骨髓增生异常综合征患者常见突变基因的突变组分析

目的:探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者15种常见突变基因的突变规律及相关临床意义。方法:选取初诊MDS和MDS转化的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者共97例。DNA测序检测并分析患者骨髓样本中15种基因的突变,包括RNA剪接因子基因U2AF1,SF3B1和SRSF2,表观遗传调节基因ASXL1,DNMT3A,IDH1,IDH2和TET2,信号转导通路基因JAK2,NRAS,KRAS和PTPN11,以及TP53,RUNX1和SETBP1。结果:67.98%的患者上述基因突变阳性,23.71%的患者同时携带多个基因突变,共检测到18种不同突变的组合。U2AF1突变最多见,其次为ASXL1和TP53突变。ASXL1和RUNX1突变常伴随其他基因突变,而SF3B1突变常单独出现。RNA剪接因子类基因突变互斥,常与表观遗传调节类基因突变相伴随。MDS/AML患者基因突变阳性率高于初诊MDS患者(85.71%vs 60.52%,P=0.038)。基因突变阳性组年龄显著大于突变阴性组,同时成人组基因突变阳性率高于儿童和青少年组,差异均有统计学意义(P=0.003)。结论:MDS及MDS/AML患者中常见基因突变的组合具有一定规律,与基因的功能分类和患者的年龄有关。     

基于高通量测序技术的105例AML和MDS患者驱动基因突变谱差异性分析

目的 获得西南地区急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常综合征(MDS)患者的基因突变谱特征,分析其差异性,探讨AML和MDS的差异性指标。方法 回顾性分析2019年9月至2022年12月该院收治的71例AML患者和34例MDS患者的临床资料,将AML和MDS患者分别按年龄进行分组,年龄≥60岁纳入老年组,年龄<60岁纳入中青年组。患者住院期间均采用高通量测序技术进行基因突变谱检测,采用流式细胞术检测分化抗原。通过分析比较基因突变谱的特征,并结合细胞表面分化抗原,获得西南地区AML和MDS患者基因突变谱的差异性。结果 AML和MDS患者老年组与中青年组的中位年龄比较,差异有统计学意义(P<0.05)。AML患者老年组男性比例较高,为76.2%,明显高于中青年组(P<0.05)。AML患者中DNMT3A的突变频率与年龄有关(P<0.05)。CEBPA、FLT3、RUNX1基因突变频率在AML中分别为23.9%、32.4%、9.9%,在MDS中分别2.9%、11.8%、26.5%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 髓系白血病患者的基因突变频率与患者的年...     

二代测序在AML/MDS诊治中的应用研究

目的:采用二代测序(next generation sequencing,NGS)检测AML/MDS相关基因突变,分析各基因在AML和MDS中的突变情况及NGS的敏感性,评估基因突变作为MRD监测及疾病进展预测的可行性。方法:标本取自2015年8月至2016年6月在哈尔滨血液病肿瘤研究所诊治的初发AML(68例)和MDS(57例)患者,采用上海源奇生命科技有限公司的AML/MDS-NGS芯片检测22个相关基因突变。结果:TET2是AML(55.9%)和MDS(56.1%)中突变率最高的基因,在AML中突变率次之的基因为CEBPA(11.8%)、DNMT3A(7.4%)、C-KIT(7.4%)和FLT3(7.4%),在MDS中为U2AF1(10.5%)和SRSF2(10.5%)。除TP53和CEBPA基因外,其他基因均有特定突变位点。复检的5例AML患者缓解时与初发时相比,FLT3、C-KIT和CEBPA基因突变均转阴,而伴随的TET2基因突变率无明显变化,而5例MDS患者缓解与初发时各基因的突变率无明显变化,其中3例MDS患者发生了疾病进展,疾病进展时出现新的基因突变,但缓解后基因突变率也无明显变化。结论:AML和MDS中均有其特定突变基因和突变位点,一些基因突变如CEBPA等可作为AML中MRD监测的有效指标,但在MDS中仅可用于预后及疾病进展评估。     

