福建药白曲中根霉的分离鉴定及菌株特性分析

采用选择性培养基对福建各地区药白曲中的根霉进行分离纯化,得到6株根霉纯菌株。经菌落形态特征观察以及分子生物学方法鉴定,确定这6株根霉均为米根霉属Rhizopus oryzae strain CBS 112.07。通过糯米基质固态发酵法跟踪测定米根霉产液化酶、糖化酶以及产还原糖和总酸能力,结果显示:6株米根霉的液化力在前5 d呈递增的趋势,其中以菌株M1,M2,M3产液化酶活力最高,并在第5天达到最大值;糖化力则在前5 d内呈现快速上升后保持稳定的趋势,其中以菌株M2,M3,M6产糖化酶活力最高,其糖化力均在第2天达到最大值,三者差异不具有显著性;还原糖产量变化趋势与糖化力相似,其中以M2、M3产还原糖量最高,并与其他菌株之间呈显著差异性;此外,M4产总酸能力最高,可达到1.17%(以乳酸计),其产还原糖量和糖化酶活力最低。M1,M2和M3是可应用于红曲黄酒酿造的优良米根霉菌株。     

酒曲根霉的诱变育种

本试验对根霉RA-1菌株进行NaNO2诱变和紫外线诱变,得到一株低聚糖酶活力较高的菌株,酶活力达到4360(U/g干曲),比出发菌株提高403.7%,液化酶比出发菌株提高到486.2%,达到1953(U/g干曲),糖化酶提高到出发菌株的567.8%,达到2.55×105(U/g干曲),将该菌株进行斜面传代,产酶稳定。     

黄酒生产用纯种根霉的筛选及其产酶条件的优化

该文从5种不同的黄酒生产用酒药中分离出5种根霉,通过比较发现1号根霉产液化酶活力、糖化酶活力、蛋白酶活力较高,并用单因素试验和正交试验优化了1号根霉的产酶条件,得出最佳的产酶条件是:温度31℃、料水比1:1.6、(NH4)2SO4的添加量0.4％.     

孝感凤窝酒曲中根霉的分离及特性研究

采用马丁孟加拉红培养基对孝感凤窝酒曲中的根霉进行分离,得到2株根霉M1和M2。M1和M2的糖化酶活力分别达到2015．48mg/h·g和D2125．61mg／h·g经形态学鉴定,它们分别是黑根霉（Rhizopu nigricans）和米根霉（Rhizopus oryzae）。同时,将这2株根霉分别接入糯米饭中进行发酵,测定酒酿的糖化酶活力、还原糖含量、总酸和总糖,并对酒酿进行了感官评定。     

高活性生淀粉糖化酶菌株F7的鉴定及其酶学性质的研究

对高活性生淀粉糖化酶菌株F7的归属和酶学性质进行了鉴定和探讨,从菌体形态特征和分子生物学特征方面对F7进行了鉴定,从F7的酶活力、酶对生淀粉的吸附力、最佳的作用温度、pH等方面探讨了F7的生淀粉糖化酶性质。结果表明:菌株F7归属藻菌纲(Phycomycetes),毛霉目(Mucorales),毛霉科(Mucoraceae),根霉属(Rhizopus Ehrenberg),米根霉种(Rhizopus oryzae)。其酶不仅对生淀粉吸附力大,消化能力强,而且其兼有的强酸性蛋白酶活力低;该酶作用pH范围是3.3～5.3;作用温度是35～45℃,酶活力稳定,在低温条件下酶液能保存较长时间;该酶对大米生淀粉的吸附率高,糖化能力也强。     

甜酒曲根霉的筛选及发酵特性研究

采用马铃薯琼脂固体培养基(PDA)，对贵阳及江西的地方特色甜酒曲中的根霉分离纯化，得到菌株Rhi-1(贵阳)和Rhi-2（江西）。以优良根霉菌株Q303为对照，探究其发酵性能。结果表明，Q303、Rhi-1(贵阳)和Rhi-2（江西）的糖化酶活力分别为238.6 mg/h·g、243.3 mg/h·g、195.4 mg/h·g，液化酶活力分别为0.237 g/g·h、0.253 g/g·h、0.178 g/g·h,Rhi-1的糖化力和液化力水平都高于Q303，是一株拥有良好发酵性能的菌株。将Rhi-1、Q303制成纯种根霉曲，接入蒸熟的糯米饭中，定时取样，测定不同阶段酒酿糖化酶活力、液化酶活力、总糖及总酸的变化趋势。通过GC-MS分析根霉的发酵产物发现Rhi-1的发酵产物里富含β-苯乙醇和乙偶姻，以及特征物质异己酸乙酯。     

