miR-99a-5p在MDS患者骨髓中的表达及功能分析

目的:检测miR-99a-5p在骨髓增生异常综合症(MDS)患者中的表达,利用生物信息学预测其靶基因并进行功能分析,探讨miR-99a-5p在MDS的发生发展中可能的作用。方法:利用qRT-PCR技术检测miR-99a-5p在初治MDS患者骨髓中的表达量,分析其与MDS临床病理参数的相关性;运用靶基因在线预测软件Targetscan、Miranda和Microcosm预测其可能的靶基因,取预测结果的交集作为miR-99a-5p在MDS中的潜在靶基因。结果:与正常对照组相比,MDS患者骨髓中miR-99a-5p表达升高(P0.001)。按IPSS的预后评分,将MDS患者分为相对低危组(包括低危险组和中危1组)和相对高危组(包括中危2组和高危组)发现,在相对低危组中miR-99a-5p的表达量是正常对照组的2.40倍(P0.001),相对高危组中miR-99a-5p的表达量是对照组的6.66倍(P0.001),相对高危组中miR-99a-5p表达量是相对低危组的2.80倍(P0.001);转白血病组(t-MDS)中miR-99a-5p的表达量是对照组的6.35倍(P0.001)。相关分析显示,患者骨髓miR-99a-5p表达量与原始细胞比例呈显著正相关(P0.001);而与染色体核型、外周血血象无明显相关。利用靶基因在线预测软件预测mi R-99a-5p的可能靶基因,并结合文献,得出ST5可能是mi R-99a-5p在MDS中的潜在靶基因。结论:mi R-99a-5p在MDS患者中表达明显上调,且随着危险度的增加其表达呈上升趋势,并可能通过负性调控靶基因ST5参与MDS的发病。     

miR-181b在弥漫大B细胞淋巴瘤中表达及功能研究

目的:探讨miR-181b在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中表达及其功能。方法:选择2010年3月到2012年3月来我院及常州市第二人民医院进行检查和治疗的124例DLBCL患者的淋巴组织样本,作为DLBCL组;另选择64例经检查确定为非淋巴瘤患者的健康淋巴组织,作为对照组。检测两组淋巴样本中miR-181b的表达水平,比较不同临床特征的淋巴瘤患者淋巴组织中miR-181b的表达水平,比较不同组织miR-181b表达水平的淋巴瘤患者的生存情况。结果:DLBCL患者淋巴组织中miR-181b的相对表达量显著高于健康淋巴组织(P0.05)。Ann Arbor分期越高的患者淋巴组织中miR-181b的相对表达量越高(P0.05),而IPI评分越高的患者淋巴组织中miR-181b的相对表达量也越高(P0.05)。miR-181b低表达组患者5年生存率显著高于高表达组患者(P0.05)。结论:miR-181b在不同临床分期和预后的DLBCL患者淋巴组织中表达存在差异,它有可能成为未来对DLBCL诊断和预后监测的有效指标。     

血浆miR-181b和miR-194作为急性移植物抗宿主病诊断及疗效评价的标志物的研究

目的:研究血浆中miR-181b和miR-194的水平变化与异基因造血干细胞移植后发生急性移植物抗宿主病(aGVHD)的关联性,确定新的aGVHD诊断及预测标志物。方法:采用qRT-PCR方法检测31例接受异基因造血干细胞移植的患者移植前、移植后15 d以及发生aGVHD时血浆中miR-181b和miR-194表达水平变化,利用ROC曲线及曲线下面积分析移植后第15天miR-181b和miR-194的表达量作为aGVHD早期诊断标志物的特异性和敏感性。结果:发生aGVHD时患者血浆miR-181b和miR-194表达水平较移植前显著上调(P 0.05),且在治疗后表达水平下调,与移植前水平相比无显著差异。移植后第15天,aGVHD组miR-181b和miR-194的表达水平较未发生aGVHD组显著上调(P 0.05),且表达水平增高先于临床诊断。该检测时间点miR-181b诊断aGVHD曲线下面积0.91±0.05(特异性为0.94,敏感性为0.69),miR-194诊断aGVHD曲线下面积0.91±0.06(特异性为0.94,敏感性为0.77)。结论:miR-181b和miR-194的表达量可作为aGVHD早期诊断及疗效评价的特异性标志物。     

