胱抑素C在兔血管成形术后再狭窄中对血管外膜的影响

目的探讨兔腹主动脉血管成形术后胱抑素C水平变化对兔腹主动脉再狭窄血管外膜的影响及机制。方法选择新西兰大白兔48只,随机分为损伤组、治疗组(胱抑素C单克隆抗体治疗)、对照组,每组16只。分别于术前和术后8h、1d、1周、3周、6周取外周静脉血,检测血清中胱抑素C水平。术后6周取腹主动脉行HE染色、血管形态计量分析和血管外膜细胞计数;同时行平滑肌肌动蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色,计算PCNA增殖指数。以血管重构指数、外弹力板围绕面积(EELA)、内弹力板围绕面积(IEIA)变化评价血管重构情况,以剩余狭窄率、血管腔面积变化衡量血管狭窄情况。结果与对照组比较,损伤组血管腔面积、EELA、IELA明显增大,血管重构指数为0.871,剩余狭窄率为33.1%。治疗组胱抑素C水平较损伤组明显下降,血管腔面积、EELA、IELA缩小程度较损伤组明显减轻,血管重构指数为0.748,剩余狭窄率为19.7%(P<0.05)。相关分析显示,胱抑素C水平与血管腔面积、新生内膜面积、IELA、EELA及PCNA阳性细胞数呈正相关(P<0.01)。结论兔腹主动脉球囊损伤后血管外膜细胞被激活,发生增殖、表型转化,参与了血管重构及血管再狭窄发生。胱抑素C水平高表达是发生腹主动脉狭窄的独立危险因素。     

维拉帕米对实验兔血管成形术后内膜增殖和血管重塑的影响

目的 :探讨维拉帕米对血管成形术后新生内膜增殖和血管重塑的影响及其机制。方法 :家兔 2 4只 ,随机分为假手术组、对照组和干预组。以球囊导管损伤家兔腹主动脉内膜 ,喂养 4周后 ,对后两组家兔腹主动脉狭窄部位行球囊成形术。其中对照组仅行血管成形术 ,干预组于术前 30min及术后每天给予维拉帕米肌注 [剂量 0 .5mg/ (kg·d) ]。分别于术前 ,术后 4 8h、1周及 4周采静脉血测定 3组家兔血清一氧化氮 (NO)含量。术后 4周处死动物 ,对成形术部位腹主动脉标本作病理形态学检查和免疫组化检查 ,并利用计算机图像分析系统分别测量血管管腔面积、新生内膜面积、内弹力板围绕面积、内膜 /中膜面积 ,计算增殖细胞核抗原 (PCNA)增殖指数(PI)。结果 :血管成形术后血清NO浓度降低 ,但术后 1周和 4周维拉帕米干预组血清NO浓度高于对照组同期水平 ,差异有非常显著性意义 (均 P <0 .0 1)。病理形态学检查示对照组和干预组管腔面积分别为 (6 .4 18±0 .6 5 8)和 (13.4 82± 1.2 0 5 )× 10 4μm2 ;内弹力板围绕面积分别为 (19.719± 1.0 87)和 (2 4 .32 6± 1.4 2 7)× 10 4μm2 。上述指标两组之间比较差异均有非常显著性意义 (均P <0 .0 1)。对照组和干预组新生内膜面积分别为 (13.176± 0 .6 34)和 (10 .195± 0 .5     

