DTPA-c-myc反义核酸的合成及其~(113)In~m标记

合成了DTPA-c-myc反义核酸,并对其进行了113Inm标记;考察了标记物113Inm-DTPA-c-myc反义核酸在生理盐水和牛血清中的稳定性和对平滑肌细胞增殖的影响。标记结果显示,在最佳标记条件下标记率为35%~40%,标记物纯化后放化纯度>90%1。13Inm-DTPA-c-myc反义核酸在生理盐水中48 h放化纯度>94.0%,在血清中48 h放化纯度仅为76.1%。细胞增殖结果显示:113Inm-DTPA-c-myc反义核酸浓度达到10μmol/L(92.5 GBq/L)时抑制率达到最大,113Inm-DTPA-c-myc反义核酸(放射性反义治疗组)和反义核酸(反义治疗组)1、13InmCl3溶液(放射性治疗组)、不加核酸或113InmCl3溶液(对照组)和c-myc正义核酸(正义治疗组)对平滑肌细胞增殖的抑制率分别为84.5%、69.3%、20.6%、15.2%、0,放射性反义治疗组与反义治疗组、放射性治疗组、对照组相比有显著性差异(P<0.05、P<0.01、P<0.01),反义治疗组和正义治疗组相比也有显著性差异(P<0.01)。这说明合成的113Inm-DTPA-c-myc反义核酸在体外可有效抑制猪血管平滑肌细胞增殖。     

113 In m-P-SCN-Bz-DTPA-c-myc反义核酸的合成及其抑制血管平滑肌细胞增殖

为研究113 Inm-p-SCN-Bz-DTPA-c-myc反义核酸对血管平滑肌细胞增殖的影响,合成了c-myc反义核酸,与双功能团连接剂p-SCN-Bz-DTPA偶联后又进行了113Inm标记,考察了标记物113Inm-p-SCN-Bz-DTPA-c-myc反义核酸在生理盐水和牛血清的体外稳定性、杂交能力和对平滑肌细胞增殖的影响.测得标记率为45%～55%,纯化后放化纯＞90%.标记物在生理盐水和牛血清的体外稳定性均较好,48 h后放化纯＞95%.杂交实验中放射性反义链和正义链杂交结合形成大分子,说明偶联和标记没有破坏放射性反义链杂交反应活性.细胞增殖实验显示,113 Inm-p-SCN-Bz-DTPA-c-myc反义核酸对平滑肌细胞增殖的抑制率具有剂量依赖性,浓度为10 μmol/L(2.5×37 GBq/L)时抑制率最大;113Inm-p-SCN-Bz-DTPA-c-myc反义核酸(放射性反义治疗组)和反义核酸(反义治疗组)、113InmCl3溶液(放射性治疗组)、不加核酸或113InmCl3溶液(对照组)和c-myc正义核酸(正义治疗组)对平滑肌细胞增殖的抑制率分别为94.92%,69.28%,20.55%,15.24%,0%,放射性反义治疗组和反义治疗组、放射性治疗组、对照组比较有显著性差异(p＜0.01),反义治疗组和正义治疗组比较具有显著性差异(p＜0.01).说明113 Inm-p-SCN-Bz-DTPA-c-myc反义核酸在体外可有效抑制猪血管平滑肌细胞增殖.     

99Tcm-MAG3-Lys-mPEG的制备及其在小鼠体内的分布

以mPEG-5000、Fmoe-Lysine和MAG3为原料，经过五步反应合成了载体MAG3-Lys-mPEG；对其进行^99Tc^m标记后，进一步研究了标记物的体外稳定性及其在小鼠体内的生物分布。结果表明，^99Tc^m-MAG3-Lys-mPEG的标记率〉98％；标记物在体外有很好的稳定性，在生理盐水中放置24h时，放化纯度〉91％；在血清中温浴16．5h时放化纯度仍〉92％；标记物在小鼠体内的血液清除较快，在肾脏中的摄取最高，标记物主要经肾脏通过尿液排出体外。mPEG有可能用作反义核酸的有效载体。     

^131I标记肿瘤血管靶向多肽的实验研究

设计合成含精氨酸-精氨酸-亮氨酸（RRL）序列的多肽，并用氯胺-T法对其进行^131I标记，标记率约60％，放化纯度〉99％。体外放置24h放化纯度仍≥90％。肿瘤对^131I标记多肽的摄取在注射后明显高于其他器官，注药后24h，肿瘤对^131I-多肽的摄取约为0．65％ID／g，肿瘤与肌肉的放射性摄取比（T／NT）达9．08。以上结果表明：通过氯胺-T法对该多肽进行^131I标记是可行的，标记物可在体外稳定存放24h；^131I-多肽可以靶向肿瘤血管，有进一步研究的价值。     

^131I-BIB的合成与生物分布

合成1-三正丁基锡-2，5-二（4＇-氨基）苯乙烯基苯（BIB），并采用双氧水标记法对其进行^131I标记，得到标记物^131I-BIB;将^131I-BIB注入ICR小鼠体内，观察其生物分布。标记结果显示，标记物^131I-BIB的标记率〉60％，放化纯度〉90%；ICR小鼠体内分布实验表明，注射后30min时，^131I-BIB在脑中的摄取最高。^131I-BIB作为髓磷脂显像剂有进一步研究的价值。     