MiR-155在慢性淋巴细胞白血病患者中的表达及其预后意义

目的:探讨miR-155在慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)患者外周血B细胞中的表达水平及其与患者的临床生物学特征之间的相关性。方法:收集73例初诊CLL患者的外周血单个核细胞及60例健康对照人群外周血CD19+B细胞,提取细胞总RNA,并采用qRT-PCR方法测定细胞内miR-155表达。系统性分析CLL患者临床特征,分析miR-155表达与CLL患者的临床表现,如年龄、性别、Binet分期、细胞遗传学特征及分子生物学特征的相关性,探讨miR-155与患者首次治疗时间(time to treatment,TTT)和总生存期(overall survival,OS)之间的关系。结果:MiR-155在CLL患者中的表达较正常人群明显增高。比较不同分子生物学特征的CLL患者中miR-155表达水平结果提示,免疫球蛋白重链可变区(immunoglobulin heavy chian variable region,IGHV)存在突变的CLL患者miR-155的表达较IGHV无突变的患者低(P0.05),同时在IGHV4-39家族中miR-155的表达明显偏低(P0.05)。荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测结果显示,p53突变/缺失阳性及ATM基因缺失阳性的患者miR-155的表达增高(P0.05)。OS及TTT在miR-155高表达组与低表达组之间无差异。结论:MiR-155在CLL患者中表达升高,同时其高表达与其临床不良预后相关。这提示,Mi R-155在CLL发生与发展中具有重要作用。     

下调miR-19b靶向TP53INP1对骨肉瘤细胞侵袭迁移和凋亡的影响

目的研究miR-19b靶向调控TP53INP1对骨肉瘤细胞侵袭迁移和凋亡的影响。方法将骨肉瘤MG63细胞分为:对照组、抑制物阴性对照组(转染抑制物阴性对照)、miR-19b抑制物组(转染miR-19b抑制物)、siRNA阴性对照+miR-19b抑制物组(转染siRNA阴性对照和miR-19b抑制物)、TP53INP1 siRNA+miR-19b抑制物组(转染TP53INP1 siRNA和miR-19b抑制物)、模拟物阴性对照组(转染模拟物阴性对照)、miR-19b模拟物组(转染miR-19b模拟物)。以qRT-PCR测定转染效果,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移,流式细胞术测定细胞凋亡。靶基因预测软件预测TP53INP1为miR-19b的靶基因,双荧光素酶报告载体鉴定靶向关系。以Western blot测定上调或下调miR-19b对TP53INP1表达的影响。以miR-19b抑制物和TP53INP1 siRNA共转染至MG63细胞中,以流式细胞术和Transwell小室测定细胞凋亡和侵袭迁移变化。结果 miR-19b抑制物MG63细胞中miR-19b表达水平下降,侵袭和迁移能力下降,细胞凋亡率升高,与对照组、抑制物阴性对照组比较,差异有统计学意义(P 0. 05)。miR-19b与TP53INP1mRNA的3,UTR有结合位点,荧光素酶报告载体鉴定TP53INP1为miR-19b的靶基因。与抑制物阴性对照组比较,miR-19b抑制物组上调细胞中TP53INP1蛋白表达水平,与模拟物阴性对照组比较,miR-19b模拟物组下调细胞中蛋白表达水平。与siRNA阴性对照+miR-19b抑制物组比较,TP53INP1 siRNA+miR-19b抑制物组能够上调MG63细胞的侵袭和迁移能力并减少细胞凋亡(P 0. 05)。结论下调miR-19b通过靶向调控TP53INP1可抑制骨肉瘤细胞侵袭迁移并诱导细胞凋亡。     

