中药抗体复合制剂防治仔猪腹泻试验

选择待开产未经大肠杆菌免疫来航蛋鸡150只,用ETEC K88+菌株C83907进行免疫后,收集高免蛋制备卵黄抗体粉。将中药提取物、卵黄抗体粉与载体按比例混合制成中药抗体复合制剂。分别选择3日龄和21日龄的杜×长×大三元杂交早期断奶仔猪18只和40只,人工感染C83907大肠杆菌后,口服含制备的中药抗体复合制剂进行被动免疫试验。结果表明:3日龄仔猪服用抗ETEC中药抗体复合制剂后,平均增重接近对照组(p>0.05),仔猪死亡率显著小于对照组(p<0.01)。21日龄服用中药抗体复合制剂组的仔猪增重高于卵黄抗体组(p<0.05)。研究结果表明,喂以6 g和10 g抗ETEC卵黄粉组的治愈率与抗生素治疗组差异不显著(p>0.05),比单一使用纯中药和卵黄抗体使用效果好(p<0.01)。     

口服特异性卵黄抗体对凡纳滨对虾抗WSSV感染的免疫保护效果

为探讨特异性卵黄抗体对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)抗白斑综合征病毒(white spot syndrome virus, WSSV)的免疫保护机制及效果,本研究以添加不同剂量WSSV卵黄抗体制剂(0、0.2%和0.5%)的饲料投喂凡纳滨对虾幼虾,免疫28 d后使用WSSV进行人工感染,测定感染对虾的肝胰腺免疫酶活力和免疫基因表达水平,以及感染后14 d内对虾的存活率。结果显示,WSSV感染3 d后,与未添加卵黄抗体制剂的对照组相比,0.2%免疫组对虾肝胰腺的超氧化物歧化酶(SOD)和酚氧化酶(PO)活力显著升高,酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活力显著降低,热休克蛋白70基因(Hsp70)表达水平显著升高,凝集素基因(lectin)和β-1,3-葡聚糖结合蛋白–脂蛋白基因(β-GBP-HDL)表达水平显著降低;0.5%免疫组对虾肝胰腺的SOD活力显著升高,ACP和AKP活力显著降低,Hsp70基因表达水平显著升高,β-GBP-HDL基因表达水平显著降低。人工感染实验结果显示,WSSV感染14 d后,0.2%和0.5%免疫组对虾的存活率分别为48.89%和87.78%,均显著高于对照组(存活率为0),且0.5%免疫组对虾存活率显著高于0.2%免疫组。特异性卵黄抗体制剂能在一定程度上改变发病的进程,延迟对虾的发病和死亡时间,提高同期存活率。研究表明,口服特异性卵黄抗体制剂可以调节对虾肝胰腺免疫酶活力和免疫基因表达水平,显著提高凡纳滨对虾抗WSSV感染的能力。本研究为卵黄抗体抗WSSV感染机制的研究提供了参考,也为在生产上使用卵黄抗体防控WSSV感染提供了科学依据。     

卵黄抗体对凡纳滨对虾生长、免疫及抗VpAHPND感染的影响

为探讨特异性卵黄抗体抗致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌 (Vibrio parahaemolyticus associated with acute hepatopancreatic necrosis disease, VpAHPND) 感染的效果及其机制,防控对虾急性肝胰腺坏死病 (Acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND),本研究以添加不同剂量VpAHPND卵黄抗体制剂 (0、0.2%和0.5%) 的饲料投喂凡纳滨对虾幼虾,测定对虾的生长率和存活率、对虾肝胰腺免疫酶活力和免疫基因相对表达水平,通过浸浴感染实验测定免疫对虾抗VpAHPND感染的能力。生长实验结果显示,免疫28 d后,免疫组与未添加卵黄抗体制剂的对照组对虾在平均生长率、特定生长率和存活率方面均无显著性差异。免疫功能实验结果显示,免疫14 d后,与对照组相比,0.2%免疫组对虾肝胰腺的酚氧化酶 (PO)、超氧化物歧化酶 (SOD)、溶菌酶 (LZM) 活力显著升高,抗菌肽 (Crustin) 基因的相对表达水平也显著升高,而β-1,3-葡聚糖结合蛋白-脂蛋白 (β-GBP-HDL) 基因的相对表达水平则显著降低。浸浴感染实验结果显示,0.2%免疫组对虾的存活率显著高于对照组;0.2% VpAHPND卵黄抗体制剂对凡纳滨对虾的相对免疫保护率为63.77%。研究表明,口服卵黄抗体不会对凡纳滨对虾的生长和存活产生不良影响,0.2%的VpAHPND卵黄抗体制剂通过提升凡纳滨对虾的PO、SOD、LZM活力和Crustin基因表达水平,增强凡纳滨对虾的免疫功能,从而提高对虾抗VpAHPND感染的能力,具有很强的应用潜力。本研究为使用特异性卵黄抗体防控AHPND提供了依据,也为其作用机制研究提供了参考。     