猪静脉桥血管重建中平滑肌细胞和成纤维细胞表型转化

目的动态观察静脉桥再狭窄动物模型中血管平滑肌细胞和外膜成纤维细胞表型转化和增殖活性的变化,评价血管平滑肌细胞和外膜成纤维细胞表型转化及增殖迁移对血管重塑的影响。方法建立猪静脉桥再狭窄模型,采用血管病理形态学和免疫组织化学方法,观察术后7、14和30d血管重塑及血管壁中增殖细胞核抗原、平滑肌α肌动蛋白和骨桥蛋白表达变化。结果①术后7d新生内膜形成并逐渐增厚,于术后30d达最大;内弹力板围绕面积于术后7d逐渐减小,术后30d管腔面积最小(P<0.05);重塑指数和外弹力板围绕面积术后7d稍有增大,其后不断减小,术后14～30d明显减小(P<0.05)。②增殖细胞核抗原染色发现,血管外膜成纤维细胞和血管平滑肌细胞增殖指数术后7d显著增加,术后14d增殖细胞核抗原阳性表达达高峰,术后30d回到基线水准。③平滑肌α肌动蛋白染色发现,术后7d中膜阳性面积减少,外膜和内膜中出现阳性表达;术后14d中膜血管平滑肌细胞阳性表达显著减少,外膜成纤维细胞和内膜中阳性表达显著增加;术后30d中膜血管平滑肌细胞阳性表达恢复,外膜阳性表达较术后14d和7d明显减少,内膜阳性表达较术后14d变化不明显。④骨桥蛋白染色发现,术后7d中膜血管平滑肌细胞阳性表达明显;术后14d中膜血管平滑肌细胞阳性表达较术后7d减少,而内膜中血管平滑肌细胞阳性表达显著增加且达高峰;术后30d中膜血管平滑肌细胞有少部分阳性表达,内膜中血管平滑肌细胞阳性表达较术后14d减少;外膜在术后各时间点均呈阴性表达。结论血管平滑肌细胞和成纤维细胞的表型转化和增殖活性改变对血管重塑起重要作用,参与并促进了血管桥再狭窄的发生过程。     

血管成形术后后装机~(192)Ir内照射对后期血管重塑的影响

为评价国产后装机系统用于预防外周血管成形术后再狭窄的效果及可行性,按血管损伤加高脂高胆固醇饲养的标准方法,建立国产小型猪动脉粥样硬化模型.随机选择双侧髂内外动脉血管成形术后部分血管,用国产后装机系统进行192Ir血管内照射,剂量为20～25 Gy.分别于术后12周及24周取材进行组织病理学分析,测量血管重塑指标.结果表明,192Ir放射治疗组血管内膜及中膜面积均小于对照组(P<0.01,P<0.05),残余管腔面积大于对照组(P<0.01),而外弹力板下面积两组无显著差异(P>0.05).提示利用192Ir后装机系统进行血管内放射治疗通过影响后期血管重塑而具有预防再狭窄的作用.     

阿托伐他汀对自发性高血压大鼠去外膜颈动脉内膜增生的影响

目的研究阿托伐他汀对自发性高血压大鼠颈动脉外膜去除后血管内膜增生的影响。方法24只13周龄雄性自发性高血压大鼠去除右侧颈动脉外膜后,随机分为自发性高血压组、阿托伐他汀组和缬沙坦组,每组8只;8只同周龄雄性WKY大鼠作为正常对照组。机械和化学法去除大鼠右侧颈动脉外膜,左侧作假手术对照。4周后,放射免疫法测定血浆及双侧颈动脉血管紧张素Ⅱ浓度,取双侧颈动脉制成光镜标本,病理图像分析系统测定颈动脉管腔横截面积、内弹力层围绕面积、外弹力层围绕面积,评价内膜和中膜增生程度。逆转录聚合酶链反应检测颈动脉血管紧张素转化酶2 mRNA表达,免疫组织化学法检测血管紧张素转换酶2蛋白表达。结果自发性高血压大鼠对照组去外膜侧和外膜完整侧血管内膜增生较正常对照组明显(P<0.01),中膜面积显著增大(P<0.05或P<0.01),去外膜侧内膜增生较外膜完整侧显著(P<0.05);阿托伐他汀组较自发性高血压组内膜增生显著降低(P<0.01)。与外膜完整侧比较,去外膜侧颈动脉血管紧张素Ⅱ浓度显著增高(P<0.01),血管紧张素转化酶2mRNA和蛋白表达明显减弱(P<0.01);与自发性高血压组比较,阿托伐他汀组颈动脉血管紧张素Ⅱ浓度显著降低(P<0.01),血浆血管紧张素Ⅱ浓度、血管紧张素转化酶2 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论阿托伐他汀可显著抑制自发性高血压大鼠颈动脉去外膜后血管内膜增生,其机制可能是通过上调血管局部血管紧张素转化酶2而实现的。     

