人源性抗HBc单链噬菌体抗体库的构建

利用RT－PCR和噬菌体表面展示技术，直接从乙肝病毒核心抗体（抗HBc）阳性患淋巴细胞中提取总RNA，反转录成cDNA；合成全套人抗体可变区引物扩增抗体可变区基因，并将重、轻链可变区基因进行拼接装配成单链抗体（ScFv）基因，重组于噬菌粒载体pHEN1，转化抑制型大肠杆菌E.coliTG1，以辅助噬菌体援救后，构建成人源性单链噬菌体库。库容量达106。     

发光分析在中药药理研究中的应用

将发光分析技术应用于中药药效学及机理方面的研究,结果表明:具有抗流感病毒作用的中药克感利咽口服液和抗心梗注射液等药物均显示良好的清除活性氧(包括氧自由基)作用,克感液抗流感病毒具有降低机体氧化应激态的作用机制.     

流感分子病毒学研究进展

流感病毒繁殖周期很短,基因结构又非常简单,病毒RNA分成8个独立的片段。每个基因片段编码一个蛋白,有利于宿主发生双重感染后不同毒株之间基因交换重组。流感病毒为了自身生存,适应外界环境,频繁发生变异。每次新亚型出现,都引起世界性大流行。人类与流感病毒将长期共存。     

结核分枝杆菌H37Ra FadD3基因克隆与表达研究

为探索FadD3在结核分枝杆菌胆固醇分解代谢中的作用,从结核分枝杆菌H37Ra的全基因组中克隆了FadD3基因,并在大肠杆菌BL21中表达.根据NCBI公布的结核分枝杆菌全基因组序列设计一对引物,PCR扩增FadD3基因.PCR扩增产物与克隆载体pGEM3Zf(+)进行拼接,得到重组基因FadD3-pGEM3Zf(+),再转化到大肠杆菌DH5ɑ得到克隆.PCR检测阳性克隆,再与表达载体pYUB28b拼接,得到重组质粒FadD3-pYUB28b.阳性重组质粒亚克隆到大肠杆菌BL21宿主菌进行自体诱导表达.经过表型筛选及鉴定分析,已成功构建了重组表达质粒FadD3-pYUB28b.SDS-PAGE和Western blotting证实,重组基因FadD3-pYUB28b在大肠杆菌BL21中有表达产物.实验结果表明,以pYUB28b为表达载体,FadD3重组基因在大肠杆菌表达体系于温度分别为18,28 ℃有包涵体形式的表达蛋白,在37 ℃无表达产物.     

甲流症状与新冠有哪些区别? 如何预防?

<正>近日,北京、上海、天津、浙江等地部分学校因学生发热而停课,发热原因为甲型流感。目前甲流、诺如病毒感染已经进入高发期,孩子出现发烧等症状,不一定是由新冠病毒引起的。什么是流感?有哪些症状?传播途径是什么?学校和托幼机构如何预防?什么是流感?流行性感冒(简称流感)是流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病。流感病毒分为甲、乙、丙、丁4型,人流感主要是甲型流感病毒和乙型流感病毒引起。甲型和乙型流感每年呈季节性流行,其中甲型流感易引起大流行。     

抗滑移系数对框架中钢梁高强度螺栓拼接性能的影响研究

抗滑移系数是高强螺栓摩擦型连接中的一个重要参数。本文对框架中高强螺栓拼接采用不同抗滑移系数时的性能,以及接触面的抗滑移系数大于和小于设计值时的性能,进行了单调荷载和循环荷载作用下的研究。结论表明:采用不同抗滑移系数设计的拼接节点,其性能差别很小,在设计时可不予考虑;接触面抗滑移系数大于或小于设计值,将直接导致拼接区的滑移出现和耗能性能的不同,但对拼接的极限承载能力并无影响。     

基因工程进展与二十一世纪人类生活

基因工程作为生物技术的核心内容,已成为现代高新技术的标志之一.1973年,Cohen将伤寒沙门氏菌抗链霉素质粒与大肠杆菌抗四环素质粒在体外重组,获得异源的重组质粒DNA,并把重组质粒导入大肠杆菌中,建立了抗四环素和抗链霉素的大肠杆菌克隆体,这一研究标志着基因工程的出现.经过几十年的发展,基因工程技术已走出实验室,成为一个巨大的朝阳产业,各个国家都投巨资资助研究和开发项目,很多商业机构也积极参与.自1983年世界第一例转基因植物(转基因烟草和马铃薯)问世以来,基因工程已在许多领域显示出巨大的应用价值.     

