Western blot法检测人脑胶质瘤中组织型纤溶酶原激活剂及其抑制剂-1的表达

目的:研究人脑胶质瘤组织中组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂(tPA)及其抑制剂-1(PAI-1)的表达,旨在了解其与人脑胶质瘤恶性生物学行为间关系,探讨其在人脑胶质瘤中的作用及其临床意义。方法:采用增强化学发光蛋白印迹法,测定人脑胶质瘤手术切除标本41例和颅脑外伤10例正常脑组织标本中的tPA及PAI-1蛋白表达水平。结果:tPA蛋白在高级别脑胶质瘤中呈低表达,在低级别的人脑胶质瘤中呈高表达,而正常脑组织中亦有表达。正常脑组织和低、高级别脑胶质瘤组间表达的差异无统计学意义(P>0.05)。tPA蛋白表达与脑胶质瘤病理级别间无明显相关性(P>0.05)。PAI-1蛋白则随着脑胶质瘤级别升高表达水平逐渐升高,而在正常脑组织中水平极低甚至不表达。正常脑组织组、低级别组脑胶质瘤及高级别组间表达差异有统计学意义(P<0.05);PAI-1蛋白表达水平与脑胶质瘤病理级别间呈正相关(P<0.05)。结论:PAI-1蛋白的高表达反映脑胶质瘤恶性生物学行为;tPA蛋白高表达可能是人胶质瘤组织分化良好的表现。     

CtBP1在神经胶质瘤组织中表达及意义的研究

目的研究人脑神经胶质瘤组织中CtBP1蛋白的表达,旨在了解其与人脑神经胶质瘤恶性生物学行为之间的关系,并探讨其在人脑胶质瘤中的作用及其临床意义。方法采用免疫组织化学测定50例人脑神经胶质瘤手术切除标本及6例癫痫患者手术切除的正常脑组织标本中CtBP1的表达水平变化。结果 CtBP1蛋白的表达随着人脑胶质瘤级别的升高而逐渐升高,而在正常脑组织中表达水平极低;正常脑组织组、低级别人脑胶质瘤组及高级别组之间表达的差异有明显统计学意义(P<0.05);CtBP1蛋白的表达水平与人脑胶质瘤的病理级别之间呈现正相关(P<0.05)。结论 CtBP1蛋白的高表达可以反映人神经脑胶质瘤的恶性生物学行为,在人脑胶质瘤的发生过程中起着重要作用,它可能是脑胶质瘤抗凋亡、恶性增殖的一个关键性的调控因子。     

Cyclin B1、CDK1和14-3-3蛋白在人脑神经胶质瘤中的表达及意义

目的研究CyclinB1、CDK1和14-3-3蛋白在人脑神经胶质瘤中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学S-P法检测60例人脑胶质瘤组织和10例正常脑组织中CyclinBI、CDK1和14-3-3蛋白的表达。结果CyclinB1和CDK1在正常脑组织和各病理级别的胶质瘤组织中均有表达,CyclinBI和CDK1的表达强度随胶质瘤病理级别不同呈递增趋势;正常脑组织与胶质瘤之间以及低级别胶质瘤与高级别胶质瘤之间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。且GyclinB1和CDK1的表达呈显著正相关（r=0．826,P〈0．05）。14—3—3蛋白在正常脑组织中主要表达于细胞胞浆,在胶质瘸组织中其表达强度随病理级别不同呈递减趋势,正常脑组织与胶质瘤之间以及低级别胶质瘤与高级别胶质瘤之间比较差异有统计学意义（P〈0．05）,且14—3．3蛋白与CyclinB1以及14．3．3蛋白与CDK1的表达呈显著负相关（r=-0．777,P〈0．05;r=-0．701,P〈0．05）。结论联合检测三者在胶质瘤的表达水平对判断胶质瘤的恶性程度具有重要临床价值。     

人脑胶质瘤中巢蛋白、基质金属蛋白酶-9蛋白的表达及临床意义

目的探讨人脑胶质瘤中脑肿瘤干细胞标记物巢蛋白（Nestin）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测66例不同级别胶质瘤组织标本及8例正常脑组织标本中Nestin．MMP-9蛋白表达。结果人脑胶质瘤标本中Nestin、MMP-9蛋白表达明显升高;Nestin、MMP-9蛋白总的阳性细胞表达率随着胶质瘤病理级别的增加而增高（P〈0．01）;人脑胶质瘤中Nestin蛋白的阳性细胞表达率和MMP-9蛋白阳性细胞表达率成正相关（P〈0．01）。结论人脑胶质瘤中Nestin、MMP-9蛋白的表达与脑胶质瘤的恶性程度密切相关;可能在脑胶质瘤的侵袭性生长、复发和转移过程中起协同作用。     

