旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物及其46—58KD蛋白的保护性免疫作用的比较研究

目的：观察旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物（ＴｓＬ１－ＥＳ）及其４６－５８ＫＤ蛋白的保护性免疫作用。并作比较研究。方法：通过无血甭的ＲＰＭＩ１６４０培养基培养旋毛虫肌肉期幼虫,获得ＴｓＬ１－ＥＳ;再以常规ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电洗脱技术相结合纯化ＴｓＬ１－ＥＳ中４６－５８ＫＤ蛋白,用ＴｓＬ１－ＥＳ及其４６－５８ＫＤ蛋白加福氏完全佐剂（ＦＣＡ）腹腔注射免疫昆明小鼠３次,每鼠再以旋毛虫３００条感染攻击,观察感染后第７天鼠肠道成虫数、第３０天肌肉幼虫数及血清抗体滴度。结果：４６－５８ＫＤ免疫组鼠的肠道成虫减虫接近（４８．３％、５０．２％及３４５８．６）;明显高于佐剂对照组（４．８％、８．２％及７４８．５）。结论：ＴｓＬ１－ＥＳ及其４６－５８ＫＤ蛋白均可产生明显的保护性免疫,且保护性免疫水平相近。     

日本血吸虫多坐分子疫苗的制备及其抗原性的研究

为了制备足量、高纯度的供血吸虫保护性免疫力研究的多价分子疫苗。通过制备型ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电渗方法从日本血吸虫成虫分离纯化出２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ蛋白。经ＢＣＡ法检测蛋白含量，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测蛋白纯度和分子量，Ｗｅｓｔｒｎ－ｂｌｏｔ及ＥＬＩＳＡ检测其抗原活性。结果日本血吸虫成虫２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ三种纯化蛋白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测均为单一条带并与所分离的蛋白分子量相符     

日本血吸虫不同发育阶段与旋毛虫抗原交叉性的研究

运用ＥＩＴＢ技术分析日本血吸虫（Ｓｊ）尾蚴、肝期童虫及雌雄成虫与旋毛虫（Ｔｓ）肌蚴抗原的交叉性。结果显示：Ｓｊ尾蚴、肝期童虫、成虫各阶段不同程度地被抗－ＴｓＳＡＲＳ，ＴｓＩＲＳ识别，其识别的抗原分子量在１５￣１００（尤５０￣７０）ｋＤ之间，两种抗血清识别的带型基本相同。所识别的各期Ｓｊ抗原中以尾蚴抗原最多，次为肝期童虫。３０天成虫仅雌虫抗原与上述两种抗血清在９７ｋＤ处显出一条弱带。抗－Ｓｊ♂ＡＲＳ     

单克隆抗体SZ—39识别的人脑胶质瘤细胞SHG—44膜蛋白的提取

目的：提取ＭｃＡｂ ＳＺ－３９识别的人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ－４４膜抗原蛋白,为其进一步研究作准备。方法：分别以两组去污剂（１）２％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１１４;（２）１％ＳＤＳ、１％去氧胆酸钠、１％ＮＰ－４０、１ｍｍｏｌ／Ｌ ＥＤＴＡ裂解ＳＨＧ－４４细胞,提取细胞蛋白,再以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法分离蛋白,并以Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ法分析鉴定。结果：ＭｃＡｂ ＳＺ－３９识别的蛋白呈一条区带,分子量为６０ｋＤ     

日本血吸虫重组32kD抗原的纯化和诊断应用

用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结合电渗洗脱的方法分离，纯化日本血吸虫重组３２ｋＤ抗原；用酶联免疫印迹技术分析纯化抗原的免疫活性。用纯化抗原，日本血吸虫成虫抗原和可溶性虫卵抗原分别检测慢性血吸虫病人肺吸虫病，肝吸虫病人，钩虫和健康人血清抗体。     

日本血吸虫不同发育阶段与旋毛虫抗原交叉性的研究

运用ＥＩＴＢ技术分析日本血吸虫（Ｓｊ）尾蚴、肝期童虫及雌雄成虫与旋毛虫（Ｔｓ）肌蚴抗原的交叉性。结果显示：Ｓｊ尾蚴、肝期童虫、成虫各阶段不同程度地被抗－ＴｓＳＡＲＳ，ＴｓＩＲＳ识别，其识别的抗原分子量在１５～１００（尤５０～７０）ｋＤ之间，两种抗血清识别的带型基本相同。所识别的各期Ｓｊ抗原中以尾蚴抗原最多，次为肝期童虫。３０天成虫仅雌虫抗原与上述两种抗血清在９７ｋＤ处显出一条弱带。抗－ＳｊＡＲＳ，ＳｊＩＲＳ识别ＴｓＳＡ中抗原成份分子量基本在３４ｋＤ以上，以３４ｋＤ和３５～３８ｋＤ带最为明显。提示Ｔｓ与Ｓｊ之间存在较多的交叉抗原，主要在幼虫阶段，各阶段之间有较大差异     

