青藏高原牦牛酸奶中具高抗氧化能力乳酸菌的筛选

研究了从青藏高原牦牛酸奶中分离的881株乳酸菌的H2O2耐受能力,从中筛选出了8株对H_2O_2具有较强耐受能力的乳酸菌,并对它们清除DPPH自由基、OH自由基、O_2~-自由基的能力以及T-AOC活性做了进一步研究。结果显示,乳酸菌对DPPH自由基的清除能力都是活细胞体高于无细胞提取物;而在对OH自由基、O_2~-自由基的清除和T-AOC活性上恰好相反。菌株BX62、XS40和XM5在对自由基的清除中表现突出,在菌体浓度为10~9 CFU/m L时,BX62的活细胞体对DPPH自由基的清除率最高(33.53%),其无细胞提取物对O_2~-自由基的清除率同样最高(48.85%)。而在乳酸菌无细胞提取物对OH自由基的清除中XS40表现最好(52.12%)。此外,3株乳酸菌都具有较强的T-AOC活性。经16S r RNA鉴定和系统进化分析,3株菌分别为Lactobacillus parplantarum BX62,Lactobacillus plantarum XM5和Pediococcus acidilactici XS40。本研究从青藏高原牦牛酸奶中筛选的3株乳酸菌的确具有高抗氧化活性,有作为天然抗氧化剂的应用前景。     

乳酸菌抗氧化特性及其katA基因分析

为了分析乳杆菌的抗氧化特性及其与katA基因的关系,以自然发酵肉制品中筛选的6株乳杆菌为研究对象,通过对1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)、羟(·OH)、超氧阴离子(O_2~-·)自由基清除率、H_2O_2耐受性以及katA基因的表达进行评价。结果表明:试验菌株清除·OH自由基的活性物质主要是菌体细胞及胞内物质,而清除DPPH和O_2~-·自由基主要是乳酸菌的代谢产物;TR1-1-3对3种自由基的清除能力都比较强,而菌株X31对·OH和O_2~-·的清除率最低,且与TR1-1-3差异显著(P0.05);除菌株X31外,其它试验菌株在H_2O_2浓度0～1.0 mmol/L范围,对H_2O_2均有一定的耐受能力,且在12～48 h培养时间内,随着培养时间的延长,耐受性逐渐增强。对自由基清除率和H_2O_2耐受能力弱的菌株X31的katA基因的特异性PCR检测结果为阴性,而其它菌株均为阳性。本研究发现乳酸菌抗氧化能力具有菌株特异性,通过分析乳酸菌对O_2~-·、·OH、DPPH自由基的清除率以及对H_2O_2耐受性的表观数据,结合katA基因表达情况,可以作为乳酸菌抗氧化能力强弱判定的检测方法。研究结果可为优质菌种资源的开发应用提供技术支持。     

仙参果酒体内外抗氧化活性的研究

以人参和仙人掌果为原料发酵制得仙参果酒,通过测定不同剂量仙参果酒的还原力、DPPH自由基、·OH和O_2~-·清除率进行体外抗氧化活性检验,并且对D-半乳糖致衰老模型小鼠进行体内抗氧化活性评价。结果表明:仙参果酒具有较强的还原力,随着仙参果酒浓度的增加,DPPH自由基、·OH和O_2~-·的清除能力都随之增加,且样品浓度为0.4 mL/mL时,抗氧化作用达到最大值。仙参果酒能显著提高小鼠血清和肝脏组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力和总抗氧化能力(total anti-oxidative capacity,T-AOC)(P0.05),同时显著降低血清和肝脏组织中丙二醛的含量(P0.05)。因此,仙参果酒具有良好的体内外抗氧化活性,可以作为一种抗氧化剂和自由基清除剂。     