流行性感冒的分子流行病学研究进展

流行性感冒实质上是一种人畜共患的传染病，至今仍无法有效控制其流行。人群流感大流行主要是由于甲型流感病毒抗原变异所致，且甲型流感病毒抗原的基因结构可能在人、禽、畜问发生重配和重组，引起人、禽、畜之问的传播并发生流行。通过积极有效地监测流感病毒在人和家禽、家畜中的流行特点，可以预测将要出现的流感病毒毒株，以制备相应的疫苗，达到控制流感流行的目的。     

功能型DNA重组修复蛋白质RecR的体内分布示踪

RecR是参与大肠杆菌(E.coli)同源重组的蛋白质,在真核生物中存在功能保守性组分.通过构建recR_yfp 融合基因及其表达载体,对大肠杆菌菌体内RecR蛋白的分布情况进行了活体观察.显微镜观察结果表明,RecR蛋白一般在菌体的拟核区起作用.通过对比紫外线敏感性,Re-cR-YFP在重组质粒上提高了recR缺陷型大肠杆菌的抗紫外线能力,表明重组质粒表达的融合蛋白RecR-YFP具有生物活性,能够提高rPfR缺陷型大肠杆菌的存活率.     

功能型DNA重组修复蛋白质RecR的体内分布示踪

RecR是参与大肠杆菌（E．coli）同源重组的蛋白质,在真核生物中存在功能保守性组分．通过构建recR-yfP融合基因及其表达载体,对大肠杆菌菌体内RecR蛋白的分布情况进行了活体观察．显微镜观察结果表明,RecR蛋白一般在菌体的拟核区起作用．通过对比紫外线敏感性,Re—cR—YFP在重组质粒上提高了recR缺陷型大肠杆菌的抗紫外线能力,表明重组质粒表达的融合蛋白RecR—YFP具有生物活性,能够提高recR缺陷型大肠杆菌的存活率．     

细胞因子受体-抗人AFP嵌合抗体融合蛋白的构建及表达

用RT-PCR方法从人胎肝组织中扩增EpoR胞外区基因及gp130跨膜区基因,并用酶切连接方法将其与抗人AFP嵌合抗体拼接,连接到质粒pVITRO上,构建真核表达载体。将重组质粒转染CHO细胞,以RT-PCR、Western blot和ELISA方法检测融合蛋白的表达。结果显示稳定转染细胞株有约150kDa的融合蛋白表达。     

细胞因子受体-抗人AFP嵌合抗体融合蛋白的构建及表达

用RT-PCR方法从人胎肝组织中扩增EpoR胞外区基因及gp130跨膜区基因,并用酶切连接方法将其与抗人AFP嵌合抗体拼接,连接到质粒pVITRO上,构建真核表达载体.将重组质粒转染CHO细胞,以RT-PCR、Western blot和ELISA方法检测融合蛋白的表达.结果显示稳定转染细胞株有约150kDa的融合蛋白表达.     

板蓝根粗提液抑制流感病毒的实验研究

对板蓝根凝聚粗提液的抗流感病毒作用进行了研究。用丙酮脱脂提取板蓝根生药的凝集素，并分别测定各样品的血凝活性，并用45.3mg/mL的样品对流感病毒（A1／京防／97－53H1N1，A1／京防／262／95）进行了体外抑制试验。结果表明：板蓝根凝集素对流感病毒具有显著的直接杀灭作用和预防作用及较好的治疗作用，而且得出抑制流感病毒的效果与板蓝根凝集素血凝活性的高低有关。     

从猪粪中分离抗铜大肠杆菌及其抗铜基因的初步定位

 从云南昆明周边的4个养猪场采集不同年龄段的猪粪样品,分离猪粪中的大肠杆菌.从分离到的大肠杆菌中发现了具有金属铜抗性的菌株并统计出抗性菌株的发生率.摸索了测定硫酸铜对抗铜性大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)的方法,接合实验确定抗铜基因是否位于可移动的接合质粒上.实验结果初步表明抗铜大肠杆菌的发生率与饲料中添加硫酸铜的量成正相关性,且72%的抗性菌株中的抗铜基因位于可移动的接合质粒上.     

