双轴旋转刺激后模拟失重大鼠前扣带回皮质内Fos表达(英文)

目的:研究动物接受不同实验方式重力刺激后,前扣带回皮质(ACC)这一可能与空间飞行后心血管功能紊乱有关的前庭功能区中神经元活动变化。方法:该研究采用卵白素-生物素复合物(ABC)、3,3’-二氨基联苯胺四盐酸盐水合物(DAB)为呈色剂的免疫组织化学方法。大鼠随机分为三组:正常对照组(Con);后肢去负荷(HU)组(动物吊尾7d)和后肢去负荷-旋转组(HU-R)(动物后肢去负荷7d后进行2h双轴旋转刺激)。结果:(1)HU组动物ACC内Fos阳性神经元的数目(199.8±44.8)比Con组(365.0±135.6)显著降低(P0.05);(2)双轴旋转刺激显著可增加7d吊尾大鼠ACC内Fos免疫阳性神经元数量(491.6±229.3,P0.05)。这些结果提示模拟失重和双轴旋转都可影响ACC神经元活动。结论:ACC受模拟失重的影响,7d吊尾刺激使ACC内Fos表达水平下降可能是一种适应的表现。     

后肢去负荷大鼠前扣带回皮质神经元Fos表达的时间模式（英文）

目的:研究模拟失重模型动物前扣带回皮质(anterior cingulated cortex, ACC)神经元激活状况及其变化的时间模式。方法:将SD大鼠随机分成4组。所有动物采用吊尾、头低位方式使后肢去负荷(hind-limb unloading, HU)方式模拟失重生理。第一、二组分别经HU处理1 d和4 d。第三、四组动物分别经过HU 1 d和4 d,并进行双轴旋转运动刺激2 h。然后，动物灌流固定、取脑、切片(厚度25μm),采用常规免疫组织化学染色技术卵白素-生物素复合物(ABC)法对ACC内神经元Fos蛋白进行免疫反应，3, 3′-二氨基联苯胺四盐酸盐水合物(DAB)为呈色剂。统计分析Fos阳性神经元数量变化。结果:(1)1-d HU组、4-d HU和1-d HU-旋转组和4-d HU-旋转组动物ACC内Fos阳性神经元数目分别是344.98±90.620、389.111±133.774、486.47±182.152和464.444±286.881。(2)HU处理1 d到4 d ACC神经激活数目有增加趋势，旋转刺激后ACC内神经元也有被激活趋势，但统计分析显示各组间无统计...     

双轴旋转运动刺激大鼠前庭感受器诱导前庭神经核复合体神经元表达Fos蛋白（英文）

目的:明确双轴旋转运动作用于前庭感受器引起前庭神经核复合体(VNC)神经元活动。方法:将16只雄性SD大鼠随机分成数目相等的四组:正常对照组、正常动物旋转刺激组、前庭感受器损毁组和前庭感受器损毁后旋转刺激组。向动物双侧鼓室内各注射10 mg 4-胺苯胂酸钠盐(sodium arsanilate)损毁前庭感受器。所有动物装入有机玻璃圆筒内于黑暗条件下进行实验。正常动物旋转刺激组和前庭感受器损毁后旋转刺激组动物接受双轴旋转运动刺激2 h;其余动物置于运动刺激仪旁作为对照组。此后,处死动物并取材,以Western Blot监测VNC部位Fos蛋白表达水平的变化。结果:与正常对照组相比,正常动物旋转刺激组VNC内Fos表达有增高趋势,但无统计学差异(P0. 05);而前庭感受器损毁组和前庭感受器损毁后旋转刺激组的Fos表达水平相当。以正常对照组VNC表达量为基准进行标准化,正常动物旋转刺激组、前庭感受器损毁组和前庭感受器损毁后旋转刺激组的相对表达值分别为1. 129±0. 0631,0. 959±0. 0487,1. 023±0. 237。结论:双轴旋转运动激活了VNC神经元; 4-胺苯胂酸钠盐可损毁前庭感受器。     

