植物乳杆菌NCU116在模拟人体消化环境中的耐受力

模拟人体消化道环境,即在人工胃液、人工肠液、胆盐和高盐环境下对植物乳杆菌NCU116的耐受力进行研究。结果表明：植物乳杆菌NCU116在pH1.5和pH2.5的人工胃液中培养3h,存活率分别达到了32.62%和45.76%,在pH3.5以上的人工胃液中能保持很高的存活率;在人工肠液中作用4h,存活率达到了49.63%;牛胆盐环境中培养24h后的NCU116活菌数随牛胆盐质量浓度(0.03～1.00g/mL)的增加而降低,但活菌数均保持在107CFU/mL以上;NaCl高盐环境中培养24h后的活菌数随NaCl质量浓度(1～8g/100mL)的增加而稍有降低,当NaCl质量浓度为8g/100mL时,活菌数仍在108CFU/mL以上。这表明植物乳杆菌NCU116对人工胃液、人工肠液、胆盐和高盐具有较好的耐受力,在食品和保健品工业中具有良好的应用前景。     

干酪乳杆菌IMAU60149的存活性及其对人工胃肠液的耐受性研究

研究了乳饮料贮藏期间Lactobacillus casei IMAU60149的存活性,以及对人工胃肠液的耐受性。将其以5.0×106g-1的接种量接种于脱脂乳中,37℃发酵,并制成活性乳饮料,之后于4℃贮藏30 d,测定贮藏期间活菌数及对人工胃肠液的耐受性。结果表明,4℃贮藏30d后,L.casei IMAU60149活菌数保持在5×108g-1以上。贮藏30 d后,乳饮料样品中L.casei IMAU60149在pH值为2.5和2.0人工胃液消化3h后,其存活率分别为90.60%和43.00%,分别在pH值为8.0的人工肠液消化8 h后,存活率分别降为71.35%和11.11%。L.casei IMAU60149保持良好的贮藏稳定性及较好的人工胃肠液耐受性,可进一步研究其在其他发酵乳制品中的应用。     

牛初乳IGF-I在模拟胃肠液中的稳定性研究

牛初乳IGF-I的模拟胃肠液稳定性研究表明,分离的牛乳IGF-I在模拟胃液中的稳定性随胃液pH值的升高而增加,0.5～4h内,胃液pH值为2,3,4时的活性保留率变化范围分别为40.25%～0.25%,50.40%～0.60%和93.34%～8.40%;初乳乳清粉中的IGF-I对胃液消化的耐受性远远强于分离的IGF-I,相同条件下,pH值为2,3,4时的活性保留率变化范围分别为67.72%～45.14%,84.59%～58.41%和94.21%～63.35%.分离的牛初SLIGF-I对pH值8的模拟肠液的耐受性相对较差,0.5～4h内活性保留率变化范围为33.20%～0.46%,而初乳乳清粉中的IGF-I活性保留率变化范围为87.80%～24.28%.     

大蒜与洋葱中SOD的提取、活性及其对体外模拟胃肠消化的耐受研究

目的:提取大蒜与洋葱中的SOD,测定其抗氧化活性,并研究其对体外模拟胃肠消化的耐受性。方法:实验通过热变性法与硫酸铵盐析法提取大蒜与洋葱中的SOD,并用邻苯三酚自氧化法测定其在体外及模拟胃液及肠液环境下的活性。结果:大蒜原液、热变性提纯液和盐析提纯液SOD比活力分别为7.92、10.28、54.81 U/mg;洋葱原液、热变性提纯液和盐析提纯液SOD比活力分别为7.10、9.54、40.19 U/mg。在人工胃液、肠液的消化结束后,大蒜原液、热变性提纯液和盐析提纯液SOD剩余活性分别为70.3%、63.5%和15.4%;洋葱原液、热变性提纯液和盐析提纯液SOD剩余活性分别为62.4%、48.1%和10.0%。结论:大蒜的各提取液SOD酶比活力单位均高于洋葱。大蒜和洋葱原液经过热变性和硫酸铵盐析后,SOD酶总活力和蛋白浓度下降,而比活力升高。模拟胃肠道消化中,提纯后的大蒜与洋葱SOD耐受性减弱,说明原液中的复合环境对SOD的活性起到了保护作用。     

