地塞米松影响Lewis肺癌小鼠移植瘤生长及微血管生成的研究

背景与目的:近年来研究发现糖皮质激素与多种肿瘤发生、发展密切相关,本研究旨在探讨地塞米松对Lewis肺癌小鼠移植瘤生长及微血管生成的影响.方法:将Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下,按数字表法随机分为3组:对照组、顺铂组和地塞米松组.于接种后第7天起分别连续给药10 d,密切监测皮下移植瘤体积变化.于接种后第17天处死全部小鼠,剥离皮下肿瘤称质量并计算抑瘤率,采用免疫组化法检测肿瘤缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1 α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达与微血管密度(microvessel density,MVD)计数水平.结果:各用药组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤质量明显低于对照组(F=11.593,P＜0.05);与对照组比较,各用药组肿瘤组织中HIF-1α、VEGF表达与MVD计数水平显著降低(F值分别为4.788、8.220和12.456,P均＜0.05);而地塞米松组与顺铂组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:地塞米松可通过抑制肿瘤组织中HIF-1 α、VEGF的表达,从而抑制Lewis肺癌的生长和微血管生成.     

地塞米松对Lewis肺癌细胞小鼠移植瘤的增殖抑制作用

目的:探讨地塞米松对Lewis肺癌小鼠肿瘤增殖的影响。方法:将Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下,随机分为3组:对照组、顺铂组和地塞米松组,并给予相应治疗,监测皮下移植瘤体积变化,计算抑瘤率。采用免疫组化法检测肿瘤增殖细胞核抗原(PCNA),细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达水平;采用流式细胞术(FCM)分析细胞周期变化。结果:各用药组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤重明显低于对照组(P<0.05);肿瘤Cyclin D1及PCNA表达水平亦较对照组显著降低(P<0.05);而地塞米松组与顺铂组比较差异无统计学意义(P>0.05)。FCM检测显示,地塞米松使细胞周期明显阻滞于G1期,作用与顺铂相当(P>0.05)。结论:地塞米松对Lewis肺癌小鼠肿瘤增殖具有明显的抑制作用,使细胞在G1期阻滞。     

大黄素抑制人肝癌HepG2细胞血管生成作用及其机制研究

目的 大黄素可促进人肝癌HepG2细胞的凋亡,然而其是否可抑制肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)血管生成及其机制罕见报道.本研究探讨大黄素对人肝癌HepG2细胞血管生成以及缺氧诱导因子-1α (hypoxia inducible factor-1a,HIF-1d)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响,以及大黄素体内抗肝癌机制.方法 采用体内鸡胚绒毛尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)实验,实验随机分为阴性对照组(生理盐水)、大黄素低剂量组(10 μmol/L)、大黄素高剂量(20 μmol/L)和阳性对照组(0.15 mg/mL地塞米松),每组各10只,每24 h每组追加同样等量药物,共72 h,观察大黄素对CAM血管生成的抑制作用.体外培养HepG2细胞,以氯化钴(CoCl2)模拟化学缺氧,设立缺氧未处理组[阴性对照组(生理盐水)]、缺氧大黄素低剂量组(10 μmol/L)、缺氧大黄素高剂量组(20 μmol/L)和缺氧阳性对照组[10 μmol/L 5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)],每组设6个复孔,处理24 h.采用小管形成实验,观察大黄素对HepG2细胞相对小管数目的影响,免疫细胞化学分析检测HIF-1α和VEGF阳性细胞的表达,Real-Time PCR分析检测HIF-1α mRNA和VEGF mRNA的表达.采用Graphpad 5.0软件进行描述性统计,组间比较采用one-way-ANOWA和Bonferroni检验.结果 CAM实验显示,实验组新生血管数目明显减少,与阴性照组比较,差异有统计学意义,F=13.374,P=0.002.阴性对照组新生血管数目为(31.47±1.81)个.给药后CAM血管生成减少,大黄素低剂量组、高剂量组和地塞米松组分别为(19.48±0.66)、(10.33±1.04)和(9.89±0.57)个,与阴性对照组比较,差异有统计学意义,P值分别为0.041、0.004和0.003;大黄素低剂量组和高剂量组与地塞米松组比较,差异无统计学意义,P值分别为0.539和1.000.小管形成实验显示,实验组相对小管数目明显减少,与阴性照组比较,差异有统计学意义,F=21.529,P＜0.001.阴性对照组相对小管数目为(100.00±0.00)％.给药后,相对小管数目明显减少,大黄素低剂量、高剂量组和阳性对照组分别为(65.85±12.67)％、(46.94±8.34)％和(41.77±7.53)％,与阴性对照组比较,差异有统计学意义,P值分别为0.049、0.001和＜0.001;大黄素低剂量组和高级剂量组与阳性对照组比较,差异无统计学意义,P值分别为0.104和0.069.免疫细胞化学分析显示,大黄素低剂量组、高剂量组和阳性对照组HIF-1α和VEGF阳性细胞显著减少.Real-Time PCR分析显示,实验组HIF-1α mRNA和VEGF mRNA表达降低,与阴性照组比较,差异有统计学意义(F=31.908,P＜0.001;F=25.146,P＜0.001).阴性对照组HepG2细胞HIF-1α mRNA和VEGF mRNA相对表达分别为0.92±0.15和0.95±0.15;大黄素低剂量组HIF-1α mRNA和VEGF mRNA相对表达分别为0.45±0.07和0.51±0.08,与阴性对照组比较,差异有统计学意义,P值分别为0.021和0.013;大黄素高剂量组HIF-1α mRNA和VEGF mRNA相对表达分别为0.32±0.05和0.40±0.07,与阴性对照组比较,差异有统计学意义,P值分别为＜0.001和0.001;阳性对照组HIF-1α mRNA和VEGF mRNA相对表达分别为0.30±0.04和0.34±0.05,与阴性对照组比较,差异有统计学意义,P值均＜0.001;大黄素低剂量组、高剂量组HIF-1α mRNA和VEGF mRNA相对表达与阳性对照组比较,差异无统计学意义,P值分别为0.663、0.362、0.443和1.000.结论 大黄素可能通过抑制HIF-1d mRNA的表达,从而降低VEGF mRNA的表达来抑制HepG2细胞新生血管的形成.     