双轴旋转运动刺激后大鼠中缝大核神经元活动分析（英文）

目的:分析大鼠经引发晕动病的双轴旋转运动刺激后,中缝背核(DR)内5-HT能神经元激活状况,以探讨5-HT水平与前庭刺激的关系。方法:将雄性SD大鼠随机分成两组:对照组和双轴旋转运动刺激组。所有动物装入定做的有机玻璃圆筒内,并于黑暗中进行如下处理2 h:运动刺激组动物以电动马达驱动的双轴旋转运动刺激;对照组动物放置在距刺激仪器20 cm的位置。应用包含DR的冠状脑切片,以双重免疫荧光标记技术标记5-HT和Fos蛋白,并对标记神经元进行计数和统计分析。结果:对照组和旋转运动刺激组的Fos阳性神经元、5-HT阳性神经元以及Fos/5-HT双标记神经元的数目分别是:93.4±12.0 vs 153.1±21.1、528.5±36.0 vs 531.1±23.4和15.1±11.3 vs 30.8±11.3。t检验分析显示两组Fos阳性神经元数目有显著性差异(P0.05);Fos/5-HT双标神经元数目在旋转运动刺激后有增加趋势。结论:引发晕动病的双轴旋转运动能激活中缝背核内的神经元,其中的5-HT能神经元也对刺激有反应。     

前庭刺激激活大鼠内侧前额叶皮质神经元Fos表达

目的:分析对比加伐尼刺激(Galvanic stimulation)与双轴旋转运动分别作用于大鼠前庭器官对内侧前额叶皮质(mPFC)神经元活动的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为4组：电刺激组、对照组、双轴旋转运动组和对照组。电刺激组动物以100～200μA电流强度刺激前庭感受器1 h后休养1 h;双轴旋转组动物以双轴旋转运动刺激2 h。应用包含mPFC的25μm脑冠状切片，以免疫组织化学抗生物素蛋白-生物素复合物(ABC)技术进行Fos蛋白免疫反应并以3,3′-二氨基联苯胺(DAB)显色。最后，对mPFC内标记神经元进行计数和统计分析。结果:动物经两种类型分别刺激后，mPFC均见到大量Fos样免疫阳性反应神经元细胞核；曼-惠特尼U检验统计表明每种刺激条件下，刺激组较对照组动物mPFC内Fos阳性神经元数目都有显著增加(P<0.05)。半定量统计显示两种类型刺激后，接受刺激组和对照组动物mPFC内Fos阳性神经元数目激活的神经元数目分别是1053±240.50 vs 44.25±3.64和509.80±54.40 vs 128.30±7.66。结论:诱发晕动病的双轴旋转刺激和伽伐...     

双轴旋转运动刺激后大鼠中缝大核神经元活动分析

目的:分析大鼠经引发晕动病的双轴旋转运动刺激后,中缝背核(DR)内5-HT能神经元激活状况,以探讨5-HT水平与前庭刺激的关系.方法:将雄性SD大鼠随机分成两组:对照组和双轴旋转运动刺激组.所有动物装入定做的有机玻璃圆筒内,并于黑暗中进行如下处理2h:运动刺激组动物以电动马达驱动的双轴旋转运动刺激;对照组动物放置在距刺激仪器20 cm的位置.应用包含DR的冠状脑切片,以双重免疫荧光标记技术标记5-HT和Fos蛋白,并对标记神经元进行计数和统计分析.结果:对照组和旋转运动刺激组的Fos阳性神经元、5-HT阳性神经元以及Fos/5-HT双标记神经元的数目分别是:93.4 ±12.0 vs 153.1 ±21.1、528.5±36.0vs 531.1±23.4和15.1 ±11.3 vs 30.8 ±11.3.t检验分析显示两组Fos阳性神经元数目有显著性差异(P＜0.05);Fos/5-HT双标神经元数目在旋转运动刺激后有增加趋势.结论:引发晕动病的双轴旋转运动能激活中缝背核内的神经元,其中的5-HT能神经元也对刺激有反应.     

