水产下杂鱼鳀鱼氮营养价值研究

用水产下杂鱼鱼为原料料进行酶解 ,采用反向高效液相色谱法测定了酶解产物的游离氨基酸和水解氨基酸 ,并用凝胶色谱法对酶解产物的多肽分子量分布进行了测定。发现其总蛋白质为 72 0 5% ,其中游离氨基酸占 15 0 4 % ,其余为多肽分子混合物。必需氨基酸占总氨基酸的 38% ,赖氨酸和牛磺酸含量丰富。酶解产物可望开发成蛋白质补剂或功能食品     

微生物固态发酵和酶解工艺处理棉粕的研究

研究了微生物和蛋白酶共同作用下棉粕中毒性因子和营养成分的变化。在枯草芽孢杆菌GJ00141、酿酒酵母GJ00079和中性蛋白酶等参与的固态发酵和酶解体系中,检测棉粕中游离棉酚、粗蛋白质、酸溶蛋白质、粗纤维、氨基酸组成、益生菌活菌数等指标。结果发现,相比原棉粕,60 h的固态发酵与酶解后,棉粕中游离棉酚含量降低40%以上,酸溶蛋白质提高了108.7%,粗纤维降低约12.7%,枯草芽孢杆菌和酿酒酵母活菌数分别为7.75、7.00 lg(CFU/g),粗蛋白质、氨基酸总量基本没有变化。由此可见,经过发酵和酶解后棉粕的营养价值和饲料品质有所提高。     

剪切乳化预处理对玉米蛋白酶解反应的促进作用

研究了剪切乳化预处理对黑曲霉酸性蛋白酶水解玉米蛋白反应的影响。实验结果表明，在酸性蛋白酶与玉米蛋白粉的质量比为10％，底物浓度为80g／L，反应温度为55℃，水解24h的条件下，当玉米蛋白粉未经高速剪切乳化预处理时，蛋白质溶出率为62．79％，所得的水解产物中分子量小于1000u的寡肽占45％；而当玉米蛋白粉经7000r／min高速剪切乳化预处理1h后，蛋白质溶出率提高到88．47％，所得的水解产物中分子质量小于1000u的寡肽占78％。利用高效液相色谱法测定了玉米蛋白粉酶解产物的氨基酸组成，发现高速剪切乳化预处理能增加水解产物中支链氨基酸的含量，有利于生产高F值寡肽。     

复合蛋白酶水解棉粕制备多肽的工艺优化

为提高棉粕蛋白资源的利用率,考察了复合蛋白酶水解脱酚棉粕制备多肽的工艺。以多肽得率和水解度为评价指标,比较了不同蛋白酶对棉粕蛋白水解能力的差异,确定了以胰蛋白酶与米曲霉蛋白酶按照酶活比3∶1构建的复合蛋白酶作为水解棉粕蛋白的最佳蛋白酶。采用单因素试验及响应面试验对影响棉粕蛋白水解的因素底物蛋白质量浓度、加酶量、p H、酶解温度以及酶解时间进行了分析,并确定了棉粕蛋白水解的最佳工艺条件为:棉粕蛋白质量浓度25 g/L,加酶量5 000 U/g,p H 8. 91,酶解温度50～55℃,酶解时间5. 92 h。在最佳工艺条件下,水解棉粕蛋白的多肽得率可以达到71. 85%。多肽的氨基酸分析结果表明,酶水解制备的多肽能基本保持原棉粕蛋白的氨基酸组成,其氨基酸种类较齐全,8种必需氨基酸含量丰富,营养价值较高。     

碱性蛋白酶水解小麦面筋蛋白制取Gln肽的研究

采用单因素和正交实验研究碱性蛋白酶Alcalase酶解小麦蛋白获得高谷氨酰胺含量肽的优化工艺。使用氨基酸分析仪测定肽中有效谷氨酰胺含量。结果表明：碱性蛋白酶Alcalase水解小麦面筋蛋白的最适条件为pH 8.0，温度 70 ℃，酶浓度 E/S 4％，底物浓度 7％，反应时间 150 min。在此条件下，酶解产物中的有效谷氨酰胺含量为 17.65％，占酶解样品中Glx（Gln与Glu之和，含量22.83％）的 77.31％，三氯乙酸氮溶指数（TCA-NSI）为 77.86％，蛋白含量 76.03％，游离氨基酸含量 2.06％，说明酶解产物的有效Gln含量高，且肽含量高。     