低氧环境下肺腺癌A549细胞对顺铂化疗抵抗的实验研究

目的:探讨低氧对肺癌A549细胞顺铂化疗抵抗作用,并分析可能机制.方法:将A549细胞分为常氧、常氧顺铂、低氧、低氧顺铂组.在常氧顺铂组和低氧顺铂组,加入不同浓度顺铂(10、40、80、100、200 μmol/L)后,采用CCK8法测定半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)和抑制率.流式细胞仪检测各组细胞周期和凋亡率.RT-PCR和Western Blot检测各组缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及切除修复交叉互补基因1(excision repair cross complementation group 1,ERCC1)的转录和蛋白表达变化.结果:常氧顺铂组IC50为25.82nmol/L,低氧顺铂组为39.98 nmol/L,常氧顺铂组和低氧顺铂组之间各个浓度顺铂抑制率有统计学差异(P＜0.05).低氧顺铂组的细胞凋亡和G2/M期细胞阻滞较常氧顺铂组减少.RT-PCR和Western Blot显示,低氧组HIF-1α、VEGF、ERCC1转录和表达水平较常氧组明显上升(P＜0.01),顺铂作用后表达均下降,在常氧顺铂组和低氧顺铂组之间有显著差异性(P＜0.01).相关分析显示HIF-1α、VEGF、ERCC1之间有显著正相关关系(P＜0.01).结论:低氧诱导A549细胞对顺铂化疗抵抗,与低氧激活HIF-1α、VEGF及ERCC1高表达有关.     

川芎嗪对PG干细胞样细胞VEGF、HIF-1α蛋白表达的影响

[目的]研究活血药川芎有效成分川芎嗪对高转移性人巨细胞肺癌细胞PG-BE1干细胞样细胞VEGF、HIF-1α蛋白表达的影响。[方法]利用无血清成球培养法分选PG-BE1中的干细胞亚群并验证其干性。用含不同浓度川芎嗪的培养液干预PG-BE1干细胞样细胞,同时设立空白对照组及顺铂(DDP)组,采用ELISA法检测PG-BE1亲代细胞、干细胞样细胞(常氧环境和低氧环境)以及不同浓度药物干预后的PG-BE1干细胞样细胞的VEGF表达,采用Wester blot法检测各组HIF-1α蛋白表达。[结果 ]PG-BE1干细胞样细胞VEGF表达强于其亲代细胞(P<0.001),VEGF在低氧环境中的表达高于常氧环境(P<0.001),不同浓度川芎嗪均可下调VEGF表达(P<0.001),且具有剂量依赖性;PG-BE1干细胞样细胞HIF-1α表达强于其亲代细胞(P<0.001),HIF-1α在低氧环境中的表达高于常氧环境(P=0.001),不同浓度川芎嗪均可下调HIF-1α表达(P<0.001),但不同剂量之间差异无统计学意义(P=0.477)。[结论]PGBE1干细胞样细胞VEGF、HIF-1α表达高于其亲代细胞,低氧环境下VEGF、HIF-1α表达上调,川芎嗪对VEGF、HIF-1α表达有一定的抑制作用。     