如皋长寿村人群肠道抗氧化乳酸菌筛选

为获得能应用于功能性食品的高抗氧化性能乳酸菌,测定了30株分离自江苏如皋长寿村人群肠道中的乳酸菌发酵液清除自由基能力和还原能力,并对初步获得的4株抗氧化性能较好的菌株发酵不同组分清除自由基能力、还原能力及抗氧化酶活性进行了测定。结果表明:4株菌发酵液抗氧化性能不等同于其各组分抗氧化性能总和,且发酵上清液抗氧化性能显著高于其菌体和胞内提取物。获得综合抗氧化性能较好的2株菌L10和L13,两株菌发酵上清液对羟自由基清除率分别为56.4%和64.8%,对DPPH自由基清除率分别为51.8%和53.5%;两株菌发酵上清液还原活性A700nm分别为2.523和2.540;两株菌发酵上清液T-SOD活性分别为32.802U/mL和33.825U/mL,GSH-Px活性分别为37.273U/mL和45.012U/mL。两株菌经鉴定分别为发酵乳杆菌和干酪乳杆菌。     

优选南极磷虾蛋白肽抗氧化活性组分

目的制备南极磷虾抗氧化肽,优选出抗氧化活性最好的南极磷虾肽成分。方法采用脱脂、酶解、超滤等手段制备南极磷虾抗氧化肽;以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、抗氧化能力指数3个抗氧化指标和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)活力2个酶活力指标为评价指标,优选出抗氧化活性最好的南极磷虾肽组分;基于G-25凝胶层析技术对抗氧化活性最好的南极磷虾肽组分进行分离纯化,进一步基于电子顺磁共振(electron paramagnetic resonance,EPR)方法测定洗脱后各峰的DPPH自由基清除率,得到抗氧化活性最好的南极磷虾抗氧化肽组分。结果通过抗氧化指标测定,截留分子量3～10 KDa的肽的DPPH自由基清除率最高,为(30.10±1.10)%,截留分子量3 KDa的南极磷虾肽的ABTS清除能力和抗氧化指数较好,则IC50值为(0.74±0.08) mg/mL、氧化自由基吸收能力(oxygen radical absorbance capacity, ORAC)值为6.39±0.21;通过酶活力指标测定,截留分子量3 KDa的肽的SOD活力和CAT活力最好,分别为(45.7±0.13)U/mg和(17.1±0.19)U/mg蛋白质。对截留分子量3KDa和3～10KDa的南极磷虾肽进行G-25分离纯化后,测定各组分的DPPH自由基清除率,可知截留分子量3～10KDa的F2-2峰清除率最好,为(51.55±1.54)%。结论基于EPR方法优选出分子量为3～10 KDa的南极磷虾肽的F2-2组分的DPPH自由基清除率最高。     

芹菜渣水溶性膳食纤维的抗氧化活性研究

研究以微波辅助法提取的芹菜渣水溶性膳食纤维(SDF)为原料,研究其对·OH、O_2~-·和DPPH自由基3种自由基的清除作用、铁还原能力和对芝麻油的抗氧化效果。试验结果表明,芹菜渣SDF对·OH和O_2~-·、DPPH·均有一定的清除能力;SDF对羟自由基的清除效果最明显,对超氧阴离子自由基O_2~-·的清除能力较弱;在其质量浓度为6 mg/mL时对·OH和O_2~-·、DPPH·的清除率分别达到95.6%,15.6%和35.9%;芹菜渣SDF还具有一定的还原能力和对芝麻油较好的抗氧化作用。     

鼠李糖乳杆菌不同组分抗氧化活性的研究

用DPPH·法测定4株鼠李糖乳杆菌B7、B8、B10、B44的抗氧化活性,分析了各菌株无细胞抽提液、全细胞和细胞裂解液等组分的DPPH清除能力及其超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)活性,并对灭酶前后各菌株组分的DPPH清除能力进行了比较。结果表明:4株鼠李糖乳杆菌都具有较高的抗氧化性;都含有以上3种酶;灭活后的菌株各组分也具有一定的抗氧化能力,其中无细胞抽提物对DPPH清除能力最强,其次是细胞裂解液,最次是全细胞,与灭酶前的趋势一致。说明4株鼠李糖乳杆菌的抗氧化活性不仅与一些抗氧化性酶有关,也和其他物质有关,为进一步研究乳酸菌的抗氧化机制提供了理论依据。     

