不同压力高压氧对实验性脑出血大鼠出血灶周围水肿及水通道蛋白4表达的影响

目的:观察不同压力高压氧对实验性脑出血大鼠出血灶周围水肿及水通道蛋白-4(AQP4)表达的影响.方法:应用胶原酶诱导法建立大鼠脑出血模型,将90只雄性脑出血SD大鼠随机分为对照组(18只)、常压氧(1.0ATA)治疗组(18只)和高压氧治疗组(54只),高压氧治疗组再按不同的高压氧治疗压力分为1.8ATA组、2.0ATA组、2.2 ATA组3个亚组,每组18只,按不同治疗压力1次/d,对照组为脑出血模型组,不进行HBO/常压氧治疗,各组分别于第1、3、5天断头取脑,每个时间点各6只.干湿比重法测定脑组织的水含量,免疫组织化学染色法测定AQP4的表达.结果:脑组织水含量:①常压氧治疗组较脑出血对照组减少,于各时间点比较差异均无显著性意义(P＞0.05);②高压氧治疗各组较常压氧组及对照组水肿减轻明显,于第1天时2.0ATA组与常压氧组及对照组比较差异有显著性意义(P＜0.05);于第3、5天时高压氧治疗各组与常压氧组及对照组比较均有显著性意义(P＜0.05),但2.0ATA组较1.8ATA组及2.2ATA组减轻明显(P＜0.05). AQP4表达:①常压氧治疗组较脑出血对照组表达减少,但于各时间点比较差异均无显著性意义(P＞0.05);②高压氧治疗各组较常压氧治疗组及脑出血对照组表达减少,于各时间点比较均有显著性意义(P＜0.05),但于3d、5d时2.0ATA组较1.8ATA组及2.2ATA组表达减少更明显(P＜0.05).结论:HBO治疗可减少出血灶周围脑组织水含量及AQP4表达,其中2.0ATA治疗压力优于1.8ATA及2.2ATA.     

水通道蛋白1、5在肺出血新生大鼠肺组织中的表达

目的研究新生大鼠肺出血发生的过程中水通道蛋白1、5在肺中表达的变化和意义。方法将80只4～5 d龄新生SD大鼠分为4组,对照组1组和实验组3组,对照组为常温常氧6 h;实验组分别为低温缺氧1 h复温供氧2 h、低温缺氧2 h复温供氧2 h和低温缺氧4 h复温供氧2 h,用断头法处死大鼠后开胸取肺做病理切片和免疫组化染色。结果观察到随着低温缺氧时间的延长病理改变可从正常肺组织向着肺水肿、点状肺出血、局灶性肺出血至弥漫性肺出血的方向发展。水通道蛋白1(AQP 1)主要表达于胸膜脏层周围毛细血管内皮细胞腔膜面和基侧膜面以及脏层胸膜的间皮细胞,肺泡Ⅱ型上皮细胞顶膜面也有少量表达,AQP 1还存在于气管腔上皮细胞顶膜面和支气管黏膜下腺上皮细胞。水通道蛋白5(AQP 5)表达于Ⅰ型上皮细胞的顶膜。随着低温缺氧时间的延长,复温供氧后AQP 1在肺毛细血管内皮细胞表达明显下降,这种减少全肺均能观察到,肺泡Ⅰ型上皮细胞AQP 5的表达也一致减少。对应的病理改变为细胞炎症反应,肺水肿、肺泡腔及间质出血。结论 AQP 1、AQP 5与新生大鼠肺出血关系密切,AQP 1、AQP 5可能与肺水肿、肺出血的形成有关。通过调节AQP 1及AQP 5的表达可能预防新生儿肺出血的发生。     

