蛋白质凝胶电泳银染色法的改进

目的探索一种快速、灵敏的蛋白质凝胶电泳银染色方法.方法对蛋白质凝胶电泳银染色过程中的多种因素进行了实验探索,在此基础上探索出一种改良的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳银染色法.结果改进方法灵敏度为Coomassie Brilliant Blue R-250法的100倍以上,对牛血清白蛋白的检测限在0.5ng以下,整个染色过程不超过60min,染色重复性好.结论改进后的方法比以前使用的方法简便、快速、灵敏、成本相对低廉.     

蛋白质凝胶电泳银染色法的改进

本文对蛋白质凝电泳氨银色过程中的多种因素进行了实验探索,在此基础上介绍了一种改良的聚丙烯酰胺凝电泳氨银染色法。该法灵敏度为ＣｏｏｍａｓｓｉｅＢｒｉｌｌｉａｎｔＢｌｕｅＲ－２５０的１００倍以上,对牛血清白蛋白的检测限在０．５ｎｇ以下;该法快速简便,整个染色过程不超过６０ｍｉｎ,所需试剂用量小,成本相对低廉,染色重复性好。     

快速、低背景凝胶染色和脱色方法

科研及临床工作中 ,经常需要用电泳法纯化或分离蛋白质 ,电泳后其胶染色方法有多种 ,常见的如考马斯亮蓝 (G2 50、R2 50 )、氨基黑及印度墨水染色法等。这些方法 ,各具特点 ,但均存在一些缺点 :如需大量价格较贵且有毒性的甲醇及乙酸等溶液进行染色 ,染色后为降低背景 ,脱色十分困难 ,耗时长 ,过浓的染料溶液用后弃之 ,容易污染环境。我们参考国外文献及有关实验室经验 ,改进总结出一种应用考马斯亮蓝 G2 50快速、低背景的二烷基硫酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)胶等蛋白染色、脱色方法。一、试剂及仪器1 .试剂 :1 mol/L HCL ,…     

聚丙烯酰胺凝胶的快速考马斯蓝染色和脱色方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质是一项常用的分析技术,它常以考马斯蓝、甲醇和乙酸作为染色和脱色剂,传统的染色和脱色时间分别为3～6h和1 0～48h。本文介绍一种快速的高温染色和漂洗脱色的方法,该法简便、快速、经济、有效。染色和脱色时间均可缩短至0 .5～1 .0 h。具体方法:蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,将凝胶放于含有1 0 0～2 5 0 ml染色液( 1 .2 5 mg/ L考马斯蓝)甲醇∶乙酸∶水( 5 0∶1 0∶40 )溶液的塑料盒中染色,盖紧盒盖后,置5 5℃水浴3 0 min,不时用手摇动。染色完毕后,将凝胶用蒸馏水短暂冲洗,然后放于2 0 0～3 0 0 ml2 .5 …     

核仁组成区嗜银染色的脱色技术

核仁组成区（ＮＯＲ）嗜银染色对肿瘤诊断和预后判断有非常重要的参考价值。这种染色方法国内外文献报道较多［１］，但存在着嗜银染色后背景着色深及银沉淀问题。我们在采用Ｐａｗａｎ［２］等的快速ＮＯＲ嗜银染色法过程中，发现用Ｈ２Ｏ２冲洗嗜银染色的涂片能解决银沉...     

改良SD—PAGE法分析尿蛋白组成

目的：建立一种快速的尿蛋白组分分析方法。方法：将薄层垂直平板SDS－PAGE与高敏的银染色和微波技术相结合，建立改良SDS－PAGE法，快速分析蛋白尿组成，结果：此法缩短分析所需的时间，使整个分析过程在7h内就可以完成，并且提高蛋白条带的分辨带，使检测灵敏度达ng级水平。结论：改良SDS－PAGE法分析尿蛋白组成简便，快速，灵敏度高。     

尿蛋白超薄琼脂糖凝胶电泳

尿蛋白超薄琼脂糖凝胶电泳陈晋，吴惠毅，沈来龙，李芹（连云港市第一人民医院中心实验室，江苏连云港２２２００２）我们对尿蛋白琼脂糖凝胶电泳进行了改良，用自制超薄琼脂糖凝胶为载体、改进了加样及染色步骤，使该法更加灵敏、快速、简易，现报道如下。１试剂１．１琼...     