AGGF1和HIF-1α及VEGF表达与食管鳞癌放疗预后相关性研究

目的 食管癌是一种常见的上消化道恶性肿瘤,放射治疗是食管癌的主要治疗方法之一.本研究旨在探讨食管鳞癌组织中AGGF1和HIF-1α及VEGF的表达,及其与食管鳞癌临床病理特征、放疗疗效及预后的相关性.方法 采用免疫组化SP法,检测新疆医科大学附属肿瘤医院胸腹放疗科2011-01-01-2015-01-01收治的79例食管鳞癌和20例正常食管组织中AGGF1、HIF-1α和VEGF的表达,结合临床病理特征和随访资料进行相关分析.结果 79例食管鳞癌中AGGF1(x2=18.975,P＜0.001)、HIF-1α(x2 =26.884,P＜0.001)和VEGF(x2=22.702,P＜0.001)的表达显著高于20例正常食管组织中的表达.食管鳞癌中AGGF1(x2=8.134,P=0.004)和VEGF(x2 =5.175,P=0.023)的表达与淋巴结转移密切相关;HIF-1α的表达与临床分期(x2=5.882,P=0.015)、淋巴结转移(x2=7.712,P=0.005)和浸润深度(x2 =5.538,P=0.019)密切相关.食管鳞癌中VEGF和HIF-1α的表达呈正相关,r=0.333,P=0.003;AGGF1和VEGF的表达呈正相关,r=0.790,P＜0.001.放疗近期疗效与HIF-1α的表达呈负相关,r=-0.246,P=0.029.AGGF1(P=0.170)和VEGF(P=0.229)阳性表达组OS短于阴性组;HIF-1α阳性表达组OS显著短于阴性组,P=0.013.Cox多因素回归分析显示,HIF-1α阳性表达(P=0.002)、浸润深度(P=0.005)和临床分期(P＜0.001)是食管鳞癌患者生存预后的独立因素.结论 AGGF1,HIF-1α及VEGF在食管鳞癌组织中高表达,并与食管鳞癌临床病理特征密切相关,三者高表达可能对食管鳞癌的放疗疗效和生存预后有影响,可为提高食管鳞癌的放疗效果和改善生存预后提供新的思路和方法.     