鸡肉蛋白酶解工艺及水解产物成分研究

为了研究鸡肉蛋白的酶解工艺条件,采用复合酶解的方法,研究了酶种类及酶解工艺条件对水解度的影响。结果显示鸡肉蛋白的最佳水解条件:pH为7.0,料液比为1:2,酶解温度为58℃,复合蛋白酶(添加量0.33%)酶解2 h后,不灭酶,加入风味蛋白酶(添加量0.67%)再酶解2 h;并在此酶解条件下,研究测定了鸡肉蛋白酶解液中游离氨基酸成分和含量,以及酶解液中肽分子量分布的情况。酶解液中游离氨基酸种类齐全且含量丰富;酶解液的肽相对分子质量都集中在1000u以下,酶解过程中多肽不断减少,寡肽不断增加;酶解3.5 h后,相对分子质量小于1000 u的小分子肽和氨基酸含量可达99.85%。     

预酶解对玛咖蛋白胃肠消化及免疫调节活性的影响

为探究不同蛋白酶预酶解对玛咖蛋白胃肠消化程度及消化产物免疫调节活性的影响,该研究选用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶以及复合蛋白酶分别对玛咖蛋白进行预酶解,再经模拟胃肠消化得到五组消化产物。利用TNBS法、福林酚法等测定消化产物的得率、水解度、可溶性肽含量及游离氨基酸含量,再以小鼠巨噬细胞RAW 264.7为模型探究消化产物的免疫调节活性。结果表明,经五种蛋白酶的预酶解,玛咖蛋白消化产物的水解度、可溶性肽含量和游离氨基酸含量分别提高了35%、5%~16%及37%~92%,且消化产物促进巨噬细胞分泌TNF-α的作用无明显降低。经菠萝蛋白酶预酶解得到的消化产物的免疫调节活性最高,该消化产物含有15 154条分子量小于3 000 u的肽段;在经活性评分及分子对接预测的与TLR2和TLR4受体存在相互作用最强的10个肽段中,NPYPFFGFSI的免疫调节活性最高;HOMO分析结果表明该肽的活性位点位于酪氨酸上。上述结果表明预酶解可在不影响玛咖蛋白免疫调节活性的条件下提高玛咖蛋白的可消化性。     

液压压榨澳洲坚果粕酶解制备多肽工艺优化

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,分析了其常规营养成分含量与氨基酸组成。采用碱性蛋白酶与中性蛋白酶催化酶解澳洲坚果粕蛋白制备多肽。以水解度为指标,利用单因素试验与正交试验考察了各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响。结果表明：液压压榨澳洲坚果粕中含有32.25%的蛋白质,17 种氨基酸,含量为25.05%。碱性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度影响的主次顺序为：酶解时间＞酶解温度＞加酶量＞酶解pH值＞底物质量浓度,最佳工艺条件为：酶解温度60 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度110 g/L、酶解pH 8.0、加酶量2 400 U/g,在此条件下水解度达到了22.83%。中性蛋白酶各因素影响水解度的主次顺序为：加酶量＞酶解时间＞底物质量浓度＞酶解温度＞酶解pH值,最佳工艺条件为酶解温度55 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度100 g/L、酶解pH 7.0、加酶量3 200 U/g,水解度达到了22.78%。碱性蛋白酶与中性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响均达到了极显著水平（P＜0.01）。在最佳工艺条件下,碱性蛋白酶酶解液压压榨澳洲坚果粕制备多肽的效果优于中性蛋白酶。     

复合酶制备鳕鱼皮梯级胶原肽的初步研究

利用酶工程技术,以鳕鱼皮作为研究对象,研究开发鳕鱼皮梯级胶原肽制品.选取胰蛋白酶和碱性蛋白酶作为试验用酶,通过正交试验方法确定最适水解条件,胰蛋白酶:加酶量2.5%、温度45℃、pH6.5、时间4h;碱性蛋白酶:加酶量4%、温度50℃、pH 8.0、时间3 h.复合酶解的最适条件为:胰蛋白酶和碱性蛋白酶混合水解,加酶量分别为2.5%和4%、温度50℃、pH 8.0、时间4 h,蛋白质水解度26.1%.分离得到两多肤组分UF-1和UF-2,分子量(Mr)范围分别为:UF-1:2000u相似文献   

