发育及DNA损伤反应调节基因1mRNA在癫痫患者脑组织中的表达及临床意义

目的观察REDD1mRNA在癫痫患者脑组织中的表达及临床意义。方法将50例癫痫患者分成难治性(42例)和非难治性癫痫(8例)两组,用基因芯片和免疫荧光定量PCR分别检测脑组织中REDD1mRNA基因表达,并与对照组进行比较。结果基因芯片扫描提示REDD1mRNA在癫痫患者脑组织中与对照组比较表达明显增加,难治性癫痫组和非难治性癫痫组没有明显的表达差异,免疫荧光定量PCR的结果与基因芯片结果一致。结论 REDD1mRNA在癫痫患者脑部中存在高表达,这种高表达可能通过雷帕霉素哺乳动物靶标系统导致神经元坏死与凋亡。     

小脑变性相关蛋白2在难治性癫患者脑脊液及血液中的表达

目的了解小脑变性相关蛋白2(CDR2)在难治性癫患者脑脊液及外周血中的表达情况。方法收集36例难治性癫患者的脑脊液和外周血,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测其CDR2表达水平,并与39例对照者比较。结果难治性癫组脑脊液中CDR2的含量明显高于其外周血和对照组,差异有统计学意义(P0.05),而难治性癫组外周血中CDR2含量与对照组无显著性差异(P0.05)。结论 CDR2在难治性癫患者脑脊液中表达显著,因而检测CDR2在脑脊液中水平可能成为早期诊断难治性癫的一个重要指标。     

MCP-1在难治性癫(癎)患者脑组织中的表达

目的 了解难治性癫(癎)患者脑组织中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的表达,探索其在难治性癫(癎)发病机制中的作用.方法在基因芯片扫描获阳性结果基础上,用免疫组织化学方法 研究40例难治性癫(癎)患者脑组织中MCP-1的表达,并与对照组进行比较.结果 基因芯片扫描显示MCP-1 mRNA表达上调,免疫组化结果进一步证实MCP-1在难治性癫(癎)患者脑组织中的表达较对照组明显增多(P＜0.05).结论 MCP-1在难治性癫(癎)的发病机制中可能起着重要作用,阻断MCP-1有可能改变难治性癫(癎)的预后.     

MCP-1在难治性癫痫患者脑组织中的表达

目的了解难治性癫癎患者脑组织中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)的表达,探索其在难治性癫癎发病机制中的作用。方法在基因芯片扫描获阳性结果基础上,用免疫组织化学方法研究40例难治性癫癎患者脑组织中MCP-1的表达,并与对照组进行比较。结果基因芯片扫描显示MCP-1 mRNA表达上调,免疫组化结果进一步证实MCP-1在难治性癫癎患者脑组织中的表达较对照组明显增多(P<0．05)。结论MCP-1在难治性癫癎的发病机制中可能起着重要作用,阻断MCP-1有可能改变难治性癫癎的预后。     

癫痫患者脑组织PSD-93 mRNA表达上调

目的研究癫痫患者脑组织中突触后密度-93(PSD-93)mRNA的表达,探讨其在癫痫形成中的作用。方法将56例癫痫患者分成耐药和非耐药两组,首先用基因芯片对其术后标本进行扫描,并与对照组比较,随后对目标基因PSD-93用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术进行验证。结果基因芯片检测发现与依赖N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDARs)-一氧化氮(NO)信号有关的基因PSD-93在癫痫患者中表达上调,RT-PCR实验结果与基因芯片一致。RT-PCR电泳图的灰度值均数在对照组为23.577、非难治性癫痫组为56.931、难治性癫痫组为51.607,非难治性、难治性癫痫组与正常对照组灰度的比值中位数分别为2.415、2.189(P<0.05),而非难治性与难治性癫痫组灰度值比值为1.103(P>0.05)。结论脑细胞膜相关鸟苷酸激酶家族(MAGUK)蛋白信号转导复合体的分子接头蛋白基因PSD-93mRNA表达增加,其可能通过信号传导异常及神经元坏死参与了癫痫的形成。     

癫痫患者脑脊液和血清中miRNA-184的表达

目的观察癫痫患者脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)和血清中miRNA-184表达变化,以探讨其在观察癫痫患者发病过程中的作用。方法应用荧光定量PCR技术检测脑脊液和外周血中miRNA-184的表达,并对其表达差异进行分析。结果脑脊液中癫痫组miRNA-184的表达明显高于对照组(P=0.011<0.05);外周血血清中癫痫组的miRNA-184的表达明显低于对照组(P=0.029<0.05)。miRNA-184的表达在脑脊液和外周血中的变化成相反的趋势。结论研究发现癫痫发作后脑脊液与外周血血清中miRNA-184的表达存在差异。在癫痫组脑脊液中的表达明显升高,这与之前的研究miRNA-184在癫痫患者脑组织中表达升高相一致。这提示:观察脑脊液和血清中miRNA-184的变化有助于观察癫痫患者脑组织中miRNA-184的变化,为研究癫痫患者脑组织的病理变化提供新的窗口。     

基因学快速检测脑脊液常见细菌感染的方法

目的 探讨基因芯片技术对于颅内感染致病菌快速检测的应用价值.方法 选择4种常见致病菌以及6种常见耐药基因的特异DNA序列设计相应的引物与探针,对30例颅内感染患者的脑脊液标本(脑脊液培养阳性12例,阴性18例)进行多重PCR扩增、基因芯片检测,进行菌种鉴定和耐药基因检测,与脑脊液细菌培养及药敏检测结果进行比较.结果 15例标本鉴定出菌种并检出耐药基因；8例未鉴定出菌种但检出细菌及耐药基因；7例未检出细菌及耐药基因.结论 基因芯片可以相对灵敏、快速地用于颅内感染患者脑脊液中致病菌检测.     

