乳腺浸润性导管癌细胞形态结构的定量分析

目的 探讨乳腺浸润性导管癌晚期癌细胞形态结构的定量差异.方法 用体视学方法对10例晚期乳腺浸润性导管癌癌细胞、细胞核、核仁的17个形态参数进行测试分析.结果 癌细胞与正常细胞比较,有7个参数有高度显著差异和显著差异.其中核仁体密度Vv4、细胞比表面Sc、核平均截面积An、核仁平均截面积Au、核平均周长Bn、核仁平均周长Bu有高度显著差异;癌细胞的核仁与核的体积之比Vv有显著差异.结论 乳腺浸润性导管晚期癌细胞核7个形态参数发生变异,为进一步定量研究晚期癌细胞形态结构的差异奠定了一定的基础.     

喉良性及恶性病变的Ag－NORs定量研究

对５５例喉良性及恶性病变组织进行了Ａｇ－ＮＯＲｓ染色。结果表明喉癌组癌细胞内Ａｇ－ＮＯＲｓ颗粒形态、大小不等，散布于细胞核内，均值为３．２９±０．６３；非典型增生组上皮细胞内Ａｇ－ＮＯＲｓ颗粒大小不同，部分散在于核内，均值为２．１１±０．３４；　喉乳头状瘤细胞Ａｇ－ＮＯＲｓ颗粒大小均匀，多数位于核仁内，均值为１．７２±０．１７。经统计学处理，３组间均有显著差异（均Ｐ＜０．０１），提示Ａｇ－ＮＯＲｓ计数对喉良、恶性肿瘤的鉴别，检测癌前病变及观察肿瘤生物学行为均有意义。     

喉良性及恶性病变的Ag－NORs定量研究

对５５例喉良性及恶性病变组织进行了Ａｇ－ＮＯＲｓ染色。结果表明喉癌组癌细胞内Ａｇ－ＮＯＲｓ颗粒形态、大小不等，散布于细胞核内，均值为３．２９±０．６３；非典型增生组上皮细胞内Ａｇ－ＮＯＲｓ颗粒大小不同，部分散在于核内，均值为２．１１±０．３４；　喉乳头状瘤细胞Ａｇ－ＮＯＲｓ颗粒大小均匀，多数位于核仁内，均值为１．７２±０．１７。经统计学处理，３组间均有显著差异（均Ｐ＜０．０１），提示Ａｇ－ＮＯＲｓ计数对喉良、恶性肿瘤的鉴别，检测癌前病变及观察肿瘤生物学行为均有意义。     

使用抗精神病药物患者的淋巴细胞银染核仁组织者区的研究

本文应用银染核仁组织者区（Ａｇ－ＮＯＲ）技术，对４０例较长期使用抗精神病药物的精神分裂症患者和２０例正常人的外周血淋巴细胞的Ａｇ－ＮＯＲ数目进行比较研究。发现１～５年病程（Ⅰ组）Ａｇ－ＮＯＲ数目为６．１８±０．１５／细胞１６～１０年病程组（Ⅱ组）为６．１１０．１３／细胞；正常对照组为６．２１±０．１７／细胞。经统计学分析表明，Ⅰ０、Ⅱ组与正常对照组的Ａｇ－ＮＯＲ平均出现率无显著性差异，说明长期使用抗精神病药物对ｒＲＮＡ基因的活性无抑制作用。     

淋巴结印片的AgNoRs形态计量分析

对８２例各种癌根治标本的淋巴结印片进行ＡｇＮｏＲｓ染色，观察ＡｇＮｏＲｓ颗粒数及其分布形态。结果癌细胞核内ＡｇＮｏＲｓ平均值为４．２３±１．３４，显著高于正常淋巴结内细胞核的ＡｇＮｏＲｓ平均值１．３２±０．１７（Ｐ＜０．０１）；癌细胞的ＡｇＮｏＲｓ分布形态有弥散型、聚合型、核仁型、混合型，正常淋巴结内细胞的ＡｇＮｏＲｓ分布形态均为孤立型。作者提议：ＡｇＮｏＲｓ染色作为细胞学涂片常规染色之一，ＡｇＮｏＲｓ颗粒数及分布形态特点均可作为诊断癌细胞的参考。     

人肝细胞癌与癌旁肝细胞增殖活性的定量研究

采用增殖细胞核抗原免疫组化标记与图像分析技术，对３０例人体肝细胞癌与癌旁近癌肝细胞的增殖活性进行了定量研究。结果显示（１）癌与癌旁近癌肝细胞ＰＣＮＡ阳性平均标记率分别为４５．２２％±１７．９０％和１２．７４％±４．８９％（Ｐ＜０．０１），随肝癌分级升高，ＰＣＮＡ标记率有升高的趋势。（２）４０％以上肝癌细胞的ＰＣＮＡ相对含量与癌旁肝细胞ＰＣＮＡ平均含量相似，结合病理形态分析，认为癌细胞ＰＣＮＡ含量增     