抗大口黑鲈蛙虹彩病毒卵黄抗体的制备及其间接ELISA检测方法的建立

大口黑鲈(Micropterus salmoides)蛙虹彩病毒(Largemouth bass ranavirus, LMBV)是我国大口黑鲈养殖中的常发病原,主要引起大口黑鲈病毒性溃疡病,制约其养殖业的健康发展。为探究卵黄抗体在防控LMBV中的潜在作用,利用LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡,制备了抗LMBV卵黄抗体;通过筛选捕获物浓度、包被条件和封闭条件,建立了抗LMBV卵黄抗体的间接酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法;使用构建的方法,评估了LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡后卵黄抗体的效价消减规律。结果表明,1‰(φ) β-丙内酯4℃作用72 h可完全灭活LMBV。间接ELISA反应中,每孔包被105 TCID50灭活病毒,37℃孵育2 h后,使用5%(φ)牛血清白蛋白37℃封闭2 h,可有效降低阴性对照组卵黄抗体的背景值;此外,所建立的检测方法与杂交醴弹状病毒卵黄抗体、未免疫的蛋黄提取物和空白细胞不存在交叉反应,特异性较高。LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡约48 d可产生特异性卵黄抗体,免疫后58 d效价升高至峰值(1∶12 800),峰值水平可持续至免疫后128 d。所构建的LMBV卵黄抗体检测方...     

ND-IBD双价卵黄抗体(IgY)的精制与应用

对ND、IBD双价卵黄液通过海藻酸钠-辛酸两步法提取,平均获得卵黄抗体(IgY)9.95mg/mL,平均纯度为77.26%,IBD抗体活性回收率达68.33%,ND抗体活性回收率为42.33%。人工感染IBD、ND试验,治愈率为分别为86.6%和80%以上;临床治疗IBD试验,治愈率为97.2%。本法经济简便,快速,不损害抗体,回收率高,疗效好,也可用于其它IgY抗体的提纯精制,具有较高的推广价值。     

鸡ND-IBD卵黄抗体(IgY)的精制与应用

对ND、IBD双价卵黄液通过海藻酸钠-辛酸两步法提取,平均获得卵黄抗体(IgY)9.95mg/mL,平均纯度为77.26%,IBD抗体活性回收率达68.33%,ND抗体活性回收率为42.33%。人工感染IBD、ND试验,治愈率为分别为86.6%和80%以上;临床治疗IBD试验,治愈率为97.2%。本法经济简便,快速,不损害抗体,回收率高,疗效好,也可用于其它IgY抗体的提纯精制,具有较高的推广价值。     

使用高免蛋黄抗体液的利弊及前景

近些年用于防治鸡病的高免卵黄,是用含有特异性抗体的卵黄加生理盐水稀释后制成的一种粘稠液体,所以称为高免蛋黄抗体液更为确切。在近十多年来,有时用它防治某些禽病并取得了一定的效果,但同时也发现它带来一些不良作用,从总的趋势看,近两年使用的数量和次数逐渐减少。认为对高免蛋黄抗体液的防治效果和使用应有正确的认识和评价。l当前高免蛋黄抗体的应用产蛋母鸡经用特定的抗原反复数次免疫后,体内可产生较高滴度的特异性抗体,并同时储存于卵黄中(蛋从体内排出体外后称蛋黄),其有效成份即称蛋黄抗体或蛋黄免疫球蛋白(IgY),它与哺乳动物…     

抗哈维氏弧菌、溶藻弧菌与副溶血弧菌三联卵黄抗体的制备及体外抑菌效果的研究

为研究三联特异性卵黄抗体对哈维氏弧菌、溶藻弧菌与副溶血弧菌的体外抑菌效果,通过制备哈维氏弧菌、溶藻弧菌与副溶血弧菌三联灭活疫苗,免疫蛋鸡。收集鸡蛋制备卵黄抗体并检测其效价、纯度和特异性。通过免疫荧光、扫描电镜和体外抑菌实验初步探究其制备的三联特异性卵黄抗体对三种弧菌的体外抑菌效果。结果显示,ELISA检测特异性卵黄抗体效价高达1:51200,并维持5周;SDS-PAGE对分离纯化的卵黄抗体分析显示,随着纯化步骤的进行,卵黄抗体中的蛋白杂带逐渐减少,纯度变高。免疫荧光和免疫印迹实验表明,特异性卵黄抗体与抗原的结合具有较高的特异性。扫描电镜进一步观察发现,相比非特异性卵黄抗体,特异性卵黄抗体处理过的弧菌,菌体互相黏附在一起,菌体细胞表面粗糙,细胞壁破损。在体外抑菌实验中,特异性卵黄抗体对弧菌具有明显的抑制效果,且抑制作用呈现剂量依赖性。综上所述,本研究制备的三联特异性卵黄抗体能够与哈维氏弧菌、溶藻弧菌和副溶血弧菌发生特异性结合,通过体外实验发现,卵黄抗体通过凝集和黏附,破坏菌体细胞的完整性,从而发挥抑菌作用。     