miR-550a-5p在骨髓增生异常综合征中的表达及其靶基因预测

目的:探讨miR-550a-5p在骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓中的表达情况并通过生物信息学分析预测靶基因及其功能,为进一步研究miR-550a-5p及其靶基因在MDS发病机制中的作用提供依据。方法:采用realtime PCR技术检测miR-550a-5p在54例MDS患者、16例MDS转化白血病患者及19例健康对照中的表达量,并分析其与临床病理特征(包括染色体情况、骨髓原始细胞比例及外周血血象)的相关性。应用miRBase获得并分析多个物种miR-550的序列特征;应用Microcosm、Miranda和Targetscan预测miR-550a-5p的靶基因,并取预测结果交集,进一步进行基因功能的GO(富集)分析和信号转导通路(Pathway)的富集分析。结果:miR-550a-5p表达量在所有MDS患者骨髓中均比对照组升高:在低危+中危1组中表达量是对照组的1.7倍(P=1.23×10-10);在中危2+高危组中表达量是对照组的1.9倍(P=1.20×10~(-10));在MDS转化为白血病组中的表达量是对照组的2.0倍(P=5.61×10~(-10))。随着MDS疾病危险度增高,miR-550a-5p表达水平逐渐上升,但其表达量与MDS患者的临床病理特征(包括染色体情况、骨髓原始细胞比例及外周血血象)之间无明显相关。利用生物信息学预测miR-550a-5p在MDS中的靶基因,结合文献报道选出了其中2个可能与miR-550a-5p调控MDS发生发展的病理机制有关的靶基因——PDLIM2和PSME1。结论:miR-550a-5p在MDS患者骨髓细胞中呈现出特异性高表达,推测其可能通过调控靶基因PDLIM2和PSME1参与MDS病理生理过程。     

miR-106b-25基因簇在小鼠肝泡型包虫病中的表达

目的探讨miR-106b-25基因簇(miR-93,miR-106b)在肝泡型包虫病中的表达及靶基因预测。方法Balb/c小鼠40只随机分为实验组24只(注射0.1 ml泡球蚴组织匀浆液)、对照组15只(注射0.1 ml生理盐水),正常组1只(不作任何处理)。分别收集实验组和对照组小鼠1月、3月和6月肝脏标本,提取RNA并定量测定miR-93和miR-106b的相对表达量,预测miR-93和miR-106b的靶基因。结果在感染3月实验组小鼠的肝内miR-93和miR-106b相对表达量分别为3.704±1.776和5.901±2.921,明显高于对照组和正常组,差异具有统计学意义(P0.05);实验组1月和6月的相对表达量与对照组和正常组比较,差异均无统计学意义(P0.05);经生物信息数据库比对后可知p21可能是miR-93、miR-106b共同的目的基因,主要发挥调控细胞周期及参与细胞凋亡等功能。结论miR-93和miR-106b在肝泡型包虫病中的表达差异可能与靶基因p21有关。miR-106b-25基因簇可能参与泡球蚴肝损伤的过程。     

miR-181a靶向抑制ATM表达促进急性髓系白血病细胞增殖

目的:研究microRNA181a(miR-181a)在人急性髓系白血病(AML)中的作用及其调控机制。方法:采用miR-181a小分子类似物转染人AML细胞系HL-60细胞,采用CCK-8计数法检测miR-181a对细胞增殖的影响。利用生物信息学方法结合文献分析预测miR-181a潜在的靶基因,通过双荧光报告实验在HL-60细胞内以及白血病患者体内多方面对靶基因进行验证。结果:miR-181a能显著促进人HL-60细胞恶性增殖(P0.05);在线软件预测发现,抑癌基因ATM可能是白血病细胞miR-181a潜在的靶基因;双荧光报告实验结果表明,miR-181a能显著地抑制含3'-UTR的ATM报告基因活性,荧光素酶活性下降56.8%(P0.01),而对含3'-UTR突变位点的ATM报告基因载体没有抑制作用。在HL-60细胞中过表达miR-181a,Western blot检测显示可以显著抑制内源性ATM的表达(P0.01),而在白血病患者中miR-181a的表达增高,与ATM的表达呈负相关(r=-0.766)。结论:miR-181a通过抑制抑癌基因ATM表达以促进人AML细胞恶性增殖,从而在AML发病中起着类似"癌基因"的作用。     