多沙唑嗪对血管狭窄和血清一氧化氮的影响

目的探讨多沙唑嗪对兔腹主动脉球囊损伤后血管狭窄的影响,及其与血清一氧化氮、血管内膜中膜平滑肌细胞增生的关系。方法23只新西兰兔随机分为正常对照组、球囊损伤组、多沙唑嗪组。正常对照组不予任何方式处理。另两组行腹主动脉球囊损伤术,同时多沙唑嗪组应用多沙唑嗪控释片4mg/d,观察各组血清一氧化氮以及血管损伤处血管狭窄、血管内膜中膜增殖细胞核抗原(PCNA)的变化。结果应用多沙唑嗪4周后多沙唑嗪组血清一氧化氮含量增高,血管损伤处血管内膜、外膜增生减轻,新生内膜面积减少,管腔面积增加,内弹力层和外弹力层包围面积增加,血管内膜中膜PCNA阳性平均灰度降低。结论多沙唑嗪可以抑制球囊损伤后兔腹主动脉血管的狭窄,抑制血管内膜中膜平滑肌细胞增殖,增加血清一氧化氮含量。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠血管成形术后内膜增生及炎症因子表达的影响

目的探讨大鼠血管成形术后,骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对血管新生内膜增生及炎症因子表达的影响。方法制作大鼠颈动脉球囊损伤模型48只,随即分成对照组和BMSCs组,每组24只。标记的BMSCs移植到大鼠,对照组注射等量的PBS液。术后取血管组织行免疫组织化学染色检测核转录因子-κBp65(NF-κBp65)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;HE染色血管组织检测血管形态学变化。术后ELISA检测血清炎症因子的浓度。结果术后14 d,BMSCs组损伤血管局部NF-κBp65、PCNA及α-SMA的表达均较对照组明显减少(P<0.05)。术后28 d,BMSCs组新生内膜面积、新生内膜/中膜面积均较对照组显著减少(P<0.05)。与对照组比较,术后BMSCs组血清TNF-α的浓度明显降低(P<0.01),而IL-10水平显著升高(P<0.01)。结论 BMSCs可发挥免疫调节作用,改善血管炎症反应,抑制血管新生内膜增生。     

自发性高血压大鼠胸主动脉外膜胶原分布及含量的变化

目的自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉外膜胶原分布及含量的变化。 方法天狼猩红染色法观察不同周龄组(4W、8W、24W)大鼠胸主动脉外膜胶原的分布,氯胺T氧化法测定不同周龄组胸主动脉外膜胶原含量,组织块贴片法进行血管外膜成纤维细胞的培养,并采用细胞免疫化学法检测血管外膜成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。 结果大鼠胸主动脉胶原主要分布于血管外膜;自发性高血压大鼠胸主动脉外膜胶原含量在8周、24周高于对照京都种Wistar大鼠(WKY);血管外膜成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫细胞化学染色呈阳性。 结论胸主动脉外膜胶原的沉积可能参与高血压血管重塑过程,血管外膜成纤维细胞可合成Ⅰ、Ⅲ型胶原。     