骨髓增生异常综合症患者RUNX1基因突变分析

目的:探讨骨髓增生异常综合症(MDS)患者中RUNX1基因突变情况,以及与其他基因突变和部分临床参数间的相关性。方法:采用基因组DNA-PCR扩增产物直接测序法检测170例MDS患者中RUNX1、DNMT3A、TET2、IDH1/2、NPM1、FLT3-ITD、C-KIT突变情况。结果:170例患者中RUNX1基因突变检测率为13.5%(23/170),其他基因突变率依次为:TET2(11.2%,19/170)、DNMT3A(9.4%,16/170)、NPM1(8.2%,14/170)、IDH2(4.1%,7/170)、FLT3-ITD(2.9%,5/170)、IDH1(1.7%,3/170)、c-KIT(0.58%,1/170)。最常见的RUNX1突变共存基因为TET2(5/23)。RUNX1突变组与未突变组患者相比,具有更高的外周白细胞水平及更低的血小板水平,差异均具有统计学意义(P0.05);但在中位年龄、MDS亚型、染色体核型、血红蛋白水平等方面2组间均无统计学差异。对17例RUNX1突变患者及111例未突变患者进行了有效随访,其中8例RUNX1突变的MDS患者进展为急性髓系白血病(AML),白血病转化率为47.05%(8/17),13例RUNX1未突变的MDS患者进展为AML,白血病转化率为11.7%(13/111),差异有统计学意义(P=0.001)。结论:RUNX1突变在MDS患者中有较高的发生率,伴有该突变的MDS患者具有更高白细胞水平、更低的血小板水平、更高的骨髓原始细胞比例及白血病转化率。     

急性髓系白血病患儿FLT3-ITD、CEBPA、NPM1、DNMT3A、RAS基因突变特征及临床意义

目的探讨急性髓系白血病(AML)患儿FLT3、CEBPA、NPM1、DNMT3A、NRAS和KRAS基因突变特征及其临床预后意义。方法收集217例初诊AML患儿骨髓标本,采用PCR扩增产物Sanger测序法检测FLT3、CEBPA、NPM1、DNMT3A、NRAS和KRAS基因突变情况,收集临床资料,探究各基因突变的临床特征及预后意义。结果本研究中突变率最高的是NRAS(11.9%),其他依次为CEBPA(10.0%)、FLT3-ITD(5.7%)、KRAS(3.0%)、NPM1(1.4%),未检测出DNMT3A突变。KRAS突变均发生于M5型,NPM1突变均发生于M2型。FLT3-ITD突变组外周血白细胞计数(×109/L)较非突变组明显升高[104.0(19.8,201.0)vs 11.4(3.8,38.7),Z=-3.061,P=0.002];KRAS突变组年龄明显低于非突变组[2.0(1.0,3.3)岁vs 7.0(3.0,10.0)岁,Z=-2.282,P=0.005]。FLT3-ITD突变组患儿总生存率较非突变组明显降低(25.0%vs 52.5%,χ2=4.993,P=0.026);无病生存率呈减低趋势(33.3%vs 60.6%,χ2=3.750,P=0.053)。RAS突变组与非突变组预后差异无统计学意义。结论 FLT3-ITD突变是AML患儿患者的不良预后指标。     

伴RUNX1基因突变急性髓系白血病患者临床特征的分析

目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者中RUNX1基因及其伴随基因突变的发生率,并分析其临床特征及预后。方法:采用基因组DNA-PCR方法扩增RUNX1基因外显子,应用基因测序分析其基因突变,同时检测NPM1、DNMT3A、FLT3-ITD、IDH1/2、K/N-RAS、CEPBA、TET2、WT1伴随突变的情况,随访患者并判定疗效和预后。结果:171例AML患者中,17例检测存在RUNX1基因突变,突变率为9.9%。RUNX1基因突变类型为错义突变9例,框移突变4例,无义突变4例,突变组患者初诊时外周血白细胞数[3(1-101)×109/L]明显少于未突变组[26(1-298)×109/L](P=0.002),而突变组的血小板数为79(22-166)×109/L,明显高于未突变组[50(8-351)×109/L](P=0.010),突变组患者骨髓原始细胞比例37(0-72)%低于未突变组的53(0-98)%(P=0.020)。M0型患者RUNX1突变率55.6%,M4型患者13.6%,显著高于其他FAB亚型(P=0.003)。两组的年龄、性别、血红蛋白浓度、外周血单核细胞绝对值无明显统计学差异(P0.05)。细胞遗传学预后中、高危组患者突变率分别为88.1%和89.7%,显著高于低危组,差异有显著统计学意义(P=0.018)。RUNX1与具体核型异常包括Trisomy 8、Del(7q)、t(8;21)、Inv(16)均无显著相关(P0.05)。RUNX1基因突变与IDH1/2、N/K-RAS基因突变有显著相关性(P0.01); RUNX1突变组化疗完全缓解率为37.5%,明显低于未突变组的79.4%(P=0.001); RUNX1基因突变组总生存率低于未突变组(P0.05)。结论:伴RUNX1基因突变的AML患者具有独特的临床及生物学特点,RUNX1基因突变可以作为AML患者预后不良的分子学标志。     