具有高抗胃肠道胁迫嗜酸乳杆菌的筛选及对肠炎小鼠的治疗作用

目的:从三株嗜酸乳杆菌中筛选出具有高抗胃肠道胁迫特性的嗜酸乳杆菌并研究其对溃疡性结肠炎小鼠的治疗效果。方法:人工模拟人体消化道胃液、肠液和胆盐环境,设置不同浓度梯度,研究三株嗜酸乳杆菌进入人体后对在消化道胃液、肠液和胆盐环境中的存活率,从而反映嗜酸乳杆菌对人体消化道胃液、肠液和胆盐环境的抵抗力。然后以筛选出的具有高抗胃肠道胁迫能力的嗜酸乳杆菌为研究对象,让处理组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠盐(DSS)溶液7 d,以人工诱发的溃疡性结肠炎(UC)小鼠为动物模型,观察此株高性能的嗜酸乳杆菌CGMCC10436的抗溃疡性结肠炎潜力。结果表明,嗜酸乳杆菌CGMCC10436在模拟胃酸pH2.5~4.5时,其活菌数大于10~7CFU/mL,并且在3 h时没有下降的趋势;在模拟肠液中2h时,嗜酸乳杆菌CGMCC10436活菌数有所上升;并且嗜酸乳杆菌CGMCC10436在胆盐浓度为4g/kg时,3 h时其活菌数大于1×107CFU/mL。嗜酸乳杆菌CGMCC10436发挥较好的抗溃疡性结肠炎功效的剂量为3×108CFU,能够改善溃疡性结肠炎小鼠表观状况,修复溃疡性结肠炎小鼠肠粘膜损伤,增强溃疡性结肠炎小鼠的免疫调节。     

免疫磁珠的制备及其在食品安全检测中的应用

目的 研究胃肠液对纳豆激酶纤溶活性的影响。方法 模拟人体胃液、肠液中的生理过程, 采用纤维蛋白平板法, 对粗酶液和含豆固体粉碎样品2种形态的纳豆激酶进行纤溶活性研究。结果 粗酶液和含豆固体粉碎样品在人工胃液处理5 h左右时, 活性分别下降到对照组的28%和35%, 说明2种状态的酶在酸性的胃液中都不稳定, 大部分活性丧失; 粗酶液和含豆固体粉碎样品在人工胃液处理4 h后, 再用人工肠液处理 5 h, 活性分别下降到对照组的89%和91%; 说明在人工肠液中2种状态的酶都较稳定, 都保持较高的酶活性。结论 为避免胃酸的破坏作用, 建议将纳豆激酶制成肠溶性的产品服用。     

Paenibacillus bovis sp.nov.BD3526作为益生菌的潜力

对Paenibacillus bovis sp.nov.BD3526作为益生菌的潜力进行了体外活性初步研究。采用模拟胃液、肠液、不同浓度的胆盐环境,测定BD3526菌株在酸性及高胆盐环境的存活率,并测试BD3526对金黄色葡萄球菌、藤黄、枯草芽孢杆菌的抑制作用。结果表明,BD3526可以耐受pH值为2.0、3.0、4.0的人工胃液、pH8.0的模拟肠液以及0.1%、0.2%、0.3%的胆盐环境;对金黄色葡萄球菌、藤黄、枯草芽孢杆菌有显著的抑制能力。说明BD3526在人工消化液环境中具有良好的存活能力,不具有溶血作用;可引起敏感菌细胞渗漏,达到杀灭部分细菌,包括金色葡萄球菌的作用,因此,该菌具备作为益生菌应用的潜力。     

传统发酵牦牛乳中2株高产胞外多糖乳酸菌在模拟消化道中耐受力的研究

从传统发酵牦牛发酵乳中分离出的2株高产胞外多糖乳酸菌,为了研究其在模拟消化道中耐受力,对2株乳酸菌(植物乳杆菌、干酪乳杆菌)分别在人工胃液、人工肠液、人工胆汁和高盐4个模拟人工胃肠道消化环境中进行培养,测其耐受力以及对Caco﹣2细胞的黏附能力。结果表明:植物乳杆菌和干酪乳杆菌在人工胃液中作用3 h的存活率随pH值的增大而增加。在pH4.5时,植物乳杆菌的存活率达到53.63%,干酪乳杆菌的存活率达到50.83%;在人工肠液中作用4h,植物乳杆菌的存活率达到了59.58%,干酪乳杆菌的存活率达到了51.42%;在胆盐环境中培养24 h后的植物乳杆菌和干酪乳杆菌活菌数随牛胆盐质量浓度的增加而降低,活菌数均保持在108cfu/m L以上;在高盐环境中培养24 h后的活菌数随盐质量浓度的增加而降低,活菌数均在108 cfu/mL以上;并且2株乳酸菌的黏附能力也很强,植物乳杆菌可以达到16.83%、干酪乳杆菌可以达到14.86%。结论:植物乳杆菌和干酪乳杆菌均能通过胃进入肠道并保持活力,而且能在肠道很好地定植,为植物乳杆菌和干酪乳杆菌作为益生菌应用在食品中提供了理论基础。     

