20．372,P=0．001）方面差异有统计学意义。结论hMLHl基因缺失表达与胰腺癌发生、分化程度、病情进展有关。     

胰腺癌P53蛋白的表达与肿瘤生物学行为及预后的关系

目的：探讨胰腺癌组织P53蛋白的过度．表达与肿瘤生物学行为及预后的关系。方法：应用单克隆抗P53抗体对28例胰腺癌组织石蜡标本进行免疫组织化学染色,结果：P53蛋白阳性物质位于肿瘤细胞核内,28例胰腺癌病例中有16例P53表达阳性（57．1％）,与正常胰腺和癌旁组织比较,差异有显著性（P＜0．05）,且阳性率随分化程度的降低而升高（P＜0．05）,淋巴结转移阳性组表达率高于淋巴结转移阴性组（P＜0．05）,与术后存活情况有关（P＜0．05）,结论：P53基因的异常表达在胰腺癌的发展过程中起重要作用,对胰腺癌病人的预后判断有一定意义。     

MMP-9在胰腺癌中的表达及意义

目的：探讨MMP-9在胰腺癌发生、发展及转移过程中的意义。方法：采用免疫组织化学S-P法,检测 MMP-9在53例胰腺癌组织（胰腺癌组）及10例正常胰腺组织（对照组）中的表达,并与临床病理学资料进行分析比较。结果：胰腺癌组织中MMP-9的阳性表达明显高于正常胰腺组织（P＜0．05）。 MMP-9的表达与胰腺癌的临床分期及淋巴结有无转移有关（P＜0．05）。结论：胰腺癌组织中 MMP-9的表达与淋巴结转移及临床分期相关。     

细胞间隙连接蛋白43在胰腺癌组织表达及其意义

①目的探讨细胞间隙连接蛋白43（Cx43）在胰腺癌及正常胰腺组织中的表达、定位及其在胰腺癌发生和发展中的意义。②方法应用免疫组织化学方法检测47例胰腺癌、25例淋巴结转移灶和10例正常胰腺组织中Cx43蛋白的表达和定位。③结果Cx43蛋白在10例正常成人胰腺导管及腺泡细胞均呈阳性表达,47例胰腺癌组织Cx43表达阳性率为44．7％,而25例淋巴结转移灶中Cx43表达阳性率为20．0％。Cx43蛋白在正常胰腺、胰腺癌和淋巴结转移灶中的阳性表达率差异具有显著性（x^2=18．59,P〈0．01）。Cx43蛋白阳性表达率在组织学Ⅰ级的胰腺癌明显高于组织学Ⅲ级（P=0．047）;无周围脏器浸润的胰腺癌组织中Cx43蛋白阳性表达率为70．6％,有浸润者为30．0％,二者间差异有显著性（x^2=7．23,P〈0．01）;无淋巴结转移的胰腺癌组织Cx43阳性表达率（63．6％）高于有转移者（28．0％）,差异有显著性（x^2=6．01,P〈0．01）。Cx43蛋白阳性表达率与胰腺癌的大小和1年生存率无关（x^2=2．21、2．07,P〉0．05）。④结论Cx43蛋自在胰腺癌中的表达下调和定位异常可能是胰腺癌发生的重要环节。Cx43蛋白表达水平可以作为判断胰腺癌分化程度、浸润转移能力的重要指标。     

原发性胰腺癌中p16基因突变及其蛋白表达的研究

目的：探讨p16基因与胰腺癌发生的关系。方法：采用PCR基础缺失分析，PCR－SSCP及免疫组织化学方法检测28例胰腺癌组织，相应癌旁组织和4例正常胰腺组织中p16基因缺失，突变及其蛋白表达状况，并结合临床病理资料进行分析，结果：28例原发性胰腺癌组织中4例发生p16基因纯合缺失。5例发生p16基因突变，p16基因变异频率为32．1％，28例癌旁组织和4例正常胰腺组织中未发现纯合缺失及突变。p16基因变异频率与淋巴结转移（P＜0．025），转移淋巴结个数（P＜0．01）及临床分期（P＜0．05）密切相关。28例原发性胰腺癌的癌组织，癌旁组织和4例正常胰腺组织p16蛋白阳性表达率分别为57．1％（16／28），85．7％（24．28）和100％（4／4），癌组织中p16蛋白阳性表达率与组织学分化（P＜0．05），淋巴结转移（P＜0．05），转移淋巴结个数（P＜0．05）及临床病理分期（P＜0．05）密切相关。结论：p16基因变异及其蛋白失表达可能是胰腺癌发生发展过程中重要因素之一，而且二者均可作为评估胰腺癌恶性程度及其侵袭能力的有用指标，存在p16基因变异及蛋白失表达的原发性胰腺癌具有更强的恶性潜能。     