围绕两轴进行复杂的旋转刺激后大鼠全脑内Fos的表达(英文)

为了探讨旋转刺激与运动病发生的关系,本研究利用一种复杂的围绕两轴旋转的加速度刺激器刺激大鼠后,观察大鼠全脑内Fos蛋白的表达情况。动物被随机地分成四组,即正常对照组、两轴旋转刺激组、双侧迷路毁损组以及双侧迷路毁损后接受旋转刺激组。采用免疫组织化学染色方法观察全脑不同核团内Fos蛋白的表达情况。结果显示:(1)正常对照组和双侧迷路毁损组大鼠的脑内均未检测到Fos样免疫阳性产物;(2)两轴旋转刺激组的大鼠在给予复杂的围绕两轴旋转的加速度刺激后,在大鼠脑和脑干的多个核团内均可检测到Fos样免疫阳性神经元,其阳性产物主要表达于细胞核。其中在脑干内的前庭复合体的不同亚核(包括前庭内侧核、前庭上核和前庭下核),孤束核、蓝斑核、臂旁内侧核、臂旁外侧核,间脑的室旁核以及边缘系统的杏仁核等内均可观察到密集分布的Fos样免疫阳性神经元;(3)双侧迷路毁损组大鼠在接受复杂的围绕两轴旋转刺激后,在上述相应核团内均难以检测到Fos蛋白的表达。以上研究结果提示两轴旋转刺激可以有效地激活前庭神经元,而大鼠在接受前庭刺激后,脑和脑干的许多核团内大量的神经元可能通过与前庭核复合体发生直接或间接的纤维联系也被激活,这些被激活的神经元可能与运动病发生的复杂机制有关。     

旋转运动刺激前庭感受器激活室旁核神经元活动的形态学证明

目的 探讨运动刺激前庭感受器后,下丘脑室旁核（Pa）神经元的反应,及Pa在前庭刺激引发机体自主反应中的作用和有关神经机制。 方法 将10只成年雄性SD大鼠平均分成两组,对照组和前庭损毁组,双侧鼓室内注射4-氨基苯砷酸钠（100 g/L）以损毁内耳迷路感受器。两组动物均经过2h双轴旋转运动刺激后,取含Pa的脑块并进行冠状切片（25μm）。以亲和素-生物素过氧化物酶体系（ABC）法对切片进行Fos蛋白免疫组织化学染色,观察和统计学分析Pa内Fos阳性神经元数量变化。 结果 药物损毁前庭后,动物头部有左右摇晃,运动时身体不稳或转圈等不平衡现象。免疫组织化学结果显示,两组动物下丘脑多个区域有大量Fos阳性神经元出现,其中Pa、室周核以及下丘脑外侧部等区域Fos阳性神经元密度更高。统计学分析表明,前庭损毁组动物Pa内Fos阳性神经元数目较正常组动物显著降低（P<0.05）,其中对照组为（104.00±7.00）个,前庭损毁组为（62.67±7.06）个。 结论 前庭信息传入能够激活Pa神经元,提示Pa神经元在前庭信息引发的自主反应中发挥一定的作用。     

大鼠前庭神经核复合体内5-HT能终末与表达5-HT1A受体的前庭臂旁核投射神经元之间的联系

目的 观察大鼠前庭神经核复合体(VNC)内5-羟色胺(5-HT)样阳性终末与表达5-HT1A受体(5-HT1A R)的前庭-臂旁核投射神经元之间的联系.方法 运用逆行束路追踪和免疫荧光组织化学染色相结合的双重标记技术,在激光共焦显微镜下观察.结果 将四甲基罗达明(TMR)注入臂旁核后,在双侧VNC的各个核团内均可观察到许多TMR逆标神经元,但以同侧为主.免疫荧光组织化学染色结果显示,在前庭内侧核(MVe)、前庭下核(SpVe)、前庭上核(SuVe)、前庭外侧核(LVe)、X核以及Y核的一些区域内,许多神经元表达5-HT1A R样免疫阳性,并可观察到大量5-HT样阳性纤维和终末.激光共焦显微镜下可进一步观察到一些TMR逆标神经元同时呈5-HT1A R样免疫阳性,且有部分5-HT样阳性终末与TMR/5-HT1A R双标神经元的胞体或树突形成密切接触.结论 提示5-HT可能通过5-HT1A R对前庭神经核复合体-臂旁核间的信息传递发挥调控作用.     