水通道蛋白8对脓毒症大鼠肝细胞线粒体形态的影响

目的 研究脓毒症状态下大鼠肝细胞线粒体形态学的变化及线粒体水通道蛋白8(AQP8)的表达.方法 将24只SD大鼠分成对照组和脓毒症组(每组12只).采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症实验动物模型,用Western印迹法检测大鼠肝细胞线粒体AQP8蛋白的表达,应用RT-PCR技术检测线粒体AQP8 mRNA相对表达量;电镜下观察两组大鼠肝细胞线粒体的超微结构.结果 脓毒症组大鼠肝细胞线粒体出现明显损伤;将对照组肝细胞线粒体AQP8蛋白相对表达水平设为1,则脓毒组AQP8蛋白表达水平为0.61±0.08,较对照组平均减少约39％,差异有统计学意义(P＜0.01);将对照组肝细胞线粒体AQP8 mRNA相对表达量设为1,脓毒组大鼠肝细胞线粒体AQP8 mRNA相对表达量为1.59±0.24,较对照组平均增加约59％,差异也有统计学意义(P＜0.01).结论 脓毒症状态下,肝细胞线粒体出现肿胀、变性,线粒体AQP8蛋白表达下调可能是重要因素之一;由于机体的代偿作用,线粒体AQP8 mRNA的表达是增加的.     

循环骤停大鼠肾集合管水通道蛋白2的表达

目的 探讨循环骤停对肾集合管水通道蛋白2(AQP2)蛋白及基因表达的抑制作用.方法 将40只大鼠随机分为两组,20只大鼠通过窒息法建立循环骤停一复苏模型(复苏组),按自主循环恢复后又分为1 h和3 h亚组;另20只只行机械通气但不建立窒息模型大鼠作为对照组,每组10只.分别于不同时间点取材,检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN).同时取部分肾脏,应用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测AQP2蛋白及基因表达.结果 各组动物复苏时间、SCr、BUN比较差异无统计学意义.复苏后1 h和3 h AQP2蛋白及mRNA表达较对照组相应时间点明显下降(蛋白表达:1 h为38.35±2.08比41.06±1.04,3 h为31.89±1.57比41.45±0.58;mRNA表达:1 h为0.61士0.13比0.87±0.14,3 h为0.54土0.11比0.85±0.12,P均＜0.01),且复苏后3 h AQP2蛋白及mRNA表达较1 h进一步下降(P均＜0.01).结论 循环骤停会导致肾AQP2蛋白、基因表达下调,这一改变早于SCr、BUN改变.     

不同介入时间高压氧治疗对实验性脑出血大鼠出血灶周围水肿及水通道蛋白-4表达的影响

摘要 目的： 观察不同介入时间的高压氧（HBO）治疗对实验性脑出血大鼠出血（ICH）灶周围水肿及水通道蛋白-4（AQP4）表达的影响。 方法： 应用胶原酶诱导法建立大鼠脑出血模型,将185只雄性Wistar大鼠随机分为正常组（5只）、假手术组（60只）、脑出血对照组（60只）和高压氧治疗组（60只）,高压氧治疗组按高压氧介入时间不同分为6h介入组、1d介入组、2d介入组和3d介入组4个亚组,每组15只,再按不同的治疗次数分为高压氧治疗后1d、3d、5d组,每个时间点各5只鼠,高压氧治疗压力2.0ATA,稳压吸氧60min,1次/d,与末次高压氧治疗结束后24h处死。所有大鼠饲养在相同环境中,正常组饲养3d后处死,脑出血对照组与假手术组大鼠不进行任何治疗,参照高压氧治疗组进行分组,并于相应时间点断头取脑,采用干湿比重法测定脑组织的水含量,免疫组化法测定AQP4的表达。 结果： 高压氧治疗组及脑出血对照组大鼠脑组织的水含量均高于正常组及假手术组（P<0.05）;高压氧治疗组较脑出血对照组大鼠脑水含量减少（P<0.05）;高压氧治疗组间比较6h介入组较其他治疗组明显减少（P<0.05）;高压氧治疗组及脑出血对照组大鼠出血灶周围AQP4的表达均高于正常组及假手术组（P<0.05）;高压氧治疗组较脑出血对照组大鼠出血灶周围AQP4表达减少（P<0.05）,高压氧治疗组间比较6h介入组较其他组减少明显（P<0.05）。 结论： HBO治疗可减少出血灶周围脑组织水含量及AQP4表达,介入治疗时间以6h为最优。     