ＮＡＮＯＧ基因在侧群表型干细胞样肝癌细胞中的表达及意义

摘要：【目的】基于侧群（ＳＰ）细胞分选方法,从肝癌细胞Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ中分选ＳＰ表型干细胞样肝癌细胞,观察干细胞标记物ＮＡＮＯＧ基因在该ＳＰ表型肝癌细胞中的表达。【方法】采用流式细胞术检测和分选肝癌细胞Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ中的ＳＰ细胞和非侧群（ＮＳＰ）细胞,细胞生长曲线法检测ＳＰ和ＮＳＰ细胞的增殖能力,Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ侵袭实验检测ＳＰ和ＮＳＰ细胞的侵袭能力,ＭＴＴ法检测ＳＰ和ＮＳＰ细胞对５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）和阿霉素（ＤＯＸ）的药物敏感性;Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅＰＣＲ和ＷＢ检测ＳＰ与ＮＳＰ细胞中ＮＡＮＯＧ基因的表达。【结果】肝癌细胞Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ中分选的ＳＰ细胞比例分别为（５．３±０．８）％和（１３．４９±１．０）％。生长曲线表明Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ的ＳＰ细胞的增殖速度快于ＮＳＰ细胞（Ｐ＜０．０５）,体外侵袭实验结果显示Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ的ＳＰ细胞体外侵袭能力高于ＮＳＰ细胞（Ｐ＜０．０５）,ＭＴＴ结果显示Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３ＢＳＰ细胞对５－ＦＵ和ＤＯＸ有耐药性,高于ＮＳＰ细胞（Ｐ＜０．０５）。Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３ＢＳＰ细胞ＮＡＮＯＧｍＲＮＡ平均表达水平分别是ＮＳＰ细胞的４．１７和５．５１倍（Ｐ＜０．０５）,ＮＡＮＯＧ蛋白平均表达水平分别是ＮＳＰ细胞的３．７８和５．０１倍（Ｐ＜０．０５）。【结论】肝癌细胞Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ中分选的ＳＰ细胞符合肿瘤干细胞的部分生物学特征,ＮＡＮＯＧ基因在ＳＰ表型干细胞样肝癌细胞中高表达。     

正常妊娠和妊娠高血压综合征妇女血浆一氧化氮及内皮素水平的变化

目的探讨一氧化氮（ＮＯ）、内皮素１（ＥＴ１）在正常妊娠及妊娠高血压综合征（简称妊高征）中的作用。方法应用Ｇｒｉｅｓ法及放射免疫法对６０例妊高征患者（妊高征组）、４５例正常妊娠妇女和１５例正常非孕妇女（对照组）的血浆及新生儿脐静脉血中ＮＯ代谢产物亚硝酸盐／硝酸盐（ＮＯ－２／Ｎ－Ｏ３）及ＥＴ１水平进行检测。结果正常妊娠妇女血浆ＮＯ－２／ＮＯ－３明显高于对照组（Ｐ＜００１），而在孕中期增高最明显；妊高征患者血浆ＮＯ－２／ＮＯ－３明显低于正常孕晚期妇女（Ｐ＜００１）和对照组（Ｐ＜００５），ＮＯ－２／ＮＯ－３水平随妊高征病情的进展逐渐下降，与平均动脉压呈负相关（Ｐ＜００１）；重度妊高征患者脐静脉血ＮＯ－２／ＮＯ－３明显低于正常晚孕妇女（Ｐ＜００１）及轻、中度妊高征患者（Ｐ＜００５）。妊高征患者血浆ＥＴ１明显高于正常晚孕妇女及对照组（Ｐ＜００１），与病情严重程度呈正相关（Ｐ＜００５），与平均动脉压无明显相关（Ｐ＞００５）；脐血ＥＴ１水平各组差异无显著意义。母血ＮＯ－２／ＮＯ－３水平与ＥＴ１水平无明显相关（Ｐ＞００５）。结论妊高征的发病可能与ＮＯ合成、释放减少及ＥＴ１合成、释放增加有关。     

乳腺导管上皮不典型增生细胞核DNA含量与细胞形态的相关研究

目的 研究乳腺导管上皮不典型增生细胞核ＤＮＡ含量与细胞形态学参数的关系。方法 应用图像分析系统对１７例正常乳腺、３６例乳腺导管上皮不典型增生及４５例浸润性导管癌细胞ＤＮＡ含量及形态参数进行测量。结果 在正常组、不典型增生组及癌组,细胞核ＤＮＡ含量、ＤＮＡ指数、核面积、核周长、核平均直径以及形态因子差异均有显著性（Ｐ〈０．０５）。细胞核ＤＮＡ含量与核面积呈正相关（ｒｓ＝０．５４,Ｐ〈０．０１）。结论     