二甲双胍抑制食管癌前病变中HIF-1α和p53的表达

目的:探讨HIF-1α(hypoxia-inducible factor-1α)和p53的表达在二甲双胍（Metformin）治疗食管癌前病变中的临床意义。方法:选取我院2018年9月-2020年6月经胃镜检查及病理活检确诊食管低级别上皮内瘤变患者60例以及同期诊断为正常食管黏膜的健康志愿者30例,根据治疗方法分为三组:A组:未予以二甲双胍治疗3个月（非二甲双胍组）30例;B组:予以二甲双胍治疗3个月（二甲双胍组）30例;C组:同期诊断为正常食管黏膜患者且未予以二甲双胍治疗3个月（健康对照组）30例。对三组治疗前后分别进行胃镜检查并于同一部位取病理行HE染色和HIF-1α、p53免疫组化染色检查。结果:治疗前A、B、C三组HIF-1α蛋白表达水平分别为:0.098±0.065、0.100±0.067、0.025±0.016,具有显著差异性（F=19.173,P＜0.05）;p53蛋白的表达水平分别为:0.199(0.051,0.361)、0.200(0.100,0.395)、0.010(0.004,0.085),具有显著差异性（H=33.496,P＜0.001）;其中A组HIF-1α、p53蛋白的表达水平显著大于C组（P＜0.05）,B组HIF-1α、p53蛋白的表达水平显著大于C组（P＜0.05）,但A组和B组的HIF-1α、p53蛋白的表达水平均没有显著差异（P＞0.05）。治疗后A,B,C三组HIF-1α蛋白表达水平分别为:0.110±0.064、0.032±0.008、0.026±0.015,具有显著差异性（F=44.951,P＜0.001）;p53蛋白的表达水平分别为:0.209(0.091,0.378)、0.104(0.017,0.170)、0.012(0.005,0.123),具有显著差异性（H=26.376,P＜0.001）;其中A组HIF-1α、p53蛋白的表达水平显著大于B组和C组（P＜0.05）,B组HIF-1α、p53蛋白的表达水平均稍大于C组,但B组和C组HIF-1α、p53蛋白的表达水平没有显著差异（P＞0.05）。治疗前后A、B、C三组组内比较:A组治疗后HIF-1α、p53表达水平有所升高,但差异无统计学意义（t=-0.536,P=0.596;Z=-1.142,调整后P＞0.05）;B组治疗后HIF-1α、p53的表达水平均明显下降,差异有统计学意义（t=5.313,P=0.000;Z=-4.330,调整后P＜0.05）;C组前后HIF-1α、p53的表达水平无明显变化,差异无统计学意义（t=-0.316,P=0.754;Z=-1.093,调整后P＞0.05）。结论:二甲双胍能够有效降低食管低级别瘤变组织中HIF-1α及p53蛋白的累积,进而可能对食管癌前病变进一步进展产生抑制作用,为临床食管癌前病变的干预治疗提供参考。     

地塞米松对非小细胞肺癌化疗患者HIF-1α

[目的]探讨地塞米松对非小细胞肺癌化疗患者低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。[方法]97例非小细胞肺癌患者随机分为单纯化疗组和地塞米松辅助化疗组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别测定两组患者治疗前及治疗后的血清HIF-1α、VEGF水平。[结果]治疗前两组患者HIF-1α及VEGF水平均未见统计学差异(P>0.05);治疗后地塞米松辅助化疗组HIF-1α及VEGF水平明显低于单纯化疗组(P<0.05)。地塞米松辅助化疗组有效率(44.00%)明显高于单纯化疗组(27.79%)(χ2=6.304,P<0.05)。[结论]地塞米松使非小细胞肺癌患者HIF-1α、VEGF水平下降,提高了化疗近期效果。     

ATF5蛋白对食管鳞癌细胞耐药性影响

目的 食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)多药耐药严重影响化疗效果,其分子机制仍未阐明.本研究通过构建不同ATF5蛋白表达量的食管癌Eca-109细胞模型,探究过表达ATF5及低表达ATF5对食管癌Eca-109细胞耐药性及凋亡的影响.方法 利用脂质体载体转染技术对食管癌细胞株进行转染,建立高、中(转染空质粒的对照组)、低3组不同ATF5蛋白表达量Eca-109细胞模型.蛋白质印迹法检测3组细胞ATF5蛋白表达水平.MTT实验和平板克隆实验观察3组细胞对紫杉醇、顺铂耐受性的变化;DAPI染料核染色后观察3组细胞在紫杉醇、顺铂作用下凋亡反应的差异;分析ATF5蛋白对食管鳞癌Eca-109细胞耐药的影响.结果 利用转染技术成功构建的3组不同ATF5蛋白表达量的Eca-109细胞模型,表达模型组细胞中ATF5蛋白相对表达量为85.9±2.66,对照组为64.35±2.54,低表达模型组为45.3±3.11,3组差异有统计学意义,F=532.323,P＜0.001.MTT实验显示,紫杉醇、顺铂作用72 h后,3组细胞存活率差异有统计学意义,F紫=163.382,P＜0.001;F顺 =579.36,P＜0.001;同一组细胞不同浓度对存活率的影响差异有统计学意义,F紫=616.32,P＜0.001;F顺 =2 558.05,P＜0.001;不同浓度的紫杉醇、顺铂作用3组细胞后,过表达组细胞的半数抑制率浓度(IC50)分别为4.16±2.21和1.54±0.67;对照组分别为1.54±0.92和1.27±0.65;低表达组细胞的半数抑制率浓度分别为0.33±0.21和0.53±0.62,3组差异有统计学意义,F紫=198 330.768,P＜0.001;F顺=64 298.048,P＜0.001;表明过表达ATF5的细胞对紫杉醇、顺铂的药物耐受性均明显升高而低表达模型组细胞对紫杉醇、顺铂的药物耐受性均明显降低.DAPI染色实验显示,紫杉醇、顺铂作用3组细胞后,过表达组细胞的凋亡率分别为(14.04±1.66)％和(11.75±2.09)％;对照组分别为(26.44±2.99)％和(34.07±3.42)％;低表达组细胞的凋亡率分别为(54.85±5.88)％和(66.66±2.81)％,3组差异有统计学意义,F紫=283.976,P＜0.001;F顺=954.464,P＜0.001.提示过表达ATF5蛋白细胞在紫杉醇、顺铂作用下凋亡细胞均减少,低表达ATF5细胞在紫杉醇、顺铂作用下凋亡细胞均增加.平板克隆形成实验显示,紫杉醇、顺铂作用3组细胞后,过表达组细胞的克隆形成率分别为(56.09±1.37)％和(62.67±1.41)％;对照组分别为(38.7±1.37)％和(34.83±3.09)％;低表达组细胞的克隆形成率分别为(25.22土1.58)％和(18.17±3.64)％,3组差异有统计学意义,F紫 =1157.447,P＜0.001;F顺=612.595,P＜0.001.表明过表达ATF5蛋白细胞在紫杉醇、顺铂作用下克隆形成数均更多,低表达ATF5蛋白细胞在紫杉醇、顺铂作用下克隆形成数减少.结论 上调ATF5蛋白的表达能增加食管鳞癌Eca-109细胞对紫杉醇、顺铂的耐药性,而下调ATE5蛋白的表达则能降低Eca-109细胞对紫杉醇、顺铂的耐药性,提示食管鳞癌细胞的耐药性可能与ATF5蛋白的表达量相关,食管鳞癌细胞中ATF5蛋白的表达情况可能能间接干扰临床药物化疗的效果.     