非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳及银染法临床应用探讨

目的：建立一种省时简便和灵敏可靠的检测筛查基因点突变的方法，即PCR-SSCP(PCR-Sjngle stand conformation polymotphism)银染分析技术。方法：应用改进的PCR-SSCP银染分析技术，检测妊娠期胆内胆汁淤积症患者外周血基因组DNA中MDR3基因外显子14的点突变情况。结果：非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳在有冷水循环装置控制下，结果稳定可靠，受环境温度影响小；但银染时，需根据室温调整染色时间及显影液的配制，当室温高于25℃时，碳酸钠需预冷，有利于控制背景色，得到更为满意的结果。结论：利用非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳及银染法筛查目的基因的点突情况，具有省时简便和灵敏可靠的特点，且重复性好，避免了盲目测序及资金浪费。     

Gomori氨银-微波法染色显示真菌在临床的应用

目的应用Gomori氨银-微波法染色显示真菌,缩短染色时间,提高染色质量。方法对已确诊的80例真菌感染者进行切片,分别采用改良的Gomori氨银-微波法染色显示真菌。结果应用Gomori氨银-微波法染色,80例标本均阳性,背景清晰,且原来的染色常规时间由90～140min缩短为6min。结论应用改良Gomori氨银-微波法染色显示真菌不仅可以大大加快染色速度,而且试剂使用方便,染色质量更加稳定可靠,是氨银液染真菌的一种改良的快速染色方法。     

三种染色法查滴虫、霉菌及淋菌的方法学评价

[目的]评价三种染色法查滴色、霉菌及淋菌的效果[方法]瑞氏染色、革兰氏染色、快速染色[结果]三种染色法检出率均优于盐水涂片法，瑞色染色查霉菌易辨认，滴虫及淋菌着色较差。革兰氏染色及快速染色可弥补瑞氏染色的不足。[结论]革兰氏染色及快速染色均为较好的筛选检验方法，快速简便实用，形态结构清晰，阳性率满意，尤以快速染色较佳。     

核酸染色方法的改进

目的 采用GV核酸染料取代溴化乙锭(EB)进行核酸染色,观察DNA染色结果,证实采用改进的核酸染色方法可替代EB进行常规核酸染色.方法 提取小鼠肝组织DNA,采用GV与EB分别进行染色和电泳,在紫外凝胶成像仪下观察和记录结果.结果 在紫外凝胶成像仪下,可观察到经两种方法染色的DNA条带清晰,亮度相当.结论 GV是一种安全灵敏的核酸染料,可替代EB进行常规核酸染色.     

聚丙烯酰胺凝胶的快速考马斯蓝染色和脱色方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质是一项常用的分析技术，它常以考马斯蓝、甲醇和乙酸作为染色和脱色剂，传统的染色和脱色时间分别为3～6h和10～48h。本文介绍了一种快速的高温染色和漂洗脱色的方法，该法简便、快速、经济、有效。染色和脱色时间均可缩短至0．5～1．0h。具体方法：蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，将凝胶放于含有100～250ml染色液（1．25mg／L，考马斯蓝）甲醇：乙酸：水（50：10：40）溶液的塑料盒中染色，盖紧盒盖后，亚55℃水浴30分钟，不时用手摇动。染色完毕后将凝胶用蒸馏水短暂冲洗．然后放于200～300ml2．5％（V…     

改良SDS-PAGE法分析尿蛋白组成

目的　建立一种快速的尿蛋白组分分析方法。方法　将薄层垂直平板SDS PAGE与高敏的银染色和微波技术相结合 ,建立改良SDS PAGE法 ,快速分析蛋白尿组成。结果　此法缩短分析所需的时间 ,使整个分析过程在 7h内就可以完成 ,并且提高蛋白条带的分辨率 ,使检测灵敏度达ng级水平。结论　改良SDS PAGE法分析尿蛋白组成简便 ,快速 ,灵敏度高     