肾细胞癌细胞Ag－NORs的测定及图象分析

应用图象分析术及核仁组成区银染技术，对５０例肾细胞病细胞核进行了多项参数测定和核仁组成区嗜银蛋白（Ａｇ－ＮＯＲｓ）检测．结果表明，肾癌的各项参数和Ａｇ－ＮＯＲｓ数量与病理分级、临床分期、细胞类型及预后密切相关；特别是ＤＮＡ含量、核面积、核直径及Ａｇ－ＮＯＲｓ数量随病理分级或临床分期的上升而明显提高，在存活超过了３年与存活不足３年的病例之间的差异有高度统计意义（Ｐ＜０．０１），说明图象分析参数及Ａｇ－ＮＯＲｓ数量可为肾癌预后的判定提供辅助资料。进一步对肾癌ＤＮＡ含量与Ａｇ－ＮＯＲｓ数量变化行直线相关分析，发现二者呈正相关。     

晚期乳腺癌癌细胞器形态参数的逐步回归分析

用细胞形态计量学方法统计10例病理诊断为女性晚期乳癌单纯癌癌细胞粗面内质网、核糖体的12个超微结构形态参数,并用逐步回归法进行分析得最优回归方程Y=0.222 0.503N6-0.013N7。结果：筛选出区分正常细胞器及癌细胞器的最佳参数是游离核糖体的面密度N6和粗面内质网的比表面N7。结果表明N6,N7的变化程度可能为乳腺癌的预后判断提供一定的定量依据。     

邯郸市猩红热发病率与气象因素之间关系的研究

目的查找适用于研究猩红热发病率和气象因素之间关系的科学方法,探讨邯郸市猩红热发病和气象因素之间的关系。方法收集1972-2010年邯郸市猩红热疫情资料、气象资料和人口资料,采用EpiData 3.0进行＂双重录入＂,用SPSS 17.0统计分析软件建立数据库对数据进行统计分析。结果①气象参数的共线性诊断结果显示,本组气象因子数据容差最小为0.014,方差膨胀因子最大达69.998。②猩红热月发病率的曲线估计方程为y^=1.369-0.230ln（X）。③猩红热和10个气象因素之间均不呈线性关系,猩红热月发病率与月平均风速之间得到曲线拟合方程y^=-0.781＋1.242X-0.58X2＋0.097X3。结论①邯郸市猩红热和10个气象因素之间不适合做直线相关分析和多元回归分析。②邯郸市猩红热月发病率的模型曲线为对数模型曲线。③猩红热月发病率与月平均风速之间呈三次方程曲线关系,月平均风速是影响猩红热月发病率的主要气象因素。     

动脉粥样硬化大鼠弓状核L—脑啡肽免疫反应阳性细胞的变化

使用免疫细胞化学过氧化物酶抗过氧化物酶复合体（ＰＡＰ）法和计算机图象分析技术，对动脉粥样硬化大鼠下丘脑弓状核Ｌ－脑啡肽免疫反应（Ｌ－ＥＮＫ－ｉｒ）阳性细胞的变化进行了半定量研究。结果发现：动脉粥样硬化大鼠下丘脑弓状核Ｌ－ＥＮＫ－ｉｒ阳性细胞数目增加，在单位剖面弓状核内阳性细胞，实验组和对照组分别为４０．５±８．３和３１．０±９．２个。计算机图象分析阳性细胞的积分光密度（ＩＯＤ），实验组和对照组分别为０．１３１４±０．０６７和０．１１０６±０．０３７，经统计学处理，两组之间阳性细胞数和ＩＯＤ都具有显著差异（Ｐ＜０．０５）。该研究从形态学角度提示：弓状核Ｌ－ＥＮＫ－ｉｒ阳性神经元对动脉粥样硬化的形成及调控过程可能有一定影响。     

高内涵筛选结合活细胞实时成像技术分析谷氨酸诱导的小鼠神经瘤母细胞N2a凋亡

 目的  利用高内涵筛选（high-content screening,HCS)技术结合活细胞实时成像技术研究谷氨酸诱导的小鼠神经瘤母细胞N2a凋亡的形态学变化特征。  方法  用HCS技术分析摸索不同浓度谷氨酸诱导的N2a细胞早期凋亡百分比的变化,同时结合活细胞实时成像技术追踪谷氨酸诱导的N2a凋亡的形态学变化特征。  结果  当谷氨酸浓度为750 μg/mL时,发生早期凋亡的N2a细胞比例达到峰值(42.07%)。对同一谷氨酸浓度,随着拍摄追踪时间的增加,凋亡细胞数目逐渐增多,胞核荧光强度的变异系数逐渐增大,胞核面积逐渐缩小,胞核逐渐出现碎片化。  结论  使用HCS结合活细胞实时成像技术能直观清晰地捕捉谷氨酸诱导N2a细胞凋亡的形态学变化特征,是一种体外追踪单一细胞凋亡形态学变化的可靠方法。该方法也可应用于药物对细胞凋亡的促进或抑制作用的形态学变化特征的研究。     

