腈水合酶耐底物突变株的筛选及产酶条件优化

采用紫外诱变和梯度平板法筛选出耐底物的突变株,通过单因素实验考察发酵液起始pH值、装液量、发酵周期、接种量对产酶的影响,确定最佳的发酵条件;采用均匀设计实验优化发酵培养基。筛选出．株能耐受4％丙烯腈的腈水合酶产生菌,在最佳产酶条件下,耐底物突变株的腈水合酶酶活达到11．5MU／mL,与优化前相比,酶活提高了49．35％。腈水合酶耐底物突变株的最佳发酵条件为：初始pH7．0、装液量16％、发酵周期58h、接种量10％。最佳发酵培养基配方为：ρ（葡萄糖）=26g／L,ρ（酵母膏）=2g／L,ρ（尿素）=4g／L,ρ（谷氨酸钠）=0．5g／L,ρ（K2HP04）=0．2g／L,ρ（KH2P04）=0．2g,／L,ρ（MgS04）=0．05g／L,φ（DXL）=0．5mL／L。     

枯草芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的发酵条件优化分析

为获得枯草芽孢杆菌产旷β-甘露聚糖酶的最佳发酵条件,分别对碳源、氮源、碳氮质量比、发酵时间和培养温度进行了单因素实验,在此基础上对发酵温度、接种量、培养基初始pH值和发酵时间四因素进行了L9（3^4）正交优化试验．结果表明枯草芽孢杆菌分泌β-甘露聚糖酶的最佳碳源为40g／L魔芋精粉,最佳氮源为5g／L酵母抽提物,两者最佳质量比为5：1,最佳发酵条件为30℃的条件下摇瓶培养28h;最佳发酵参数组合为发酵温度30℃、接种量5％、培养基初始pH6．5、发酵时间28h;各因素对枯草芽孢杆菌产β－甘露聚糖酶的影响程度大小依次为发酵时间〉发酵温度〉接种量〉培养基初始pH,其中发酵时间对产酶的影响最为显著。     

高效表达AIM工程菌的发酵培养基及发酵条件优化

为了进一步提高工程菌的载脂蛋白AI米兰突变体（AIM）的表达量,降低发酵成本,通过碳氮源优化实验并结合正交实验筛选出该工程菌产A1M的最适培养基为（g／L）：蔗糖10,酵母粉10,硫酸铵6和NaCl10;最适发酵条件为：装液量30mL,接种量8％,诱导时机A600 1．0,诱导剂浓度0．8mmol／L,诱导时间6h．在此优化的条件下,A1M的表达量为2．26g/L,是未优化条件下的1．58倍．     

酪酸梭状芽孢杆菌发酵培养基的优化

验证了高层半固体琼脂试管法比固体琼脂平板法更具有良好的厌氧性能,能准确地对酪酸梭状芽孢杆菌进行活菌计数．通过对发酵培养基中不同碳源、氮源、生长因子进行单因素研究,L9（3^3）正交实验进一步优化得到最佳培养基组成为（g／L）：胰蛋白胨10,葡萄糖8,酵母膏4．用此培养基在37℃培养24h,活菌数可达4．1×10^8mL^-1．培养基中添加K2HPO45g／L、MgSO4-7H2O0．2g／L、MnSO4·H2O0．2g／L、CaCO31g／L培养32h时,酪酸梭状芽孢杆菌芽孢转化率可达95％．     

高产S-腺-苷蛋氨酸啤酒酵母诱变选育及其培养条件

为了筛选高产S-腺-苷蛋氨酸（SAM）啤酒酵母突变株，采用不同剂量^60Coγ射线对出发啤酒酵母菌悬液进行反复辐射处理，最终得到SAM高产突变株S—W55，并研究了其最优培养条件。结果表明最优化培养基为（％）：葡萄糖4、L-蛋氨酸0．03、酵母浸粉0．4、CaCl2 0．01、KH2PO4 0．4、NaH2PO4 0．1、MgSO4 0.1，此条件下摇瓶发酵突变株S-W55的生物量和SAM产量分别达到12.15g/L和1．88g／L，分别比未优化前提高了27．1％和19．7％。10L发酵罐放大培养表明酵母突变株S—W55最适培养温度和pH值分别为28℃和5.0，发酵罐中其生物量、SAM产量比摇瓶发酵有了进一步的提高。     