32P液体球囊血管内照射对血管损伤后管壁基质金属蛋白酶9表达的影响

目的观察血管内液体球囊放射治疗对血管成形术后再狭窄的影响,同时通过观察放射治疗效应探讨放射治疗防止再狭窄发生的可能机制.方法雄性Wistar大鼠72只,体重300～350 g,随机分为两组,胸主动脉经球囊损伤(损伤组),球囊损伤加32P液体球囊血管内照射(照射组,按照射剂量分为20 Gy亚组和28Gy亚组).使用原位杂交方法测定管壁基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA表达;采用免疫组化的方法测定增殖细胞核抗原(PCNA)表达阳性细胞;用计算机图像分析方法观察血管组织形态学的变化,并对原位杂交和免疫组化的结果进行定量分析.结果照射组与损伤组相比第14天外弹力板围绕面积、管腔面积明显增大,且随照射剂量的增加而增大;第1,3,7天管壁MMP-9 mRNA表达率明显降低,降低程度随照射剂量增加而增大.结论32P液体球囊可防止再狭窄的形成,其机制之一可能是通过抑制管壁MMP-9 mRNA表达,从而抑制血管重塑.     

阿托伐他汀对自发性高血压大鼠去外膜颈动脉血管阻力的影响

目的:观察阿托伐他汀对自发性高血压大鼠(SHR)去外膜血管重塑的影响和血管反应性。方法:36只16周龄雄性SHR去除一侧颈动脉外膜后,随机分为3组:阿托伐他汀组、缬沙坦组和对照组,分别灌胃给药4和8周后处死。给药前及给药后每2周测量大鼠安静清醒状态下尾动脉收缩压;给药后第4和8周电磁血流仪测量双侧颈动脉血流量。结果:给药前,各组收缩压差异无统计学意义(P>0.05),给药后第4周,阿托伐他汀组收缩压下降,至第6、8周时[(166.17±7.20)、(159.00±11.21)mmHg]较对照组[(183.50±8.46)mmHg]显著下降(P<0.05,P<0.01);去外膜侧第4周血管阻力指数轻度降低,第8周时略大于正常侧;阿托伐他汀组和缬沙坦组[(4.937±0.359),(3.673±0.161)]均较对照组(5.327±0.371)显著减小(P<0.05,P<0.01)。结论:SHR去外膜后早期血管阻力轻度下降,至后期略有升高,阿托伐他汀可显著降低SHR的血管阻力,包括未去外膜血管。     

雄激素缺乏对雄性大鼠血管内皮细胞的影响

目的:观察雄性大鼠去势后,雄激素缺乏对血管内皮细胞功能和结构的影响。方法:雄性Wistar大鼠20只随机化分为单纯去势组(10只)和假手术组(10只)。8周后,用放射免疫法测定两组大鼠血浆睾酮的浓度,取胸主动脉HE染色后,观察血管内皮细胞的形态变化;采用化学比色法测定血浆一氧化氮(NO)的水平,用ELISA法检测血清内皮素-1(ET-1)的含量。结果:与假手术组相比较,单纯去势组血浆睾酮的浓度及血浆NO的水平均显著降低,分别为[(2.47±0.53)μg/L vs.(0.28±0.07)μg/L和(33.44±8.50)μg/L vs.(21.61±10.51)μg/L,P<0.05];而血浆ET-1的含量则明显升高[(3.84±0.16)μg/L vs.(4.41±0.34)μg/L,P<0.05]。单纯去势组血管平滑肌细胞的排列不整齐,管壁厚薄欠均匀,血管内皮细胞增生。结论:雄性大鼠去势后雄激素缺乏可使大鼠血管内皮受损,释放NO减少以及ET-1增加。     

缬沙坦对血管损伤小鼠血管重构的影响

目的观察缬沙坦对血管损伤小鼠血管壁内膜、中膜的影响。方法8周龄雄性C57BL／6野生型小鼠80只,随机分为手术组（n=20）、治疗组（n=20）、假手术组（n=20）和对照组（n=20）。手术组：行聚乙烯套管包裹股动脉手术,术后开始蒸馏水灌胃治疗（1mL／次,qd）;治疗组：行聚乙烯套管包裹股动脉手术,术后开始缬沙坦灌胃治疗（10mg／kg,qd）;假手术组：游离出股动脉不套管,术后不灌胃;对照组：不手术,不灌胃。于手术后第14天处死小鼠,取各组损伤套管处股动脉（对照组取相应部位股动脉）;采用苏木素-伊红（HE）染色,光镜下观察血管形态学变化,NIH分析软件测量新生血管内膜和中膜的面积。结果各组中膜均无增厚表现,与术前相比差异无统计学意义（P〉0．05）。假手术组及对照组无新生内膜增厚,与实验前相比差异无统计学意义（P〉0．05）;手术组与治疗组内膜均增厚、面积增大,其中手术组内膜面积增厚程度最大,但与治疗组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。手术组与假手术组及对照组相比,内膜面积比较差异统计学意义（P〈0．05）。结论短期应用缬沙坦能一定程度上抑制损伤后血管内膜增厚、抑制血管重构。     