尿激酶型纤溶酶原激活因子在人脑胶质瘤中的表达和意义

目的研究人脑胶质瘤组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activa-tor,uPA),探讨uPA的表达与人脑胶质瘤恶性程度的关系。方法采用免疫组化、半定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对58例人脑胶质瘤手术切除标本、10例内减压术中切除的正常脑组织标本的uPA蛋白及mRNA表达水平进行检测。结果随着胶质瘤恶性度的升高,其uPA蛋白及mRNA表达率和表达水平逐渐增高,而正常组织表达率及表达水平极低。结论人脑胶质瘤中uPA蛋白和基因的高表达反映了胶质瘤的恶性生物学行为。     

人脑胶质瘤中Survivin和Ki-67指数的检测及其临床意义

目的通过检测人脑胶质瘤组织中重要凋亡相关蛋白Survivin的表达及Ki-67增殖指数,探讨两者与肿瘤恶性程度之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测Survivin在48例人脑胶质瘤和8例正常脑组织中的表达情况,采用SABC法检测Ki-67指数。结果 Survivin的表达水平和Ki-67指数随着肿瘤恶性程度的升高而增高（P〈0.01）,Survivin表达阳性标本的Ki-67指数明显高于Survivin阴性表达的标本（P〈0.01）。结论 Survivin的表达水平及Ki-67指数能反应胶质瘤的恶性生物学行为。     

LMO3蛋白在人脑胶质瘤组织中的表达及意义

目的观察LMO3蛋白在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化两步法检测44例人脑胶质瘤患者与12例正常脑组织中LMO3蛋白的表达。结果LMO3蛋白在人脑胶质瘤、正常脑组织中均有表达,表达强度随恶性程度的增高而增高,差异有统计学意义（χ^2=15．402,P〈0．05）。Spearman等级相关检验证实LMO3蛋白的表达强度与胶质瘤的恶性程度呈正相关（r=0．485。P〈0．05）。结论LMO3蛋白在人脑胶质瘤及正常脑组织中均有表达,其表达水平与胶质瘤的分化程度相关。     

促肾上腺皮质激素释放因子受体2在人脑胶质瘤中表达及其临床意义

目的探讨促。肾上腺皮质激素释放因子受体2（conicotmpin-releasing factor receptor type2，CRFR2）在人脑胶质瘤中表达及其临床意义。方法随机收集35例手术切除的胶质瘤组织标本及培养人类胶质母细胞瘤株U87，进行CRFR2免疫组织化学染色，分别取5例泌乳素垂体腺瘤组织标本作为阳性对照及5例正常脑组织作为阴性对照。结果CRFR2着色于肿瘤细胞膜，在不同类型、级别的脑胶质瘤中均有着色，且随肿瘤病理级别增高而表达增高，差异有统计学意义（P〈0．05），在正常脑组织中呈阴性表达，U87细胞株中存在CRFR2＇高表达。结论CRFR2可能参与胶质瘤恶性生物学行为形成，但其具体作用及机制不详。     

人脑胶质瘤组织中微小 RNA-21 与磷酸酶和张力蛋白同源基因的表达及其临床意义

目的初步探索rnieroRNAR-21（miR-21）与磷酸酶和张力蛋白同源蛋白（PTEN）基因在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR检测215例胶质瘤（胶质瘤组）和50例正常人脑组织（对照组）中miR-NA-21的表达水平,采用SP免疫组化法检测PTEN蛋白的表达情况,并探讨二者在胶质瘤组织中表达的相关性。结果miR-21在胶质瘤组中的相对表达量（2-△△CT）（4．222±1．755）明显高于对照组织（1．064±0．126）,差异有统计学意义（P〈0．05）。PTEN在对照组中的表达率（100．00％）高于胶质瘤组（49．30％）,差异有统计学意义（P〈0．05）。胶质瘤组中miR-21的表达量与PTEN在胶质瘤组中的阳性表达率呈负相关（r=-0．448,P〈0．05）。结论miR-21在胶质瘤组织中的表达升高,可能通过负性调节PTEN的表达,在胶质瘤的发生发展中发挥作用,二者的表达可以显示胶质瘤的恶性程度,通过检测二者在胶质瘤中的表达有助于评价胶质瘤的恶性程度和生物学行为。     

Ki67、GFAP 在人脑恶性胶质瘤病理分级中的意义!