副干酪乳杆菌HCS17-040的筛选鉴定及其益生特性

目的：获得具有降甘油三酯功能的乳酸菌菌株。方法：从母乳及顺产的健康婴儿粪便中筛选分离乳酸菌菌株,采用单试剂法乳酸菌（GPO-PAP法）测定其甘油三酯去除能力。从中选择甘油三酯去除能力强的菌株进行形态学鉴定、生理生化及16S rDNA鉴定,并测定其耐受酸、胆盐和胃肠液的能力。结果：筛选分离出一株副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）,命名为HCS17-040（CGMCC No 19747）,其甘油三酯下降率达（42.80±1.79）%;该株菌在pH 3.0和pH 2.0的环境中培养17 h后存活率分别为89.39%和87.18%;在3 g/L和5 g/L的胆盐浓度环境中培养17 h后存活率分别为94.75%,92.97%;在人工胃液中作用3 h,存活率为93.93%;在人工肠液中作用4 h,存活率高达99.06%。结论：副干酪乳杆菌HCS17-040对甘油三酯具有一定的去除能力,且具有良好的耐酸、胆盐及人工胃肠液的能力。     

干酪乳杆菌在模拟人体消化道环境及高盐环境中生长活力的研究

采用胃蛋白酶和胰蛋白酶,模拟人体消化道环境,在pH值为1.5～4.5人工胃液、人工肠液、胆汁0.3 g/L～3.5 g/L和6.0%～8.0%NaCl浓度下对两株干酪乳杆菌的生长情况进行研究.结果表明,两株干酪乳杆菌在pH为2.5～4.5人工胃液或在人工肠液中作用3h均能生长,活菌数达到1010/mL左右,在含2.5gL的胆盐浓度中或在7.5%的高盐浓度条件下亦能正常生长.这表明该菌株具有较好的适应性,可以作为益生菌用于食品工业.     

动物双歧杆菌乳亚种菌株HCS04-002益生特性的研究

该研究测定动物双歧杆菌乳亚种（Bifidobacterium animails subsp. lactis）菌株HCS04-002对酸、胆盐、人工胃液和人工肠液的耐受性,并采用邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷（ONPG）法及甘油三酯试剂盒分别测定菌株的β-半乳糖苷酶活力和甘油三酯降解能力。结果表明,菌株HCS04-002在pH 2.0和pH 3.0环境下处理17 h,存活率达60%以上;在0.3%、0.5%、1.0%、1.5%的胆盐环境处理17 h,存活率达70%以上;经人工胃液和人工肠液消化后,存活率达99%以上;β-半乳糖苷酶活力为0.78 U/mL;甘油三酯降解率为43%。综上,动物双歧杆菌乳亚种菌株HCS04-002具有较好的耐酸、耐胆盐及耐胃肠液能力,进入人体后能够以较高存活率到达肠道发挥作用,并具有一定的缓解乳糖不耐受和降甘油三酯功能。     

Microencapsulation of Lactobacillus rhamnosus GG by Transglutaminase Cross‐Linked Soy Protein Isolate to Improve Survival in Simulated Gastrointestinal Conditions and Yoghurt

Microencapsulation is an effective way to improve the survival of probiotics in simulated gastrointestinal (GI) conditions and yoghurt. In this study, microencapsulation of Lactobacillus rhamnosus GG (LGG) was prepared by first cross‐linking of soy protein isolate (SPI) using transglutaminase (TGase), followed by embedding the bacteria in cross‐linked SPI, and then freeze‐drying. The survival of microencapsulated LGG was evaluated in simulated GI conditions and yoghurt. The results showed that a high microencapsulation yield of 67.4% was obtained. The diameter of the microencapsulated LGG was in the range of 52.83 to 275.16 μm. Water activity did not differ between free and microencapsulated LGG after freeze‐drying. The survival of microencapsulated LGG under simulated gastric juice (pH 2.5 and 3.6), intestinal juice (0.3% and 2% bile salt) and storage at 4 °C were significantly higher than that of free cells. The survival of LGG in TGase cross‐linked SPI microcapsules was also improved to 14.5 ± 0.5% during storage in yoghurt. The microencapsulation of probiotics by TGase‐treated SPI can be a suitable alternative to polysaccharide gelation technologies.     

