肌腱缺损修复的研究现状和进展

肌腱缺损是肌腱外科常见的问题 ,肌腱缺损后的手术修复和功能重建是肌腱外科十分重要的研究课题之一。随着肌腱愈合机制的研究进入细胞分子水平 ,发现很多生长因子在肌腱损伤修复中对细胞增殖、分化以及基质合成发挥着重要作用[1 ] 。国内外学者不断探索如何在肌腱修复过程中通过内外源性生长因子调控细胞增殖、分化以及基质合成 ,促进肌腱修复并减少肌腱粘连和生物力学强度的衰减。1　治疗现状1 .1　自体肌腱移植　自体肌腱移植是治疗临床肌腱缺损的首选方法。移植的自体肌腱分为有滑膜肌腱和无滑膜肌腱。有滑膜肌腱来源有限 ,无滑膜肌腱存…     

BMP-12诱导下对骨髓基质干细胞分化潜能及生物学行为影响的实验研究

目的：探讨（MSCs）在BMP-12诱导下向肌腱细胞分化潜能及其生物学行为。方法：将MSCs在含BMP-12的F12培养液中诱导分化后传代培养并与肌腱细胞对比．进行形态学观察、细胞增殖、细胞周期、细胞DNA指数及细胞凋亡检测。通过^3H-Proline掺入实验了解对MSCs细胞胶原合成的影响。结果：MSCs细胞呈梭形生长,第2天进入对数增长期．倍增时间为3、2天,而单纯肌腱培养对照组倍增时间375天（P〉0．05）。MSCs与单纯培养对照组比较^3H-Proline掺入值无显著性差异（P〉0．05）．说明MSCs细胞分泌可分泌胶原。细胞功能向肌腱细胞方向转化。MSCS细胞DNA指数为O．96，增殖指数比对照组高11％；提示MSCs细胞生长速度快．增殖能力强。结论：MSCs在BMP-12诱导下具有向肌腱细胞分化潜能，可作为肌腱组织工程的有效种子细胞应用于组织工程化肌腱的构建。     

皮肤成纤维细胞构建组织工程肌腱的实验研究

近年来，研究者们应用类似于骨髓基质干细胞的细胞作为组织工程肌腱的种子细胞，未获明显进展。皮肤成纤维细胞和肌腱细胞均来源于中胚层，细胞形态相似。如果成纤维细胞能取代肌腱细胞，作为种子细胞应用于肌腱组织工程则可望解决种子细胞缺乏的难题。作者曾应用成纤维细胞作为种子细胞修复肌腱缺损取得初步成功，但缺乏长期观察结果。本研究旨在长期观察皮肤成纤维细胞构建的组织工程肌腱，并与肌腱细胞作为种子细胞的组织工程肌腱进行比较。     

脂肪干细胞在肌腱组织工程中的研究进展

严重的肌腱缺损带来严重的社会及经济负担，传统治疗方法效果欠佳。肌腱组织工程为治疗严重的肌腱
缺损提供了新的方向。脂肪干细胞较骨髓干细胞有来源广泛，分离过程简单、安全等优点，具有向多种细胞分化的
潜能及强大的自我增殖能力。脂肪干细胞在生长因子、周期性张力及氧分压等适宜刺激下可分化为肌腱细胞，分泌
肌腱细胞外基质，形成组织化工程肌腱以修复严重缺损的肌腱，改善因肌腱缺损导致的功能障碍。     

BMP-12诱导下对骨髓基质干细胞分化潜能及生物学行为影响的实验研究

目的:探讨(MSCs)在BMP-12诱导下向肌腱细胞分化潜能及其生物学行为。方法:将MSCs在含BMP-12的F12培养液中诱导分化后传代培养并与肌腱细胞对比,进行形态学观察、细胞增殖、细胞周期、细胞DNA指数及细胞凋亡检测。通过3H-Proline掺入实验了解对MSCs细胞胶原合成的影响。结果:MSCs细胞呈梭形生长,第2天进入对数增长期,倍增时间为3.2天,而单纯肌腱培养对照组倍增时间3.75天(P>0.05)。MSCs与单纯培养对照组比较3H-Proline掺入值无显著性差异(P>0.05),说明MSCs细胞分泌可分泌胶原。细胞功能向肌腱细胞方向转化。MSCs细胞DNA指数为0.96,增殖指数比对照组高11%,提示MSCs细胞生长速度快,增殖能力强。结论:MSCs在BMP-12诱导下具有向肌腱细胞分化潜能,可作为肌腱组织工程的有效种子细胞应用于组织工程化肌腱的构建。     