去甲基化治疗对骨髓增生异常综合征患者microRNA-124表达的激活作用

目的:通过检测microRNA-124(miR-124)在MDS患者骨髓细胞中的表达水平及在地西他滨治疗前后的表达变化,探讨miR-124在MDS发病中的作用及表达调控机制。方法:采用茎环法实时荧光定量聚合酶链反应检测35例MDS患者骨髓单个核细胞中miR-124的表达水平,同步检测10例正常供者骨髓中miR-124表达水平作为对照组。结果:MDS患者的miR-124表达水平低于正常对照组。低危组(包括RA和RCMD亚型)与正常对照组比较,差异无统计学意义(P0.05),但高危组(包括RAEB1、RAEB2和CMML亚型)miR-124表达水平与正常对照组比较有统计学差异,前者miR-124中位数明显低于后者(P0.01)。对18例MDS患者应用小剂量地西他滨治疗前后的miR-124表达水平检测发现,7例治疗后miR-124表达水平升高,差异有统计学意义(P0.05)。此结果说明去甲基化可激活该基因的表达。结论:miR-124基因过度甲基化和表达沉默可能是诱发MDS患者细胞克隆性转化的重要因素。     

miR-181b-3p在胃癌患者血清中的表达及其靶基因预测

目的 研究血清miR-181 b-3 p检测在胃癌诊断中的价值.方法 采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测35例胃癌患者(研究组)和45例健康志愿者(对照组)血清中miR-181b-3p的相对表达水平,并比较不同年龄、性别、临床及病理学特征胃癌患者血清中的miR-181b-3p相对表达水平.绘制受试者工作特征(ROC)曲线计算曲线下面积,评价miR-181b-3p对胃癌的诊断效能.结合miRDB、miRWalk、TargetScan和DIANA TOOLS数据库预测miR-181b-3p的靶基因,并绘制蛋白互作网络图.结果 与对照组比较,研究组血清中miR-181b-3p的相对表达水平明显升高,差异有统计学意义(t=7.943,P<0.05).未/低分化程度、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期胃癌患者血清中miR-181 b-3 p相对表达水平明显高于中/高分化程度、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期胃癌患者,差异有统计学意义(t=3.509、P<0.001,t=3.080、P=0.004,t=2.641、P=0.013).血清miR-181b-3p检测诊断胃癌的ROC曲线下面积为0.886(95％CI:0.815～0.956),灵敏度为68.8％,特异度为91.1％.miR-181b-3p预测靶基因所编码蛋白质间相互作用关系较复杂.结论 血清miR-181b-3p在胃癌患者中表达上调,且能够有效区分胃癌患者和健康人群,有望作为诊断胃癌的生物标志物.     

miR-218负调控SFMBT1抑制肝癌细胞增殖

目的探讨miR-218是否通过调控含有4个mbt区域的scm相关基因(SFMBT1)影响肝癌细胞增殖能力。方法 RT-PCR检测人肝癌细胞Hu H-7、Hep G2、SNU-449和人正常肝细胞HH中miR-218的水平。靶基因预测软件预测miR-218的靶基因并用荧光素酶报告基因进行鉴定,RT-PCR和Western blot检测miR-218对靶基因的调控作用。肝癌细胞转染miR-218模拟物(miR-218 mimics组)、SFMBT1小干扰RNA(SFMBT1 siRNA组),同时设置对照组(只加入转染试剂)。噻唑蓝(MTT)检测各组细胞存活率。结果肝癌细胞Hu H-7、Hep G2、SNU-449中miR-218表达水平均明显低于正常肝细胞HH(P0.01)。Hep G2细胞中miR-218表达水平最低,后续选用Hep G2细胞深入研究。miR-218的靶基因是SFMBT1,并且miR-218负调控SFMBT1靶基因。miR-218 mimics组和SFMBT1 siRNA组细胞存活率均明显低于对照组(P0.01)。miR-218 mimics和SFMBT1 siRNA共转染后的细胞存活率比miR-218mimics组和SFMBT1 siRNA组均明显降低(P0.01)。结论 miR-218能够负调控靶基因SFMBT1抑制人肝癌细胞的增殖。     