不同蛋白酶水解高温花生粕和低温花生粕及其水解产物抗氧化活性的对比研究

由于高温花生粕中的花生蛋白在高温压榨过程中高度变性,因此在食品工业中蛋白利用率较低。本研究通过对比高温花生粕和低温花生粕经过不同商业蛋白酶(Alcalase 2.4 L,Neutrase,Papain,Protamex及Flavorzyme 500 MG)水解后水解产物特性的蛋白回收率、水解度、分子量分布及抗氧化活性,确定高温花生粕是否适合采用生物酶解的方式利用其中的蛋白质并筛选合适的蛋白酶。结果表明,高温花生粕经不同蛋白酶水解后,其蛋白质利用率均在60.61~67.86%,与低温花生粕相当;水解度及分子量分布方面,高温花生粕Flavorzyme水解产物的DH最高,高达44.92%,且含有较多的3 ku小分子肽及游离氨基酸;此外,高温花生粕不同酶水解产物的DPPH自由基清除活性均高于低温花生粕,这可能是由于高温花生粕水解产物中含有较多具有供电子的小分子肽、游离氨基酸以及高温压榨过程中生成的美拉德反应产物。     

Effect of Heat Treatment Upon the Chemical Composition of Cottonseed Meal and Upon the Reactivity of Cottonseed Condensed Tannins

The effects of heat treatment on the chemical composition of cottonseed meal (CSM), with or without the addition of cottonseed hulls (containing condensed tannins; CT), and upon reactivity of the CT were studied. Heat was applied in a forced draught oven at 100°C for 2 h. Fluorodinitrobenzene (FDNB)-available lysine, free gossypol, extractable- and bound-CT concentrations, in vitro total nitrogen (N) solubility and the in vitro rumen degradation of the two major seed proteins (52 and 48 kDa) present in cottonseed kernel (which does not contain CT) were determined. The reactivity of CT was assessed by determining N solubility and rumen degradation of cottonseed kernel proteins in the presence or absence of polyethylene glycol (PEG; molecular weight (MW) 3500), which binds and inactivates CT. Heat treatment reduced the concentrations of free gossypol and FDNB-available lysine by small amounts, reduced measurable total CT content by 13%, reduced the solubility of total N, and reduced potential degradability of the 52 and 48 kDa cottonseed storage proteins by mixed rumen microorganisms. Addition of hulls further depressed solubility of total N and ruminal degradation of the two major storage proteins in cottonseed kernel. The action of PEG in vitro indicated that only part of the depression caused by hull addition could be explained by the presence of CT in the hulls, and that the effects of CT upon N solubility and potential degradability in heated CSM were similar to that in unheated CSM. Addition of hulls also substantially reduced FDNB-available lysine. In commercially produced materials, CSM from the Brisbane mill had a lower total CT content, lower N solubility and lower ruminal protein degradation rate than CSM from the Narrabri mill, but a similar level of FDNB-available lysine. Although application of heat inactivated 13% of the total CT, such that it could no longer be extracted and detected with butanol/HCl, it did not seem to change the overall effects produced by CT in reducing N solubility and protein degradation. The effect of hull addition in reducing available lysine has considerable relevance for feeding CSM to monogastric livestock. Interactions involving heat, hulls and CT need to be further studied.     

假丝酵母ZD-3与黑曲霉ZD-8复合固体发酵对棉籽饼脱毒及营养价值的影响研究

研究目的为研究热带假丝酵母ZD-3与黑曲霉ZD-8复合固体发酵对棉籽饼粕脱毒效果、蛋白质营养价值及显微形态结构等的影响。利用热带假丝酵母ZD-3和黑曲霉ZD-8对棉籽饼进行单菌及复合固体发酵，然后测定发酵底物中游离棉酚（FG）、氨基酸含量，体外法测定饲料蛋白质氨基酸消失率，用环境扫描电镜拍摄底物发酵后的显微形态结构变化等。试验结果：复合发酵可极显著（P〈0．01）地降低棉籽饼底物游离棉酚含量，脱毒率为91．64％；棉籽饼底物粗蛋白、总氨基酸、必需氨基酸含量分别提高27．83％、18．15％、19、18％；提高粗蛋白、总氨基酸及必需氨基酸体外消化率分别为20．90％、26．16％、24．47％，赖氨酸和蛋氨酸分别增加20．24％、66．29％。环境扫描电镜图片表明，复合发酵处理棉籽饼底物后，黑曲霉形态结构发生变化，其菌丝变细，未观察到抱子头，只见光秃秃的顶囊。酵母菌形态未发现有明显变化。试验结果表明，复合发酵效果明显优于单菌发酵棉籽饼底物的效果，不但达到棉酚脱毒的目的，而且发酵饲料营养价值显著提高。复合发酵时，热带假丝酵母ZD-3对黑曲霉ZD-8的形态变化有显著影响。     