动态应变下肌腱细胞三维培养的初步研究

目的：研究三维培养条件下机械应变对肌腱细胞形态，排列，增殖及代谢的影响。方法：采用自行研制的动态应变三维细胞培养装置，将机械应变作用于肌腱细胞－支架材料复合物。结果：机械应变对肌腱细胞分裂，DNA合成和代谢的影响与应变作用的强度，频率，周期及作用时间有关。采用特定的应应（10％伸长，0．2Hz，每小时作用15分钟）作用48小时，加载组肌腱细胞数和3H标记的胸腺嘧啶核苷掺入量都明显高于对照组（P＜0．05），在应变作用下，其细胞形态呈扁平形，沿应变方向延伸，机械应变还引起1型胶原合成增加（P＜0．05），结论：周期性机械应变直接作用于肌腱细胞可以刺激其生长，这对于应用机械应变促进组织工程化肌腱的构建具有重要应用价值。     

屈肌腱的愈合及其影响因素

过去认为肌腱无自身愈合能力,肌腱修复必须依靠周围新生肉芽组织和细胞的长入才能愈合,游离肌腱移植的结局也是为纤维结缔组织所取代,即所谓的外源性愈合理论。近十余年来,许多体外和体内实验发现,肌腱在愈合过程中腱内膜和腱外膜细胞可增殖、移动,并能吞噬旧胶原合成新胶原连接肌腱断端,在没有粘连的情况下发生了愈合,因此提出了肌腱的内源性愈合理论。 目前多数学者同意肌腱的内源性和外源性愈合过程均     

肌腱修复愈合影响因素的研究

肌腱损伤修复愈合的质量,直接影响患者功能恢复的程度.肌腱是连接肌肉和骨骼的组织,肌肉收缩将力量由肌腱传递到骨骼,最终产生动作.肌腱修复愈合的关键是肌腱本身是否具有愈合能力,因此在其愈合方面长期以来存在着外源性愈合与内源性愈合的争议.早在1953年,Back就认为肌腱细胞是静止细胞,肌腱的愈合是由损伤肌腱附近的周围组织长入肉芽组织,在成纤维细胞和炎症细胞的参与下完成.但20世纪80年代Lundborg等在对滑液在肌腱修复过程中的营养作用的研究中,在无血供的情况下,发现肌腱缝合创面表面浅层细胞愈合,说明了肌腱细胞具有潜在的愈合能力.但究竟哪种机制在肌腱的愈合过程中占优势,迄今仍然不是很清楚,现将肌腱修复愈合的影响因素的研究进展综述如下.     

构建应用于生物学研究的组织工程肌腱

目的：构建应用于生物学研究的组织工程肌腱,为体外研究中检测胶原纤维的形态结构提供可行的方法手段。方法：培养大鼠肌腱细胞,构建无支架的组织工程肌腱,并检测其光镜结构和电镜结构。结果：构建的组织工程肌腱表面光滑,结构紧密,细胞生存良好,细胞外基质分泌丰富。具有波浪形的胶原纤维,胶原纤维排列规则,直径大小相对均一,但小于正常肌腱纤维直径。结论：本研究构建的组织工程肌腱不含支架材料,结构与损伤肌腱类似,可以检测多种生物学指标,适于肌腱损伤修复的体外研究。     

肌腱修复的组织工程研究进展

对于肌腱缺损,传统的手术方法虽然可以减轻患者的痛苦,但是其功能重建并不乐观。随着肌腱组织工程的发展,用工程化肌腱来修复肌腱缺损正在成为一个新兴的治疗方法。目前,组织工程肌腱的研究涉及种子细胞、支架、生长因子和改进策略等各方面。组织工程化肌腱临床应用的关键是如何模拟体内环境,在体外成功构建肌腱组织。因此,在体外模拟体内环境进行组织工程的构建是未来的研究方向之一。     