精制禽流感高免卵黄抗体的研究

用禽流感油乳剂灭活苗按一定的免疫程序免疫SPF蛋鸡,制备高免卵黄抗体,用改良的水稀释法对IgY进行纯化,经过抗体效价检测、无菌检验、安全试验、动物试验,该卵黄抗体可以用于田间试验。保存期试验证明:精制禽流感高免卵黄抗体室温条件下可保存10个月,4℃条件下保存15个月,-20℃条件下保存18个月。     

卵黄抗体及其在水产养殖病害防治中的研究进展

卵黄抗体(IgY)是一种存在于卵黄中的免疫球蛋白，具有性质稳定、安全高效、绿色环保、不产生耐药性等特点，在水产养殖病害防治领域具有广泛应用前景。文章介绍了卵黄抗体的分子结构、理化性质和作用机制以及卵黄抗体在水产动物疾病防治中的研究现状和应用前景，以期为今后卵黄抗体在水产养殖的基础研究和应用提供参考。     

大口黑鲈弹状病毒的分离培养及其卵黄抗体的制备

本研究从爆发性死亡的大口黑鲈(Micropterus salmoides)鱼苗病样中分离培养1株大口黑鲈弹状病毒(M.salmoides rhabdovirus,MSRV)毒株,采用甲醛灭活大口黑鲈弹状病毒,制备佐剂灭活疫苗,免疫产蛋鸡,收集高免蛋,制备MSRV卵黄抗体,测定其效价、中和效果及对病毒复制和宿主细胞内凝集素基因(intelectin)表达的影响。结果显示,成功利用草鱼(Ctenopharyngodon idellus)卵巢细胞株CO细胞分离培养大口黑鲈鱼弹状病毒,并用于佐剂灭活疫苗的制备;MSRV佐剂灭活疫苗免疫蛋鸡,成功获得MRSV的卵黄抗体,效价为1∶256,稀释度为1∶64时的中和病毒的作用最为明显,中和作用率达38.29%以上,病毒核酸拷贝数明显降低。同时,还可上调细胞内凝集素的表达。研究表明,特异性卵黄抗体对大口黑鲈弹状病毒具有明显的中和效果,为后续卵黄抗体作为免疫制剂的应用奠定了基础。     

抗鲤疱疹Ⅱ型病毒卵黄抗体制备及其功能鉴定

为制备抗鲤疱疹Ⅱ型病毒(CyHV-2)的卵黄抗体,探索防治异育银鲫(Carassius auratus gibelio)鳃出血病的新方法和途径,本研究利用原核表达系统产生具免疫原性的重组CyHV-2-ORF72衣壳蛋白,纯化后免疫蛋鸡;二次免疫后采用间接ELISA法抽检免疫蛋的特异性卵黄抗体(IgY)含量,收集抗体效价...     

利用卵黄监测鳖群中病原菌感染

用从病鳖体内分离的四种病原菌制备诊断抗原, 采用微量凝集试验检测104 份卵黄样品中抗菌卵黄抗体。结果共检出86 份阳性样品, 其中以气单胞菌卵黄抗体阳性样品最多, 阳性检出率为50-96 % 且抗体水平较高, 可达1∶32 。变形杆菌卵黄抗体和不动杆菌卵黄抗体的阳性检出率分别为22-12 % 和9-62 % 。表明鳖场鳖群中有气单胞菌、变形杆菌和不动杆菌感染, 但以气单胞菌感染的范围及强度最高。     

野生水禽高致病性禽流感卵黄抗体监测

为了解野生水禽对高致病性禽流感病毒(AIV)自然被动免疫状况,于2010—2011年,在大庆龙凤湿地分别采集绿头鸭、须浮鸥、黑翅长脚鹬三种野生水禽巢卵150、184和128枚,采用血凝抑制试验检测H5和H7两种AIV的卵黄抗体。结果表明,绿头鸭H5和H7亚型禽流感卵黄抗体的阳性率分别为53.33%和14.67%,平均卵黄抗体滴度分别为4.55和3.45(log2);须浮鸥H5和H7亚型禽流感卵黄抗体的阳性率分别为34.78%和11.96%,平均卵黄抗体滴度分别为3.78和3.18(log2);黑翅长脚鹬H5和H7亚型禽流感卵黄抗体的阳性率分别为31.25%和9.38%,平均卵黄抗体滴度分别为3.85和3.67(log2)。由此可见,野生水禽种群对于高致病性禽流感的接触情况是较为频繁的,提示需要进一步加强对其种群的病毒携带情况进行监测。     