复合发酵棉籽粕菌种筛选、鉴定及其发酵工艺参数优化研究

通过对发酵棉籽粕效果优良菌株的筛选、鉴定及其复合发酵最适工艺条件的研究,探讨发酵对棉籽粕脱毒效果及粗蛋白(crude protein,CP)含量等的影响.筛选并利用三株发酵效果优良的菌株(两株酵母和一株霉菌)对棉籽粕底物进行发酵,结果表明:与发酵前相比,底物中游离棉酚(free gossypol,FG)含量显著降低(P<0.05),并显著提高了CP含量(P<0.05).经工艺优化试验研究,得到较为理想的发酵工艺条件:底物组成为棉籽粕70%、玉米20%、糖蜜10%,添加3%硫酸铵,底物与水比例为1:0.6,三菌种(S1:S3:S6)接种比例为3:3:2,接种量为5%,自然pH.     

复合发酵棉籽粕营养价值及活性产物分析研究

旨在研究复合固态发酵(两株酵母和一株霉菌)对棉籽粕脱毒效果及营养价值的影响,同时分析测定发酵底物中的活性产物。结果表明:复合发酵可极显著降低棉籽粕底物游离棉酚含量(P0.01),降解率达71.90%;棉籽粕底物粗蛋白、总氨基酸和必需氨基酸含量分别提高28.96%、8.83%、7.58%;发酵54~60 h时底物中蛋白酶活力最高(酸性蛋白酶活力为931.58 U/g,中性蛋白酶活力为1 097.79 U/g,碱性蛋白酶活力为798.62 U/g),纤维素酶活力最高(滤纸酶活力为1 601.66 U/g,Cx酶活力为3 590.02 U/g,C1酶活力为1 685.35 U/g),淀粉酶活力最高为578.05 U/g;同时发酵过程产生了一定量的有机酸。     

Comparison of in vitro digestion characteristics and antioxidant activity of hot- and cold-pressed peanut meals

Due to the poor protein solubility, hot-pressed peanut meal (HPM) has less value than cold-pressed peanut meal (CPM) in the food industry. The objective of this study was to determine whether the denatured proteins in HPM were suitable for hydrolysis by digestive enzymes. The hydrolysis characteristics and antioxidant activity of HPM and CPM during in vitro digestion were compared. The results showed that HPM was hydrolysed more extensively than CPM. There were more free amino acids and small peptides with MW < 5 kDa in HPM hydrolysates. In addition, HPM hydrolysates displayed stronger 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,20-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS) radical-scavenging activities, ORAC value and reducing power than CPM hydrolysates, which could be due to the higher content of small peptides, antioxidative amino acids and melanoidins in HPM hydrolysates. The above results indicated that HPM was a potential source of protein supplement for human consumption.     

榛子粕抗氧化肽的分离纯化及序列分析

为研究榛子粕抗氧化肽的抗氧化性和氨基酸组成的关系,本实验通过中性蛋白酶水解榛子粕蛋白得到榛子粕抗氧化肽,以DPPH自由基清除率为指标,采用超滤分离和葡聚糖凝胶纯化,获得DPPH自由基清除率高的榛子粕抗氧化肽P2,采用超高压液相色谱串联四级杆质谱(LC-MS/MS)测定榛子粕抗氧化肽的氨基酸序列。P2中7个短肽的氨基酸序列分别为His-ILe/Leu-Pro(362 Da)、ILe/Leu-Val-Asp-Glu(475 Da)、Thr-Pro-Pro-His-Lys(588 Da)、His-ILe/Leu-His-Ser-Ala-Thr(662 Da)、Cys-His-Ser-ILe/Leu-Met-ILe/Leu(701 Da)、Thr-His-Ala(327 Da)、Phe-ILe/Leu(279 Da)。由此得出结论,疏水性氨基酸和芳香性氨基酸可以提高榛子粕抗氧化肽的抗氧化性。     