PTEN及Survivin在胰腺癌中的表达及意义

目的探讨胰腺癌及正常胰腺组织中FFEN和Survivin的表达及PTEN和Survivin在胰腺癌发展中的作用。方法采用免疫组化的方法检测48例胰腺癌中及15例正常胰腺组织中PETN、Survivin的表达情况。结果48例胰腺癌组织标本中PTEN、Survivin表达阳性率分别为31．3％（15／48）、77．1％（37／48）,正常胰腺组织标本中PTEN、Survivin表达阳性率分别为66．7％（10／15）、0（0／15）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）;胰腺癌组织中PETN、Survivin的表达与患者的性别、年龄均无关（P〉0．05）,与癌细胞分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0．05）。Survivin与PETN在胰腺癌组织中的表达呈负相关（r=-0．381,P〈0．05）。结论Survivin的异常高水平表达及PTEN的表达缺失与胰腺癌的发生、发展、转移及浸润密切相关。     

nm23-H1蛋白在食管癌组织中的表达及意义

目的：探讨肿瘤转移抑制基因（nm-23H1）蛋白在不同食管癌组织中表达及与临床的意义。方法：选取收治的60例食管癌患者,取患者手术标本包括食管癌组织、食管癌旁1cm粘膜（癌旁）、食管正常粘膜（切缘）及食管癌区域淋巴结,采用流式细胞仪检测不同组织标本中nm23-H1蛋白表达水平。结果：癌组织与癌旁组织、组织切缘之间nm23-H1蛋白表达比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）;nm23-H1蛋白在癌组织与淋巴结表达比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;在有、无淋巴结转移两组对应组织间,癌与癌、癌旁与癌旁、淋巴结与淋巴结比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）;nm23-H1蛋白在切缘与切缘间表达比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。nm23-H1蛋白表达与食管癌组织病理分期有关,呈逐级降低趋势（P〈0．05）。结论：nm23-H1蛋白检测可作为食管癌判断肿瘤淋巴结转移的重要指标,有助于对食管癌患者术后转移的判断。     

MUC4和ErbB2在胰腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨MUC4和ErhB2在胰腺癌中的表达及临床意义。方法 免疫组化SP法检测60例胰腺癌．12例慢性胰腺炎及8例正常胰腺组织标本中MUC4和ErbB2蛋白的表达。结果 MUC4和ErbB2在胰腺癌中的表达率较慢性胰腺炎及正常胰腺组织均明显升高（P＜0．01）；ErbB2随胰腺癌病理分化程度的降低．阳性表达率逐渐增高（P〈0．05）；MUC4和ErbB2在临床Ⅲ～Ⅳ期胰腺癌中的表达率均明显高于Ⅰ～Ⅱ期（P〈0．05），在伴淋巴结转移的39例胰腺癌患者中的表达率亦较无淋巴结转移者明显升高（P＜0.05或P＜0.01）。结论 MUC4可能是一个特异的胰腺癌肿瘤相关标志物．与ErbB2共同在胰腺癌的发生、发展中发挥重要作用。     