细菌BK2产壳聚糖酶的发酵条件及壳寡糖的制备

优化了菌株BK2发酵产壳聚糖酶的条件：葡萄糖20g／L，壳聚糖0．3g／L，硝酸铵15g／L．接种量1，5％（10^7 cell／mL），发酵起始pH6．0．发酵温度30℃．培养时间48h．BK2发酵液中的壳聚糖酶活力可达到1．29U／mL．用酶液降解壳聚糖，分离提取粗产品，采用薄板层析法进行组分分析．分析结果表明．壳聚糖已被降解成含有不同分子质量的壳寡糖混合物，     

培养基组成对雅致放射毛霉发酵生产壳聚糖的影响

研究了发酵培养基中不同碳源、氮源、无机盐对雅致放射毛霉（Actinomucor elegans）合成壳聚糖的影响．采用单因素和响应面法优化了发酵培养基中玉米粉和玉米浆这两种主要成分的最佳添加量组合．结果表明,最佳培养基组成为（g／L）：玉米浆68,玉米粉液化液42,KH2PO42,MgSO42．采用优化后的培养基,壳聚糖产量最大达到2．223g／L,比优化前提高了64．30％．     

Ochrobactrum intermedium DN2发酵培养基优化研究烟碱降解酶

研究工作中筛选得到一株有较强烟碱降解能力的新型烟碱降解细菌Ochrobactrum intermediu mDN2，对其产烟碱降解酶的发酵培养基进行了优化。采用Plackett-Burman设计法，对影响Ochrobactrum intermediumDN2产烟碱降解酶的15个因子进行了筛选。结果表明，影响该茵发酵产酶的显著因子为：烟碱、酵母膏、葡萄糖、tween-80的质量浓度和培养基初始pH。在此基础上，采用响应曲面法对以上5个显著因子进行了优化。得到各因子最佳水平为：烟碱2．183g／L，葡萄糖0．823g／L，酵母膏0．844g／L，Tween-800．976g／L，初始pH6．9。在此优化条件下获得实际酶活为7943U／L，与预测值8060U／L相近，比优化前提高了52％。     

产生物表面活性剂细菌的筛选及发酵条件优化

利用变色圈法、排油圈法从土壤和污泥等样品中分离筛选出1株产生物表面活性剂的细菌菌株WB,并通过单因素实验及L9（3^4）正交实验对该菌株的培养基配方及培养条件进行优化．结果表明：在葡萄糖10g／L,麸皮25g／L,酵母粉0．9g／L,培养基初始pH值为7．2,250mL摇瓶装液量为50mL,发酵时间为72h的条件下,菌株WB的表面活性剂的产量可达3．6g／L．     

红曲霉液态发酵产洛伐他汀条件的研究

对红曲霉GM026产洛伐他汀的液态发酵培养基成分和发酵条件进行了研究．结果表明。最佳培养基组成：甘油9％,大豆粉0．75％,NANO30．2％,MgSO4·7H2O0．05％。KH2PO40．15％;最佳发酵条件：培养温度26℃,初始pH=5．0,接种量7％,250mL三角瓶装液量为50mL,摇床转速170rad／min。在上述条件下。发酵培养14d,洛伐他汀产量达到375．853mg／L．     

产海藻糖酵母的培养条件优化研究

对产海藻糖酿酒酵母进行培养条件优化,得到的最适条件为:每升发酵液中葡萄糖10 g,酵母膏7.5 g,尿素7.5 g,KH2PO42.5 g,Na2HPO42.5 g,微量元素液7.5 mL,发酵初始pH为7.0,对数生长期培养温度选择30℃,稳定期培养温度37℃,装液体积分数40%。摇瓶优化后海藻糖质量比为152 mg/g,约为优化前的2.3倍。选用最优条件在5 L发酵罐中进行培养,培养过程中两次补料,确定最佳培养时间为52 h,在该时间海藻糖产量为1 072 mg/L,比摇瓶中培养的最高值831mg/L高出241 mg/L。     

冬虫夏草液体发酵产胞外多糖的实验条件

为提高虫草多糖产率,优化了冬虫夏草液体发酵条件。最佳发酵条件为:葡萄糖30 g/L,豆粕20 g/L,MgSO42 g/L,KH2PO44 g/L,pH值为7.0,接种量10%,培养温度24℃,摇床转速140 r/min。在此条件下,胞外多糖的最高产量为3.928 g/L。利用液体发酵生产胞外多糖,可有效地缩短生产周期。     

美味牛肝菌在气升式反应器中的培养

以1.5L外循环气升式反应器进行美味牛肝首的深层培养试验,其最适通风量为：0～24h0.3vvnm;24～72h0.4vvm.;72～120h0.5vvm.培养时间较摇瓶培养可提前大约12h,菌丝干重可达26.3g／L.     