地塞米松对低氧小鼠缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子表达的影响

背景与目的业已发现缺氧与肿瘤发生、发展关系密切。本研究的目的是观察地塞米松对低氧小鼠肺组织中缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor 1α，HIF-1α）及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）表达的影响，探讨缺氧与血管新生的关系及地塞米松的作用机制。方法实验用雄性昆明小鼠，随机分为对照组和三个实验组（缺氧3天组、缺氧6天组、缺氧＋激素组）。用免疫组织化学技术检测小鼠肺组织中HIF-1α和VEGF蛋白的表达。结果缺氧组小鼠HIF-1α和VEGF蛋白表达均较对照组显著增加（P〈0．05）；缺氧＋激素组与缺氧组比较，HIF-1α和VEGF蛋白表达显著下降（P〈0．05）。HIF-1α与VEGF表达呈正相关（r=0．730，P=0．007）。结论缺氧可以上调小鼠肺组织中VEGF和HIF-1α的表达，而地塞米松可抑制低氧小鼠VEGF和HIF-1α的表达，具有抗血管生成的作用。     

HIF-1α在乳腺癌合并2型糖尿病患者中的表达

目的:探讨乳腺癌合并2型糖尿病中缺氧诱导因子-α(HIF-1α)的表达及其对血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)的影响.方法:回顾性分析我院2011年1月-2014年12月收治的118例乳腺癌合并2型糖尿病患者(实验组)和非糖尿病的乳腺癌患者的临床资料(对照组),比较两组基本临床病理特征差异,采用免疫组化SP法检测两组患者HIF-1α及VEGF的表达,采用CD34对血管内皮细胞进行标记并计算MVD.结果:实验组中肿瘤直径大于2cm的人数远多于对照组,差异有统计学意义(χ2=4.434,P=0.035);对照组和实验组淋巴结转移率分别为43.75%(56/128)、59.32%(70/118),实验组的淋巴结转移率远高于对照组(χ2=5.959,P=0.015);实验组的HIF-1α阳性表达率为80.51%,显著高于对照组的HIF-1α阳性表达率(64.84%),差异存高度统计学意义(χ2=7.533,P=0.006),实验组的VEGF阳性表达率为86.44%,高于对照组的VEGF阳性表达率(68.75%),差异存高度统计学意义(χ2=10.929,P=0.001);实验组的MVD计数高于对照组,差异存高度统计学意义(t=2.883,P=0.004).实验组中HIF-1α阳性表达组VEGF阳性表达率为90.53%(86/95),HIF-1α阴性表达组的VEGF阳性表达率为69.57%(16/23),HIF-1α阳性表达组明显高于HIF-1α阴性表达组,两组比较差异有统计学意义(χ2=6.941,P=0.008),两组的MVD计数分别为121.35±32.46,102.74±34.86,差异存统计学意义(t=2.432,P=0.017).结论:2型糖尿病能促进乳腺癌组织微血管的增生,加速肿瘤组织的转移与增长,是乳腺癌患者预后差及临床分期晚的危险因素.     