动脉粥样硬化兔弓状核NPY免疫反应阳性神经元的形态学变化

目的观察动脉粥样硬化兔下丘脑弓状核NPY免疫反应阳性神经元的形态变化,为研究神经体液因素在动脉粥样硬化形成中的作用提供形态学依据.方法采用免疫组织化学ABC法和计算机图像分析技术.结果实验组下丘脑弓状核NPY免疫反应阳性神经元体积、数目及积分光密度出现明显改变(P＜0.05).结论下丘脑弓状核NPY免疫反应阳性神经元的形态变化与动脉粥样硬化的形成有关.     

Correlative Analysis on the Relationship between PMI and DNA Degradation of Cell Nucleus in Human Different Tissues

Summary： To determining the postmortem interval （PMI） through quantitative analysis of the DNA degradation of cell nucleus in human brain and spleen by using image analysis technique （IAT）. The brain and spleen tissues from 32 cadavers with known PMI were collected, subjected to cell smear every 1 h within the first 5-36 h after death, stained by Feulgen-Van＇s staining, Three indices reflecting DNA in brain cells （astrocytes） and splenic lymphocytes, including integral optical density （IOD）, average optical density （AOD）, average gray （AG） were measured by employing the mage analysis instrument. The results showed that IOD and AOD declined and AG increased with the prolongation of dead time within 5 36 h. A correlation between the PMI and gray parameters （IOD,AOD and AG） was identified and the corresponding regression equation was obtained. The parameters （IOD, AOD and AG） were proved to be effective quantitative indicators for accurate estimation of PMI within 5-36 h after death.     

瘤细胞核形态测量与星形细胞瘤病理分级关系探讨

目的：探讨瘤细胞核形态测量与星形细胞瘤病理分级关系。方法：应用病理图像分析系统（ＣＭＩＡＳ系列） 对８７ 例星形细胞瘤的细胞核面积、核平均直径及核密度进行测量,按Ⅰ～Ⅳ级分组统计显示。结果：各组瘤细胞核面积、核平均直径的均数和标准差及变异系数按Ⅰ～Ⅳ级顺序依次增大,核密度按Ⅰ～Ⅲ级顺序依次增大,相邻组均数比较有高度显著性差异（ Ｐ＜０．０１）。结论：瘤细胞核的形态测量、核异形性的数字化表达,可作为星形细胞瘤病理分级,特别是分级中用于区分肿瘤高度恶性或低度恶性的重要工具。     

反相高效液相色谱法测定槐定碱滴丸体外溶出度

目的：建立测定槐定碱滴丸中槐定碱溶出度的方法。方法：选用小杯法,以0.1mol/L盐酸为溶出介质,转速为50 r·min-1,用高效液相色谱法测定槐定碱的溶出度,绘制溶出曲线,计算溶出参数T50、Td、m,并用相似因子法进行评价。结果：槐定碱的检测浓度在6.25-100μg·mL-1（r=0.9997）范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系;槐定碱的平均回收率为98.23%（RSD=2.17%）,3批样品溶出度相似。结论：本方法简便、准确、可靠,可用于测定槐定碱滴丸中主要组分的溶出度。     

富含支链复方氨基酸注射液中N-乙酰-L-半胱氨酸的含量测定

目的：采用分光光度法测定富含支链复方氨基酸注射液中N-乙酰-L-半胱氨酸的含量。方法：以4-氯代-7-硝基苯并呋喃的碱性缓冲液(pH=8.3)为显色剂；检测波长为423 nm。结果：N-乙酰-L-半胱氨酸在0．04～0．17 mg／mL质量浓度范围内呈良好线性关系，回归方程为Y=4.725ρ-0.0172(r=0.9999)；平均回收率为100．1％(RSD=1．46％，n=9)。结论：方法简便、快速、准确；适用于质量控制。     

小鼠小肠上皮细胞的体外原代培养

目的探讨小鼠小肠上皮细胞原代培养的原理和方法。方法取胎龄为17~19d的昆明鼠的小肠,通过3种不同的小肠上皮细胞分离方法进行原代培养。结果体外培养出圆形、多角形单层生长,呈"铺路石样",核周可见许多小空泡并且CK18、碱性磷酸酶染色阳性的细胞。结论应用中性蛋白酶Ⅰ和粗胶原酶Ⅺ消化可获满意的上皮细胞分离效果,细胞贴壁良好。小肠上皮在体外的增殖分化有赖于分离的细胞器中干细胞及短暂分裂细胞的多少以及一些间质细胞的存在。