大鼠前庭神经核复合体内5-羟色胺1A受体的分布

为了研究5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)亚型在大鼠前庭神经核复合体(VNC)内的分布情况,本文采用免疫组织化学方法,在光学显微镜下对5-HT1AR亚型免疫阳性结构进行了观察。结果显示:5-HT1AR免疫阳性产物在VNC各个核团全长均有分布,主要定位于VNC神经元的胞体和近侧端树突,呈弥散分布,但在胞浆中也观察到许多染色深浅不同、分布不均匀的点状阳性结构。其中5-HT1AR样阳性神经元在前庭内侧核的全长呈密集分布,在前庭下核的尾段呈中等密度分布,在前庭上核、前庭外侧核和X核的全长、前庭下核的吻段和中段以及Y核的中、尾段均呈低密度分布,Y核的吻侧呈稀疏分布。本文结果提示,5-HT1AR阳性结构广泛地分布于大鼠VNC内,它们可能在介导5-HT对神经元活动的调节,参与前庭信息的整合与加工方面发挥重要作用。     

热应激诱导大鼠延髓内脏带神经元Fos蛋白的表达

为了探讨不同温度下,大鼠的行为表现及大鼠延髓内脏带内神经元Fos蛋白的表达情况,本研究将成年SD大鼠置于不同温度(24℃、34℃、38.5℃、42℃),相对湿度60%的实验仓内60min,观察大鼠的行为表现。应用免疫组化法,观察大鼠延髓内脏带内Fos和酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元的形态、分布和数量的变化。行为学结果显示:(1)24℃时,大鼠无异常表现,直肠温度为36℃左右;(2)34℃时大鼠直肠温度升高至38℃左右,但动物行为亦无明显变化;(3)在38.5℃和42℃时,大鼠直肠温度升高至39℃以上,且大鼠的行为最初表现为精神萎靡,而随后转为兴奋状态。免疫组化染色结果显示:(1)24℃时,延髓内脏带的孤束核与延髓腹外侧区内Fos阳性胞核较少;(2)34℃时,上述部位内Fos阳性胞核的数量增加;(3)38.5℃时,Fos阳性胞核的数量达到峰值;Fos/TH双标神经元的比率分别占TH或Fos单标神经元的69%和43%;(4)42℃时,Fos阳性胞核又降低,并观察到三种Fos阳性细胞:胞核为Fos阳性,胞浆为Fos阳性,以及胞浆、胞核均为Fos阳性。以上结果提示:延髓内脏带参与了热应激过程,Fos蛋白的表达随温度的升高而发生明显的变化,且TH阳性神经元可能参与了这种作用的调节。     

热应激时下丘脑视上核和室旁核Fos蛋白的表达

为了探讨不同温度下,大鼠的行为表现及大鼠下丘脑视上核和室旁核内神经元Fos蛋白的表达情况,本研究将成年SD大鼠置于不同温度(24℃、34℃、38.5℃、42℃),相对湿度为60%的实验仓内60min,观察大鼠的行为表现;同时应用免疫组化染色技术,观察大鼠下丘脑视上核和室旁核内Fos阳性神经元的形态、分布和数量的变化。行为学结果显示:24℃时,大鼠无异常表现,直肠温度为36℃左右;34℃仅引起大鼠直肠温度升高至38℃左右,动物行为无明显变化;38.5℃和42℃时,大鼠直肠温度升高至39℃以上,最初大鼠精神萎靡,活动减少,但随后转为兴奋状态,出现惊跳、逃窜行为。免疫组化染色结果显示:24℃时,下丘脑视上核、室旁核内Fos阳性细胞较少;34℃时,Fos阳性细胞的表达量增加;38.5℃时,Fos阳性细胞数达到峰值;42℃时又降低,并出现三种Fos阳性细胞:即胞核为Fos阳性、胞浆为Fos阳性以及胞浆、胞核均为Fos阳性。以上结果表明下丘脑视上核、室旁核内Fos蛋白的表达随温度的升高而发生明显的变化,提示这两个核团参与了热应激过程。     

Transneuronal tracing of vestibulo-trigeminal pathways innervating the masseter muscle in the rat