裙带菜多肽的制备及其抗氧化活性的研究

实验以裙带菜为原料制备裙带菜蛋白,通过单因素和正交试验确定了碱性蛋白酶为裙带菜抗氧化肽制备的最佳酶,最优酶解条件为:料液比4%、酶解温度55℃、酶解时间3.5h、加酶量7500U/g、pH 10.0,该条件下制备的裙带菜多肽的还原能力最强,700nm处的吸光值为0.411。对制备的裙带菜多肽进行超滤分级,从O_2~-·清除率、·OH清除率、DPPH自由基清除率、Fe~(2+)螯合率4个方面,探究了不同分子量裙带菜多肽的抗氧化能力。结果表明:裙带菜多肽对Fe~(2+)的螯合能力和DPPH自由基的清除能力较强,对O_2~-·和·OH的清除能力相对较弱,且总体呈现低分子量肽段的抗氧化活性较强,高分子量肽段的抗氧化活性较弱的趋势。     

黄粉虫酶解物体内外抗氧化及免疫活性研究

目的:研究黄粉虫酶解物(TMH)体内外抗氧化活性和免疫活性。方法:研究TMH的还原能力及其对DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除能力;通过动物试验研究TMH的体内抗氧化能力和免疫能力。结果表明:TMH具有较强的抗氧化能力,对DPPH自由基、O_2~-·自由基的清除能力分别达到88.4%(10 mg/mL),61.0%(200 mg/L),还原能力为0.653(6 mg/L);动物试验表明,TMH可以显著提高小鼠血浆、肝脏中CAT、GSHPx、T-SOD(P0.05)活力,降低MDA(P0.05)含量并抑制羟自由基能力;显著增加血清中IgG、IgM、IL-4、IFN-γ(P0.05)的含量,提高小鼠脾脏和肝脏指数,表现出较强的抗氧化能力以及改善机体免疫功能的作用。     

高海拔地区传统牦牛酥油中抗氧化乳酸菌的筛选

以耐酸、耐过氧化氢为耐受性指标,DPPH自由基、OH自由基和超氧阴离子自由基的清除能力为抗氧化指标,对采集自西藏不同海拔的牦牛酥油中的乳酸菌进行筛选。结果表明:西藏牦牛酥油中分离得到的61株乳酸菌,有7株既耐低酸环境又对H_2O_2具有较好耐受性,其中C19(Lactobacillus plantarum)的DPPH自由基和超氧阴离子自由基清除力最优,分别为30.84%和26.91%,E1(Lactobacillus rhamnosus)的OH自由基清除力最优,为57.60%。菌株的DPPH自由基、OH自由基和超氧阴离子自由基清除率无对应关系,并且海拔与乳酸菌的抗氧化活性呈非正比关系。C19和E1两株乳酸菌具备开发成为天然抗氧化发酵剂的潜力。     

乳酸菌对自由基清除能力的研究

研究了52株乳酸菌的细胞和无细胞提取物清除DPPH自由基的能力,从中筛选出了3株对DPPH自由基清除率较高的乳酸菌,并对它们清除超氧阴离子自由基、羟自由基的能力及其还原能力做了进一步研究。结果表明,ZS-2的无细胞提取物对DPPH的清除率最高(46.53%),对羟自由基具有较高的清除率(48.72%),但对超氧阴离子自由基没有清除作用;而FS-3和BCX-9细胞对羟自由基的清除率均高于它们的无细胞提取物,同时也具有较强的清除超氧阴离子的能力。其中,FS-3无细胞提取物对超氧阴离子自由基的清除率最高,3株菌均有一定的还原能力。研究表明,乳酸菌的细胞和无细胞提取物在体外实验中对各种自由基具有不同的清除能力。     

