茶叶酸性多糖的分离、纯化及其理化性质研究

采用水提醇沉法从采自江西婺源的粗老绿茶中提取茶叶多糖,通过Sevag法脱蛋白得到精制茶叶多糖,应用高效凝胶渗透色谱法（high performance gel permeation chromatography,HPGPC）分析茶叶多糖纯度并测定其分子质量,进一步测定茶叶多糖的糖含量、蛋白质含量、单糖组成、糖醛酸组成等理化指标,同时对其进行紫外和红外光谱扫描,考察其光谱性质。结果表明：该茶叶多糖组分为均一性高的酸性多糖组分,分子质量约为289 734 D,糖含量为55.1%,蛋白质含量为1.8%。该茶叶多糖酸性组分主要由鼠李糖、核糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为1.26∶3.18∶4.08∶1.00∶1.52∶3.92,该茶叶多糖酸性组分中含有大量半乳糖醛酸,含量为33.5%。     

草菇多糖VVP-1b的分离纯化及其光谱分析

从草菇子实体中提取水溶性粗多糖,经脱蛋白、脱色、DEAE-Sepharose F.F和Superdex-200柱层析,分离纯化得到一种水溶性草菇多糖组分VVP-1b。采用液相色谱、紫外光谱、红外光谱等光谱方法对其部分理化性质和结构进行测定。结果表明:VVP-1b为均一组分,具有明显的多糖特征峰,含有β-吡喃糖苷键;其总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量分别为88.7%、7.8%、27.6%,相对分子质量为5.84×105;单糖组成及摩尔比为阿拉伯糖∶甘露糖∶半乳糖∶葡萄糖=4.0∶1.0∶1.4∶35.4。因此VVP-1b是一种均一的具有β-吡喃糖苷键的酸性多糖。     

梭柄松苞菇多糖CVP-Ⅱ_2的理化性质及其结构研究

以梭柄松苞菇子实体为原料,采用超声辅助水提醇沉法,经脱色、脱蛋白、DEAE-52离子交换柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱层析分离纯化得到梭柄松苞菇多糖CVP-Ⅱ2,用高效凝胶渗透色谱(GPC)结合葡聚糖凝胶Sephadex G-100的分离结果鉴定其分子量分布及纯度,利用碘-碘化钾、苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝G-250法、硫酸-咔唑法对其淀粉含量、总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量进行测定;经紫外光谱分析、红外光谱分析、GC分析其官能团特征及单糖组成。结果表明,CVP-Ⅱ2为非淀粉白色絮状均一多糖,其总糖、蛋白质含量、糖醛酸含量分别为:总糖含量为86.76%,不含蛋白质,糖醛酸含量为12.93%;其重均相对分子量Mw为11252u;红外光谱显示CVP-Ⅱ2具有多糖的特征吸收峰且为吡喃型糖环构型;单糖组成结果显示CVP-Ⅱ2含岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为:甘露糖∶岩藻糖∶葡萄糖∶半乳糖=1∶1.63∶29.36∶5.02。     

火棘水溶性多糖PP-A2理化性质研究

对火棘水溶性多糖的PP-A2组分的理化性质进行了研究。结果表明:PP-A2的相对分子质量约为30kDa,其单糖组分主要是由阿拉伯糖和鼠李糖以及保留时间为3.46min的未知组分(由红外光谱分析推测其可能是糖醛酸)组成的杂多糖,其中还含有少量的果糖、半乳糖和甘露糖,PP-A2中各糖残基物质的量的比为:(阿拉伯糖+鼠李糖)∶果糖∶半乳糖∶甘露糖=9.56∶3.37∶1.88∶1。     

海星多糖的分离纯化及鉴定

目的:建立海星多糖分离纯化的方法,并对纯化组分进行鉴定。方法:用碱提-酶解法提取海星多糖,再用离子交换层析和凝胶过滤层析法进行纯化;用理化方法和光谱法对纯化组分进行鉴定。结果:分离纯化的海星多糖不含蛋白质,含硫酸基,其中SSP1含己糖醛酸18.5%,含氨基己糖22.6%,含岩藻糖16.8%。结论:获得海星多糖6个纯化组分(SSP1-6),其中SSP1由己糖醛酸、氨基己糖、岩藻糖和硫酸基组成,其组成摩尔比约为:1.00∶1.10∶1.07∶(未测含量)。     