骨髓间质干细胞体外预构组织工程化肌腱的实验研究

目的 探讨骨髓间质干细胞与胶原-聚羟基乙酸的细胞相容性，为构建组织工程化肌腱寻求理想方法。方法 以贴壁法分离、培养骨髓间质干细胞，并检测CD44。在实验组中将骨髓间质干细胞置入含胶原-聚羟基乙酸的DMEM培基中培养；在对照组中将骨髓间质干细胞置入DMEM培基中培养。通过MTT方法比较两组的细胞活性和生长情况，并对实验组进行超微观察。以骨髓间质干细胞为种子细胞，以胶原-聚羟基乙酸为支架在体外预构组织工程化肌腱。结果 以贴壁法原代培养骨髓间质干细胞，11天细胞即汇合成片，检测CD44示阳性。骨髓间质干细胞接种于胶原一聚羟基乙酸中混合培养后14天生长良好，始终保持89％VA上的细胞活力，与对照组比较无显著差别；实验组细胞数未发生明显改变．而对照组从第4天开始即发生增殖。透射电镜示实验组细胞培养14天后仍保持旺盛的分泌功能。体外预构的组织工程化肌腱具有良好的形态，细胞伸展成梭形，沿聚羟基乙酸缝线大致平行排列。结论 骨髓间质干细胞与胶原-聚羟基乙酸的细胞相容性好。以骨髓间质干细胞为种子细胞，以胶原-聚羟基乙酸为支架可在体外初步预构组织工程化肌腱。     

美实现肌睫组织再生肌腱损伤冶愈有望

肌腱损伤常常导致运动员提前结束职业生涯。美国南加州大学牙科学院施松涛（音译）研究员领导的科研小组在成人肌腱内发现一个具有增生和自我更新能力，拥有干细胞性质的独特细胞。该小组已能在实验室里分离出这些细胞，并在动物模型中再生出类似肌腱的组织。这项研究结果为治愈因运动过量和外伤引起的肌腱损伤带来了希望。[第一段]     

细胞生长因子在肌腱修复中作用的研究进展

近年研究发现,在肌腱损伤修复过程中一些细胞生长因子起着极其重要的作用。通过对细胞生长因子合理调控有望成为一种促进肌腱愈合,减少肌腱粘连的新方法。随着细胞生物学、分子生物学、基因学、组织工程学等学科研究的不断深入,对这方面的研究有了更高更深的认识。现就有关细胞生长因子在肌腱损伤修复中作用的研究简要综述。     

兔骨髓间充质干细胞体外分离培养研究近况

骨髓间充质干细胞(bone marrow stroma cell,BMSC)是20世纪80年代初人们通过骨髓培养发现的中胚层发育的早期细胞,具有强大的增殖能力和多向分化潜能,可在一定的环境和条件下分化为多种造血以外的组织,特别是中胚层来源组织的细胞如成骨细胞,成软骨细胞,成脂细胞,成肌腱细胞等,并可在体外表达多种外源目的基因[1,2]。这些特性使得BMSC可以作为种子细胞用于组织工程和基因治疗的研究。但是如何成功地从骨髓中提取、分离、培养BMSC却是一个很关键的问题。近几年来有不少学者从兔的四肢骨中提取BMSC进行体外分离培养,现将他们的实验方法…     

生长因子在人肌腱细胞和皮肤成纤维细胞中的表达差异

目的 对几种重要的生长因子在正常人体皮肤、肌腱中的表达差异进行研究。方法 体外培养人肌腱细胞和人皮肤成纤维细胞，观察细胞的形态特点；用基因芯片、免疫组化、免疫细胞化学、RT-PCR的方法对肌腱细胞和成纤维细胞的几种生长因子进行检测及比较。结果 所测生长因子中除转化生长因子-βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)、类胰岛素生长因子-结合蛋白3(IGF-BP3)外，其余在肌腱细胞和成纤维细胞中的表达均无明显的差异。结论 人成纤维细胞与人肌腱细胞的生长因子表达基本相似，通过对皮肤成纤维细胞的某些特性的改造，可以使其成为构建组织工程化肌腱的种子细胞。     