胃癌组织ING4和HIF-1α及VEGF表达的相关性分析

目的:研究ING4、HIF-1α和VEGF在胃癌组织中的表达情况,探讨它们在胃癌发生发展中的作用.方法:应用免疫组化SP法检测66例胃癌和30例正常胃组织中ING4、HIF-1α和VEGF的表达情况,同时测定CD31标记的微血管计数(MVD),分析与胃癌临床病理因素的关系,探讨ING4、HIF-1α和VEGF之间的相关性及与MVD的关系.结果:ING4在胃癌组织中的表达明显低于正常胃组织(P=0.001),HIF-1α和VEGF的表达则明显高于正常胃组织(P值均＜0.01);胃癌组织ING4的表达与性别(P=0.018)和侵犯程度(P=0.018)有关,HIF-1α和VEGF阳性表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和TNM分期相关(P值均＜0.05);胃癌组织中ING4与HIF-1α、VEGF的表达呈负相关(r=-0.31,P=0.011;r=-0.26,P=0.032),HIF-1α与VEGF的表达呈正相关(r=0.69,P＜0.001);ING4与MVD的表达呈负相关(r=-0.29,P=0.018),HIF-1α、VEGF与MVD的表达呈正相关(r=0.75,P＜0.01 ;r=0.79,P＜0.01).结论:ING4、HIF-1α和VEGF在胃癌和正常胃组织中的表达存在明显差异;三者之间有相关性且均与临床病理因素以及肿瘤血管生成相关,它们的相互作用调控着胃癌的发生和发展,联合检测有助于判断胃癌恶性程度和预后.     

乳腺癌组织中HIF-1α的表达水平及其与肿瘤血管生成相关性研究

目的:探讨缺氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α）在乳腺正常组织、不典型增生、原位癌、浸润性癌组织中的表达水平,分析其与浸润性乳腺癌临床病理指标及肿瘤血管生成之间的关系。方法:收集20例正常乳腺组织、23例不典型增生、34例原位癌、80例浸润性乳腺癌组织标本,用免疫组化SP法检测各组中HIF-1α的表达,分析其在浸润性乳腺癌中的表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结受累情况、TNM分期、组织学分级、激素受体等临床病理指标之间的关系。并用CD34标记肿瘤新生血管,分析HIF-1α表达对肿瘤血管生成的影响。结果:HIF-1α在正常乳腺组织中未见阳性表达,在乳腺不典型增生组织、原位癌组织、浸润性癌组织中表达阳性率分别为8.7%（2/23）、47.1%（16/34）及73.8%（59/80）,表达率依次增高,乳腺原位癌组织与不典型增生组织之间、乳腺浸润癌组织与原位癌组织之间差异具有统计学意义（P＜0.01）。在浸润性乳腺癌中,HIF-1α的表达在不同肿瘤直径、组织学分级及淋巴结转移分组中差异具有统计学意义（P均＜0.05）。浸润性导管癌HIF-1α阳性组MVD值（11.74±4.398）明显高于HIF-1α表达阴性组（9.093±2.856）,差异有统计学意义（P＜0.05）。HIF-1α表达与MVD值呈正相关性（r=0.633,P＜0.05）。结论:HIF-1α在浸润性乳腺癌组织中表达水平升高,其表达上调与乳腺癌新生血管生成密切相关。     

下咽鳞癌中HIF-1α与VEGF表达的临床治疗意义

目的 分析乏氧诱导因子- 1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)在下咽鳞癌及癌旁正常黏膜组织中的表达,探讨HIF-1α、VEGF在下咽鳞癌中表达的临床意义。方法 对62例患者应用免疫组化检测HIF-1α、VEGF的表达,并分析其与患者临床病理特征及预后关系。结果 HIF-1α、VEGF在鳞癌组织中的表达...     