Kallikrein gene delivery inhibits vascular smooth muscle cell growth and neointima formation in the rat artery after balloon angioplasty.

Tissue kallikrein cleaves kininogen substrate to produce vasoactive kinin peptides that have been implicated in the proliferation of vascular smooth muscle cells (VSMCs). To explore potential roles of the kallikrein-kinin system in vascular biology, we evaluated the effects of adenovirus-mediated human kallikrein gene delivery on the growth of primary cultured VSMCs and in balloon-injured rat artery in vivo. Kallikrein gene transfer into cultured rat VSMCs resulted in time-dependent secretion of recombinant human tissue kallikrein and inhibition of cell proliferation. Balloon angioplasty reduced endogenous rat tissue kallikrein mRNA and protein levels at the injured site. In rats that received adenovirus-mediated human kallikrein gene delivery, we observed a 39% reduction in intima/media ratio at the injured vessel after delivery compared with that of rats that received control virus (n=8, P<0.01). Icatibant, a specific bradykinin B(2) receptor antagonist, blocked the protective effect and reversed the intima/media ratio to that of the control rats (n=5, P<0.01). After gene delivery, human kallikrein mRNA was identified at the injured vessel and a 3-fold increase occurred in kininogenase activity. cAMP and cGMP levels in balloon-injured aorta increased significantly at 4, 7, and 14 days after kallikrein gene delivery, but icatibant abolished the increase. These results provide new insights into the role of the vascular kallikrein-kinin system and have significant implications for gene therapy to treat restenosis or atherosclerosis.     

转导C型钠尿肽基因对血管成形术后血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察局部转导C型钠尿肽基因对损伤后血管平滑肌细胞增殖的影响。方法将84只雄性新西兰大白兔随机均分为正常、对照和实验3组。后2组高脂饮食喂养,并以球囊损伤兔髂动脉建立再狭窄模型。对照组局部转导逆转录病毒载体携带的碱性磷酸酶基因;实验组局部转导逆转录病毒载体携带的C型钠尿肽基因。于术后第3天、第1周末、第2周末和第4周末取损伤段动脉进行氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入实验和增殖细胞核抗原免疫组织化学检测,采用计算机图像分析仪测量血管腔面积、内膜厚度、内膜面积、内膜与中膜面积比。结果对照组和实验组在后3天血管内膜面积、内膜厚度、内膜/中膜比值开始逐渐增加,术后2周上述各值显著增加,但实验组上述指标明显低于对照组(后第3天、第1周时P<0.05,后第2周、第4周时P<0.01)。氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入实验发现,术后第3天,对照组和实验组氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入量开始增加,但两组无显著差异(P>0.05);术后第1周,实验组氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入量明显低于对照组(P<0.05),术后4周时,实验组氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入量已降至接近正常水平(P>0.05),而对照组氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入量增加值仍高于正常组(P<0.01)。增殖细胞核抗原免疫组织化学显示对照组髂动脉损伤后2周在内膜层可见大量增殖细胞核抗原阳性细胞,而实验组增殖细胞核抗原阳性细胞表达不显著。结论局部转染C型钠尿肽基因可有效抑制血管成形术后血管平滑肌细胞增殖及内膜增生。     

Expression and function of vascular endothelial growth factor receptors (Flt-1 and Flk-1) in vascular adventitial fibroblasts