miR-214介导慢性淋巴细胞白血病对氟达拉滨耐药的作用研究

目的:探讨miR-214在慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞对氟达拉滨耐药中的作用及机制。方法:选择2014年08月-2018年07月P本院血液科收治对氟达拉滨(Flu)耐药的CLL患者和健康受试者各10例,采用RTPCR法测定单个核细胞中miR-214表达水平。将CLL患者原代细胞分为空白对照组(control group)、阴性对照组(miR-214-NC group)和miR-214转染组(miR-214-ASO group)。转染病毒24 h后与Flu共同培养48 h,测定细胞增殖和凋亡情况,以及PTEN和PI3K/AKT信号通路下游相关基因和蛋白表达水平。结果:CLL患者单个核细胞miR-214的表达水平较健康受试者显著升高(P 0. 05); miR-214转染组细胞miR-214表达水平显著降低(P 0. 05);miR-214转染组细胞在Flu浓度为3、10和30μmol/L时的吸光度显著降低(P 0. 05); Flu浓度为10 mmol/L时miR-214转染组细胞的凋亡率显著增高(P 0. 05),PTEN和BAD m RNA水平显著增高(P 0. 05),MDM2和NF-κB m RNA水平显著降低(P 0. 05),PTEN和p-BAD蛋白水平显著增高(P 0. 05),MDM2和NF-κB蛋白水平显著降低(P 0. 05)。结论:抑制miR-214可以提高耐药的CLL细胞对氟达拉滨的敏感性,这种作用可能与其促进细胞凋亡有关,并且与其调节PTEN/AKT信号通路下游分子表达有关。     

急性胰腺炎患者血清葡萄糖调节蛋白78、miR-181-5p的表达及意义

目的 探讨急性胰腺炎(AP)患者血清葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、miR-181-5p的表达水平及其临床意义.方法 选取141例AP患者作为研究对象,依据AP严重程度分为轻症组86例和重症组55例.另选取同期体检的健康人员100例纳入对照组.采用实时荧光定量PCR法检测受试者血清miR-181-5p、GRP78 mRNA表达水平.采用Pearson相关分析法分析血清miR-181-5p、GRP78 mRNA表达水平的相关性.采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-181-5p、GRP78 mRNA表达水平对重症AP的预测价值.结果 对照组、轻症组、重症组的血清miR-181-5p表达水平依次升高,GRP78 mRNA表达水平依次降低,差异有统计学意义(P＜0.05).miR-181-5p与GRP78 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.665,P＜0.05).miR-181-5p表达水平偏高、GRP78 mRNA表达水平偏低是重症AP的危险因素(P＜0.05).ROC曲线显示,血清miR-181-5p预测重症AP的曲线下面积(AUC)为0.836,血清GRP78 mRNA预测重症AP的AUC为0.741,二者联合预测重症AP的AUC为0.861.结论 AP患者血清miR-181-5p表达水平升高,GRP78 mRNA表达水平降低.miR-181-5p、GRP78与AP严重程度有关,对重症AP具有一定预测价值,可作为重症AP的潜在预测标志物.     