简易过氧化物酶染色法的建立及实验研究

目的 建立一种简便的血细胞过氧化物酶染色方法。方法 改进Washburn法，使用含联苯胺的瑞氏染液和pH6．4～6．8磷酸盐缓冲液。结果 对30例急性白血病进行POX染色，并与改进前比较，结果完全一致，结论 该法具有试剂简单，配制方便，操作容易，快速稳定，结果理想等特点。     

微波技术在肾小球基底膜六胺银染色中的应用

<正>肾穿刺活检病理诊断是目前认为确诊肾脏疾病的唯一方法,特殊染色能直观地观察到肾小球、肾小管、肾间质及血管的病理变化。六胺银染色是观察肾小球基底膜的重要方法之一,我们通过微波技术对肾小球基底膜进行六胺银染色改进,获得了比传统染色方法更好的效果,现报告如下。     

介绍一种滤纸片快速细胞学染色法

为了缩短染色时间，减少染色步骤，加快细胞学病理诊断的过程，我科尝试用伊红和美蓝做成的滤纸片进行快速染色。根据病理常规石蜡切片HE染色和检验血片快速染色的原理进行改进和设计，经过200多例滤纸片细胞学染色的反复摸索，取得了满意的效果。本方法所得到的诊断与普通HE染色结果相符合，同时制片质量好，适用于普查肿瘤和临床急需诊断的细胞学检查，现报告如下。     

不同染色方法对肺孢子菌的诊断作用比较

目的比较革兰染色、苏木素-伊红染色（hematoxylin and eosin stain,HE）、吉姆萨染色（Giemsa stain）和六胺银染色（Gomoris Methenamine silver nitrate stain,GMS）在诊断肺孢子菌肺炎中的作用。方法收集1例典型肺孢子菌感染患者的痰液,经消化处理,离心,涂片,分别进行革兰染色、HE染色、吉姆萨和六胺银染色,油镜观察。结果革兰染色未见可疑结构;HE染色肺孢子菌包囊壁不着色,呈透明的晕圈状,囊内小体4～8个呈蓝紫色;吉姆萨染色包囊壁不着色,可见清楚的轮廓,囊内小体核蓝色,囊内容物紫红色;六胺银染色肺孢子菌包囊壁棕到黑色,结构清楚,囊内可见圆形的核状物和特征性的括弧状结构。结论常规使用的革兰染色无法诊断肺孢子菌,其他3种方法均可选择,合理的方案是用吉姆萨染色筛选,用六胺银染色确证。     

考马斯亮兰-银染色法检测PAGE分离的蛋白质

微量蛋白的检测及其性质的鉴定是生物学研究中棘手的问题,PAG 平板梯度电泳对复杂的蛋白质分离效果较好.但通常由于缺乏灵敏的染色方法,脱色时间长,而难以得到理想的完整谱带的图谱.为此,探索建立新的染色法是很有必要的.我们根据近来报道的尿素银,普通银,考马斯亮兰以及考马斯亮兰     

银染色与免疫组织化学显示胃内分泌细胞的比较

银染色与免疫组织化学显示胃内分泌细胞的比较郑集义，姚林，邓永江，吴霞，虞积耀（海军总医院病理科北京１０００３７北京军区总医院病理科）胃粘膜有许多弥漫散在的内分泌细胞，这类细胞的变化与胃的疾病有关。我们应用银染色及免疫组化方法对胃内分泌细胞进行比较观察...     

3种幽门螺杆菌染色方法的比较

胃幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)与消化道多种疾病的发生有关,临床为明确诊断常需要做HP检测.目前常用的方法有W-S银染色和Giemsa染色,但实际应用中,我们发现亚甲蓝染色比这两种染色操作简便、染色时间短,结果稳定可靠,更具实用性.