Vascular endothelial growth factor receptors (VEGFRs) are previously considered to exist exclusively in endothelial cells. However, little is known if the receptors are expressed in other non-endothelial cells. In this study, we measured activation of two VEGFRs, Flk-1 and Flt-1, and their biological functions in cultured adventitial fibroblasts and injured rat carotid injury arteries induced by balloon angioplasty. Our results indicated that Flt-1, but not Flk-1, existed in adventitial fibroblasts. Angiotensin II increased Flt-1 protein expression in a time- and concentration-dependent manner. Adventitial fibroblast migration stimulated by vascular endothelial growth factor (VEGF) and placental growth factor (PIGF) required Flt-1 expression. The Flt-1-induced adventitial fibroblast migration was blocked by anti-Flt-1 neutralizing antibody and soluble VEGFR1 protein (sFlt-1). However, Flt-1 activation did not enhance cell proliferation. In addition, Flt-1 expression was significantly increased in the neointima and adventitia in injured rat carotid arteries. We concluded that functional expression of Flt-1 in adventitial fibroblasts might be an important mediator in the pathogenesis of vascular remodeling after arterial injury.     

吡哆胺和替米沙坦对大鼠腹主动脉平滑肌细胞增生、凋亡及血清糖基化终末产物的影响

目的 观察应用吡哆胺和替米沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)腹主动脉平滑肌细胞增生、凋亡和血清糖基化终末产物(AGE)、活性氧(SOD)的影响,探讨血管重塑的可能机制.方法 选取22周龄雄性SHR,随机分为高血压对照组(n=12)、替米沙坦组(n=12)、吡哆胺组(n=12)、替米沙坦与吡哆胺联合治疗组(联合治疗组,n=12)和正常对照组(n=12).测定各实验组大鼠的血压,ELISA法检测血清AGE,化学发光法测定一氧化氮(NO)、SOD,免疫组化法测定增殖细胞核抗原和凋亡指数.HE染色观察各组实验动物腹主动脉形态学变化.结果 替米沙坦组和联合治疗组的收缩压均明显低于高血压对照组(P均<0.01),而吡哆胺组无明显改变(P>0.05).替米沙坦组、吡哆胺组和联合治疗组血清NO和SOD水平均显著高于高血压对照组(P均<0.01),而且联合治疗组明显高于两个单药治疗组(P均<0.05).替米沙坦组、吡哆胺组和联合治疗组血清AGE水平均显著低于高血压对照组(P均<0.01),而且联合治疗组明显低于两个单药治疗组(P均<0.05).腹主动脉HE染色形态学观察显示替米沙坦组、吡哆胺组和联合治疗组血管平滑肌细胞的排列、增生,血管壁内膜完整性,弹力板受压和胶原纤维增生情况均明显优于高血压对照组.替米沙坦组、吡哆胺组及联合治疗组增殖细胞核抗原的表达均显著低于高血压对照组(P均<0.01),且联合治疗组更低于各单药干预组(P均<0.05).替米沙坦组、吡哆胺组和联合治疗组细胞凋亡指数均显著高于高血压对照组(P均<0.01),联合治疗组干预后的细胞凋亡指数高于两个单药治疗组(P均<0.05).结论 吡哆胺和替米沙坦可部分协同改善SHR腹主动脉的血管重构,可能与抑制氧化应激和AGE生成,抑制细胞增生核抗原和调节细胞凋亡有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of telmisartan and pyridoxamine on vascular smooth muscle cells (VSMCs) proliferation and apoptosis as well as abdominal aorta vascular remodeling in spontaneously hypertensive rats (SHRs). Methods SHRs randomly received placebo, telmisartan(6 mg*kg-1*d-1), pyridoxamine(200 mg*kg-1*d-1) or telmisartan (6 mg*kg-1*d-1) plus pyridoxamine (200 mg*kg-1*d-1, n=12 each) for 16 weeks. Wistar-Kyoto (WKY, n=12) rats serve as normotensive contro1. The systolic blood pressure (SBP) of rat was measured before and weekly thereafter. The serum advanced glycation end-products (AGEs) were detected by competitive ELISA. The serum super oxide dismutase (SOD) and nitric oxide (NO) were measured. The abdominal aorta were assessed by image analysis in HE stained sections. The VSMCs apoptosis and proliferation in abdominal aorta were detected with in situ end labeling technique and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunohistoehemistry staining respectively. Results SBP were significantly lower in telmisartan and telmisartan plus pyridoxamine therapy group than in placebo treated hypertensive rats while not affected by pyridoxamine (P>0.05). Activity of SOD and NO were significantly higher and AGEs significantly lower in telmisartan, pyridoxamine and combination therapy treated SHRs than in placebo treated hypertensive rats(P<0.01). The elmisartan, pyridoxamine and combination therapy can significantly inhibit the PCNA expression and significantly enhance the apoptosis value in abdominal aorta(P<0.01). The efficacy of combined treatment was significantly higher than telmisartan and pyridoxamine alone(P<0.05). Conclusion Telmisartan and pyridoxamine could attenuate abdominal aorta vascular remodeling via reducing oxidative stress and AGEs production as well as restoring the balance of VSMCs proliferation and apoptosis in SHRs abdominal aorta.     