稳定期COPD患者血清miR-181a与炎性因子的关系及对急性加重和死亡的预测价值

目的:研究稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清miR-181a与炎性因子的关系及对急性加重和死亡的预测价值。方法:选择2016-09—2018-06期间在我院就诊的120例稳定期COPD患者作为研究的稳定期COPD组,同期体检且一般资料匹配的80例健康志愿者作为研究的对照组。检测血清miR-181a的表达量及炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-8)的含量,随访患者急性加重及死亡情况。采用ROC曲线分析miR-181a对急性加重及死亡的预测价值,采用Kaplan-Meier曲线分析miR-181a低表达及高表达患者急性加重及死亡的差异。结果:稳定期COPD组患者血清miR-181a的表达量明显低于对照组,血清TNF-α、IL-6、IL-8的含量明显高于对照组(P0.05);稳定期COPD患者血清miR-181a表达量与TNF-α、IL-6、IL-8含量均呈负相关,相关系数分别为-0.726、-0.413、-0.323(P0.05);与miR-181高表达稳定期COPD患者比较,miR-181低表达稳定期COPD患者第一次急性加重的中位时间、生存的中位时间均明显缩短(P0.05);miR-181a预测稳定期COPD患者急性加重的最佳截点为0.575,预测稳定期COPD患者死亡的最佳截点为0.480。结论:稳定期COPD患者血清miR-181a减少与炎性因子释放增多有关且对急性加重和死亡均具有一定的预测价值。     

miR-181a-5p和miR-451a在胃癌诊断和预后评估中的临床价值

目的探讨miR-181a-5p和miR-451a在胃癌诊断和预后评估的临床价值。方法选取2014年1月至2016年12月在该院就诊的胃癌患者血清标本117例为胃癌组,选择同期在该院行胃镜检查诊断为息肉的患者血清标本75例和健康体检者血清标本45例分别设为胃息肉组和健康对照组。比较各组研究对象血清miR-181a-5p和miR-451a表达水平,观察胃癌患者血清miR-181a-5p和miR-451a表达水平与临床病理因素和随访2年胃癌患者预后的关系,以及其在诊断胃癌和预测胃癌患者2年内死亡的效能。结果胃癌组术前血清miR-181a-5p表达水平明显高于胃息肉组和健康对照组(P<0.01),而胃息肉组miR-181a-5p表达水平明显高于健康对照组(P<0.01),胃癌术后血清miR-181a-5p表达水平较术前明显降低(P<0.01);胃癌组术前血清miR-451a表达水平明显低于胃息肉组和健康对照组(P<0.01),而胃息肉组的血清miR-181a-5p表达水平明显高于健康对照组(P<0.01),胃癌组术后血清miR-451a表达水平较术前明显升高(P<0.01)。血清miR-181a-5p和miR-451a联合检测诊断胃癌的灵敏度为77.8%,特异度为97.3%,曲线下面积均明显高于miR-181a-5p和miR-451a单项检测(P<0.01),而miR-181a-5p与miR-451a的曲线下面积差异无统计学意义(P>0.05)。血清miR-181a-5p和miR-451a表达水平在不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移和浸润深度的胃癌患者中差异有统计学意义(P <0.001)。死亡组患者血清miR-181a-5p表达水平明显高于存活组(P <0.01),而血清miR-451a表达水平明显低于存活组(P<0.01)。血清miR-181a-5p和miR-451a联合检测在预测胃癌患者2年内死亡的灵敏度为100.0%,特异度78.6%,曲线下面积明显高于miR-181a-5p和miR-451a单项检测(P<0.05),而miR-181a-5p与miR-451a的曲线下面积差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合检测血清miR-181a-5p和miR-451a在胃癌诊断中具有重要临床价值,其表达水平与患者的预后具有重要关系,在预测2年内死亡具有较高的效能。     

拉贝洛尔联合小剂量阿司匹林对妊娠期高血压孕妇血清miR-181b、miR-210表达的影响

目的探讨拉贝洛尔与小剂量阿司匹林治疗妊娠期高血压的疗效及对血清微小RNA-181b(miR-181b)、微小RNA-210(miR-210)表达的影响。方法将150例妊娠期高血压患者随机分成研究组和对照组,每组75例。对照组采用拉贝洛尔治疗,研究组患者在对照组基础上加用小剂量阿司匹林肠溶片治疗。比较2组患者的临床疗效、凝血功能以及不良妊娠结局情况、血清miR-181b、miR-210表达量。结果治疗后,研究组临床疗效显著高于对照组(P 0.05);研究组凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)均显著长于对照组,纤维蛋白原(Fib)及D-二聚体水平均显著低于对照组(P 0.05);研究组的不良妊娠结局发生率显著低于对照组(P 0.05);研究组血清miR-18b、miR-210表达量显著低于对照组(P 0.05)。结论拉贝洛尔联合小剂量阿司匹林对妊娠高血压患者具有较好的临床疗效,能够有效改善凝血功能,降低不良妊娠结局的发生率,降低血清miR-18b、miR-210表达量。     