上皮间质转化在食管鳞状细胞癌转移中的作用

目的：观察上皮间质转化相关标记物E-钙黏蛋白（E-cadherin）和Vimentin基因及其蛋白在食管鳞状细胞癌淋巴结转移组和非转移组中的表达,并分析E-cadherin和Vimentin表达的相关性。方法采用免疫组织化学SP法和实时定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测47例有淋巴结转移、30例无淋巴结转移的食管癌和20例正常食管组织中E-cadherin和Vimentin基因及其蛋白的表达情况。结果对照组、非转移组与转移组 E-cadherin蛋白表达分别为20/20（100％）、29/30（96．67％）和44/47（93．62％）,组间比较差别有统计学意义（ P＜0．05）。转移组的高表达率22/47（46．8％）低于非转移组18/30（60％）,但差别无统计学意义（ P＞0．05）。Vimentin蛋白在对照组、非转移组、转移组阳性表达率逐渐增高,分别为0/20（0）、11/30（36．67％）、37/47（78．72％）,组间比较差别有统计学意义（ P＜0．05）,转移组与非转移组间比较差别有统计学意义（ P＜0．05）。Vimentin和E-cadherin表达呈显著负相关,相关系数（ r＝-0．377）。qRT-PCR检测显示非转移组和转移组中E-cadherin和Vimentin mRNA表达量与对照组比较差别有统计学意义（P＜0．05）。E-cadherin基因的表达在转移组（0．43±0．23）与非转移组（0．51±0．54）间的差别无统计学意义（ P＞0．05）,而转移组 Vimentin表达（4．05±1．88）明显高于非转移组（2．70±1．73）,差别有统计学意义（ P＜0．05）。结论上皮间质转化相关基因E-cad-herin和Vimentin与食管鳞癌的转移密切相关,可作为预测食管癌转移复发及评估临床预后的有效标记物。     

钙离子结合蛋白S100A4在胰腺癌组织中的表达及其意义

目的探讨胰腺癌组织中钙离子结合蛋白S100A4的表达及其临床意义。方法应用免疫组化EliVisionTMPlus法检测70例手术切除的原发洼胰腺癌组织及15例癌旁非肿瘤胰腺组织中S100A4蛋白的表达情况,比较S100A4表达与临床病理指标的关系。结果70例标本中S100A4阳性率为74．3％（52／70）,而癌旁非肿瘤胰腺组织中未见表达,差异有统计学意义（χ2=28．70,P〈0．05）;S100A4表达与性别、年龄及肿瘤部位无关（P〉0.05）,与肿瘤大小、分化程度、TNM分期、淋巴结转移、生存期显著相关（P〈0.05）。S100A4表达阳性组与阴性组之间无瘤生存率（χ2=13．12,P〈0．05）及总体生存率（χ2=20.64,P〈0.05）差异均有统计学意义。结论S100A4蛋白的高表达与胰腺癌的临床病理指标密切相关,其高表达提示患者预后不良。     

舌鳞癌中微淋巴管密度与淋巴结转移之间的关系

目的分析舌鳞癌组织中微淋巴管密度（LMVD）与淋巴结转移之间的关系。探讨微淋巴管密度在预测舌鳞癌淋巴结转移中的作用。方法应用免疫组化方法,在69例舌鳞癌中用淋巴管内皮细胞特异性抗体D2—40标记淋巴管,计数肿瘤LMVD,结合临床病理因素进行分析。结果舌鳞癌中微淋巴管密度为33．24±0．09,明显高于正常黏膜微淋巴管密度（6．23±0．23）（P〈0．01）;淋巴结转移组微淋巴管密度为38．15±0．35．明显高于非转移组（27．56±0．05）（P〈0．05）。结论LMVD密度与舌鳞癌淋巴结转移呈正相关,其中舌鳞癌微淋巴管密度测定对预测其淋巴结转移可能具有重要意义。     

HIF-1α、MMP-1和 VEGF-C 在喉鳞癌组织中的表达及其与颈转移的相关性研究

目的：比较声门上型喉鳞状细胞癌与癌旁正常组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）和血管内皮生长因子-C（VEGF-C）的表达,探讨其与临床病理参数、颈淋巴转移之间的关系以及三者之间的相关性。方法免疫组化 SP 法检测30例声门上型喉鳞状细胞癌及其癌旁正常组织中 HIF-1α、MMP-1和VEGF-C 的表达情况,并对喉癌组织按年龄、T 分期、病理分级、淋巴转移进行分组,探讨三者与各临床病理参数、颈淋巴转移之间的关系。结果喉鳞状细胞癌组织中 HIF-1α、MMP-1、VEGF-C 高表达明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义（P 〈0.05）,在癌组织中,三者表达均与病理分级、TNM 分期有关（ P 〈0.05）,与年龄无关（ P ＆gt;0.05）,三者在淋巴结转移组中的高表达率明显高于未转移组,HIF-1α和 VEGF-C、HIF-1α和 MMP-1、MMP-1和VEGF-C 均呈正相关。结论喉鳞癌中 HIF-1α、MMP-1、VEGF-C 的高表达与颈淋巴转移密切相关,三者可能成为预测喉鳞癌转移和预后的生物学指标。     