斑蝥素对大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜增生的影响

目的:通过细胞培养及建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,探讨斑蝥素对血管内皮损伤后新生内膜增生的作用及机制。方法:采用组织块贴壁法体外培养SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC),以脂多糖(LPS)作为刺激因素,选择吡咯烷二硫代氨甲基甲酸盐(PDTC)作为核转录因子(NF-κB)信号通路抑制剂,将VSMC分为对照组、1μg/ml LPS刺激组(LPS组)、LPS刺激后加用5μmol/L斑蝥素组(斑蝥素组)、LPS刺激后加用80μmol/L PDTC处理组(PDTC组)、LPS刺激后加用5μmol/L斑蝥素和80μmol/L PDTC处理组(斑蝥素+PDTC组)共5组;应用伤口愈合实验和Transwell实验检测斑蝥素对VSMC迁移的影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测斑蝥素对NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-p65)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。采用Fogarty(2 F)球囊导管建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,SD大鼠随机分为假手术组、损伤组、斑蝥素(2 mg/kg)组,各组于造模前1周开始腹腔注射给药,连续给药3周,术后14 d取血检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的水平,同时取损伤颈动脉进行苏木精-伊红染色、免疫组织化学法检测MMP-9、NF-κB p65、TNF-α及IL-6的表达。结果:伤口愈合实验和Transwell实验结果显示,LPS组细胞的迁移能力显著增强(P<0.01);与LPS组比较,斑蝥素组、PDTC组、斑蝥素+PDTC组细胞迁移能力均受到抑制(P<0.01),另外与斑蝥素组比较,斑蝥素+PDTC组细胞迁移未见差异(P>0.05)。Western blot结果显示,与对照组比较,LPS组细胞p-p65和MMP-9表达增加,斑蝥素组或PDTC组表达显著降低(P均<0.05);与斑蝥素组比较,斑蝥素+PDTC组中p-p65和MMP-9表达未见差异(P均>0.05)。在大鼠颈动脉球囊损伤模型中,损伤组大鼠血清内TNF-α和IL-6浓度明显升高,斑蝥素组大鼠血清中TNF-α和IL-6浓度较损伤组显著降低(P均<0.05);损伤组大鼠颈动脉内膜增生明显,斑蝥素组较损伤组内膜面积、内膜面积/中膜面积减小(P均<0.05);与损伤组比较,斑蝥素组血管内膜中MMP-9、NF-κB p65、TNF-α和IL-6的表达明显降低(P均<0.05)。结论:斑蝥素对LPS诱导的VSMC的迁移以及对受损大鼠颈总动脉内膜的增生具有显著的抑制作用;其机制主要与抑制NF-κB信号通路介导的炎症反应密切相关。