汉滩病毒M,S基因不同拼接方式原核表达效果比较研究

为了比较汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与核蛋白(NP)主要抗原位点片段不同拼接方式的原核表达效果，将汉滩病毒76—118株M基因编码G1的片段与S基因编码区5’端约O．7kb的片段连接，克隆入pGEX一4T2，构建嵌合基因原核表达栽体pGEX-4T2-G1S0．7，pGEX-4T2-S0．7G1，在大肠杆菌XLl一Blue中诱导表达GST—G1S0．7或GST—S0．7G1融合蛋白。经IPTG诱导后，ELISA活性测定结果表明，两种融合蛋白均可与抗汉坦病毒NP的mAb特异性结合，融合蛋白GST—G1S0．7还可与抗汉滩病毒糖蛋白的mAb特异性结合。Western blot结果显示，诱导出G1S0．7或S0．7G1与GST的融合蛋白，其中G1S0．7嵌合基因的表达产物降解较少。研究证明：两种拼接方式的嵌合基因均可在大肠杆菌中表达出有生物学活性的融合蛋白，但表达效果不同，为汉滩病毒基因工程疫苗的研究奠定了基础。     

牛奶菜水提物对中华眼镜蛇毒神经毒性的抑制作用

【目的】考察牛奶菜(Marsdenia sinensis)水提物对中华眼镜蛇(Naja atra)毒神经毒性的抑制作用。【方法】利用四通道离体组织灌流系统和昆明小鼠(Mus musculus)离体回肠标本检测牛奶菜水提物对中华眼镜蛇毒神经毒性的抑制、即时中和与恢复作用。【结果】牛奶菜水提物对中华眼镜蛇毒神经毒性有一定抑制作用。【结论】研究结果揭示了牛奶菜用于治疗中华眼镜蛇咬伤的有效性,为后续开发抗蛇毒药物奠定了基础。     

人血管生长素基因的化学合成与克隆

采用固相亚磷酸胺法化学合成并克隆人血管生长素基因，该基因全长４２３ｂｐ，其中３６９ｂｐ的结构基因全部选用大肠杆菌偏爱的密码子，在结构基因上游设置了适合原核非融合蛋白表达的核糖体结合位点的Ｓ－Ｄ序列。采用两级退火一步拼接法成功克隆全长基因，该基因适合在多种融合或非融合原核表达载体中表达。     

全预制拼接槽形UHPC梁抗弯抗剪性能试验研究

为实现UHPC结构在房屋建筑中的应用,提出了一种全预制拼接槽形UHPC梁,该梁截面呈槽形,带螺栓肋且肋上设贯通螺栓孔,梁柱可由两片槽形带肋梁正拼接和反拼接形成工字形和回字形两种梁、柱全装配式组合连接模式. 为研究全预制拼接槽形UHPC梁的抗弯抗剪性能,共完成3根梁抗弯试验,分别为现浇工字形梁、回字形拼接梁、工字形拼接梁. 通过抗弯试验发现,拼接梁的刚度略高于现浇梁,而反接槽形拼接梁的抗弯承载力高于现浇梁,以此证明UHPC拼接梁的抗弯性能优于UHPC现浇梁. 为研究工字形拼接梁的抗剪性能,设置了不同剪跨比和箍筋间距,通过正交试验设计完成了9根反拼接槽形拼接梁的抗剪试验研究,获得开裂和破坏荷载、变形和裂缝分布规律等. 通过抗剪试验发现,在箍筋间距相同时,工字形拼接梁随剪跨比由1增大为2、3,破坏模式由斜压破坏转变为剪压破坏;对于有腹筋梁,箍筋间距相同时,剪跨比越大,槽形拼接梁承载力越低,延性越大,且有腹筋梁的箍筋对主裂缝的发展具有有效的约束作用.     

基因免疫研究进展

1990年WolffJA等意外发现小鼠骨骼肌细胞能直接摄取病毒裸露的DNA ,并表达其编码的蛋白质 ,这种表达可持续数月 ,这一发现为开创基因疫苗的研究奠定了基础。 1992年Tang等将带有人生长激素的质粒DNA通过基因枪导入小鼠表皮细胞 ,几周后 88%被接种的小鼠产生了特异性抗体。 1993年Ulmer等发现小鼠肌肉注射编码甲型流感病毒相对保守的核心蛋白的质粒载体后 ,可有效的保护小鼠抵抗另一亚型流感病毒的攻击 ,从而证明了注射不但能在体内表达抗原蛋白 ,并且可以诱导产生具有显著保护作用的免疫应答。从此继全菌弱毒苗和亚单位疫苗后 ,出现了…     

抗砷质粒pSDR941的构建及其在专性自养极端嗜酸性…

将具有广泛寄主范围的ＩｎｃＱ质粒ｐＪＲＤ２１５的Ｋｍ基因片段删掉，置换进大肠杆菌抗砷质粒ｐＵＭ３上的抗砷基因及Ｐ１启动子片段，构建成新的抗砷质粒ｐＳＤＲ９４１，为１２．４ｋｂ，通过接合的方式将其转移到氧化硫硫杆菌中并获得了表达。