基因芯片检测难治性癫脑组织中sh3gl2的表达

目的：运用基因芯片和RT-PCR技术检测难治性癫脑组织中sh3gl2 mRNA表达,从分子水平探讨难治性癫可能的发病机制。方法：在应用基因芯片对难治性癫患者手术切除的颞叶组织与对照组行基因表达谱分析研究的基础上,筛选出目的基因后用RT-PCR对芯片扫描结果进行验证。结果：候选基因sh3gl2在难治性癫患者脑部颞叶组织中出现高表达,与对照组相比差异有显著统计学意义（P〈0.01）;RT-PCR结果与芯片结果一致。结论：sh3gl2在难治性癫颞叶皮质中的表达增加,提示了其可能是难治性癫发生发展中的一个重要因素。     

协同刺激分子在格林-巴利综合征患者 脑脊液、血及周围神经中的表达

目的　探讨协同刺激分子在格林 巴利综合征 (GBS)患者脑脊液、血和周围神经组织中的表达及其作用。方法　用RT PCR法及原位杂交法观察GBS患者外周血、脑脊液和周围神经组织中协同刺激分子B7 1、B7 2、CD2 8、CTLA 4的表达。结果　GBS患者外周血、CSF和周围神经组织中协同刺激分子CD2 8、B7 1、B7 2在炎性细胞上的表达明显高于对照组 ;GBS患者CSF中CD2 8、B7 1、B7 2mRNA的表达明显高于外周血。结论　在GBS发病过程中协同刺激分子的表达对T细胞的活化 ,进而导致体液免疫和细胞免疫反应起重要作用。     

脑出血患者血浆和脑脊液阿片肽含量的变化及纳络酮的干预作用

目的探讨脑出血患者血浆和脑脊液(CSF)阿片肽———β内啡肽(βEP)、强啡肽A113(DynA113)的含量变化及纳络酮的干预作用。方法将60例脑出血患者随机分为纳络酮组和对照组;两组在脑出血常规治疗的基础上,纳络酮组加用纳络酮3.0mg静脉滴注,每日1次,连用14d。采用放射免疫分析法(RIA)检测两组患者治疗前和治疗7d、14d血浆和CSF中βEP、DynA113的含量,分析脑出血部位及出血量与上述指标变化的关系并与正常组(正常血浆组及正常CSF组)比较;对两组脑出血患者治疗前后格拉斯哥昏迷评分(GCS)和神经功能缺损程度评分(NDS)进行比较。结果(1)脑出血患者血浆和CSF中βEP、DynA113含量与两正常组比较明显增高(均P<0.01);不同出血部位患者的血浆和CSF中βEP、DynA113含量的差异无显著性;脑出血量与血浆和CSF中βEP、DynA113含量呈显著正相关(r=0.663、0.480、0.645、0.380,均P<0.01);(2)治疗后纳络酮组血浆和CSF中βEP、DynA113含量明显低于对照组(P<0.05～0.01);GCS、NDS较对照组明显改善(均P<0.05)。结论脑出血后血浆和CSF中阿片肽含量异常升高;纳络酮治疗能明显降低血浆及CSF中阿片肽含量,显著改善脑出血患者的神经功能缺损。     

难治性癫痫患者血清和脑脊液中MCP-1表达的研究

目的研究单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemottractant protein-1 MCP-1)在难治性癫痫患者血清和脑脊液中的表达。方法采用RT-PCR和ELISA技术测定难治性癫痫患者、非难治性癫痫患者、正常对照组血清及/或脑脊液中MCP-1 mRNA及蛋白的含量。结果难治性癫痫患者血清及脑脊液中的MCP-1 mRNA及蛋白的含量较非难治性癫痫明显升高(P<0.01),血清中含量较正常对照组明显增高(P<0.01);非难治性癫痫患者血清中MCP-1 mRNA及蛋白的含量与正常对照组比较差别无统计学意义(P>0.05)。结论MCP-1在难治性癫痫患者血清及脑脊液中均升高,MCP-1可能参与了难治性癫痫的发病过程。     