HIF-1α和CA9在乳腺癌中的表达及其与基底细胞样型乳腺癌的关系

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和碳酸酐酶9(CA9)在乳腺癌各分子亚型中的表达及其与基底细胞样型乳腺癌的关系.方法 采用免疫组织化学法检测HIF-1α和CA9在5种不同乳腺癌亚型(共803例)中的表达水平并分析其与基底细胞样型乳腺癌临床病理特征及患者生存时间的关系.结果 HIF-1α和CA9在乳腺癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁乳腺组织(43.96％∶3.86％,x2=354.858,P＜0.001;19.80％∶4.61％,x2=86.495,P＜0.001).管腔A型、管腔B型、人表皮生长因子受体-2(HER-2)过表达型、基底细胞样型、普通乳腺样型中HIF-1α的阳性表达率分别为31.97％、25.00％、56.06％、77.89％和55.76％,CA9的阳性表达率分别为7.48％、5.56％、60.61％、40.00％和27.88％,差异均具有统计学意义(x2=88.628,P＜0.001;x2=147.128,P＜0.001);HIF-1α和CA9在雌激素受体(ER)阴性的HER-2过表达型、基底细胞样型和普通乳腺样型中的表达明显高于ER阳性的管腔A型和管腔B型(均P＜ 0.005).HIF-1α和CA9的表达与基底细胞样型乳腺癌的淋巴结转移(x2=4.542,P=0.033;x2=7.025,P =0.008)、pTNM分期(x2=5.390,P=0.020x2=10.179,P=0.001)及不良预后有关(x2 =4.353,P=0.037x2=6.056,P=0.014),且二者在基底细胞样型乳腺癌中的表达具有正相关关系(C=0.315,P=0.001).结论 HIF-1α和CA9过表达可能与ER阴性乳腺癌关系更密切,二者可能协同在基底细胞样型乳腺癌的发生、发展中发挥重要作用.基底细胞样型乳腺癌HIF-1α和CA9过表达提示患者预后不良.     

HIF-1α和VEGF鉴别诊断结核性胸腔积液与肺癌伴癌性胸腔积液的意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）在结核性胸腔积液与肺癌伴癌性胸腔积液鉴别诊断中的意义。方法 从本院2012年1月至2013年12月的108例胸腔积液患者中筛选出符合要求的45例患者,根据胸腔积液性质分为肺癌伴癌性胸腔积液组（CA组）25例和结核性胸腔积液组（TB组）20例,检测两组血清及胸水中HIF-1α、VEGF水平并计算胸水与血清VEGF比值（胸水／血清VEGF）和胸水与血清HIF-1α比值（胸水／血清HIF-1α）,采用受试者工作特征曲线（ROC）分析HIF-1α、VEGF、胸水／血清HIF-1α和胸水／血清VEGF鉴别肺癌伴癌性胸腔积液和结核性胸腔积液的效能,分析胸水HIF-1α、血清HIF-1α、胸水VEGF及血清VEGF两两联合及四者联合的敏感度、特异度和诊断符合率。结果 CA组胸水HIF-1α水平为（2.29±0.89） ng／ml, 高于TB组的 （0.88±0.69）ng／ml,差异有统计学意义（P<0.01）;CA组血清HIF-1α水平为（2.00±1.00）ng／ml,TB组为（1.85±0.77）ng／ml,差异无统计学意义（P＞0.05）。CA组和TB组胸水VEGF水平分别为（1035.31±687.64）pg／ml和（732.97±493.61）pg／ml,血清VEGF水平分别为（491.25±278.33）pg／ml和（463.42±288.15）pg／ml,差异无统计学意义（P＞0.05）。CA组胸水／血清HIF-1α水平为1.26±0.49,高于TB组的0.56±0.55,差异有统计学意义（P<0.01）;CA组和TB组的胸水／血清VEGF水平分别为2.85±2.73和2.02±1.58,差异无统计学意义（P＞0.05）。在结核性胸腔积液与肺癌伴癌性胸腔积液的鉴别诊断中,单独检测胸水HIF-1α的敏感度为88%,特异度为85%,单独检测胸水／血清HIF-1α的敏感度为92%,特异度为85%,而联合检测血清及胸水HIF-1α和VEGF的敏感度为64%,特异度为100%。结论 胸水HIF-1α和胸水／血清HIF-1α水平对于结核性胸腔积液与肺癌伴癌性胸腔积液鉴别诊断有一定临床意义。联合检测血清HIF-1α、胸水HIF-1α、血清VEGF和胸水VEGF可提高特异度。     