日本血吸虫肝门型童虫蛋白质SDS—聚丙烯酰胺凝电泳的分析

本文采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对日本血吸虫肝门型童虫蛋白组分进行了分析，结果显示，１４ｄ肝门型雌雄童虫出现３３条蛋白区带，主带８条，２１ｄ肝门型雌雄童虫出现３４例蛋白区带，主带８条，２１ｄ雄性童虫出现３１条蛋白区带，主带７条，各组童虫与成虫比较，有２７～２８条共同蛋白区带，提示日本血吸虫不同时期的肝门型童虫与成虫的蛋白组分在质与量方面虽然存在着某些差异，但总体上两者     

抗HSV—1杂交瘤细胞系的建立及单抗特性研究

以ＨＳＶ－１为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，取其脾细胞在ＰＧＥ介导下与ＳＰ２／０细胞常规融合，ＩＦＡ法筛选鉴定，反复克隆，共获得７株能稳定、持续分泌抗ＨＳＶ的ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为８７￣１０３条之间，Ｉｇ类型分别为ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３，腹水抗体效价在１０＾－５￣１０＾－７之间免疫沉淀。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，２株与１３２Ｋ多肽发生特异性反应，只具有ＨＳＶ－１型特异性，其余３     

日本血吸虫重组32kD抗原的纯化和诊断应用

用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结合电渗洗脱的方法分离、纯化日本血吸虫重组３２ｋＤ抗原（ｒＳｊ３２）；用酶联免疫印迹技术（ＥＩＴＢ）分析纯化抗原的免疫活性。用纯化抗原、日本血吸虫成虫抗原（ＡＷＡ）和可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）分别检测慢性血吸虫病人、肺吸虫病人、肝吸虫病人、钩虫病人和健康人血清抗体。结果表明：纯化的ｒＳｊ３２分子量为３７ｋＤ，有较好的免疫活性；用其检测日本血吸虫病的敏感性和特异性与虫源性抗原（ＡＷＡ和ＳＥＡ）无显著性差异。提示ｒＳｊ３２可代替ＡＷＡ和ＳＥＡ用于日本血吸虫病诊断     

日本血吸虫肝门型童虫蛋白质SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳的分析

本文采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对日本血吸虫肝门型童虫蛋白组分进行了分析，结果显示：１４ｄ肝门型雌雄童虫出现３３条蛋白区带，主带８条；２１ｄ肝门型雌雄童虫出现３４条蛋白区带，主带８条；２１ｄ雄性童虫出现３１条蛋白区带，主带７条。各组童虫与成虫比较，有２７～２８茶共同蛋白区带，提示日本血吸虫不同时期的肝门型童虫与成虫的蛋白组分在质与量方面虽然存在着某些差异，但总体上两者的蛋白组分有很大的相似性。     

卫氏并殖吸虫成虫的特异性诊断抗原

目的：寻找诊断并殖吸虫病的特异性抗原。方法：应用SDS-PAGE和Western blot对卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原中的蛋白组分进行分析。结果：卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原蛋白经SDS-PAGE后显示14条蛋白带，其中相对分子质量为53000、3l000、25000、16000、11000是主带；相对分子质量为53000和34000的条带可与华支睾吸虫病患者血清反应；108000、94000、65000的条带可与血吸虫病患者血清反应；58000、53000、43000的条带可与旋毛虫感染的大鼠血清、小鼠血清及旋毛虫病患者血清反应。37000的蛋白带只能被斯氏狸殖吸虫感染的大鼠血清和并殖吸虫病患者血清所识别，而不与华支睾吸虫病、血吸虫病患者血清、旋毛虫感染的大鼠和小鼠血清、旋毛虫病患者血清、正常大鼠、小鼠血清及正常人血清发生交叉反应。结论：卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原中相对分子质量为37000的蛋白组分为卫氏并殖吸虫成虫的特异性抗原，可用于并殖吸虫病的免疫学诊断及血清流行病学调查．     

华支睾吸虫成虫特异性诊断抗原分析

目的:寻找诊断华支睾吸虫病的特异性抗原.方法:应用SDS-PAGE和Western blot对华支睾吸虫成虫可溶性抗原中的蛋白组分进行分析,试验血清包括旋毛虫感染的大鼠和小鼠血清,正常大鼠和小鼠血清,旋毛虫病、华支睾吸虫病、并殖吸虫病、日本血吸虫病及囊虫病患者血清,斯氏狸殖吸虫感染的大鼠血清和正常人血清.结果:华支睾吸虫成虫可溶性抗原蛋白经SDS-PAGE后显示17条蛋白带,其中相对分子质量为65 000、54 000、31 000、25 000、13 000的为主带.Western blot结果显示,相对分子质量为108 000、94 000、71 000、65 000、56 000、53 000、43 000的蛋白带可被华支睾吸虫病患者血清识别,108 000、71 000、65 000、63 000、53 000的蛋白带可被并殖吸虫病患者血清识别,108 000、94 000、71 000可被日本血吸虫病患者血清、旋毛虫感染的大鼠血清及旋毛虫病患者血清识别;56 000的蛋白组分只能被华支睾吸虫病患者血清识别,而不与其他试验血清发生交叉反应.结论:华支睾吸虫成虫可溶性抗原中相对分子质量为56 000的蛋白组分为华支睾吸虫成虫的特异性抗原.     