脂多糖诱导大鼠DIC模型水通道蛋白5的表达与肺水肿的关系

目的研究对Wistar大鼠滴注LPS造成DIC后,肺细胞膜表面水通道蛋白5（AQP5）的表达变化与肺水肿的关系。方法清洁级,雄性Wistar大鼠随机分为：对照组（滴注生理盐水组）;实验组（滴注LPS后4h、6h、8h、10h组）。各组取血检测PLT计数、PT、APTT、FIB含量、DD水平;取各组大鼠左肺测量其肺湿／干重比值;取各组肺组织进行HE染色,观察肺组织中微血栓形成情况及组织病理损伤（结合血液学指标与组织病理损伤判断DIC病程）;提取大鼠肺组织细胞总RNA,RT-PCR方法检AQP5mRNA水平的表达。采用SNK—q及直线相关方法对结果进行统计学分析。结果各实验组PLT计数、PT、APTT、FIB含量、DD水平与对照组相比P〈0．01;滴注LPS后6h在肺组织中可见微血栓,滴注LPS后8h、10h肺组织结构紊乱,肺泡中有大量渗出液;滴注LPS后4hAQP5的mRNA表达下调,与对照组相tLP〈0．01;滴注LPS后4h～10h肺湿／干重比值增加。经直线相关分析肺湿／干重比值与AQP5的mRNA呈负直线相关,P〈O．01。结论DIc时肺水肿的程度与肺细胞表面AOP5的表达相关．有望通过调节肺细胞表面AOP5的表达干预DIG时肺水肿的形成或消除。     

肝硬化腹水大鼠水通道蛋白的表达

目的 :探讨肝硬化腹水大鼠模型中水通道蛋白的变化及其作用方法采用改良的CCl4肝硬化腹水大鼠模型 ,通过免疫组织化学及半定量RT -PCR ,检测肾脏 (皮质和髓质 )中水通道蛋白AQP1和AQP2的表达以及脏层腹膜中AQP1的表达 ,并与正常对照组大鼠相比较。结果 :(1)免疫组织化学显示 ,AQP1主要表达在肾脏近曲小管上皮细胞的刷状缘和髓襻降支细段上皮细胞的顶质膜 ,AQP2主要表达在肾脏的远曲小管与集合管 ,肝硬化腹水组与正常组比较 ,皮质、外髓及内髓的AQP1和AQP2的表达均显著增加 (P <0 .0 1)。在两组中 ,AQP1均仅表达在脏层腹膜中若干小血管壁中 ,两组之间无显著差异 (p >0 .0 5 )。 (2 )半定量RT -PCR显示 ,肝硬化腹水组与正常组相比 ,在肾皮质和髓质中 ,AQP1mRNA、AQP2mRNA表达升高 (P <0 .0 1)。AQP1mRNA在两组的脏层腹膜中的表达无显著差异 (p >0 .0 5 )。结论肝硬化伴腹水大鼠模型中肾脏AQP1及AQP2的表达升高 ,与肝硬化腹水情况下水的重吸收增加有关。     

脂氧素A4对肺泡Ⅱ型上皮细胞水通道蛋白1,3,5的影响

目的 探讨脂氧素A4(LipoxirA4,LxA4)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)攻击的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(typeⅡpenumonocyte,AT Ⅱ)水通道蛋白(aquaporin,AQP)1,3,5的影响.方法 每次取SPF级健康SD雄性大鼠,体质量200～250 g一只,对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞进行分离、纯化,鉴定,得到纯度为≥90%的肺泡Ⅱ型上皮细胞,将细胞随机分为:①溶剂对照(乙醇,0.7μL/mL)组;②空白组(无血清的培养基不含任何药物);③LXA4(1×10-7moL/mL)组;④LPS(1μg/mL)组;⑤LPS+LXA4(1μg/mL LPS+1×10-7moL/mL LXA4)组.药物刺激4 h后用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞上AQP1,AQP3和AQP5的mRNA的表达,免疫组织化学方法(IHC)检测肺泡Ⅱ型上皮细胞上AQP1,AQP3和AQP5蛋白的表达.试验重复6次.采用方差分析进行统计学处理.结果 RT-PCR和免疫组织化学法结果显示,用1 μg/mL的LPS刺激肺泡Ⅱ型上皮细胞4 h后ATⅡ上AQP1,AOP3和AQP5的mRNA和蛋白表达较空白组明显减低(P＜0.01),而LPS+LXA4组中ATⅡ上AQP1,AQP3和AQP5的mRNA和蛋白表达较LPS模型组有明显增高(LPS+LXA4,AQP1:0.647±0.132,AQP3:0.900±0.856,AQP5:0.879±0.058;LPS.AQP1:0.297±0.133,AQP3:0.512±0.113,AQP5:0.647±0.110;P＜0.01),且LXA4组中ATⅡ上AQP1,AQP3和AQP5的mRNA和蛋白表达较空白组也有明显增高(LXA4,AQP1:0.539±0.142,AQP3:0.818±0.176,AQP5:0.841±0.066;Blank Control,AQP1:0.518±0.139;AQP3:0.138±0.136,AQP5:0.766±0.066;P＜0.01).结论 大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞上表达有AQP1,AQP3和AQP5,LXA4能促进脂多糖攻击的肺泡Ⅱ型上皮细胞上AQP1,AQP3和AQP5mRNA和蛋白表达上调.     