Previous studies reported that the activity of trigeminal motoneurons innervating masseter muscles is modulated by vestibular inputs. We performed the present study to provide an anatomical substrate for these physiological observations. The transynaptic retrograde tracer pseudorabies virus-Bartha was injected into multiple sites of the lower third of the superficial layer of the masseter muscle in rats, a subset of which underwent a sympathectomy prior to virus injections, and the animals were euthanized 24–120 h later. Labeled masseteric motoneurons were first found in the ipsilateral trigeminal motor nucleus following a 24-h postinoculation period; subsequent to 72-h survival times, the number of infected motoneurons increased, and at ≥96 h many of these cells showed signs of cytopathic changes. Following 72-h survival times, a few transynaptically labeled neurons appeared bilaterally in the medial vestibular nucleus (MVe) and the caudal prepositus hypoglossi (PH) and in the ipsilateral spinal vestibular nucleus (SpVe). At survival times of 96–120 h, labeled neurons were consistently observed bilaterally in all vestibular nuclei (VN), although the highest concentration of infected cells was located in the caudal part of the MVe, the SpVe, and the caudal portion of PH. The distribution and density of labeling in the VN and PH were similar in sympathectomized and nonsympathectomized rats. These anatomical data provide the first direct evidence that neurons in the VN and PH project bilaterally to populations of motoneurons innervating the lower third of the superficial layer of the masseter muscle. The MVe, PH, and SpVe appear to play a predominant integrative role in producing vestibulo-trigeminal responses.     

Effect of daily linear acceleration training on the hypergravity-induced vomiting response in house musk shrew (Suncus murinus)

The effects of repeated linear acceleration training and the antimotion sickness drug, promethazine, on hypergravity-induced motion sickness were examined in musk shrew (Suncus murinus), which is known to show a vomiting response to motion stimulation. Animals were assigned into five groups: vestibular intact, untreated animals (Sham), vestibular lesioned (VL) animals, vestibular intact animals with promethazine hydrochloride administered as daily drinking water (Prom), vestibular intact animals who underwent horizontal linear accelerator motion training (Train), and vestibular intact animals treated with both promethazine hydrochloride and linear acceleration training (Prom + Train). In Sham animals, the number of vomiting episodes was 14 ± 2 during 2 G exposure for 10 min, and was accompanied by intense Fos expression in the medial vestibular nucleus (MVe), the nucleus of the solitary tract (NTS), the area postrema (AP), and the paraventricular hypothalamic nucleus (PVN). The vomiting response and Fos expression were completely abolished in VL animals, indicating that these responses are mediated via the vestibular system. Although Train and Prom animals experienced a significantly reduced number of hypergravity-induced vomiting episodes compared with Sham animals, the effect was significantly greater in Train animals than in Prom animals. Fos expression in the NTS, AP, and PVN were significantly more reduced in Train animals than in Prom animals. Higher dose of bolus injection of promethazine (50 mg/kg, i.p.) completely abolished the vomiting episodes, although the animals were drowsy and sedated due to side effects. In conclusion, daily linear acceleration training and promethazine could prevent the hypergravity-induced vomiting episodes.     

不同高渗刺激对下丘脑视上核和室旁核神经元功能状态的影响

视上核和室旁核是下丘脑中两个与渗透压感受、加压素分泌以及水平衡调节密切相关的核团。为了搞清楚这两个核团在不同刺激条件下的激活状态和反应特性,本文采用慢性和急性渴觉刺激模型,免疫组化和ELISA检测相结合的方法对视上核和室旁核内的Fos表达以及血清加压素水平进行了测定。慢性刺激组动物给予2% NaCl盐水持续2d,而急性刺激组动物皮下直接注射2mol/L的NaCl盐水2.5ml,两组动物的进食保持正常。结果表明,这两种不同的刺激方式引发的Fos表达模式基本相似,视上核、室旁核、下丘脑外侧区以及正中视前区、穹窿下器和终板血管下器等区都检测到大量的Fos阳性胞核。但Fos染色的深浅程度和Fos胞核的数量却在两组之间有明显的差异:急性组胞核浓染,数量多;慢性组胞核淡染,数量少。ELISA检测的结果与此相反,急性组动物血清中加压素的水平很低,与对照组没有明显差异;而慢性组动物血清中的加压素水平很高,几乎是对照组的2倍。以上结果提示,下丘脑神经元的激活和分泌功能与刺激方式密切相关,选择单一刺激模式、单一指标来揭示和衡量其功能状态是缺乏说服力的。