欧李仁多肽抗氧化作用的研究

目的:研究欧李仁多肽的抗氧化作用。方法:以欧李仁多肽对DPPH.自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除能力以及对小鼠体内血清及肝脏中SOD、GSH-PX酶活力和MDA含量的影响来确定欧李仁蛋白多肽的抗氧化能力。结果:欧李仁多肽对DPPH.自由基有显著的清除能力,其IC50值为2.69mg/mL;欧李仁多肽还具有明显的清除羟自由基和超氧阴离子自由基的作用,其IC50值分别为6.52mg/mL和7.19mg/mL。欧李仁多肽还可显著提高小鼠血清和肝脏中SOD、GSH-PX酶的活力,显著降低小鼠体内MDA的含量。结论:欧李仁多肽具有较好的抗氧化作用。     

乳酸菌发酵对武夷岩茶抗氧化活性影响研究

为探明乳酸菌发酵对武夷岩茶主要功能成分的影响,重点考察了岩茶中没食子酸(GCG)在乳酸菌发酵前后的变化,以及对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O_2~-·)抗氧化活性的影响。试验结果表明:在37℃发酵48 h,乳酸菌活性最高,其活菌数为2.24×10~9 CFU/mL。当接种量为6.8×10~3 CFU/mL时,岩茶乳酸菌发酵液和岩茶萃取液中GCG含量最高,分别达到0.25、0.29 mg/g,表明乳酸菌发酵对岩茶中GCG含量有一定的影响。岩茶萃取液经乳酸菌发酵后,其清除DPPH·和O_2~-·能力比发酵前略有降低。     

乳酸菌在不同培养基中产抗氧化酶活性的研究

将10株乳酸菌分别接种到MRS肉汤、鲜牛乳、蔬菜汁培养基中进行发酵。发酵48h后用羟胺法检测超氧化物歧化酶,可见光法检测过氧化氢酶的活力。结果表明:在MRS肉汤培养基中,LA,LCP,BL,LC,LP,LCR,ST,LR,SF,LB产SOD酶和CAT酶活力分别为38.45,36.24,26.21,28.43,14.62,17.52,12.53,14.82,9.82,15.21U/mL和8.56,7.23,5.36,3.46,2.09,2.12,1.25,2.49,1.49,2.23U/mL;在鲜牛乳培养基中产SOD酶和CAT酶活力分别为50.34,47.51,43.26,39.45,19.98,14.92,21.03,13.62,17.24,17.03U/mL和9.89,8.56,6.57,4.03,2.96,2.98,2.25,3.02,2.83,3.12U/mL;在蔬菜汁培养基中产SOD酶和CAT酶活力分别为118.56,115.42,104.34,99.58,82.25,80.91,80.03,76.20,82.03,78.92U/mL和38.84,41.06,28.53,31.27,21.25,22.03,12.51,15.12,11.12,2.73U/mL。     

锁阳水提物抗氧化活性评价

为研究锁阳水提物抗氧化活性,采用1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH·)法和邻苯三酚自氧化法测定锁阳水提物清除DPPH·和超氧阴离子(O_2~-·)的能力,并测定细胞内丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P_x)活力水平。研究结果显示,锁阳水提物具有DPPH·清除能力,半数抑制浓度(IC_(50))为0.45 mg/mL;也具有O_2~-·抑制能力,IC_(50)为1.01 mg/mL。中剂量组及高剂量组的锁阳水提物均使细胞内MDA含量下降(P0.05),高剂量组的锁阳水提物可增强SOD活力(P0.05),低、中、高3个剂量组的锁阳水提物均可增强GSH-Px活力,但与对照组相比无统计学意义(P0.05)。因此,锁阳水提物可有效清除自由基并具有较好的抗氧化活性。     

顶孢霉发酵液提取物清除自由基能力的研究

为了研究筛选出的具有抗氧化活性的2株顶孢霉的发酵液提取物清除自由基的能力,本研究制备了2株顶孢霉的发酵液提取物,比较了其清除O2-·、·OH和DPPH·三种自由基的能力.结果表明:2株顶孢霉发酵液提取物的相对还原力(即总抗氧化活性)均显著高于维生素E;对O2-·自由基的清除率也均高于维生素E,其中,菌株YX015更为高效,在1.0mg/mL浓度时对O2-·自由基的清除率达到49.15%;2菌株清除·OH和DPPH·的能力均显著弱于维生素E,但都高于其自身清除O2-·的能力,在浓度达到1.0mg/mL时,菌株CA022对·OH的清除率为60.43%;菌株YX015对·OH的清除率为83.33%.     