甜酒曲中一株高产淀粉酶根霉的筛选与鉴定

从4种不同的甜酒曲中共分离得到7株霉菌。分别采用平板透明圈法、比色法测定所有菌株的糖化酶活力。筛选到1株高产淀粉酶的根霉菌即3#,糖化酶活力为1972.2 U/g,通过18S rDNA分子生物学鉴定为米根霉(Rhizopus oryzae)。     

太空酒曲中功能菌的生物酶活性研究

从太空酒曲中分离、选育出主要功能菌:根霉SKR_3、黑曲霉SKA_2、米曲霉SKO_3;与原生产中使用的曲药的主要功能菌——根霉SNR_1、黑曲霉SNA_4、米曲霉SNO_2的酶活性进行比较研究。结果表明:SKR_3的糖化酶、液化酶活性均比SNR_3高出两倍以上,SKR_3培养36hr后其糖化酶、液化酶活性达到SNR_1培养72hr后的两倍;SKA_2的糖化酶、液化酶活性比SNA_4的高出三倍,蛋白酶活性高出一至二倍,SKA_2培养48hr后糖化酶、液化酶活性达到SNA_1培养72hr的三倍;SKO_3与SNO_1的糖化酶、液化酶、蛋白酶活性基本无差异。     

太空酒曲中功能菌的生物酶活性研究

从太空酒曲中分离、选育出主要功能菌：根霉SKR3、黑曲霉SKA2、米曲霉SKO3；与原生产中使用的曲药的主要功能菌-根霉SNR1、黑曲霉SNA4、米曲霉SNO2的酶活性进行比较研究。结果表明：SKR3的糖化酶、液化酶活性均比SNR1高出两倍以上，SKR3培养36h后其糖化酶、液化酶活性达到SNR1培养72h后的两倍；SKA2的糖化酶、液化酶活性比SNA4的高出三倍，蛋白酶活性高出一至二倍，SKA2培养48h后糖化酶、液化酶活性达到SNA4培养72h的三倍；SKO3与SNO1的糖化酶、液化酶、蛋白酶活性基本无差异。     

响应面优化药食同源基质制曲工艺及酒体成分分析

以12 种药食同源物质为制曲基质,研究根霉接种量、基质含水量、培曲时间和培曲温度对实验曲糖化酶和液化酶活力的影响。在单因素试验基础上,采用Box-Behnken试验设计原理,以糖化酶活力为响应值,对制曲工艺条件进行优化。结果表明,最佳工艺条件为根霉接种量0.3%、培曲时间40 h、基质含水量65%和培曲温度28 ℃,在此条件下糖化酶活力预测值为778.65 mg/（g·h）。最佳培曲条件经过3 次验证实验,所得糖化酶活力实测平均值为（779.233±0.577）mg/（g·h）,实测值与预测值较为接近,说明此方案可行。且实验曲糖化酶和液化酶活力分别约为传统曲的1.3 倍和2.8 倍。对传统曲酿造米酒和实验曲酿造米酒的33 种酒体成分进行检测,其两种曲酿酒差异最大的物质分别为异戊醇（10.065、109.394 μg/100 mL）、丁酸乙酯（0.867、187.552 μg/100 mL）、乙酸（135.240、560.939 μg/100 mL）、苯酚（0.156、0.858 μg/100 mL）。综合以上结果,实验曲具有良好的发酵性能,所酿造米酒具有更加丰富的滋味,有较好的开发前景。     

不同类型丝状真菌发酵产酶性能比较及其混菌发酵性能研究

比较了实验室前期从福建红曲黄酒酿造用曲中分离及台湾生物资源研究及保存中心(BCRC)的不同丝状真菌菌株(黑曲霉AN19、黄曲霉AF20、米曲霉AO35、米根霉RO45、黑曲霉BCRC31494、黄曲霉BCRC31654、米曲霉BCRC30222和米根霉BCRC32229)的产酶性能,从中筛选出产液化酶、糖化酶和蛋白酶活力较高的4株菌株:黄曲霉AF20、米根霉RO45、黑曲霉BCRC31494和米曲霉BCRC30222。将此4株丝状真菌菌株分别进行单一和两两混合发酵糯米,研究其产酶及产糖性能。结果表明:接种纯种米根霉RO45到糯米培养基中,测得的液化酶活力和还原糖产量最高,然而整个发酵过程蛋白酶活力始终较低;米根霉RO45与米曲霉BCRC30222混合发酵,不仅保持较高的液化酶活力和还原糖产量,还能够显著提升发酵体系中的蛋白酶活力。本研究结果对于黄酒传统酿造工艺的改进和优良产酶菌株的筛选提供了重要的基础数据。     