姬松茸茵丝体深层液体发酵条件的优化

主要研究了姬松茸深层液体发酵培养条件对菌丝生物量和胞内多糖产量的影响．确定了最佳培养条件为：培养基中玉米粉加量3％,豆饼粉0．3％,250mL摇瓶装液量45mL,发酵温度25℃．在此培养条件下,胞内多糖产量达到7．26g／L．并通过培养基中添加8种中草药提取液,发现生地黄对姬松茸多糖产量有一定的提高作用,多糖产量可达7．83g／L．     

红曲霉产红色素液相发酵条件的优化

为获取更多红色素,进行了对液态发酵的最佳营养液组成和环境条件研究。最佳碳源和氮源确定为葡萄糖和谷氨酸钠,添加浓度分别是30 g/L和1.5 g/L时,最适宜产红曲色素。研究的三种微量元素中,Fe2＋明显有利于提高红色素产量,Mn2＋也有提高色素产量的作用,但不如Fe2＋添加效果好。最适宜培养基起始pH值为6.5,摇瓶旋转速度为700 rpm。在最佳条件下,分批发酵时生物体产量为0.20 gDCW/g葡萄糖,红色素产量为32.5OD500g/（DCW.h）。     

固定化胰蛋白酶及其用于制备酪蛋白磷酸肽(CPPs)的实验研究

以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂进行胰蛋白酶的固定化实验。实验条件：壳聚糖0．2g，交联剂浓度9％，交联温度30℃，交联时间2h，加酶量0．8mg，pH值8．0，固定化时间1h，固定化温度4℃。实验结果表明：固定化胰蛋白酶的最适温度为55℃，比溶液酶提高了15℃，活力回收率为50．8％。此外进行了利用固定化胰蛋白酶制备酪蛋白磷酸肽(CPPs)的实验，测定了其持钙能力，发现CPPs浓度为0．5g／L和0．2g／L时能完全阻止磷酸钙沉淀生成，浓度为0．1g／L时能使磷酸钙沉淀生成推迟20min，浓度为0．06g／L和0．04g／L时能使磷酸钙沉淀生成推迟10min。     

北虫草液体培养基的研究

为选取北虫草的最适液体培养基,以三因素三水平的正交试验设计培养北虫草的液体培养条件,北虫草菌种的接种量为5%(体积分数)。培养条件为18℃,pH为6.5,转速为120r/min,培养时间为72h。通过对培养所得的北虫草菌丝体干质量的测定分析可以得出培养北虫草的碳源最优水平为葡萄糖,氮源最优水平为NH4NO3,无机离子最优水平为K2HPO4。从而得到该菌种的最适液体培养基的配方(质量浓度)葡萄糖,NH4NO3,K2HPO4分别为20,1,1g/L。根据数据分析的R值和F值均可以确定:碳源为最重要的因素,应将其控制在最优水平,所以培养北虫草应该选取最优葡萄糖水平。实验结果为进一步大规模培养北虫草提供了重要的依据。     

表达牛肉风味强化肽P.postoris GS115（pGAP9-16BMP）摇瓶发酵条件的优化

从碳源种类及质量浓度、氮源质量浓度、温度、pH等方面对构建的工程菌P.postoris GS115（pGAP9-16BMP）摇瓶发酵条件进行了优化.结果表明,最佳表达条件为：甘油30 g/L,蛋白胨40 g/L,酵母粉20 g/L,挡板三角瓶装液量为30%,菌体生长阶段控制温度32℃,初始pH 6.0,培养96 h.在此条件下,牛肉风味强化肽BMP（Beefy Meaty Peptide）表达量最高为41.9 mg/L.     

酿酒酵母SC408转化3-甲硫基丙醇条件的研究

研究了一株产3-甲硫基丙醇的产香酵母菌Saccharomyces cerevisiae SC408的培养基组分和转化条件.均匀试验设计优化后的培养基组分为：氨基酸4.0 g/L、KH2PO48.0 g/L、K2HPO46.0g/L、MgCl20.01 g/L、FeCl20.02 g/L、ZnSO40.03 g/L、酵母膏0.8 g/L、葡萄糖30.0 g/L和NaCl 2.0g/L;接种量和培养条件对3-甲硫基丙醇产生一定影响,在摇床培养30℃,转速200 r/min,SC408发酵132 h,其3-甲硫基丙醇产量达到1.6 g/L,氨基酸的摩尔转化率约为72%.