高原环境中大鼠脑水肿与水通道蛋白4的表达变化

目的:探讨大鼠在模拟5000m高原环境下脑水肿脑组织水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)的表达变化及意义。方法:实验选用Wistar大白鼠56只按随机数字法将大鼠分为正常对照组8只、实验组48只,其中实验组按在模拟高原环境中饲养时间分为饲养4,24,48,72h,2周和4周组,每组8只。在各时相点取大鼠大脑半球组织,测定脑组织含水率,作AQP4免疫组织化学染色和组织原位杂交,用图像分析软件检测AQP4抗体和基因阳性表达相对灰度值,了解AQP4在大鼠大脑的表达变化。结果:饲养4,48,72h组大鼠脑组织含水率明显高于正常对照组(P<0.05～0.01),大鼠在模拟高原环境中饲养2周时含水率逐渐下降,饲养4周组脑组织含水率接近正常对照组。AQP4在脑毛细血管壁及胶质纤维呈阳性表达,正常对照组大鼠AQP4平均相对灰度值(averagerelativegray,ARG)(1.268±0.119)明显低于饲养4h组(1.392±0.098)(t=5.258,P<0.05);饲养24,48和72h组AQP4阳性表达增强,ARG值显著增加(t=2.967～5.652,P<0.01);饲养2周组ARG值有所下降(t=5.239,P<0.05)。AQP4mRNA在胶质细胞核和神经细胞核表达阳性,变化规律与AQP4蛋白变化基本一致,即24,48和72h组阳性细胞数率增加(t=3.045～5.526,P<0.01),阳性染色增强,饲养2周组阳性表达率下降(t=4.687,P<0.05)。结论:AQP4与血脑屏     

高原环境中大鼠脑水肿与水通道蛋白4的表达变化

目的：探讨大鼠在模拟5000m高原环境下脑水肿脑组织水通道蛋白4(aquaporin4，AQP4)的表达变化及意义。方法：实验选用Wistar大白鼠56只按随机数字法将大鼠分为正常对照组8只、实验组48只，其中实验组按在模拟高原环境中饲养时间分为饲养4，24，48，72h，2周和4周组，每组8只。在各时相点取大鼠大脑半球组织，测定脑组织含水率，作AQP4免疫组织化学染色和组织原位杂交，用图像分析软件检测AQP4抗体和基因阳性表达相对灰度值，了解AQP4在大鼠大脑的表达变化。结果：饲养4，48，72h组大鼠脑组织含水率明显高于正常对照组(P&;lt;0．05～0．01)，大鼠在模拟高原环境中饲养2周时含水率逐渐下降，饲养4周组脑组织含水率接近正常对照组。AQP4在脑毛细血管壁及胶质纤维呈阳性表达，正常对照组大鼠AQP4平均相对灰度值(average relative gray，ARG)(1．268&;#177;0．119)明显低于饲养4h组(1．392&;#177;0．098)(t=5．258，P&;lt;0．05)；饲养24，48和72h组AQP4阳性表达增强，ARG值显著增加(t=2．967～5．652，P&;lt;0．01)；饲养2周组ARG值有所下降(t=5．239，P&;lt;0．05)。AQP4 mRNA在胶质细胞核和神经细胞核表达阳性，变化规律与AQP4蛋白变化基本一致，即24，48和72h组阳性细胞数率增加(t=3．045～5．526，P&;lt;0．01)，阳性染色增强，饲养2周组阳性表达率下降(t=4．687，P&;lt;0．05).结论：AQP4与血脑屏障通透性变化密切相关，AQP4表达增强是高原脑水肿发生的分子生物学机制之一。     