血清miR-181b及miR-210在妊娠期高血压疾病中表达及与炎性细胞因子的相关性

目的探讨妊娠期高血压疾病(hypertensive disorders in pregnancy, HDP)患者血清miR-181b、miR-210表达变化,分析其与白细胞介素(interleukin, IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的关系。方法 HDP患者226例,其中妊娠期高血压(gestational hypertension, GH)60例(GH组)、轻度子痫前期(mild preeclampsia, MP)90例(MP组)、重度子痫前期(servere preeclampsia, SP)76例(SP组),同期健康孕妇60例为对照组。检测4组血清miR-181b mRNA、miR-210 mRNA相对表达量及IL-1β、IL-6及TNF-α水平;Pearson相关分析HDP患者血清miR-181b mRNA、miR-210 mRNA相对表达量与IL-1β、IL-6及TNF-α的相关性。结果对照组、GH、MP、SP组血清miR-181b mRNA相对表达量(1.42±0.65、5.73±1.60、10.94±4.28、17.13±8.16)、miR-210 mRNA相对表达量(0.84±0.13、3.62±1.05、4.74±1.36、7.92±2.17),IL-1β[(2.60±0.84)、(11.26±2.53)、(17.65±6.24)、(23.92±9.16)ng/L]、IL-6[(90.26±27.45)、(106.35±33.74)、(128.42±36.18)、(151.46±40.27)ng/L]及TNF-α[(12.40±2.28)、(19.25±4.42)、(35.84±6.53)、(64.73±9.50)ng/L]水平依次增高(P0.05);HDP患者血清miR-181b mRNA相对表达量与IL-1β、IL-6、TNF-α呈正相关(r=0.694,P0.001;r=0.735,P0.001;r=0.846,P0.001)、miR-210 mRNA相对表达量与IL-1β、IL-6、TNF-α呈正相关(r=0.548,P=0.003;r=0.718,P0.001;r=0.815,P0.001)。结论 HDP患者miR-181b及miR-210表达上调,且上调程度与HDP病情严重程度及IL-1β、IL-6、TNF-α水平变化相关,可能参与HDP的发生、发展。     

微小RNA-1265在鼻咽癌中的表达及诊断价值

目的探讨微小RNA-1265(miR-1265)在鼻咽癌中的表达及诊断价值。方法选取2018年1月至2019年8月于该院治疗的鼻咽癌患者60例作为研究组,鼻咽部良性肿瘤患者60例作为对照组,收集两组患者的病理组织和血清。采用PCR法检测两组患者病理组织和血清中的miR-1265相对表达水平,比较不同临床病理参数鼻咽癌患者miR-1265的相对表达水平。采用受试者工作曲线(ROC曲线)分析miR-1265对鼻咽癌的诊断价值,采用TargetScan预测靶基因并用双荧光素酶报告基因分析实验进行验证。采用Pearson相关分析miR-1265和MAT1表达的相关性。结果研究组病理组织中miR-1265的相对表达水平高于对照组(P0.05)。研究组患者血清中miR-1265的相对表达水平高于对照组(P0.05)。不同性别、年龄及病理类型患者间miR-1265的表达水平差异无统计学意义(P0.05),不同TNM分期、病理分期和淋巴结转移的患者miR-1265表达水平差异有统计学意义(P0.05)。当病理组织miR-1265截断值为0.895时,其诊断鼻咽癌的曲线下面积(AUC)为0.917(95%CI:0.878～0.946),灵敏度为87.3%,特异度为91.3%。当血清miR-1265截断值为0.515时,其诊断鼻咽癌的AUC为0.717(95%CI:0.678～0.806),灵敏度为67.3%,特异度为71.3%。双荧光素酶报告基因分析实验证实miR-1265的靶基因为MAT1。鼻咽癌组织中MAT1 mRNA与miR-1265的相对表达水平呈显著负相关(r=-0.943,P0.001)。结论鼻咽癌组织和血清中miR-1265表达上调,与鼻咽癌进展密切相关,具有区分鼻咽癌和鼻咽部良性肿瘤的价值。miR-1265靶基因是MAT1基因,可能成为鼻咽癌潜在治疗靶点。     