甜酒汁液糖分的纸色谱层析

根霉RN-1,根霉RQ-1,根霉RA-1,根霉RS-1是从酒曲中筛选纯化的高糖化力菌株。用该菌株制作甜酒糖分层析结果表明,其糖化产物主要为葡萄糖,不同展开剂以吡啶:正丁醇:水=4:6:3效果最好。     

甜酒汁液糖分分析

根霉RhizopusRN-1,根霉RhizopusRQ-1,根霉RhizopusRA-1,根霉RhizopusRS-1是从酒曲中筛选纯化的优良菌株。用该四菌株制作甜酒,测定了其总糖和还原糖含量和低聚糖值。并对根霉RA-1糖组分进行了Sephadex G-100柱凝胶层析,分离得到四个峰。纸层析结果表明,第一峰为单糖,第四峰为低聚麦芽三糖,不同展开剂以吡啶∶正丁醇∶水=4∶6∶3效果最好。     

Degradation of ochratoxin A and other mycotoxins by Rhizopus isolates

Several filamentous fungi representing the genera Rhizopus and Mucor were examined for their ability to degrade ochratoxin A (OTA), aflatoxin B1, zearalenone and patulin in a liquid medium. While none of the isolates exhibited aflatoxin degrading activity, ochratoxin A, zearalenone and patulin were decomposed by several isolates. Ochratoxin A was successfully degraded by Rhizopus stolonifer, R. microsporus, R. homothallicus and two R. oryzae isolates, and by four unidentified Rhizopus isolates. Kinetics of ochratoxin A detoxification of selected Rhizopus isolates was also examined. Rhizopus isolates were able to degrade more than 95% of ochratoxin A within 16 days. A R. stolonifer isolate could also effectively decompose ochratoxin A on moistened wheat. Further studies are in progress to identify the enzymes and genes responsible for ochratoxin detoxification and to transfer these genes to other Rhizopus isolates or microbes which could be used safely for decontamination of cereal products.     

柠檬皮中柠檬苦素对根霉的抑菌活性和机理

通过测定柠檬皮中柠檬苦素对根霉的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)、孢子萌发抑制率、菌丝萌发抑制率确定其抑菌活性,根据测定各因素对抑菌活性的影响确定抑菌活性的稳定性;并通过扫描电镜观察和测定根霉细胞外碱性磷酸酶(AKP)含量和蛋白质含量,菌丝体的总糖含量,分析柠檬皮中柠檬苦素对根霉的抑菌机理。结果表明:柠檬皮中柠檬苦素对根霉的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)分别为1250、5000 μg/mL;对根霉孢子萌发的抑制效果更强,对孢子萌发和菌丝生长抑制的EC₅₀值分别为918.34和1707.31 μg/mL。柠檬苦素对根霉的抑菌活性不受温度和明胶的影响;pH为4时,抑菌活性最强;Fe3+、Fe2+均能显著(p<0.05)提高柠檬苦素的抑菌活性。柠檬苦素能使根霉的糖、蛋白质、AKP等胞内物质渗出;扫描电镜观察也发现经柠檬苦素处理的根霉孢子凹陷和皱缩严重,且溶出物明显;菌丝出现断裂扭曲、变形、变细。因此,柠檬苦素能破坏根霉的细胞壁和细胞膜的完整性,使胞内物质渗出,菌丝体和孢子变形,从而使根霉生长代谢受到影响。     

根霉酵母麸曲在牛栏山基酒生产中的应用

牛栏山酒厂从清香大曲和酒醅中分离出根霉10株,酿酒酵母12株。经过生化性能测定,筛选出高糖化酶活力根霉2株,高发酵力酵母1株。我们将其培养成麸曲,应用到牛栏山二锅头基酒生产中,所得基酒与普通基酒相比,出酒率明显提高,口味有所改善,表现出口味酸甜,柔和的特点。根霉酵母混合麸曲配合大曲使用使得基酒出酒率,优质酒率得到提高,为提高牛栏山二锅头基酒的产量和质量提供了一个良好的途径。     

高产低聚糖甜酒根霉曲种的最适混合比例的研究

本文研究了RhizopusRN-1,Q303,RhizopusRA-1和RhizopusRQ-1等几种根霉之间的协同作用及其对低聚糖的影响.结果表明上述四种根霉的最适添加量分别为0.17%、0.17%、0.22%、0.12%,培养时间为48h.