过表达HIF-1α和VEGF蛋白与垂体腺瘤侵袭行为的关系

目的:探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子(VEGF)在垂体腺瘤中的表达及与垂体腺瘤侵袭性的关系。方法:收集的32例垂体腺瘤标本中侵袭性垂体腺瘤20例,非侵袭性垂体腺瘤12例,应用免疫组化染色检测HIF-1α和VEGF蛋白的表达。并对侵袭组与非侵袭组的HIF-1α和VEGF蛋白表达及不同大小肿瘤HIF-1α和VEGF蛋白表达进行分析比较。结果:非侵袭组垂体腺瘤中HIF-1α和VEGF蛋白表达阳性率与侵袭组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;垂体腺瘤直径大于30 mm者HIF-1α和VEGF蛋白表达阳性率与直径10~30 mm者比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:HIF-1α和VEGF蛋白在侵袭性垂体腺瘤中的表达明显增加,并且与垂体腺瘤侵袭行为密切相关。     

CS-TPGS-b-(PCL-ran-PGA)纳米粒递送HIF-1α siRNA联合顺铂对鼻咽癌裸鼠移植瘤影响研究

目的 乏氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)增强抗肿瘤药物敏感性研究在国内外已有诸多报道.本研究拟探讨纳米聚合物壳聚糖-聚乙二醇1 000维生素E琥珀酸酯-聚乙内酯-聚乙醇酸[d-α-tocopheryl polyethylene glycol 1 000 succinate-b-poly(ε-caprolactone-ran-glycolide),CS-TPGS-b-(PCL-ran-PGA),简称CNP]包载HIF-1α小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)联合顺铂(cisplatin,DPP)对鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响.方法 皮下接种CNE-2细胞建立人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,应用随机数字表法分磷酸盐缓冲液组(Control)、单纯纳米粒组(CNP,200 μg/kg)、单纯顺铂组(DPP,100 μg/kg)、单纯纳米粒联合顺铂组(CNP 200 μg/kg+DPP 100 μg/kg)、载HIF-1α siRNA纳米粒组(CNP-siRNA,200 μg/kg)和载HIF-1α siRNA纳米粒联合顺铂组(CNP-siRNA 200μg/kg+DPP 100μg/kg)6组.每组5只,腹腔注射3d1次,共7次.干预过程中3d测量1次肿瘤体积,治疗22d后拉颈处死裸鼠,称取瘤质量,计算抑瘤率;利用蛋白质印迹与RT-PCR检测移植瘤中HIF-1α和多重耐药基因-1/P糖蛋白(multidurg resistance gene 1/P-glycoprotein,MDR-1/P-gp)基因蛋白表达水平,HE染色观察各组肿瘤组织病理形态改变.结果 与Control组相比,CNP组抑瘤率为18.32％,DPP组为37.59％,CNP-siRNA组为43.32％,CNP+ DPP组为47.64％,CNP-siRNA+ DPP组为70.21％.其中CNP-siRNA+DPP组抑瘤效果最为显著,与其他治疗组相比,差异有统计学意义,F=253.511,P＜0.001.在HIF-1α mRNA表达上,与Control组相比,CNP组mRNA表达量为0.89±0.04,DPP组为0.99±0.02,CNP-siRNA组为0.95±0.02,CNP+ DPP组为0.35±0.04,CNP-siRNA+DPP组为0.15±0.07.CNP-siRNA+ DPP组mRNA抑制效果最为显著,与其他组相比,差异有统计学意义,F=351.194,P＜0.001.蛋白质印迹结果亦显示,CNP-siRNA+ DPP组中HIF-1α蛋白条带宽度明显低于其余各实验组,MDR-1/P-gp表达水平表现出与HIF-1α基因蛋白表达相似的实验结果.HE结果表明,CNP-siRNA+ DPP组能够显著促进肿瘤细胞坏死及凋亡.结论利用CNP纳米聚合物递送HIF-1α siRNA联合DDP能够有效下调肿瘤细胞HIF-1α及MDR 1/P-gp基因蛋白表达,抑制肿瘤生长,促进肿瘤细胞坏死凋亡.新型纳米聚合物CNP作为递送siRNA的有效载体,在肿瘤基因靶向治疗中具有较高的应用前景.