棉籽抗菌活性肽的分离纯化及鉴定

通过体外模拟消化系统对棉籽分离蛋白(cottonseed protein isolate,CPI)进行酶解,得到具有抗菌活性的酶解产物,并采用超滤(ultrafiltration,UF)、阴离子交换色谱(anion exchange chromatography,AEC)、半制备高效液相色谱(semi-preparation high performance liquid chromatography,semi-P-HPLC)分离技术对棉籽抗菌活性肽进行分离纯化,用电喷雾串联质谱(electrospray ionization-tandem mass spectrometry,ESI-MS/MS)鉴定棉籽抗菌肽的氨基酸序列。在抗菌活性肽分离纯化过程中,用UF对具有抗菌活性的CPI酶解产物进行分离,得到3个组分U-Ⅰ~U-Ⅲ。抗菌活性检测表明U-Ⅲ的抗菌能力最强;用AEC分离U-Ⅲ得到3个组分QF-Ⅰ~QF-Ⅲ,其中QF-Ⅱ抗菌能力最强;进一步采用semi-P-HPLC分离QF-Ⅱ得到4个组分PF-Ⅰ~PF-Ⅳ,其中PF-Ⅲ的抗菌能力最强,经HPLC检测为单一峰,ESI-MS/MS检测分析得到该肽的氨基酸序列为ISGLIYEETR(Ile-Ser-Gly-Leu-Ile-Tyr-Glu-Glu-Thr-Arg)。     

棉酚降解菌的筛选、鉴定及棉粕固态发酵效果研究

目的:筛选分离出棉酚降解菌株,研究其生长降解特性和对棉粕中棉酚脱毒效果,为深入研究微生物降解棉酚的机制提供依据。方法:从山东棉花产地采集土壤样本,以醋酸棉酚为唯一碳源,稀释涂布法分离筛选出一株具有棉酚降解能力的菌株,通过16S rRNA基因序列系统发育分析以及生理生化特征对菌株进行初步鉴定,确定菌属。用高效液相色谱测定其对棉酚的降解和棉粕固态发酵脱毒效果。结果:筛选到一株可以降解棉酚的细菌,命名为YL01,初步鉴定为拉乌尔菌属Raoultella sp.。该菌株除利用棉酚外,还可以邻苯二酚、原儿茶酸和对苯醌为唯一碳源生长。YL01在以棉酚为唯一碳源的无机盐液体培养基中生长10 d后,棉酚的降解率为48%;接种该菌株到棉粕中,通过固态发酵,8 d内棉粕中棉酚含量下降43%,蛋白含量增加10%。结论:本研究分离筛选到一株棉酚降解菌Raoultella sp. YL01,为进一步深入研究棉酚的微生物降解机制奠定了基础,其对运用生物处理技术消除棉粕中棉酚具有潜在的应用前景。     

制油工艺对棉籽粕中蛋白结构与功能特性的影响

以亚临界流体萃取法、热榨浸出法、冷榨浸出法所得棉籽饼粕为实验材料,采用超声波辅助碱法提取棉籽蛋白,对其蛋白结构与功能特性进行分析。结果表明：棉籽蛋白的主要亚基分子质量为50、45?kDa且只有一个吸热峰,起始温度、变性温度和焓变范围分别为85.6～87.8、94.3～97.7?℃和5.6～7.9?J/g,热榨浸出粕蛋白二硫键的含量最低并且含有许多低分子质量亚基;亚临界流体萃取粕蛋白和冷榨浸出棉籽粕蛋白的二级结构中有较低的β-折叠含量、较高的α-螺旋和β-转角含量;热榨浸出粕蛋白的变性温度最高。亚临界流体萃取粕蛋白具有较高的吸水性、吸油性、乳化稳定性、起泡性、表面疏水性和荧光强度。冷榨浸出粕蛋白的吸水性、吸油性、表面疏水性和荧光强度高于热榨浸出粕蛋白。亚临界流体萃取法所得棉籽粕的蛋白变性程度最小,更多地保留了棉籽蛋白的天然结构和功能特性。