目的探讨Ki67、GFAP与人脑恶性胶质瘤病理分级的关系。方法取深圳市宝安区中医院病理科2007年1月～2012年12月组织学确诊为恶性胶质瘤标本3l例,根据WHO（2007年）胶质瘤分级标准,分为胶质瘤Ⅱ级组、胶质瘤Ⅲ级组和胶质瘤Ⅳ级组,另取10名正常人脑组织胶质细胞作为正常对照组。免疫组织化学法检测Ki67及GFAP表达。结果Ki67表达水平在正常对照组最低,随着肿瘤WHO分级的增高而增高,在胶质瘤Ⅳ级组达高峰,差异有统计学意义（P〈0．05）;GFAP表达水平在正常对照组最高,随WHO分级的增高而降低,在胶质瘤Ⅳ级组表达水平最低,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Ki67、GFAP可作为人脑恶性胶质瘤病理分级及预后判断有价值的参考指标。     

脑胶质瘤增殖细胞核抗原和Cyclin Dl蛋白的表达及生物学意义

目的探讨增殖细胞核抗原（PCNA）和Cyclin D1蛋白在脑胶质瘤中的表达及其在胶质瘤发生、发展过程中的生物学意义。方法对已明确诊断的82例脑胶质瘤及10例瘤旁正常脑组织利用S—P免疫组化法检测PCNA和Cyclin D1蛋白。结果82例胶质瘤中PCNA标记指数（PCNALI）较正常脑组织明显升高,并随胶质瘤恶性程度的升高而呈上升趋势（P〈0．05）。Cyclin D1蛋白阳性率在正常脑组织及肿瘤组织间以及不同分级的胶质瘤间无明显差异（P〉0．1）。结论PCNA是胶质瘤发生和恶性转化的重要促进因子,而Cyclin D1可能不参与该类肿瘤的发生和发展。     

狼疮性肾炎中u—PA和PAI—1的表达及其意义

目的了解尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)及其Ⅰ型抑制因子(PAI-1)在狼疮性肾炎(LN)肾小球病变中的表达及其意义。方法对50例不同类型的LN和10例原发性肾小球轻微病变的肾活检组织,采用免疫组化及图象分析法比较观察了u-PA和PAI-1在肾小球的表达强度,并与肾小球增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数和Ⅳ型胶原染色强度作相关分析。结果u-PA和PAI-1在各型LN病变肾小球中的表达,均比肾小球轻微病变明显增强(P<0.05或<0.01),并以LN-IV型为最明显。PAI-1的染色反应强于同组的u-PA,两者有显著差异(P<0.05)。肾小球u-PA和PAI-1的表达均与PCNA阳性细胞核数呈正相关(P<0-05)。而且PAI-1的表达还与肾小球内IV型胶原沉积呈正相关(P<0.05)。结论狼疮性肾炎中u-PA和PAI-1的异常表达与肾小球的病变程度和病理类型相关,并可能是影响狼疮性肾炎发生发展的重要因素。     

人脑神经胶质瘤组织中细胞外信号调节激酶和磷脂酰肌醇3激酶的表达及其临床意义

目的探讨细胞外信号调节激酶2(ERK2)和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)在人脑神经胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法选取42例人脑神经胶质瘤组织标本和6例正常脑组织标本,采用免疫蛋白印迹技术(Western blot)和免疫组织化学方法联合检测ERK2和PI3K蛋白在神经胶质瘤组织及正常脑组织中的表达,并分析二者的相关性。结果免疫组织化学结果显示ERK2和PI3K蛋白主要分布于细胞质。ERK2和PI3K在正常脑组织中的阳性表达率低于神经胶质瘤组织(χ2=32.576,P<0.05;χ2=43.688,P<0.05)。ERK2和PI3K在Ⅰ^Ⅳ级神经胶质瘤组织中的阳性表达率均高于正常脑组织(P<0.05)。Spearman等级相关分析显示ERK2和PI3K的表达与神经胶质瘤的恶性程度呈正相关(r=0.711,P<0.05;r=0.825,P<0.05)。Western blot结果显示,ERK2和PI3K在神经胶质瘤组织中均有过度表达,与正常脑组织比较差异有统计学意义(P<0.05);PI3K与ERK2蛋白的表达呈正相关(r=0.867,P<0.01)。结论 ERK2、PI3K蛋白在人脑神经胶质瘤组织中的过表达可能与神经胶质瘤细胞的恶性增殖及发生、发展关系密切。联合检测ERK2和PI3K可较准确地评价人脑神经胶质瘤的病理特征,对判断人脑神经胶质瘤的恶性程度有重要的临床价值。     