4株乳酸菌对模拟胃肠环境的耐受性及生长特性研究

对4株来源于自然发酵肉制品中的乳酸菌进行耐酸耐胆盐性能的测定,选取在pH3.0和含0.3 g/100 mL胆盐的MRS培养基中存活率均超过50%的2株菌（M12、M23）,进一步研究其在模拟胃肠液中的耐受性及MRS培养基中的生长特性。结果表明,这2株乳酸菌对人工模拟胃肠道环境有较好的耐受性,经过人工模拟胃液处理2 h后,存活率均＞50%,经人工模拟肠液处理10 h后仍可存活;这2株菌具有较强的增殖及产酸能力,24 h内均已进入稳定生长期,随着菌体数目的增加,培养基pH值快速降低,在肉制品的发酵温度范围内均能较好地生长。因此,这2株菌可作为潜在的益生菌菌株应用于肉制品的发酵。     

Adsorption and desorption of phenanthrene on carbon nanotubes in simulated gastrointestinal fluids

Adsorption of phenanthrene on carbon nanotubes (CNTs) and bioaccessibility of adsorbed phenanthrene were studied in simulated gastrointestinal fluids. Adsorption of phenanthrene on CNTs was suppressed in pepsin (800 mg/L) solution (gastric) and bile salt (500 and 5000 mg/L) fluids (intestinal). In addition to competitive sorption, pepsin and high-concentration bile salt (5000 mg/L, above critical micelle concentration) solubilized phenanthrene (3 and 30 times of the water solubility, respectively), thus substantially reduced phenanthrene adsorption on CNTs. Pepsin and bile salts also increased the rapidly desorbing phenanthrene fraction from CNTs. The rapidly desorbing phase lasted less than 1 h for all CNTs. Further, 43-69% of phenanthrene was released from CNTs after desorption in the simulated gastric and intestinal fluid at low bile salt concentration while 53-86% was released in the gastric and intestinal fluid at high bile salt concentration. These findings suggest that the release of residual hydrophobic organic compounds from CNTs could be enhanced by biomolecules such as pepsin and bile salts in the digestive tract, thus increasing the bioaccessibility of adsorbed phenanthrene and possibly the overall toxicity of phenanthrene associated CNTs.     

川西高原发酵牦牛乳中降解亚硝酸盐乳酸菌的筛选与耐受性研究

以川西高原发酵牦牛乳中分离出的195株乳酸菌为研究对象,采用比色法测定其亚硝酸盐降解能力,从中筛选出亚硝酸盐降解能力极强的菌株。将这些优势菌株分别在人工胃液、人工肠液、胆盐和高盐4个模拟人工胃肠道消化环境中进行培养,测其耐受力。结果表明:这195株乳酸菌亚硝酸盐降解率范围为35.79%~96.51%,其中降解率在80%~90%的菌株占54.87%,仅有1.54%的菌株亚硝酸盐降解率在50%以下,有3株亚硝酸盐降解能力极强的菌株(降解率大于95%)。这3株菌在人工胃液中的活菌数随培养时间的延长而减少,培养3 h后,菌株5、26、150在pH5.5时的活菌数分别为3.7、3.6、4.1×108 CFU/mL;在人工肠液中培养4 h后,菌株5、26、150的活菌数分别为4.3、6.8、5.3×108 CFU/mL;在不同胆盐梯度的培养基中培养24 h后,3株菌的活菌数随胆盐浓度增大而减少,且均保持在108 CFU/mL以上;在高盐环境中培养24 h后的活菌数随盐质量浓度的增加而降低,活菌数均在108 CFU/mL以上。结论:川西高原发酵牦牛乳中分离出的195株乳酸菌降解亚硝酸盐的能力存在较大差异,其中降解亚硝酸盐能力极强的菌株对体外模拟消化环境具有较好的耐受力,为其在医药,食品和生物领域的应用提供了理论依据。     