3-三甲基硅苄胍的合成及其125I标记

以3-溴甲苯为起始物，通过5步反应合成可用于放射性碘（砹）标记的3-三甲基硅苄胍，并用核磁共振（NMR）、质谱（MS）、高效液相（HPLC）等对产物进行了表征。以此化合物为前体，对其进行了¹²⁵I标记。¹²⁵I MIBG的标记率达66.7%，放化纯度＞98%。标记物在室温下放置3d后，放化纯度无明显变化，表明¹²⁵I MIBG具有较高的体外稳定性。     

脑胶质瘤U87-EGFRvIII细胞反义寡核苷酸的~(188)Re标记实验研究

研究放射性核素铼(188Re)标记脑胶质瘤U87-EGFRvIII(Epidermal Growth Factor Receptor Variant III)细胞反义寡核苷酸序列的制备方法,探讨其作为脑胶质瘤反义显像剂的可能性。采用细胞指数富集的配基系统进化技术(Cell-based Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,Cell-SELEX)筛选脑胶质瘤U87-EGFRvIII细胞,得到一段高亲和力的反义寡核苷酸序列U2,然后采用直接标记法进行188Re的放射性标记,按照正交实验设计进行188Re最佳标记条件的摸索,纸层析法测定标记率,通过体外稳定性实验评价188Re-U2的放化特性,测定标记物静脉注射后在大耳兔不同时相血液放射性清除曲线,应用SPECT显像观察标记物在兔体内的放射性动态分布变化。结果表明:在最佳标记条件下188Re-U2的标记率为70%±14%;经Sep-PaK C18反相柱分离纯化后,188Re-U2在生理盐水和血清中37 oC下放置24 h的放化纯度分别为70.6%和95.55%;188Re-U2在兔体内的血放射性清除迅速,主要通过肾脏排泄,其余脏器内放射性均较低。188Re直接法标记U87-EGFRvIII细胞反义寡核苷酸U2的方法简单,具有良好的标记率和体内外稳定性,并且体内分布动力学特性也比较理想。     

^99Tc^m-DTPA-双（3，5-二甲氧基-4＇-氨基二苯乙烯）的制备及其在小鼠体内的生物分布

通过3，5-二甲氧基-4’-氨基二苯乙烯与DTPA双酸酐（DTPAA）反应制备了DTPA-双（3，5-二甲氧基-41-氨基二苯乙烯），所得产品经IR、MS、^1HNMR和元素分析进行结构确认；对其进行了^99Tc^m-标记并观察了标记物在小鼠体内的分布。结果显示，标记物标记率和放化纯度均〉90％，在连续观察的6h内，其放化纯度均〉90％，表明其稳定性良好。标记物在小鼠体内的生物分布结果显示，标记物在肝中摄取较高，注射后10min时达到峰值13．12％／g，且滞留时间较长，注射后180min时仍有12．07％／g；在肺和血液中清除较快，注射后5min时分别为10．41％／g和13．50％／g，注射后180min时则分别降至2．42和2．71％／g。这为进一步研究既能抑制癌细胞，又能对其疗效进行检测的新型放射性治疗药物提供了思路。     

β-CIT的131I标记及其初步临床应用

用过氧乙酸法进行了β-CIT的131I标记,并用标记物对4例正常对照、8例帕金森氏病(PD)患者、3例帕金森氏综合征(PS)患者进行显像,计算纹状体与小脑的放射性摄取比(特异性摄取)及纹状体131I-β-CIT摄取的非对称指数AI.结果显示131I-β-CIT放化纯度达(97.6±0.3)%,室温下放置4 h以及分别与水、人新鲜血清孵育4 h后,其放化纯度仍均＞95%;纹状体能特异摄取131I-β-CIT,与正常对照组及PS组相比,PD患者双侧纹状体摄取的放射性明显降低(P＜0.01),且症状对侧降低更明显;PS患者与正常对照组相比,其纹状体摄取无明显差异(P＞0.05).直线回归分析显示,PD患者症状的严重程度与纹状体特异摄取131I-β-CIT下降密切相关.提示131I-β-CIT多巴胺转运蛋白显像可作为PD诊断、鉴别诊断和病情严重程度的客观指标.     

碘标记表皮生长因子的代谢特性

用^125I、^131I标记表皮生长因子（EGF），并采用Sephadex G25柱对标记物进行纯化，标记率达75.4%，放化纯度达95.2%，用昆明种小鼠作^125I-EGF体内分布实验及药代动力学试验；用新西兰大白兔做^131I-EGF体外显像研究。结果显示，小鼠体内注入^125I-EGF后1h，肾肝组织中的药物浓度很快下降；肺组织摄取一定量的^125I-EGF且保留时间长达3h；脾脏的放射性在15min达到高峰后开始缓慢下降；脑组织放射性明显低于血本底。^125I-EGF的体内分布、代谢消除过程等工代动力学符合二室模型，分布半衰期T1／2α为0.3min，消除半衰期T1／2β为80.8min。新西兰大白兔体外^131I-EGF显像清晰，碘标记EGF的体内、外稳定性较好。