ZO-1基因甲基化在MDS进展中的意义

目的:探讨ZO-1基因甲基化在骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)向急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)转化中的临床意义,为MDS患者的预后评估进一步提供理论依据。方法:采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MS-PCR)方法检测ZO-1基因在正常对照者骨髓标本(normal control,NC)、MDS、AML患者骨髓标本中的甲基化状态。运用亚硫酸氢盐侧序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)方法检测1例MDS系列标本ZO-1基因在其MDS-RA、MDS-RAEB、AML阶段的甲基化状态。结果:ZO-1基因在NC、MDS、AML患者标本中的甲基化阳性率存在明显差异(P=0.000),在NC组未发现甲基化阳性,在AM L组阳性率最高(65.0%)。MDS/AML患者ZO-1基因甲基化阳性组髓系原始细胞比例更高(P=0.000)。1例MDS患者系列标本显示,随着疾病进展,在MDS-RA、MDS-RAEB、AML阶段中,甲基化位点阳性频率存在明显差异(P=0.000),在AML阶段阳性频率最高(64.65%)。结论:ZO-1基因启动子区高甲基化发生于MDS/AML患者中,随着恶性克隆增生,ZO-1基因甲基化阳性率及甲基化位点阳性频率越来越高,在一定程度上预示着MDS疾病进展,进一步提示ZO-1基因甲基化水平可成为监测MDS患者急性白血病转化的新指标。     

地西他滨联合预激化疗对中老年MDS转化急性髓系白血病的近远期疗效及预后因素分析

目的:探讨国产地西他滨联合预激化疗[粒细胞集落刺激因子(G-CSF)+吡柔比星(THP)+阿糖胞苷(Ara-C)](CTG方案)治疗中老年骨髓增生异常综合征(MDS)转化的急性髓系白血病(AML)的近远期疗效及预后因素。方法:选取2013年6月至2015年6月在东莞市人民医院收治的初诊中老年MDS转化AML患者共76例,依据治疗方法分为CTG治疗和地西他滨联合CTG治疗(联合治疗组)2组,CTG治疗组36例,联合治疗组40例,2组患者均接受4个疗程治疗,随后进行来那度胺维持治疗。比较2组的近远期疗效及不良反应发生率,同时探讨影响联合治疗的不良预后因素。结果:2组患者的年龄、性别、初始血细胞计数、骨髓原始细胞比例、疾病诊断分型、染色体核型及FLT3-ITD基因突变等基础临床特征均无显著性差异,联合治疗组的近期疗效优于CTG治疗组(ORR:72.5%vs 50%)(P0.05),而骨髓抑制程度、严重感染发生率、胃肠道反应及肝损害方面,2组均无明显差异(P0.05)。随访2年时间,联合治疗组的中位生存时间优于CTG治疗组(19.9 vs 11.0个月)(P0.05)。多因素分析显示:近期疗效不佳(RR=3.926,P=0.015)、FLT3-ITD基因突变(RR=4.347,P=0.004)是影响联合治疗的独立危险因素。结论:国产地西他滨联合预激化疗治疗中老年MDS转化急性髓系白血病的近远期疗效均优于单纯预激化疗,而不良反应并未显著增加,其中近期疗效及FLT3-ITD基因突变是影响患者预后的独立危险因素。     

AML1-ETO阳性急性髓系白血病患者c-kit突变及其临床意义

本研究探讨AML1-ETO融合基因阳性急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者c-kit突变的发生情况及其临床意义。采用PCR和直接测序法检测31例AML1-ETO阳性AML患者c-kit基因17外显子突变的发生情况,并分析c-kit基因突变与患者的临床、实验室特征以及疗效的关系。结果表明:31例患者中14例检测到c-kit突变,突变率为45.16%,突变组男性患者的比例为71.43%、初诊时白细胞计数>10×109/L患者的比例为78.57%和伴有髓外浸润患者的比例为21.43%,均明显高于无突变组(29.41%、41.18%、0%,P=0.020,0.036,0.045),两组患者的年龄和骨髓原始细胞比例无明显差异(P=0.437和0.510)。c-kit突变和无突变组化疗完全缓解(CR)率(64.29%∶80%)和复发率(58.33%∶21.43%)的差异无统计学意义(P=0.344和0.054),而死亡率(57.14%)在c-kit突变组明显高于无突变组(20%,P=0.039)。结论:AML1-ETO阳性AML患者c-kit突变常见,突变患者预后差,常规检测c-kit突变对患者的危险度分层、预后评估和选择有效治疗方案有重要意义。     