ARHⅠ和DAPK在人脑胶质瘤组织中的表达及意义

目的： 探讨ras同源家族成员Ⅰ(aplysia ras homolog Ⅰ,ARHⅠ)基因和死亡相关蛋白激酶(death associated protein kinase,DAPK)基因在正常脑组织及脑胶质瘤组织中的表达及临床意义。方法： 采用免疫组织化学SP染色技术测定10例正常脑组织及47例脑胶质瘤组织中ARHⅠ和DAPK的表达。结果： ARHⅠ和DAPK蛋白在正常脑组织中的阳性表达率最高,并且随着胶质瘤恶性程度的增高,ARHⅠ和DAPK的阳性细胞表达率逐渐下降,其在高级别胶质瘤中的表达明显高于低级别胶质瘤,差异有统计学意义（P<0.05),在胶质瘤中ARHⅠ和DAPK蛋白表达呈显著正相关（r=0.723,P<0.05)。结论： ARHⅠ和DAPK蛋白在脑胶质瘤中的表达与肿瘤的临床病理分级密切相关,ARHⅠ和DAPK表达下调可能与脑胶质瘤的发生发展有关。     

黏着斑激酶、磷酸酶和张力蛋白同源缺失基因在脑胶质瘤中的表达及相关性研究

目的：明确黏着斑激酶（FAK）和第十号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失基因（PTEN）在脑胶质瘤组织中的表达变化,以及与肿瘤的发生、侵袭性生长和临床病理学特征的关系.方法：应用EliVision免疫组织化学方法检测FAK、PTEN在6例正常脑组织及54例各级脑胶质瘤中的表达情况.结果：FAK在脑胶质瘤中的表达总阳性率为66.67%,其中Ⅰ～Ⅱ级为35.00%,Ⅲ级为81.25%,Ⅳ级为88.89%,Ⅰ～Ⅱ级阳性率均低于Ⅲ级和Ⅳ级（P〈0.01）,而Ⅲ级和Ⅳ级差异无统计学意义（P〉0.05）.PTEN在脑胶质瘤中总阳性率46.30%,其中Ⅰ～Ⅱ级为75.00%,Ⅲ级为 31.25%,Ⅳ级为27.78%.Ⅰ～Ⅱ级阳性率均高于Ⅲ级和Ⅳ级（P〈0.01）,而Ⅲ级和Ⅳ级差异无统计学意义（P〉0.05）.PTEN与FAK在脑胶质瘤中的表达呈负相关关系（P〈0.01）.结论：FAK的阳性率随着脑胶质瘤病理级别的增加而增加,而PTEN的阳性率随着脑胶质瘤病理级别的增加而降低.同时分析二者在肿瘤细胞中的表达,有助于判断脑胶质瘤的病理学分级、预后,以及进一步指导临床治疗.     

Alpha B-crystallin基因在人胶质瘤中的表达

目的:探讨alpha B-crystallin基因在人胶质瘤中的表达水平。方法:采用RT-PCR方法检测人胶质瘤中alpha B-crystallinmRNA表达情况。结果:不同病理级别人脑胶质瘤组织中alpha B-crystallinmRNA表达均有不同程度下降。结论:Alpha B-crystallin基因表达下调可能与人胶质瘤的发生发展有关。     

子痫前期患者血浆抑制素A、纤溶相关因子水平变化的意义

目的探讨子痫前期患者血清中抑制素A(INH-A)、纤溶相关因子(t-PA、PAI-1、PAI-2)水平变化及临床意义。方法对34例子痫前期孕妇及50例正常妊娠孕妇应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定妊娠24～28周和28～34周两时段中外周血t-PA、PAI-1和PAI-2及胎盘分泌抑制素A浓度,并进行对比分析。结果子痫前期组INH-A、t-PA、PAI-1水平均高于正常妊娠组(P0.01),而PAI-2水平孕晚期显著低于正常妊娠组(P0.05);抑制素A与t-PA、PAI-1水平呈正相关(r=0.28,P0.01,r=0.37,P0.01);孕中期抑制素A与PAI-2无相关关系,但孕晚期二者呈负相关关系(r=-0.31,P0.05)。结论 t-PA、PAI-1、INH-A的高表达在子痫前期的发病中起重要作用,可作为早期监测子痫前期发生的敏感指标。