罗伊氏乳杆菌J1胃肠道耐受性评价及其对免疫相关基因调控的体外研究

以分离自传统发酵乳制品中的罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri,L.reuteri)J1为研究对象,对其黏附性能、生长特性、对胃肠道环境的耐受能力以及该菌株作用于Caco-2细胞不同时间后免疫相关基因表达量的动态变化进行评价。结果显示,罗伊氏乳杆菌J1具有良好的黏附性,黏附率达87.93%,具有定植于肠道中的潜力。该菌株在4 h进入对数期,14 h进入稳定期。在肠道耐受性评价中,菌株在pH为2.0和3.0条件下处理3 h后,其存活率分别为86.77%、97.12%;在胆盐质量浓度分别为0.3、0.5和1.0 g/100 mL的培养基中处理4 h后,其存活率分别为105.00%、82.60%和82.18%;经模拟人工胃液处理3 h后转入人工肠液继续培养8 h,存活率达82.71%;该菌株在7 g/100 mL的盐溶液中处理24 h后,其存活率为80.36%。此外,108CFU/mL的罗伊氏乳杆菌J1可刺激Caco-2细胞中免疫相关因子IL-1β的表达,抑制促炎因子IL-6和趋化因子IL-8的表达。综上表明,罗伊氏乳杆菌J1具有定植于肠道上皮细胞的潜力,耐受胃肠道环境,并发挥一定的免疫调节作用。     

降解草酸盐乳酸菌株的筛选及其酸乳发酵特性

本实验以来源于自制酸奶、泡菜、酵头等特色发酵食品的49株乳酸菌为候选菌株,分光光度法测定菌株体外降解草酸盐能力和模拟胃肠道耐受性,主成分分析法评价各菌株发酵酸乳特性。结果表明,9株菌草酸盐降解率在70%以上,最高达86.96%;其中,菌株“四川郫县A1”、菌株“鄂温克”、菌株“鲁青6”在pH3.0酸溶液、人工模拟胃液、胆盐溶液、人工模拟肠液存活率均在50%以上;菌株“鲁青6”和菌株“鄂温克”发酵酸乳的感官评价、持水力、酸度、后酸度、破裂力、硬度、胶粘性、内聚力、咀嚼性、弹性等特性均较优;16S rDNA序列分析表明,菌株“鲁青6”为食窦魏斯氏菌,菌株“鄂温克”为副干酪乳杆菌。菌株“鲁青6”和菌株“鄂温克”既能高效降解草酸盐,又能耐受胃肠道环境,同时在酸乳中发酵特性优良,可作为功能酸乳开发候选菌株。     

柑橘在体外模拟胃肠消化过程中总多酚、总黄酮及总抗氧化活性的变化规律

通过体外模拟胃肠消化法模拟柑橘在胃肠道的消化过程,测定模拟胃肠消化过程中总多酚、总黄酮的释放量及总抗氧化活性的变化规律。结果显示,柑橘多酚主要是游离酚,有机化学提取法释放的多酚高于模拟胃肠消化法。模拟胃消化3 h后,与消化0 h相比,宽皮柑、脐橙和金橘的多酚最大释放量是其1.02、0.93、1.21 倍,黄酮最大释放量是其1.46、2.37、2.16 倍,最大抗氧化活性是其1.10、1.23、1.62 倍。体外模拟肠消化4 h后,与胃消化0 h和肠消化0 h相比,宽皮柑、脐橙和金橘的多酚释放量分别为其0.99、0.80、1.29 倍和91%、81%、90%,黄酮的最大释放量分别为其73%、39%、64%和51%、17%、39%,最大抗氧化活性分别为其1.67、1.09、1.76 倍和1.31、0.88、1.22 倍。这表明柑橘在模拟胃肠消化过程中,胃蛋白酶、胰酶、胆汁及胃酸均可以促进抗氧化活性物质释放。     

产ACE抑制肽菌株的筛选及其在模拟消化道环境中的活性分析

为了筛选出对血管紧张素转换酶（angiotensin-converting enzyme,ACE）抑制活性较高并且具有较强的耐酸耐胆盐和耐盐的乳酸菌,对实验室保存的27株乳酸菌进行了产酸能力、蛋白水解活力、ACE抑制活性、模拟胃肠道消化及酸、胆盐和盐耐受性的测定。结果显示,菌株M3的ACE抑制率可达71.94%±1.39%,具有较好的蛋白水解活力和产酸能力,蛋白水解活力为（86.66±3.51）μg/mL亮氨酸,滴定酸度为（71.67±2.86）°T。菌株M3经人工胃肠液分别处理3 h后,ACE抑制率为74.96%±1.73%;在pH3的环境中3 h,耐受性为14.34%±1.21%,活菌数能达到7 lg CFU mL?1以上;在含有0.3%胆盐的培养基中3 h,耐受性为37.50%±2.47%;在含有4% NaCl的培养基中24 h,耐受性为37.32%±1.84%。该菌经16S rDNA鉴定为Lactobacillus (Lb.) paracasei subsp. paracasei M3。因此,菌株Lb. paracasei subsp. paracasei M3可用作发酵牛乳富产ACE抑制肽且能耐受消化道环境具有益生菌潜力的菌株。