胃癌淋巴管上皮β—catenin表达与癌转移相关性的研究

目的：通过试验来研究胃癌组织微淋巴管β—catenin的表达及癌细胞转移之间的关系与发生机制。方法：正常胃组织标本2例,胃癌病理组织32例。采用免疫组化方法,通过LYVE-1标记定位,对比不同条件下的转移与分化间的胃癌淋巴管β-catenin的表达情况。结果：LYVE-1在正常组织及癌组织中的微淋巴管上皮呈表达阳性,而正常组织微淋巴管β—catenin表达呈阴性,胃癌组织β—catenin在胃癌微淋巴管中表达不显著,β—catenin在微淋巴管的表达低分化表达率为66．4％,在有转移组中表达率67．7％,分别同高分化组和无转移组表达差异显著（P〈0．05）。结论：癌细胞的转移与胞质中β—catenin积累相关,促进了胃癌细胞周围微管道形成,提高了癌细胞的转移几率。     

肝细胞生长因子在甲状腺乳头状癌的表达及其与淋巴管生成的关系

目的:探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织的表达及其与肿瘤淋巴管生成的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法,检测52例PTC和20例癌旁正常甲状腺组织HGF表达和特异性淋巴管内皮标志物D2-40标记的微淋巴管密度(micro-lymphatic vessel density,MLVD),结合PTC的临床病理参数作相关统计学分析。结果:PTC癌组织HGF、MLVD较癌旁正常甲状腺组织明显增高(P<0.01),有无淋巴结转移组间差异有统计学意义(P<0.05);HGF表达与癌旁MLVD之间呈明显的正相关关系(P<0.01)。结论:HGF的过表达和MLVD增高与PTC发生、发展有关;HGF可促进肿瘤淋巴管生成。     

EphB4受体及其配体EphrinB2 mRNA在卵巢癌组织中的表达及与血管生成的关系

目的检测EphB4和EphrinB2mRNA在卵巢癌组织中的表达,探讨其在卵巢癌发生、发展及血管生成过程中的作用。方法采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法检测30例卵巢癌和10例正常卵巢组织中EphB4和EphrinB2mRNA的相对含量,同时利用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接（SP）法检测上述组织的微血管密度（MVD）,分析EphB4和EphrinB2mRNA的表达与各种临床病理参数和血管生成的关系。结果①卵巢癌组织中EphB4mRNA、EphrinB2mRNA的表达均高于正常卵巢组。②EphB4、EphrinB2mRNA的表达与卵巢癌临床分期及淋巴结转移有关。③卵巢癌组织中EphB4和EphrinB2mRNA的表达与组织中微血管密度正相关。结论 EphB4和EphrinB2可能在卵巢癌的发生、发展及血管生成中发挥重要作用。     

胃癌组织中VEGF—C、VGFR-3表达和微淋巴管密度的研究

目的探讨血管内皮生长因子C（VEGF—C）及其受体-3（VEGFR-3）在胃癌组织中的表达,分析其表达与微淋巴管密度（LVD）和胃癌生物学行为之间的关系。方法采用组织微阵列技术,通过免疫组化sP法检测胃癌组织标本125例、癌旁正常组织96例中VEGF—C、VEGFR-3的表达,以Podoplanin标记微淋巴管密度（LVD）进行计数。结果VEGF—C和VEGFR-3在胃癌组织和癌旁正常组织中的阳性表达率分别为62．4％、56．0％和10．41％、12．5％,差异有统计学意义（均P〈0．05）,VEGF—C和VEGFR一3表达与LDV、胃癌淋巴结转移、临床分期、远处转移及CEA均呈正相关（P〈0．05）,VEGFR一3表达与Ca19—9呈正相关（P〈0．05）而VEGF—C的表达则与CA19—9无相关（P〉0．05）;胃癌组织中LVD计数为（2．98±0．81）个高于癌旁正常组织中计数（1．82±0．63）个,差异有统计学意义（P〈0．05）,且癌周LVD计数高于癌内LVD计数（P〈0．05）。结论胃癌组织中VEGF—C和VEGFR-3均呈高表达,与淋巴管生成有关并参与了胃癌的发生、浸润和转移。     