轮叶党参多糖的分离纯化及结构研究

目的:确定轮叶党参多糖组分1(CLPS1)结构,为轮叶党参多糖活性研究和天然植物多糖的开发提供依据。方法:经提取、分离纯化后获得组分CLPS1,利用气相色谱、红外光谱、核磁共振、高碘酸氧化、Smith降解和甲基化分析方法等确定CLPS1结构。结果:CLPS1比旋光度为右旋44°,总糖含量为97.6%,糖醛酸为13.18%;相对分子质量为91.7,CLPS1单糖组成为阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸、甘露糖,摩尔比为2.7∶3.4∶2.3∶1.1∶0.5。CLPS1中存在葡萄糖醛酸,分子中含有吡喃糖并且存在α-和β-构型。主链主要由阿拉伯糖和半乳糖组成,半乳糖和葡萄糖构成支链和主链的末端残基;半乳糖分支点糖残基是葡萄糖(1→4,6)、半乳糖(1→3,6);半乳糖有1→6、1→3,6、1→、1→3、1→4键型;葡萄糖有1→、1→4、1→4,6键型;阿拉伯糖为1→5键型,半乳糖醛酸为1→3键型。结论:CLPS1为一种结构复杂的酸性多糖。     

纳豆多糖的理化性质及结构分析

对纳豆多糖各理化成分的含量进行测定,采用高效液相色谱及气-质联用色谱分析分子质量和单糖组成,并经傅立叶红外光谱测定纳豆多糖的官能团以及刚果红实验检测其空间结构。结果表明,纳豆多糖中总糖66. 01%,蛋白质1. 12%;糖醛酸及SO24-分别占2. 79%、1. 57%;纯化后发现,纳豆多糖为单一组分,分子质量为11. 53 k Da,单糖组成及摩尔比为岩藻糖∶木糖醇∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=1. 04∶1. 53∶1. 57∶1. 19∶4. 68;红外光谱分析出其具有多糖的特征吸收峰,刚果红实验表明纳豆多糖具有三股螺旋结构。     

坛紫菜多糖的分离纯化及其组成分析

采用热水提取坛紫菜多糖,经分离纯化得到3个多糖组分(分别命名为SP1、SP2及SP3).通过红外光谱和气相色谱对多糖组分进行分析,并用化学法测定多糖组分中的硫酸根、糖醛酸、半乳糖及3,6-内醚半乳糖含量.测定结果表明,SP1的单糖组成中含半乳糖96.53%、鼠李糖1.225%、岩藻糖0.85%、阿拉伯糖1.37%、木糖1.16%;SP2、SP3的单糖组分为半乳糖,而无其它单糖.3种多糖的硫酸基含量分别为(8.54±0.44)%、(10.24±0.23)%及(12.35±0.58)%,糖醛酸含量分别为(15.00±0.23)%、(10.46±0.55)%及(11.50±0.35)%,3,6-内醚半乳糖含量分别为(6.84±0.43)%、(4.99±0.24)%及(4.56±0.36)%.     

响应面法优化磁化水提取燕麦麸皮多糖工艺

以燕麦麸皮为原料,多糖得率和蛋白质残留率为考察指标,比较了磁化水和纯净水对燕麦麸皮中多糖的提取效果,并采用响应面法对磁化水提取燕麦麸皮多糖工艺进行优化。结果表明,磁化水对麸皮多糖的提取效果优于纯净水,其最优提取条件为提取温度68 ℃、液料比18∶1（mL/g）、提取pH 8.7、提取时间105 min,多糖得率为（13.92±0.07）%,蛋白质残留率为（30.14±0.18）%,与纯净水提取相比,多糖得率提高了37.55%。对纯化后的多糖采用气相色谱法检测分析,其单糖含量为葡萄糖（60.9±1.3）%、木糖（21.1±1.1）%、阿拉伯糖（16.7±1.4）%,同时含有半乳糖（1.0±0.8）%和鼠李糖（0.3±0.1）%。     