基于二代测序的老年和年轻成人急性髓系白血病患者突变基因谱比较

目的:比较基于二代测序(NGS)的老年和年轻急性髓系白血病(AML)患者突变基因谱,探讨老年AML的分子生物学特点。方法:回顾性分析2018年1月至2018年11月在郑州大学第一附属医院进行了基于22个基因突变谱的NGS检测初治AML(非急性早幼粒细胞白血病)患者的突变基因数据,并比较老年(≥60岁)和年轻(60岁)AML患者之间的差异。结果:250例患者常见突变频率依次为NPM1(22.4%)、FLT3-ITD(18.8%)、NRAS(17.2%)、DNMT3A(14.4%)、TET2(11.6%)、IDH2 (9.6%)、CEBPA双突变(8.8%)、CEBPA单突变(8.4%)、KIT (8.4%)、RUNX1(7.6%)、IDH1(7.6%)、ASXL1(6.0%)、U2AF1(5.2%)、SRSF2 (3.2%)、SF3B1 (3.2%)、TP53 (2.4%)、KRAS(2.0%)。NPM1、CEBPA、DNMT3A突变常见于患者预后中等组,而KIT突变在患者预后良好组更常见。老年患者较年轻患者更多出现TET2突变(21.8%vs 8.7%)(χ~2=7.180,P=0.007)和IDH2突变(20.0%vs 6.7%)(χ~2=8.788,P=0.003)。将突变基因按照功能进行分组显示,老年患者更多发生DNA甲基化和去甲基化突变(包括DNMT3A、TET2、IDH1、IDH2)(67.3%vs 36.4%,χ~2=16.653,P=0.000),以及RNA剪切酶突变(包括SRSF2、SF3B1、U2AF1、ZRSR2)(23.6%vs 8.7%)(χ~2=9.041,P=0.003)。结论:基于NGS技术发现,不同年龄的AML患者常见突变种类存在显著差异,老年患者更多发生DNA甲基化和去甲基化突变以及RNA剪切酶突变。     

Somatic reversion impacts myelodysplastic syndromes and acute myeloid leukemia evolution in the short telomere disorders

BACKGROUNDGermline mutations in telomerase and other telomere maintenance genes manifest in the premature aging short telomere syndromes. Myelodysplastic syndromes and acute myeloid leukemia (MDS/AML) account for 75% of associated malignancies, but how these cancers overcome the inherited telomere defect is unknown.METHODSWe used ultra-deep targeted sequencing to detect somatic reversion mutations in 17 candidate telomere lengthening genes among controls and patients with short telomere syndromes with and without MDS/AML, and we tested the functional significance of these mutations.RESULTSWhile no controls carried somatic mutations in telomere maintenance genes, 29% (16 of 56) of adults with germline telomere maintenance defects carried at least 1 (P < 0.001), and 13% (7 of 56) had 2 or more. In addition to TERT promoter mutations, which were present in 19%, another 13% of patients carried a mutation in POT1 or TERF2IP. POT1 mutations impaired telomere binding in vitro and some mutations were identical to ones seen in familial melanoma associated with longer telomere length. Exclusively in patients with germline defects in telomerase RNA (TR), we identified somatic mutations in nuclear RNA exosome genes RBM7, SKIV2L2, and DIS3, where loss-of-function upregulates mature TR levels. Somatic reversion events in 6 telomere-related genes were more prevalent in patients who were MDS/AML-free (P = 0.02, RR 4.4, 95% CI 1.2–16.7), and no patient with MDS/AML had more than 1 reversion mutation.CONCLUSIONOur data indicate that diverse adaptive somatic mutations arise in the short telomere syndromes. Their presence may alleviate the telomere crisis that promotes transformation to MDS/AML.FUNDINGThis work was supported by the NIH, the Commonwealth Foundation, the S&R Foundation Kuno Award, the Williams Foundation, the Vera and Joseph Dresner Foundation, the MacMillan Pathway to Independence Award, the American Society of Hematology Scholar Award, the Johns Hopkins Research Program for Medical Students, and the Turock Scholars Fund.     