肾上腺髓质素和降钙素基因相关肽在原发性高血压危险性分层时的变化及意义

目的研究原发性高血压患者血浆肾上腺髓质素(ADM)、降钙素基因相关肽(CGRP)的水平变化,探讨两种血管活性物质在原发性高血压危险性分层中的变化及临床意义.方法随机选择80例原发性高血压患者和20例正常人作对照,根据<1999年WHO/ISH高血压诊疗指南>中的危险分层标准将原发性高血压病人分为低危、中危、高危和极高危等4组.用放射免疫法测定血浆ADM、CGRP的含量.结果血浆ADM的浓度在低危组、中危组、高危组和极高危组及正常对照组分别为36.28±10.12、41.28±8.09、66.64±10.22、87.90±10.39和15.26±4.30 ng/L,低危组、中危组、高危组和极高危组与正常对照组比较有显著性差异(P＜0.01),且随危险分层的增高而逐渐显著增高.血浆CGRP的浓度在低危组、中危组、高危组和极高危组及正常对照组分别为59.48±9.42、55.92±10.01、47.36±8.87、37.61±9.61和71.08±6.43 ng/L,低危组、中危组、高危组和极高危组与正常对照组比较有显著性差异(P＜0.01).且随危险分层的增高而逐渐显著降低.血浆ADM与CGRP呈负相关(r=-0.742,P＜0.01).结论血浆肾上腺髓质素、降钙素基因相关肽参与了原发性高血压的病理生理过程及靶器官损害,可以反映原发性高血压的危险性分层.     

miR-497在乳腺癌中的表达及其机制研究

目的检测miR-497在乳腺癌组织中的表达水平,探讨其在乳腺癌细胞中的作用机制。方法 qRT-PCR法检测36例乳腺癌患者癌组织及癌旁组织中miR-497的表达水平;采用脂质体法将miR-497 mimics、mimics NC、miR-497 inhibitor和inhibitor NC分别转入MDA-MB-231乳腺癌细胞系,通过MTT实验和细胞迁移实验分析miR-497对MDA-MB-231细胞增殖和迁移能力的影响;采用靶基因预测软件Targetscan human release7.1预测miR-497的靶基因,western blot验证miR-497 mimics、mimics NC、miR-497 inhibitor和inhibitor NC对靶基因蛋白的影响。结果 qRT-PCR结果显示,与癌旁组织(7.76±1.58)比较,miR-497在乳腺癌组织中的表达水平(2.12±1.04)明显降低(t=17.85,P0.01);MTT实验结果显示,与mimics NC组[(104.36±3.25)%]比较,转染miR-497 mimics组[(67.56±4.11)%]的细胞增殖能力明显减弱(t=13.1,P0.01);细胞迁移实验证实,与mimics NC组比较,转染miR-497 mimics后的细胞迁移能力减弱(272.3±8.5 vs 173.6±7.1,P0.05);与inhibitor NC组比较,转染miR-497 inhibitor后细胞迁移能力增强(269.5±7.3 vs 346.1±13.5,P0.01);靶基因预测软件预测HSP40可能是miR-497的靶基因;western blot结果显示,与mimics NC组比较,miR-497 mimics转染后的HSP40蛋白表达水平下调(P0.01);而与inhibitor NC组比较,转染miR-497 inhibitor后其HSP蛋白的表达水平升高(P0.01)。结论 miR-497可能通过靶向HSP40抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移,从而对乳腺癌进程起到调节作用。