珊瑚菌多糖RBP-Ⅰ的结构及抗氧化活性分析

珊瑚菌经热水浸提分离得到粗多糖,纯化后得到珊瑚菌多糖RBP-Ⅰ,采用凝胶渗透色谱测定其分子量,并结合Sephadex G-100层析柱鉴定其纯度。利用苯酚-硫酸法测定糖含量,碘-碘化钾法判定是否含有淀粉,考马斯亮蓝G-250法测蛋白含量,硫酸-咔唑法测糖醛酸含量。采用红外光谱扫描、气相色谱分析其结构及单糖组成。结果表明,RBP-Ⅰ的Mw为15857 Da,为均一多糖;总糖含量86.94%,糖醛酸含量5.14%,不含蛋白及淀粉;多糖RBP-Ⅰ中单糖的摩尔比为鼠李糖∶岩藻糖∶阿拉伯糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=1.00∶6.53∶1.99∶8.29∶70.05∶53.80;红外光谱表明其具有多糖特征峰,且为吡喃型多糖。体外抗氧化结果表明:当多糖质量浓度为10000μg/m L时,FRAP值达到0.0672 mmol/L,DPPH自由基的清除率达到22.83%,ABTS+·的清除率达到15.71%。由此可见,珊瑚菌多糖RBP-Ⅰ具有一定的抗氧化活性。     

DEAE琼脂糖凝胶纯化龙胆多糖及其分子特性

以龙胆为原料提取龙胆多糖,纯化后对其分子特性进行研究。通过正交试验确定了龙胆多糖的最佳提取参数：浸提时间2.5 h、浸提温度90 ℃、液料比20∶1（V/m）,得率为12.80%。利用DEAE琼脂糖凝胶柱对龙胆多糖粗品进行纯化,得到F1和F2两个分离组分,得率分别为14.1%和63.4%。化学组成分析表明龙胆多糖粗品、F1和F2是由不同含量的总糖、蛋白质、硫酸根和糖醛酸组成的,单糖组成主要包括阿拉伯糖和半乳糖,同时含有少量的葡萄糖、鼠李糖、甘露糖和木糖。采用高效尺寸排阻色谱-紫外检测器-多角度激光光散射仪-示差折光检测器联机系统对多糖的分子质量及分布进行分析,结果表明龙胆粗品、F1和F2分子质量（Mw）为67.2×103～788.4×103 u,回转半径（Rg）为90.2～321.1 nm。研究确定了龙胆多糖的提取参数,并通过离子交换柱进行纯化,分析了龙胆多糖的分子特性,为下一步的生物活性研究奠定了基础。     

方格星虫多糖的分离纯化及单糖组成

方格星虫多糖经碱法提取、三氯乙酸脱蛋白、DEAE-52纤维素柱层析、Sephadex G-100凝胶柱层析纯化得到精制方格星虫多糖（Sipunculus nudus polysaccharide,SNPS）。测定SNPS的理化性质和单糖组成,结果表明：SNPS为白色粉末状单一组分;经理化性质测定和紫外光谱分析,表明SNPS的多糖质量分数为99.35%,糖醛酸质量分数为22.21%,不含蛋白质和核酸,不含硫酸根;气相色谱分析结果表明方格星虫多糖SNPS主要由阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为1.16∶9.54∶1。本研究表明SNPS是从方格星虫中得到的均一组分纯多糖。     

干燥方式对桑叶降糖活性成分含量的影响

本实验探讨了冷冻干燥、真空干燥、微波干燥和热风干燥4 种不同干燥方式对桑叶降糖活性成分的影响。采用高效液相色谱法测定桑叶1-脱氧野尻霉素（1-deoxynojirimycin,DNJ）含量、苯酚-硫酸法测桑叶多糖含量、亚硝酸钠法测定桑叶总黄酮含量。结果表明：冷冻干燥法制备的桑叶色泽最好,与新鲜桑叶最为接近,但DNJ和总黄酮的含量都较低;真空干燥法制备的桑叶DNJ和多糖含量最低,且桑叶的色泽也最差;微波干燥对桑叶的降糖成分和色泽影响较小,当功率为140 W处理10 min时,其DNJ和多糖的含量最高,分别为（297.15±6.35） mg/100 g和（11.71±0.01）%;热风干燥的时间较短,对桑叶的颜色影响也较小,当干燥温度为75 ℃,干燥时间为60 min,所得桑叶的DNJ、总黄酮、多糖的含量都较高,分别为（227.47±5.79）mg/100 g、（49.51±1.18）mg/g和（11.29±0.01）%。因此热风干燥更适合于工业化生产中大批量桑叶的干燥。同时测定对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用可知干燥后桑叶降糖物质结构未发生改变,降糖效果依然存在。     