IDH不同突变亚型及伴发基因突变对急性髓系白血病患者的预后意义

目的:探讨IDH不同突变亚型及伴发不同基因突变在非M 3型急性髓系白血病（AML）患者中的预后意义。 方法:采用二代测序技术检测2016年6月至2018年12月就诊于郑州大学第一附属医院的389例AML患者的22种基因突变情况,通过Kaplan-Meier法及Cox回归模型分析影响预后的因素。结果...     

中国健康正常人、骨髓增生异常综合征及再生障碍性贫血患者HFE基因突变的研究

目的 分析健康正常人、骨髓增生异常综合征(MDS)和再生障碍件贫血(AA)患者HFE基因突变的频率并探讨其与铁代谢和铁过载脏器功能受损相关指标的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)联合测序分析的方法检测271例MDS患者、402例从患者和1615名健康正常对照的HFE基因H63D和C282Y突变,并比较未输注红细胞的MDS和AA患者HFE基因突变组与未突变组的铁代谢指标和铁过载脏器功能受损相关指标.结果 271例MDS患者、402例AA患者及1615名正常对照中均未发现HFE基因C282Y突变及C282Y和H63D复合突变.MDS患者H63D突变率为4.1%(271例中11例),且均为杂合型.从患者H63D杂合型突变率为9.7%(402例中39例),纯合型突变率0.25%(402例中1例).正常对照H63D杂合型突变率为10.2%(164例),纯合型突变率0.24%(4例).MDS患者H63D突变率明显低于正常对照(P:0.002),而AA患者与正常对照比较差异无统计学意义(P=0.988).未输注红细胞的MDS及AA患者的血清铁蛋白(SF)值、血清铁(SI)值、铁饱和度(TS)值均接近或高于正常高限,血清未饱和铁(UIBC)值明显低于正常.未输注红细胞的MDS患者H63D突变组与未突变组的SF、SI、UIBC、总铁结合力(TIBC)、TS值差异无统计学意义(P值均＞0.05);未输注红细胞的AA患者H63D突变绀的SI值明显高于未突变组[42.6(24.6～60.4)μmol/L和32.0(8.4～63.3)μmol/L(P=0.011)],而两组的其他铁代谢参数差异均无统计学意义(P值均＞0.05).MDS及AA患者或就诊前未输注红细胞的MDS及AA患者H63D突变组与未突变组的肝酶值、卒腹血糖(FBS)值、心电图(ECG)异常率、外周血指标差异均无统计学意义(P值均＞0.05).结论 HFE基因H63D和C282Y突变在人群的分布有种族和遗传的差异,中国人HFE基因的突变率明显低于白种人.MDS与AA患者本身均可致铁过载,HFE基因H63D和C282Y突变并不是导致其铁过载的主要原因.     

急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征患者NPM基因突变的研究

目的探讨染色体核型正常的急性髓系白血病（AML）和骨髓增生异常综合征（MDS）患者NPM基因突变。方法染色体核型正常的AML患者40例（初治28例，首次完全缓解期12例），MDS患者33例，用基因组DNAPCR法扩增NPM基凶第12外显子，PCR产物纯化后直接测序，发现突变患者，将PCR产物克隆至pUCm—T载体，转化大肠杆菌DH5α，至少挑选5个以上重组克隆，小量制备质粒后进行测序。结果共发现NPM突变患者6例（AML4例，MDS2例），A型突变4例，B型突变1例，新发现突变1例（命名为R型）。结论新发现了一个NPM突变类型，并在国内外首次证实MDS患者也存在NPM基凶突变，为进一步研究NPM突变与AML及MDS发生的关系提供了重要线索．     