Lung fluid transport in aquaporin-1 and aquaporin-4 knockout mice

The mammalian lung expresses water channel aquaporin-1 (AQP1) in microvascular endothelia and aquaporin-4 (AQP4) in airway epithelia. To test whether these water channels facilitate fluid movement between airspace, interstitial, and capillary compartments, we measured passive and active fluid transport in AQP1 and AQP4 knockout mice. Airspace-capillary osmotic water permeability (Pf) was measured in isolated perfused lungs by a pleural surface fluorescence method. Pf was remarkably reduced in AQP1 (-/-) mice (measured in cm/s x 0.001, SE, n = 5-10: 17 +/- 2 [+/+]; 6.6 +/- 0.6 AQP1 [+/-]; 1.7 +/- 0.3 AQP1 [-/-]; 12 +/- 1 AQP4 [-/-]). Microvascular endothelial water permeability, measured by a related pleural surface fluorescence method in which the airspace was filled with inert perfluorocarbon, was reduced more than 10-fold in AQP1 (-/-) vs. (+/+) mice. Hydrostatically induced lung interstitial and alveolar edema was measured by a gravimetric method and by direct measurement of extravascular lung water. Both approaches indicated a more than twofold reduction in lung water accumulation in AQP1 (-/-) vs. (+/+) mice in response to a 5- to 10-cm H2O increase in pulmonary artery pressure for five minutes. Active, near-isosmolar alveolar fluid absorption (Jv) was measured in in situ perfused lungs using 125I-albumin as an airspace fluid volume marker. Jv (measured in percent fluid uptake at 30 min, n = 5) in (+/+) mice was 6.0 +/- 0.6 (37 degrees C), increased to 16 +/- 1 by beta-agonists, and inhibited to less than 2.0 by amiloride, ouabain, or cooling to 23 degrees C. Jv (with isoproterenol) was not affected by aquaporin deletion (18.9 +/- 2.2 [+/+]; 16.4 +/- 1.5 AQP1 [-/-]; 16.3 +/- 1.7 AQP4 [-/-]). These results indicate that osmotically driven water transport across microvessels in adult lung occurs by a transcellular route through AQP1 water channels and that the microvascular endothelium is a significant barrier for airspace-capillary osmotic water transport. AQP1 facilitates hydrostatically driven lung edema but is not required for active near-isosmolar absorption of alveolar fluid.     

Comparative immunohistochemical localizations of aquaporin-1 and aquaporin-4 in the cochleae of three different species of rodents

The species-specific difference of the immunohistochemical localization of aquaporin-1 (AQP1) and aquaporin-4 (AQP4) was investigated in the cochleae of the 3 different species of rodents, including guinea pig, mouse and Mongolian gerbil. In the guinea pig cochlea, intense AQP1-like immunoreactivity was present in the type III fibrocytes in the spiral ligament and the mesenchymal cells just below the basilar membrane. Immunostaining was also found in some type IV fibrocytes in the spiral ligament, fibrocytes in the spiral limbus and mesenchymal cells lining the perilymphatic space against the bony otic capsule. In contrast, no remarkable immunostaining was found in the basilar membrane of the mouse cochlea. The medial part of the Reissner's membrane was positively immunostained with anti-AQP1 antibody only in the mouse cochlea. In the gerbil cochlea, AQP1-like immunoreactivity was weak compared with the other 2 species. AQP4 was found in the cochlear supporting cells, including Claudius cells, Hensen's cells and inner sulcus cells of the 3 rodent species. AQP4 was also expressed in some interdental cells of the spiral limbus. Weak immunoreactivity was also found in the root cells only in the upper turns of the guinea pig cochlea. In contrast, no detectable immunoreactivity was found in the root cells of the other 2 species. The results obtained in the present study provide the first evidence for the existence of the species differences in the expression of the AQP1 and AQP4 proteins in the rodent cochlea.     