血管内皮生长因子C的表达和微淋巴管密度与食管癌淋巴结转移和预后的关系

目的探讨食管癌组织中血管内皮生长因子C（VEGF-C）的表达和微淋巴管密度（LVD）与食管癌淋巴结转移和预后的关系,揭示食管癌淋巴转移的可能机制。方法采用免疫组化法定性检测59例食管癌组织中VEGF-C的表达,同时采用淋巴管特异性标记物血管内皮生长因子受体3（VEGFR-3）进行免疫组化染色检测淋巴管密度,以CD34标记血管内皮检测微血管密度作为对比,结合食管癌临床病理参数和预后分析。结果食管癌组织VEGF-C的阳性表达率显著高于正常组织（P=0.05）,食管癌组织淋巴管密度（31.21±11.47）较正常组织（11.71±4.70）明显增高（P〈0.01）。淋巴结转移组VEGF-C/LVD显著高于淋巴结无转移组（P〈0.01,P〈0.05）。淋巴结转移组术后2年生存率（33.42%）显著低于无淋巴结转移组（66.93%）（P〈0.05）,VEGF-C阳性组术后2年生存率（26.69%）显著低于VEGF-C阴性组（66.95%）（P〈0.01）。结论食管癌组织VEGF-C和LVD与淋巴结转移存在显著相关,肿瘤组织可能通过调控VEGF-C促进淋巴管的生成,为肿瘤的淋巴转移提供通道,进而影响食管癌患者的预后。     

生长激素受体在宫颈癌组织中的表达及其意义

目的:研究生长激素受体(Growth hormone receptor,GHR)在人宫颈癌组织中的表达情况,探讨其在宫颈癌发生发展中的作用机制。方法:应用免疫组织化学方法对30例宫颈上皮内瘤样病变(CINⅠ-Ⅲ)、60例宫颈癌组织及30例癌旁正常组织中GHR的检测,研究GHR在不同病理类型、分期、分化程度宫颈癌组织中的表达水平。结果:宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤样病变、癌旁正常组织中GHR表达率分别为70.0%、46.7%、40.0%。GHR在宫颈癌组织中的表达显著高于宫颈上皮内瘤样病变组织及癌旁正常组织(P<0.05),GHR在宫颈癌组织中表达与淋巴结转移、分化程度、临床分期密切相关(P<0.05)。结论:GHR在宫颈癌的发生、发展中起重要作用,可以作为反映宫颈癌生物学行为的有效指标之一。     

肺鳞癌神经内分泌分化的生物学特性

目的：探讨肺鳞癌伴神经内分泌（neuroendocrine NE）分化的生物学特性。方法：2003-01-2005-01收受手术治疗且病理为肺鳞癌的患者共67例。收集手术切除标本以及患者临床和术后随访资料。应用免疫组化二步法检测肿瘤组织标本中神经内分泌标记物神经元特异性烯醇化酶（NSE）和突触素（Syn）的表达。结果：肺鳞癌组织中NE标记NSE和Syn的阳性表达率分别为47.76%、31.34%,肺鳞癌中有淋巴结转移的NSE和Syn的阳性表达显著高于非淋巴结转移组（P〈0.05）,伴NE分化的肺鳞癌与其临床分期及预后无明显相关性（P〉0.05）。结论：伴有NE分化的肺鳞癌更容易出现淋巴结的转移,而与肿瘤的临床分期无明显相关性,不能作为其判断预后的独立指标。     

肝再生磷酸酶3基因与胃癌恶性进展相关性研究

目的：检测肝再生磷酸酶3（PRL-3）mRNA在胃癌、癌旁正常组织及其转移灶中的表达,探讨其与胃癌发生发展以及侵袭转移的生物学行为之间的关系。方法：半定量PCR测定22例胃癌组织及其相对应的癌旁正常组织、6例远处转移灶PRL-3 mRNA相对表达水平,并分析其表达水平与临床病理学指标的关系。结果：22例胃癌组织中PRL-3基因表达量较相应癌旁正常组织中高,但差异无统计学意义（0.95±0.24 vs 0.85±0.27,P〉0.05）。6例转移灶PRL-3基因表达量（2.04±0.44）显著高于原发肿瘤（1.26±0.26）（P〈0.05）。PRL-3基因表达水平与肿瘤远处转移有相关性（P〈0.05）,而与肿瘤大小、分化程度、浸润深度及性别无关（P〉0.05）。结论：PRL-3基因在胃癌恶性进展中起重要作用,PRL-3可能成为判断胃癌转移高危因素的一个生物学标志物。