CD73在NPM1突变型急性髓系白血病患者中的表达及其临床意义

目的:探讨CD73在NPM1突变型及野生型急性髓系白血病(AML)患者中的表达及对其治疗疗效和预后的判断价值。方法:选取2015年6月-2019年6月本院收治的初治AML患者160例,同期选取本院非AML者的骨髓样本40例作为对照,分别比较健康者、NPM1突变型AML及NPM1野生型AML患者中CD73的表达,分析CD73表达与其临床病理特征及疗效的关系,对患者进行随访,进一步分析CD73对不同AML患者预后的影响。结果:CD73在AML患者中的阳性表达率(23.75%)显著高于健康对照组(0.62%),NPM1突变AML患者CD73+表达率(74.75%)显著高于NPM1野生型(25.51%)(P<0.001);AML患者CD73+表达与年龄、FAB分型、疾病危险程度分级及NPM1基因突变状况有关(P均<0.05);NPM1基因突变AML患者总体生存率为75.98%,显著高于NPM1野生型AML患者的34.68%(P<0.001),NPM1基因突变AML患者中CD73+组中位生存时间为21个月,显著长于CD73-组患者的11个月(P<0.001),NPM1野生型AML患者中CD73+组中位生存时间为13个月,显著短于CD73-组患者的18个月(P<0.001)。结论:CD73在NPM1基因突变AML患者中表达增加,CD73在不同NPM1基因突变型AML患者中有不同的预后意义。结合AML患者临床病理特征、CD73表达及NPM1基因情况有助于判断其预后,并指导有关治疗方案的制定。     

单倍型造血干细胞移植后糖皮质激素耐药急性移植物抗宿主病的危险因素分析

目的分析单倍型造血干细胞移植(haplo-HSCT)后糖皮质激素耐药急性移植物抗宿主病(GVHD)的危险因素。方法回顾性分析2010年1月至2011年12月在北京大学血液病研究所接受haplo-HSCT后并发急性GVHD的成人急性髓系白血病/骨髓增生异常综合征患者的临床资料。结果共有85例急性GVHD患者纳入研究,男55例,女30例,中位年龄30(19~67)岁。糖皮质激素治疗后达到完全缓解(CR)53例(62.4%),部分缓解(PR)6例(7.1%),未缓解(NR)26例(30.6%)。Ⅰ/Ⅱ、Ⅲ/Ⅳ度急性GVHD组糖皮质激素治疗的CR率分别为66.2%(51/77)、25.0%(2/8)(χ^2=3.639,P=0.048);累及1个、2个靶器官急性GVHD组糖皮质激素治疗的CR率分别为77.4%(48/62)、21.7%(5/23)(χ^2=22.157,P<0.001);明尼苏达危险度积分标危、高危组糖皮质激素治疗的CR率分别为67.5%(52/77)、12.5%(1/8)(χ^2=7.153,P=0.004)。单因素和多因素分析均显示明尼苏达危险度积分高危和移植物单个核细胞量≥8.33×108/kg是发生糖皮质激素耐药急性GVHD的独立危险因素。明尼苏达积分标危组(77例)、高危组(8例)移植后22个月总生存率分别为(90.3±3.8)%、(75.0±15.3)%(χ^2=2.831,P=0.092);糖皮质激素治疗CR组(53例)、非CR组(32例)移植后22个月总生存率分别为(95.2±3.4)%、(78.6±7.9)%(χ^2=5.287,P=0.021)。结论明尼苏达危险度积分和移植物单个核细胞数可以预测haplo-HSCT后糖皮质激素耐药的急性GVHD。     

急性髓细胞白血病患者ASXL2和ZBTB7A基因突变及与预后的关系

目的:探讨急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者ASXL2和ZBTB7A基因突变及其与患者预后的相关性。方法:选取2014年1月-2016年1月在本院接受治疗的42例t(8;21)AML患者,对其骨髓样本进行ASXL2和ZBTB7A基因测序,并分析携带ASXL2和ZBTB7A突变的AML患者的遗传特征及其与预后的相关性。结果:在t(8;21)AML患者中发现了ASXL2(33.3%)和ZBTB7A(9.5%)突变。ASXL2突变与野生型患者相比,突变型患者诊断时的白细胞数量显著较高[(9.49±1.85)×10⁹/L vs(8.3±1.14)×10⁹/L,P=0.042],性染色体缺失的频率更低(分别为21.43%vs 71.43%,P=0.002),ASXL2突变与ASXL1突变互斥(P=0.035),ASXL2突变患者中染色质修饰基因ATRX和BCOR突变比例较高(P=0.032,P=0.005)。此外,ASXL2和ZBTB7A突变对总体或无事件生存率无明显影响。结论:在t(8;21)AML患者中检测到ASXL2和ZBTB7A突变。ASXL2和ZBTB7A基因突变对AML患者预后无明显影响。     