冬枣多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的：分离纯化冬枣多糖,并研究其组分、结构特征和抗氧化活性。方法：采用水提醇沉、脱蛋白脱色、DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-100凝胶色谱柱分离纯化冬枣多糖;利用Sephadex G-100凝胶色谱柱进行纯度鉴定和分子质量的测定;通过紫外光谱、红外光谱、气相色谱法进行了初步结构分析;采用邻二氮菲法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）体系对纯化多糖进行抗氧化活性的研究。结果：冬枣多糖经DEAE-52分离和Sephadex G-100纯化得到2 个组分DPA和DPB,经Sephadex G-100鉴定均为均一组分,DPA和DPB分子质量分别为1.04×104、3.02×105 D,不含蛋白质和核酸,为吡喃型糖苷环骨架,DPA的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为6.66∶1.00∶6.75∶2.09;DPB的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为4.33∶10.90∶1.00∶3.25∶4.78;DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性,随着多糖质量浓度的增加,其抗氧化活性增强,在质量浓度为8 mg/mL时对羟自由基清除率分别为28.52%、78.79%,在质量浓度为0.4 mg/mL时对DPPH自由基清除率分别为9.97%、24.54%。结论：DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性。     

Chemical characteristics and antioxidant activities of polysaccharide purified from the seeds of Plantago asiatica L.

BACKGROUND: A water‐soluble polysaccharide from the seeds of Plantago asiatica L. (P. asiatica L. polysaccharide, PLP) was extracted with hot water and purified by gel filtration chromatography. The chemical characteristics of PLP were determined by high‐performance gel permeation chromatography (HPGPC) and Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy. In addition, the antioxidant activities of PLP in vitro were evaluated using various test systems, including scavenging of 1,1‐diphenyl‐2‐picryl‐hydrazyl (DPPH) radicals, scavenging of superoxide radicals generated by 1,2,3‐phentriol autoxidation, scavenging of hydroxyl radicals and inhibition of lipid peroxidation. RESULTS: The molecular weight of PLP was determined by HPGPC to be about 1894 kDa. PLP contained 29.2 g kg^?1 protein and 145.8 g kg^?1 uronic acid. The FTIR spectrum of PLP also revealed typical characteristics of a polysaccharide containing protein and uronic acid. Moreover, the results showed that PLP possessed antioxidant activities, but lower than those of ascorbic acid. CONCLUSION: PLP is an acid protein‐bound polysaccharide of high molecular weight, but its structure needs further study. The present results suggest that PLP could potentially be used as a natural antioxidant. Copyright © 2009 Society of Chemical Industry     

百合多糖对Ⅰ型糖尿病大鼠的降血糖作用

目的：探讨百合多糖对I 型糖尿病大鼠的降血糖作用。方法：从新鲜百合中提取出百合多糖,采用离子交换层析和凝胶层析纯化得到3种多糖;优选碱洗百合多糖、以链脲佐菌素诱导建立I型糖尿病大鼠模型,通过百合多糖治疗,比较治疗前后大鼠体质量及空腹血糖的变化、测定治疗后胰岛素水平以及己糖激酶、琥珀酸脱氢酶、总超氧化物歧化酶的活性和丙二醛的含量,研究百合多糖对I型糖尿病大鼠的降血糖作用。结果：百合多糖可减缓糖尿病大鼠体质量的负增长;降低空腹血糖（P＜0.01）和丙二醛含量（P＜0.05）;升高胰岛素、己糖激酶、琥珀酸脱氢酶和总超氧化物歧化酶活性（P＜0.01）。结论：百合多糖一方面通过提高糖代谢酶的活性,促进葡萄糖的摄取和利用;另一方面通过提高机体抗氧化功能,抑制氧自由基对胰岛β细胞的损伤,增加胰岛素分泌,调节I型糖尿病大鼠的血糖。     

大叶麻竹笋多糖分离纯化工艺

以水提醇沉法提取到的大叶麻竹笋粗多糖为原料,对其进行脱蛋白、透析脱色、DEAE-52纤维素柱层析分级、Sephadex-50葡聚糖凝胶柱分级处理,探究大叶麻竹笋多糖的分离纯化工艺。研究结果表明,木瓜蛋白酶结合Sevag法是最佳脱蛋白条件;进行DEAE-52纤维素柱分级,以纯水、0.05 mol/L和0.1 mol/L NaCl溶液洗脱获得了3 种主要的大叶麻竹笋多糖组分BSP1、BSP2、BSP3;再进行Sephadex-50葡聚糖凝胶分级,分别纯化得到了BSP1A、BSP2A、BSP3B 3 种多糖组分,这3 种多糖组分基本不含蛋白质和核酸,且纯度均达到了95.3%以上。