麦苗中超氧化物歧化酶(SOD)抗氧化活性研究

本研究探讨麦苗中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)在动物体内和体外的抗氧化活性。体外抗氧化试验中将麦苗中经过提取、纯化、干燥制成的SOD成品经蒸馏水配制成溶液,分别采用DPPH·清除法、Fenton反应法和Fe~(3+)还原法测定其对DPPH和羟自由基的清除率及其还原能力。通过饲养昆明种小鼠,经口灌胃受试物SOD酶液以及生理盐水、番茄红素,考察丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(Catalase,CAT)活力和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。结果表明,体外试验中SOD酶液具有良好的抗氧化能力,SOD(1 mg/mL)酶液在1 mL水平下对DPPH、羟基自由基的清除率分别可达到96.95%、98%,还原能力随剂量的增加呈递增趋势;体内试验中SOD剂量组与对照组相比,小鼠肝组织中MDA差异显著(P0.05),且各个剂量组下MDA含量都有减少。与对照组比较,SOD高剂量组能提高小鼠肝组织中GSH-Px和CAT活力(P0.05)。麦苗中SOD在体外和体内均表现出良好的抗氧化作用。     

辣椒碱体外抗氧化作用研究

以辣椒碱标准品为原料,Vc为阳性对照,采取体外抗氧化试验模型研究其抗氧化活性。通过分析辣椒碱的还原力和清除DPPH自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)、亚硝基以及羟自由基(·OH)的能力,探讨辣椒碱的体外抗氧化性能。结果表明,辣椒碱的还原能力以及对DPPH·、亚硝基以及·OH的清除率随质量浓度的增加而升高,且清除效果与Vc基本相近,但对O_2~-·的清除率较低;辣椒碱对DPPH·、亚硝基以及·OH的IC_(50)分别为0.02,0.15,0.28mg/mL,说明辣椒碱清除DPPH·的效果较好。     

芸豆/大豆复合发酵液工艺优化及抗氧化研究

以紫花芸豆、大豆为试验原料,利用酵母菌、复配乳酸菌等多种益生菌协同发酵制备复合发酵液,采用响应面法优化工艺参数,并分析其体外抗氧化能力。结果表明：复合发酵液最佳发酵工艺条件为糖添加量6%、初始pH=4.0、接种量4%、发酵温度32 ℃,此条件下发酵液超氧化物歧化酶（SOD）活力为268.46 U/mL。抗氧化试验表明复合发酵液DPPH自由基清除率及羟自由基清除能力随着发酵时间延长呈持续增长趋势,至发酵结束其清除率分别为90.72%和606.26 U/mL。经此工艺条件制得的发酵液色泽通透,具有较强抗氧化活性。     

几株乳酸菌与降血糖相关的性能研究

选用从陕、甘、宁等地区传统乳酸菌发酵食品中筛选的18株乳酸菌,通过对其与降血糖相关的性能,即:对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制性、对自由基DPPH和O~(2-)的清除能力、对菌株还原能力等五个方面的研究,结果表明:18株乳酸菌的菌悬液对α-葡萄糖苷酶的抑制率总体高于发酵上清液和细胞破碎上清,其中乳双歧杆菌1号菌株的菌悬液对α-葡萄糖苷酶抑制率在所有菌株中最高为37.48%。其余四个方面均是发酵上清液作用较强,乳双歧杆菌1号发酵上清液对α-淀粉酶抑制抑制率、还原能力和对O~(2-)清除率在所有菌株中均最高,其中抑制率为33.85%,还原浓度为105.25μmol/L,清除率为34.18%。保加利亚乳杆菌1号发酵上清液对DPPH清除率在所有菌株中最高为82.92%。