动态应变下肌腱细胞三维培养的初步研究

目的　研究三维培养条件下机械应变对肌腱细胞形态、排列、增殖及代谢的影响。方法　采用自行研制的动态应变三维细胞培养装置 ,将机械应变作用于肌腱细胞 -支架材料复合物。结果　机械应变对肌腱细胞分裂、DNA合成和代谢的影响与应变作用的强度、频率、周期及作用时间有关。采用特定的应变 (10 %伸长、0 .2Hz、每小时作用 15分钟 )作用 48小时 ,加载组肌腱细胞数和 3H标记的胸腺嘧啶核苷掺入量都明显高于对照组(P<0 .0 5 ) ;在应变作用下 ,其细胞形态呈扁平形 ,沿应变方向延伸 ;机械应变还引起 型胶原合成增加 (P<0 .0 5 )。结论　周期性机械应变直接作用于肌腱细胞可以刺激其生长 ,这对于应用机械应变促进组织工程化肌腱的构建具有重要应用价值。     

核心蛋白聚糖对兔肌腱细胞增殖及细胞周期的影响

目的 观察核心蛋白聚糖(decorin,DCN)对兔肌腱细胞体外增殖和细胞周期的影响,以探讨decorin在肌腱愈合中对肌腱细胞的作用.方法 原代培养兔肌腱细胞,分别加入不同浓度(0.25、1.25、2.5、5μg/ml)的decorin;培养12、24、48 h用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法测定细胞增殖速度;镜下观察低浓度DCN作用24 h后对兔肌腱细胞增殖的影响;低浓度DCN培养24 h后用流式细胞仪检测细胞周期.结果 0.25、1.25、2.5μg/ml浓度decorin作用12 h后对兔肌腱细胞增殖有着减少的趋势,但是24 h后却明显地促进其增殖(P＜0.05),但是48 h后差异不显著.而5μg/ml浓度组作品12 h对兔肌腱细胞增殖有着增加的趋势,24 h后促进增殖作用显著(P＜0.05),48 h后却抑制兔肌腱细胞的增殖.0.25μg/ml低浓度decorin作用兔肌腱细胞24h后镜下观察和流式细胞分析,细胞增殖明显增强,S期增加,PI明显大于对照组(P＜0.05).结论 低、中浓度decorin对兔肌腱细胞的增殖起着先延迟后促进的作用,提示在肌腱愈合中如果在肌腱和腱鞘之间运用DCN,可能起到早期隔离TGF-β对腱鞘成纤维细胞的作用,而后期增强TGF-β对腱内膜细胞的作用,从而促进内源性愈合,减少外源性愈合,达到减少粘连的效果.     

GDF-5对大鼠肌腱细胞及腱鞘滑膜细胞增殖及凋亡的影响

目的 观察生长分化因子-5(GDF-5)对体外培养的大鼠肌腱细胞及腱鞘滑膜细胞增殖的影响,为进一步研究在体内局部添加GDF-5以促进损伤肌腱愈合及改善外源性愈合所致粘连打下基础.方法 MTT法测定不同浓度的GDF-5在体外对肌腱及腱鞘滑膜细胞增殖率的影响;流式细胞仪测定不同浓度的GDF-5在体外对肌腱及腱鞘滑膜细胞凋亡率的影响.结果 GDF-5可以明显促进肌腱细胞的增殖,而对腱鞘滑膜细胞的增殖率的作用较弱.对两种细胞的凋亡无明显影响.结论 添加一定浓度的GDF-5后肌腱细胞增殖率较腱鞘滑膜细胞提高更为明显,而凋亡并未发生改变.     

无滑膜肌腱滑膜化的实验研究及其意义

将家兔和胎儿的鞘外无滑膜肌腱段分别放入膝关节腔内进行在体肌腱培养和体外与滑膜细胞联合培养。结果显示：在体培养的肌腱段表面出现了光滑的，具有滑膜组织形态结构的特征，游离于关节腔内，无粘连发生；体外与滑膜细胞联合培养的胎儿肌腱段表面，被滑膜细胞爬行并覆盖。实验表明：无滑膜肌腱在滑液环境中可向有滑膜肌腱转化，并且可以通过体外培养进行滑膜化改造，使之滑膜化。     

组织工程肌腱种子细胞、支架材料和生长因子的研究进展

组织工程肌腱作为肌腱损伤修复的重要方法,已成为研究热点。本文以"组织工程肌腱、种子细胞、支架材料、生长因子"为主题词,检索CNKI的相关文献。纳入具有原创性、论点论据可靠的实验文章,排除重复性研究,选择符合标准的40篇文献进行分析。对种子细胞的种类、支架材料的选择以及诱导肌腱形成因素进行阐述,促进每个关键点的优化,以利于组织工程肌腱的成熟构建。