卵黄抗体及其在动物疾病中的应用

卵黄抗体(Egg yolk antibody)又称卵黄免疫球蛋白(Egg yolk immunoglobulin,IgY)指用特定抗原对产蛋禽进行免疫,机体刺激法氏囊B细胞分化成浆细胞,分泌特异性的抗体进入血液,血液流经卵巢时特异性抗体主要是IgY在卵细胞中逐渐累积,为胚胎和幼雏提供被动免疫保护。卵黄抗体效价稳定、提取工艺简单方便、成本低、安全高效,在动物疾病防治中有广阔的应用前景。     

相关链接 卵黄抗体添加剂及其应用

Williams等(1962)发现用某种抗原免疫产蛋母鸡,鸡血清中可产生相应抗体,产蛋母鸡又能以产蛋方式将血清免疫球蛋白有效地转移到卵黄中(Rose和Orlans,1981).鸡血液中能转移到卵黄中的免疫球蛋白只有免疫球蛋白G(IgG),至今尚未发现卵黄中存在免疫球蛋白A和M(IgA和IgM)(胡清林等,1997).因此卵黄中的IgG又称为卵黄抗体或卵黄免疫球蛋白(简称1gG)(Leslie和Clem,1969).与哺乳动物的免疫球蛋白相比,鸡蛋的卵黄抗体具有取材方便、提取方法比较简单、产量高等优点.     

刺参饲料中添加免疫球蛋白的研究

卵黄免疫球蛋白（Immunoglobulin of Yolk,IgV）,又称卵黄抗体。当用特定抗原免疫产蛋母鸡后,鸡血清可产生大量相应的特异性多隆抗体IgY,并迅速转移和积累（15天左右）于卵黄。IgY分子结构独特,性质稳定,功能多样。目前被广泛应用于生化检测、免疫检测以及食品（主要是婴儿食品）和化妆品等领域。     

卵黄抗体添加剂对肉鸭血清甲状腺素及IGF-Ⅰ水平的影响

为探讨卵黄抗体促进肉鸭生长的作用机理,通过在7～49日龄肉鸭日粮中添加0.1%的卵黄抗体,采用放射免疫分析法测定血清中甲状腺素及IGF-I含量。结果表明:肉鸭日粮中添加卵黄抗体可使肉鸭血清T3、T4、IGF-I含量升高。T3、T4、IGF-I含量分别较对照组提高24.49%(P<0.05)、3.69%(P<0.10)和38.97%(P<0.05)。血清T3、T4以及IGF-I含量变化对卵黄抗体促进肉鸭新陈代谢、提高生产性能有一定的作用。     

犬细小病毒病的防治

<正>犬细小病毒病(Canine parvo virus infection),又称犬细小病毒性肠炎或传染性出血性肠炎,为犬的一种由犬细小病毒(Canine parvo virus,CPV)引起的一种急性、烈性、高度接触性和高致死性传染病。该病具有感染率高、发病急、病程短、治愈率低、死亡率高等特点【1】。自2009年12月至2010年5月,笔者在西宁某宠物医院实习期间收治出现犬细小病毒病症状的宠物犬57例,经临床症状、流行病学和病理解剖学诊断,结合犬细小病毒抗原快速检测试纸确诊后,采取一系列综合防治措施,取得了良好的效果,共治愈42例,治愈率为73.7%。现将笔者对本病的防制体会总结如下,供参考。1病原特性CPV(犬细小病毒)是一种单链DNA基因组无囊膜病毒,是引起犬患传染性出血性肠炎的原因【1】。CPV是     

鸡抗鸭源大肠杆菌卵黄抗体的研制

用鸭源大肠杆菌125号菌株制成的灭活油佐剂苗、蜂胶苗及无佐剂菌苗作为免疫原,免疫经产蛋鸡,定期收集鸡蛋,用氯仿提取卵黄抗体,采用试管凝集法检测抗体效价。结果表明:油佐剂灭活苗的抗体维持时间较长,在免疫后60d还能保持较高水平,其峰值达到1∶24。蜂胶灭活疫苗的抗体产生速度比较快,消失也较快,其峰值达到1∶12,40d后抗体基本上消失。不加佐剂的灭活菌苗抗体产生速度较快,10d达到峰值1∶16,然后呈逐渐下降趋势,免疫40d后波动较小。结果,油佐剂灭活菌苗免疫后产生的抗体效价及持续时间高于无佐剂灭活苗和蜂胶苗的抗体效价。