日本血吸虫成虫和虫卵可溶性抗原及其组分抗原的研究

目的:探讨日本血吸虫雄虫、雌虫、虫卵的可溶性抗原雄虫(AWA-m、雌虫AWA-f、虫卵SEA)及其组分抗原的特性.方法:用DE22纤维素层析柱对日本血吸虫AWA-m,AWA-f,SEA抗原进行纯化,得到相应组分抗原.分别以SDS-PAGE和Western blot对组分抗原进行全面分析,并与相应未经纯化的可溶性抗原作比较.结果:经DE22纤维素层析处理的AWA-m,AWA-f,SEA,均能获得含多种蛋白的组分抗原.SDS-PAGE结果表明,AWA-m见10条主带和9条次带,其中Mr 37 000,28 000,25 000为特异性条带,出现8条免疫反应阳性带;而AWA-m组分抗原为9条蛋白带和6条免疫反应阳性带.AWA-f见15条蛋白带,其中Mr 26 500为特异性条带,组分抗原为8条蛋白带.AWA-f粗抗原及其组分抗原均见9条反应带.SEA见8条主带和10条次带,13条为免疫反应阳性条带;SEA组分抗原见11条带,其中9条为免疫反应阳性带.结论:AWA-m,AWA-f,SEA经DE22纤维素层析纯化获得组分抗原,方法简单、可靠.该组分抗原含有粗抗原的主要免疫反应成分,去除了多种与日本血吸虫病免疫反应无关的蛋白.     

快速蛋白液相色谱系统纯化肺癌组织热休克蛋白70及其鉴定

目的:从肺癌组织中纯化并鉴定热休克蛋白70(HSP70),为研究其免疫原性和作为肿瘤疫苗奠定基础.方法:用组织蛋白裂解液从肺癌组织中提取总蛋白,应用ConA-sepharose亲和层析和快速蛋白液相色谱系统(FRLC)连续分离、梯度洗脱获得蛋白,应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western-blot进行蛋白相对分子质量及免疫原性鉴定.结果与结论:所获蛋白的相对分子质量为70 000,经Western-blot鉴定为HSP70.     

SDS—PAGE分析斯氏肺吸虫幼虫和成虫排泄分泌抗原

目的：分析斯氏肺吸虫幼虫和成虫排泄分泌抗原（ES-Ag)的分子生物学特性,有利于提高免疫诊断方法的敏感性和特异性。方法：采用SDS-PAGE分析斯氏肺吸虫幼虫和成虫排泄分泌抗原。结果：斯氏肺吸虫幼虫排泄分泌抗原在24-60KD之间可见4条显色带,其中24KD为主带,成虫排泄分泌抗原在20-60KD之间可见5条显色带,其中20KD和32KD为主带。结论：斯氏肺吸虫幼虫和成虫排泄分泌抗原共有的主要区带为20KD。     

二棘血蜱唾液腺抗原成分的分析

二棘血啤唾液提取物（SGE）经十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）显示出22条蛋白带，其中主带有5条，分子量分别为215KD，114KD，105KD，66KD和52KD。用二棘血蜱叮刺家兔后兔血清做免疫印渍，特异性抗原带168KD，152KD，105KD和98KD。推测二棘血蜱168KD，152KD，105KD和98KD的蜱唾液腺蛋白抗原能够有效地诱导宿主产生获得性免疫力。     

PC预处理移植静脉免疫原性的实验研究

目的 评估经多聚环氧化合物(PC)处理的同种异体静脉的免疫原性。方法 根据处理犬静脉的不同方法分为新鲜组(n=7)、戊二醛(GA)组(n=5)和Pc组(n=6);匀浆液二次免疫BALB/c小鼠,小鼠血清与该犬淋巴细胞反应,以荧光标记的兔抗鼠IgG抗体染色被反应的淋巴细胞,计算染色淋巴细胞的百分率。结果 新鲜组的淋巴细胞染色率高于PC组和GA组(P0.05)。结论 PC与GA一样能明显有效地降低移植静脉的免疫原性。     

旋毛虫与日本血吸虫感染间相互影响的实验研究

用小白鼠定量感染实验观察了旋毛虫与日本血吸虫感染间的相互影响。结果表明：旋毛虫的预先感染明显降低日本血吸虫攻击感染的成虫发育率；反之，日本血吸虫的预先感染对旋毛虫肌肉幼虫产量无明显影响。     

鸡卵核提取物中诊断混合性结缔组织病的特异性抗原分析

目的：分析鸡卵核提取物中检测混合性结缔组织病（ＭＣＴＤ）的特异性抗原成份。方法：应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及考马斯亮兰染色技术对鸡卵核提取进行蛋白组份分析；应用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ技术对鸡卵核蛋白抗原进行免疫识别分别。结果：鸡卵核提取物中可见１３个蛋白成份，分子量分别为７８，７６，７２，６４，５７，５５，５０，４８，４６，４２，３，３２和２４ＫＤ。皮肌炎和多发性肌炎（ＤＭ／ＰＭ）及硬皮病（ＰＳＳ）病