难治性癫痫患者脑组织中Eml 5mRNA表达及其意义

目的 运用基因芯片和荧光定量PCR技术检测难治性癫痫患者脑组织中Eml5（EMAP like protein5，Eml5）mRNA表达，探讨其表达异常在难治性癫痫患者中的意义。方法 收集36例难治性癫痫患者和8例非难治性癫痫患者术后脑组织，用含有14109条人类基因的芯片对其扫描，筛选出目的基因后，用荧光定量PCR对芯片扫描结果进行验证，并与8例正常脑组织进行比较。结果 发现候选基因End5mRNA在难治性癫痫患者脑部海马和颞叶中出现高表达，荧光定量PCR结果与芯片结果一致。结论 End5mRNA表达上调可能是难治性癫痫发生发展中的一个重要因素，其可能通过加强神经微管组装，促进神经元轴突延伸，触发海马齿状回颗粒细胞苔藓纤维异常发芽，参与了病理性神经网络重组和兴奋性突触重构。     

Increased expression of calponin-3 in epileptic patients and experimental rats

Calponin-3 is an actin-interacting protein and is expressed in the brain. Our previous microarray scan has found an up-regulation of calponin-3 gene CNN3 in the temporal lobe of patients with drug-resistant epilepsy. Here we investigated in epileptic patients the changes of brain and cerebrospinal fluid (CSF) calponin-3 expressions, and assessed calponin-3 expression pattern in a rat model of pilocarpine-induced epilepsy. We showed that in the temporal neocortices of 30 patients with drug-resistant epilepsy, both mRNA and protein level of calponin-3 were significantly increased. In addition, the augmentation of CSF calponin-3 from 126 epileptic patients was closely correlated with disease duration. Moreover, in the cortices of temporal lobes of pilocarpine-treated rats, calponin-3 increased along with the time and maintained at significant high levels for up to 2 months, while the up-regulation of hippocampal calponin-3 only occurred at 24h and 1 week. The elevated calponin-3 suggests that deregulation of actin filament dynamics in axonal and dendritic outgrowth and synaptic rearrangement may contribute to pathophysiology of epilepsy.     

铁调节转运体1 mRNA与耐药性癫痫

目的观察耐药性癫痫患者脑组织中铁调节转运体1（IREG1）mRNA的表达,探讨其在耐药性癫痫发病中的作用。方法收集耐药性癫痫患者术后脑组织,首先用基因芯片进行差异基因表达的筛选,然后用RT-PCR从基因水平进行验证,并与对照组比较。结果含有4097条人类全长基因的芯片扫描显示有142个基因表达有差异,37个基因表达下调,105个基因表达上调。目的IREG1 mRNA在耐药性癫痫患者颞叶中表达明显增加（P〈0.05）,Cy3和Cy5信号比值为2.75。RT-PCR在实验组和对照组的灰度值分别为2.6138,1.7708,变化趋势与芯片扫描结果相同。结论IREG1 mRNA可能参加了耐药性癫痫的形成,并在耐药性癫痫的发病机制中起着一定作用。     

钙黏蛋白-18mRNA在难治性癫痫患者脑组织中的表达

目的:研究难治性癫患者脑组织内钙黏蛋白-18(cadherin-18)mRNA的表达,拟从另一角度加深对人类难治性癫的认识。方法:在基因芯片扫描的基础上,运用RT-PCR检测钙黏蛋白-18mRNA在难治性癫患者脑部的变化。结果:基因芯片扫描显示钙黏蛋白-18mRNA在难治性癫患者脑部比正常人表达上调5.320倍,RT-PCR检测同样显示钙黏蛋白-18mRNA在难治性癫患者脑部表达增强,其电泳条带灰度值为25.547,而正常组仅为11.176。结论:结果表明特异性表达于中枢神经系统的钙黏蛋白-18mRNA在难治性癫患者脑部表达增强,提示钙黏蛋白-18可能参与了人类难治性癫的形成。     

癫痫患者及慢性癫痫大鼠脑组织生长抑素的测定及意义

为揭示生长抑素（ＳＯＭ）与癫痫发生的关系。采用放射免疫法检测了癫痫患者脑脊液及戊四氮诱发的慢性癫痫大鼠脑组织ＳＯＭ放射免疫活性。结果显示：癫痫患者脑脊液中ＳＯＭ含量显著高于对照组；慢性癫痫大鼠顶叶皮层、海马内ＳＯＭ含量亦显著高于对照组。提示：ＳＯＭ与癫痫发作有关。     

In Vivo MicroRNA Detection and Quantitation in Cerebrospinal Fluid

Alterations in microRNA (miRNA) expression in postmortem brain tissue or peripheral blood have been linked to schizophrenia. Cerebrospinal fluid might provide an in vivo biomarker more directly reflecting functional changes in the brain. The goals of this study were to determine the feasibility of detecting miRNAs in cerebrospinal fluid and to compare miRNA levels in cerebrospinal fluid versus blood. Four healthy volunteers and four patients with psychotic disorders underwent a lumbar puncture and a blood draw. Expression of 378 validated miRNAs was assessed from each biofluid type for each subject using microarray technology. Five miRNAs were chosen for validation with quantitative polymerase chain reaction. A substantial number of miRNAs (n?=?95) were exclusively or predominately detected in cerebrospinal fluid (CSF). Levels of 35 miRNAs detected in both CSF and blood samples in all subjects were poorly correlated. The investigation of miRNAs in CSF can help advance the understanding of psychiatric diseases and particularly schizophrenia.