缺血半暗带组织中水通道蛋白4表达的初步研究

背景在组织学和细胞学上对半暗带的认识已取得了进展,而关于水通道蛋白(aquaporin-4,AQP4)与半暗带和磁共振成像相结合的报道不多.目的探讨水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP4)在缺血半暗带(ischemicpenumbra,IP)中的表达规律.设计随机对照的实验研究.地点和对象健康Wistar大鼠35只,体质量300～400 g,雌雄不拘,随机分为对照组和栓塞组;栓塞组又分为大脑中动脉栓塞(MCAO)后15,30min,1,3,6,24 h组,每组各5只大鼠.干预对照组的大脑中动脉不栓塞,其余操作同栓塞组.在对照组术后30 min、各栓塞组于栓塞结束时行脑部T1WI,T2WI和DWI扫描.采用刘梅丽等方法界定影像半暗带,计算影像半暗带和中心梗死区的相对表观扩散系数(ADC1和ADC2),将缺血脑组织进行红四氮唑(TTC)染色,并与DWI图像对比.取最大层面的影像半暗带组织进行病理观察、免疫组织化学及原位杂交实验,用图像分析检测AQP4蛋白、基因的表达量,并进行统计分析.主要观察指标①影像半暗带组织病理观察结果.②影像半暗带和中心梗死区的相对表现扩散系数.③AQP4蛋白、基因的表达量.结果对照组的DWI和T2WI未见异常,ADCR为(98.7±0.8)%,AQP4蛋白表达平均值为(7.9±0.5)%,基因表达平均值为0.5±0.06.栓塞后15min即在DWI上出现高信号;平均于栓塞后1.4 h在T2WI显示高信号,ADC1在24 h内始终呈下降趋势,在1 h内迅速下降;而ADC2呈现先降后升的变化规律.在1 h内AQP4表达迅速上调,1～24 h仍缓慢增加,AQP4表达与ADC1呈显著负相关(r=-0.989,P＜0.001).影像半暗带与组织半暗带都具有相同的病理改变-细胞性水肿.结论影像半暗带与组织半暗带是等值的,半暗带的病理基础之一是细胞内水肿,AQP4表达增强是缺血半暗带形成的重要原因,半暗带组织的ADC值下降可以间接反映AQP4表达上调的水平.     

"失血性休克-内毒素"二次打击所致肺损伤水通道蛋白的表达

目的 探讨水通道蛋白（AQP）-1和AQP-5在失血性休克一内毒素二次打击所致大鼠肺损伤中的表达。方法 30只SD大鼠随机分为两组：假手术对照组（C组）、二次打击组（HS组），每组15只。建立“未控制性失血性休克-内毒素”二次打击大鼠模型，并按院前期90min、院内复苏期60min、院内观察期三期进行实验。实验结束前采血测动脉血气并比较两组大鼠存活率。测定肺泡灌洗液蛋白（BALFpro）、肺通透指数（PPI）及肺组织湿／干质量比（W／D）；HE染色光镜下观察肺损伤程度；采用免疫组化法分别测定肺组织AQP-1和AQP-5的蛋白表达。结果 与C组比较，Hs组MAP、lac、PaO2、pH、BE、PPI、BALFpro、W／D等指标均明显恶化，肺组织损伤严重，大鼠存活率降低；与C组比较，HS组肺组织AQP-1和AQP-5的表达显著降低（P〈0．01）。结论 二次打击所致大鼠肺损伤时AQP-1和AQP-5表达均明显降低，这可能是失血性休克后肺损伤肺水肿形成的重要原因之一。     

肝癌组织水通道蛋白-1表达的诊断意义

目的 探讨水通道蛋白-1(AQP-1)在肝细胞癌(HCC)、肝内胆管癌(ICC)和转移性腺癌(MAC)中的表达特征及其与临床病理学的关系.方法 应用免疫组化EnVision Plus法对100例HCC、50例ICC和30例MAC组织中AQP-1、Hep Par-1、CKl9和pCEA的表达进行检测,并对其与肿瘤临床病理特征的关系进行统计学分析.结果 ICC组AQP-1表达率为88%(44/50),明显高于HCC组(7/100,P<0.01)和MAC组(6/30,P<0.05);随着ICC组织学分化程度的降低,AQP-1表达明显下降(P<0.05),ICC患者淋巴结转移AQP-1的表达率明显低于未转移者(P<0.01).结论 AQP-1可能是胆管细胞分化及其肿瘤的良好标记物,结合Hep Par-1、CKl9和pCEA等可有助于肝肿瘤的鉴别诊断.     