抑癌基因pten在骨髓增生异常综合征及急性髓系白血病的表达

为了研究pten基因在骨髓增生异常综合征（MDS）、急性髓系白血病（AML）患者中的表达及其意义，采用逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫印迹杂交（Western blot）方法检测Jurkat细胞株、35例MDS、45例AML及20例正常人骨髓有核细胞中pten mRNA及其蛋白的表达。结果表明：pten mRNA在阴性对照Jurkat细胞株不表达。MDS组的阳性表达率（77．1％）低于正常对照组（90．0％），但差异无统计学意义（P〉0．05）；AML组阳性表达率（60．0％）低于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；MDS—RAEB组阳性表达率（70．0％）低于MDS—RCMD组（86．7％），初发／复发AML组阳性表达率（53．3％）低于完全缓解AML组（73．3％），但差异均无统计学意义（p〉0．05）。对各组pten mRNA相对表达量分析发现，MDS及AML组均明显低于正常对照组（P〈0．005）；MDS-RAEB组低于MDS-RCMD组（P〈0．05）；初诊／复发的AML组明显低于完全缓解的AML组（P〈0．001）；MDS组与AML组相比，差异无统计学意义（p〉0．05）。PTEN蛋白表达阳性率在MDS组（65．7％）及AML组（54．8％）均低于正常对照组（90％）（P〈0．05）；MDS—RCMD组（80．O％）与MDS—RAEB组（55．0％）相比，阳性表达率均无统计学意义（P〉O．05），但初诊／复发的AML组（44．4％）与完全缓解的AML组（73．3％）相比，差异有统计学意义（p〈0．05）。结论：pten mRNA在MDS、AML中表达完全缺失并不多见，但表达强度较正常人明显减弱。PTEN蛋白在MDS、AML中阳性表达率低于正常人，且与mRNA表达水平不一致。pten基因的表达异常参与了MDS及AML的发病。     

伴有NPM1基因突变的急性髓细胞白血病患者的临床特征

目的分析急性髓细胞白血病（AML）的NPM1（Nucleophosmin）基因第12外显子突变,探索伴有NPM1基因突变的AML患者的临床特征。方法随机选择98份临床确诊的急性白血病和骨髓增生异常综合征（MDS）患者的冻存骨髓细胞标本,其中78份AML、10份急性淋巴细胞白血病（ALL）和10份MDS提取DNA,行多重PCR,同时扩增NPM1基因第12外显子及FLT3基因第14、15外显子,PCR-毛细管电泳同时检测NPM1和FLT3-ITD基因突变。结果 78例AML患者共检出21例（26.9%）具有NPM1基因突变,10例ALL和10例MDS均未检测出该突变。78例AML中52例核型正常,NPM1阳性19例（36.5%）,26例异常核型AML患者NPM1阳性仅2例（7.7%）,两组间差异有统计学意义（P〈0.05）。AML-M2、M5患者NPM1基因突变发生率高于其他组。NPM1突变型AML患者WBC中位数为42.0（16.3～102.0）×10^9/L,野生型为14.0（3.4～67.2）×10^9/L,两组间差异有统计学意义（P〈0.05）。21例NPM1突变型AML中12例（57.1%）同时伴有FLT3-ITD,57例NPM1野生型患者13例（22.8%）出现FLT3-ITD突变,两组间差异有统计学意义（P〈0.05）。NPM1阳性FLT3阴性患者9例中8例（88.9%）获得CR1,NPM1阳性FLT3阳性12例中3例（25%）获得CR1,NPM1阴性FLT3阴性33例中16例（48.5%）获得CR1,NPM1阴性FLT3阳性13例中2例（15.4%）获得CR1,组间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 NPM1基因突变是AML患者常见的一种突变,尤其是染色体核型正常AML患者发生率较高。伴有NPM1突变的AML患者的临床特征为年龄高,外周血白细胞高,更常见于M2和M5中,伴随FLT3-ITD突变发生率高,CR1率较高。     

伴NPM1突变急性髓系白血病二代测序突变基因谱与MICM分型特征关联性分析

目的:分析伴NPM1突变(NPM1mut)急性髓系白血病(AML)患者二代测序(NGS)法检测的突变基因谱与MICM特征间的关系,解释NPM1mutAML的临床生物学异质性.方法:收集苏州大学附属第三医院、南京医科大学附属常州第二人民医院和浙江医院收治的成人初诊AML患者,选取NGS资料完整的NPM1mut患者238例...