实验性脑出血后水通道蛋白4的表达变化

背景:水通道蛋白4可能是导致脑水肿形成的重要调节因素之一,但水通道蛋白4是否参与脑出血后脑水肿的形成尚未见报道。目的:观察出血性脑水肿病理过程中水通道蛋白4的表达情况,探讨其与脑水肿形成的关系。设计:随机对照动物实验。单位:广西壮族自治区人民医院神经内科和重庆医科大学神经生物学研究室。材料:实验于2003-04/2003-10在重庆医科大学生物学实验室完成。选择健康Wistar大鼠120只,雄性,体质量250～300g,由重庆医科大学实验动物中心提供。方法:实验分为4部分,每部分(n=30)均随机分为对照组(n=5)和手术组(n=25),并将手术组进一步分为出血后6h,1d,3d,5d,7d共5个时相组(n=5)。手术组大鼠麻醉后将定量胶原酶注入脑左侧尾状核建立脑出血模型;对照组只进针不注胶原酶。造模成功标准:将大鼠尾巴提起,瘫痪侧前肢回收后屈曲于腹下,正常侧前肢向地面伸展。实验分为以下4个部分:①采用免疫组化检测水通道蛋白4蛋白的表达。②采用原位杂交法检测水通道蛋白4mRNA的表达。③采用反转录-聚合酶链反应检测水通道蛋白4mRNA的表达。④应用电镜观察大鼠脑水肿的病理改变。主要观察指标:①各组大鼠水通道蛋白4mRNA及其蛋白的表达水平。②造模大鼠脑水肿区的病理改变。结果:手术组大鼠均造模成功,全部大鼠均进入结果分析,无脱失。①各组大鼠水通道蛋白4mRNA及其蛋白的表达水平比较:对照组大鼠水通道蛋白4的表达无明显改变。与对照组相比,手术组大鼠脑出血后6h,水通道蛋白4mRNA和蛋白在脑水肿区表达增强;至第3天,水通道蛋白4mRNA和蛋白的表达达到高峰;1周后,水通道蛋白4的表达仍显著高于对照组(t=12.65,P<0.01)。②脑水肿形成过程中水通道蛋白4mRNA和蛋白的关系:水通道蛋白4mRNA和蛋白的表达呈高度正相关(r=0.8281～0.9821,P<0.01)。③手术组大鼠脑水肿区相应的病理改变:在脑出血后1～3d内为逐渐加重的细胞内水肿,到第3天,脑水肿进一步加剧,出现血管源性水肿,而且有部分组织变性和坏死。结论:脑出血后水通道蛋白4表达明显增强,提示水通道蛋白4可能参与了出血性脑水肿的发生发展过程。抑制水通道蛋白4的表达可能是防治脑水肿的一种有效途径。     

Lung fluid transport in aquaporin-5 knockout mice

The mammalian lung expresses water channel aquaporin-1 (AQP1) in microvascular endothelia, AQP4 in airway epithelia, and AQP5 at the apical plasma membrane in type I cells of alveolar epithelia. We previously studied the role of AQP1 and AQP4 in lung fluid transport using knockout mice. Here, we examined the role of AQP5 using AQP5 knockout mice, which were recently shown to manifest defective saliva secretion. AQP5 deletion did not affect lung morphology at the light microscopic level, nor did it affect the distribution or expression of aquaporins 1, 3, or 4. Airspace-capillary osmotic water permeability (P_f) was measured in isolated perfused lungs by pleural surface fluorescence and gravimetric methods. P_f was reduced 10-fold by AQP5 deletion and was further reduced by 2- to 3-fold in AQP1/AQP5 double-knockout mice. Hydrostatic lung edema in response to acute increases in pulmonary artery pressure was not affected by AQP5 deletion. Active alveolar fluid absorption was measured in an in situ lung model from the increase in concentration of a volume marker in an isosmolar alveolar instillate. Interestingly, fluid absorption did not differ in litter-matched AQP5 knockout mice, nor was there an effect of AQP5 deletion when fluid absorption was maximally stimulated by pretreatment of mice with keratinocyte growth factor. These results indicate that AQP5 is responsible for the majority of water transport across the apical membrane of type I alveolar epithelial cells. The unimpaired alveolar fluid clearance in AQP5-null mice indicates that high alveolar water permeability is not required for active, near-isosmolar fluid transport.     

实验性脑出血后水通道蛋白4的表达变化

背景：水通道蛋白4可能是导致脑水肿形成的重要调节因素之一．但水通道蛋白4是否参与脑出血后脑水肿的形成尚未见报道。 目的：观察出血性脑水肿病理过程中水通道蛋白4的表达情况．探讨其与脑水肿形成的关系。 设计：随机对照动物实验。 单位：广西壮族自治区人民医院神经内科和重庆医科大学神经生物学研究室：材料：实验于2003-04／2003-10在重庆医科大学生物学实验室完成。选择健康Wistar大鼠120只，雄性，体质量250-300g，由重庆医科大学实验动物中心提供方法：实验分为4部分，每部分（n=30）均随机分为对照组（n=5）和手术Ⅲ（n=25），并将手术组进一步分为出血后6h．1d．3d，5d，7d共5个时相组（n=5），手术组大鼠麻醉后将定量胶原酶注入脑左侧尾状核建立脑出血模型；对照组只进针不注胶原酶。造模成功标准：将大鼠尾巴提起，瘫痪侧前肢回收后屈曲于腹下，正常侧前肢向地面伸展。实验分为以下4个部分：①采用免疫组化检测水通道蛋白4蛋白的表达。②采用原位杂交法检测水通道蛋白4mRNA的表达。③采用反转录-聚合酶链反应检测水通道蛋白4mRNA的表达④应用电镜观察大鼠脑水肿的病理改变。 主要观察指标：①各组大鼠水通道蛋白4mRNA及其蛋白的表达水平。②造模大鼠脑水肿区的病理改变。 结果：手术组大鼠均造模成功，全部大鼠均进入结果分析，无脱失。①各组大鼠水通道蛋白4mRNA及其蛋白的表达水平比较：对照组大鼠水通道蛋白4的表达无明显改变。与对照组相比，手术组大鼠脑出血后6h，水通道蛋白4mRNA和蛋白在脑水肿区表达增强；至第3天，水通道蛋白4mRNA和蛋白的表达达到高峰；1周后，水通道蛋白4的表达仍显著高于对照组（t=12．65，P〈0．01）。②脑水肿形成过程中水通道蛋白4TnRNA和蛋白的关系：水通道蛋白4mRNA和蛋白的表达呈高度正相关（r=0．8281～0．982l，P〈0．01）。③手术组大鼠脑水肿区相应的病理改变：在脑出血后1～3d内为逐渐加重的细胞内水肿，到第3天，脑水肿进一步加剧，出现血管源性水肿，而且有部分组织变性和坏死。 结论：脑出血后水通道蛋白4表达明显增强，提示水通道蛋白4可能参与了出血性脑水肿的发生发展过程。抑制水通道蛋白4的表达可能是防治脑水肿的一种有效途径。     

水通道蛋白AQP5在唾液腺囊肿中的异常表达

目的探讨水通道蛋白AQP1、AQP3和AQP5在唾液腺囊肿中表达水平及其意义。方法利用RT-PCR方法对10例正常及囊肿组织各种AQP进行mRNA水平分析。利用Image J软件对RT-PCR进行量化分析。结果AQP1和AQm表达无差异，AQP5表达显著增强。结论AQP5在囊肿中表达增强，提示其可能是参与囊肿形成的主要水通道。其特异性抑制剂的发现，将有助于对于囊肿及干燥综合征发病机制的进一步研究。