14-3-3蛋白的研究进展

14-3-3是一个在真核生物中广泛表达的酸性蛋白家族，主要以同源/异源二聚体形式存在，通过磷酸化丝/苏氨酸作用与靶蛋白或靶蛋白的2个结构域结合。7种不同亚型的高度保守的14-3-3蛋白与人类细胞中多种不同的信号通路有密切的关系。14-3-3通过调节靶蛋白间的相互作用在信号转导途径中发挥调控作用。     

14-3-3蛋白与凋亡

14 3 3蛋白是分布十分广泛的真核生物蛋白家族 ,在体内发挥着诸多的生物学功能。 14 3 3蛋白能够在多个通路和环节与一些调节因子相互作用 ,抑制凋亡的发生 ;14 3 3蛋白主要是通过以下几种作用方式参与凋亡的调节 :控制靶蛋白 (如Bad ,Bax ,Fkhrl 1)的亚细胞定位 ,作为接头蛋白 (如A2 0与c Raf 1)促进蛋白质 蛋白质相互作用以及调节关键酶 (如ASK1)的活性 ,但具体作用机制有待进一步研究     

信号蛋白质14-3-3研究进展

14 - 3- 3信号蛋白质家族是一组高度保守 ,分布十分广泛的多功能真核生物蛋白质 ,具有 7个亚型 ,与各种信号肽分子包括激酶、磷酸酶、膜转移受体等结合 ,参与细胞内信号传导包括有丝分裂信号转导、细胞周期调节、细胞凋亡等 ,并对朊蛋白病有重要诊断价值     

14-3-3蛋白在生殖细胞中的作用

14-3-3蛋白是在所有真核细胞中广泛表达的一类高度保守的酸性蛋白家族,主要通过磷酸化依赖的方式与靶蛋白结合从而发挥其调控作用。到目前为止,我们已经发现14-3-3蛋白能与超过300种蛋白质相互作用,几乎参与细胞的所有重要生理、病理过程。14-3-3蛋白在受精卵和卵母细胞中既与通道蛋白、烟碱乙酰胆碱受体相互作用,又参与信号转导、细胞凋亡和细胞周期的调控并且在精子的发生中发挥重要作用。本文主要对14-3-3蛋白在生殖细胞中的可能功能作一简要介绍。     

蛋白14-3-3蛋白亚型与癌症

14-3-3蛋白家族在真核细胞中广泛表达且高度保守,据报道其与心血管疾病、神经元损伤、帕金森病以及支气管哮喘等疾病有关联,近年来研究发现14-3-3蛋白与癌症的发生和发展也密切相关,而涉及的癌症包括胆管癌、肝癌、肺癌、鼻咽癌、口腔癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、卡波济肉瘤、脑膜癌、直肠癌、星形细胞瘤等几乎所有常见癌症。14-3-3蛋白对癌症增殖、转移、凋亡以及耐药等影响作用已经得到证实,其调控机制也得到部分揭示,并且已合成了影响14-3-3蛋白与其他蛋白相互作用的特异小分子阻断药物。人体内的14-3-3蛋白家族包含β,ε,γ,η,θ(τ),ζ和σ7种亚型,不同亚型有不同的组织定位和功能。阐明各亚型在不同肿瘤中的分布、作用及其调控机制,对我们进一步认识和治疗癌症均有一定的指导意义。     

血吸虫14-3-3蛋白疫苗的研究现状

血吸虫病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,主要流行于亚洲、非洲和拉丁美洲的76个国家和地区。采用疫苗防治该病是当前研究的热点领域,本文综述了血吸虫14-3-3的蛋白质疫苗、DNA疫苗、rBCG疫苗、重组酵母疫苗和Bm-Sj14疫苗等方面的研究现状。     

14-3-3σ调控p27抑制Ratl-Akt细胞增殖

目的:研究腺病毒介导14-3-3σ(Ad-14-3-3σ)对Akt过表达Ratl-Akt细胞增殖的影响,并探讨其作用是否通过调控p27而实现.方法:通过5-溴-2'脱氧尿嘧啶(BrdU)实验检测Ad-14-3-3σ对Rat1-Akt细胞增殖的影响,并通过激酶分析法和免疫荧光实验探讨Ad-14-3-3σ对p27磷酸化水平及其在细胞内定位的影响.结果:Ad-14-3-3σ转染的细胞BrdU阳性率(45%)低于PBS处理组(100%)或Ad-β-gal转染的对照组细胞(98%).14-3-3σ可降低磷酸化p27的水平和减少Akt介导的p27在胞浆中的定位.结论:转染14-3-3σ基因能抑制Akt过表达细胞株Ratl-Akt增殖,14-3-3通过降低Akt激酶磷酸化p27的活性,阻断Akt介导的p27胞浆错位,从而发挥其抑制Ratl-Akt细胞增殖.     

CDC25 B与14-3-3相互作用的研究

有研究表明在肿瘤发生发展的过程中,癌细胞的有丝分裂失控是肿瘤发生的主要原因。因此,对细胞分裂调控机制的研究成为目前研究的热点。其中细胞分裂周期25 B （ cell division cycle 25 B, CDC25B）和14-3-3是与细胞分裂有着密切关系的调控子。目前研究已经发现PKA／CDC25B／MPF （ CDC2-cyclinB1）和PKA／CDC25B／14-3-3／MPF是调控细胞有丝分裂的两条重要信号转导途径。蛋白激酶A （ pro-tein kinase A, PKA）是一种环磷酸腺苷（ cyclic adenosine monophosphate, cAMP）依赖性蛋白激酶,可以通过磷酸化下游的靶蛋白,抑制靶蛋白正常发挥作用,从而发挥调节作用。实验研究发现, PKA可以通过磷酸化CDC25B某些位点的丝氨酸残基,使CDC25B处于磷酸化状态,不能使成熟促进因子（ maturation pro-moting factor, MPF）的催化亚基细胞分裂周期2蛋白（cell division cycle 2, CDC2）第15位酪氨酸脱磷酸,因而不能激活MPF,使细胞分裂发生阻滞,不能发生G2／M的转化。14-3-3可以通过CDC25B／14-3-3／MPF途径调节有丝分裂,14-3-3通过结合已经发生磷酸化的CDC25 B的氨基酸（丝氨酸或者苏氨酸）残基,阻止CDC25B进入细胞核,从而引起细胞分裂的阻滞畅这样也就提示可以将14-3-3作为靶位点进行靶向治疗,治疗肿瘤疾病。     

白细胞间介素-3

本文讨论白细胞间介素-3(Interleukin-3,IL-3)的生物学和生化学特性。IL-3的许多特性与IL-2类似,两者都促进分化并为各种淋巴细胞系生长所必需。不过,IL-3与IL-2不同之处是,前者主要影响不成熟淋巴细胞分化阶段,因而可以从一个特殊角度来对淋巴细胞分化进行体外研究。20αSDH与T细胞系的关系除了可用各种细胞膜表面抗原鉴定不同淋巴细胞亚群外,还有两种酶已用于鉴定两     

Interaction between various 14-3-3β segments and PrP In Vitro

Objective To study the potential interaction between PrP protein.Methods The supernatant of health and scrapie-infected hamsters' brain homogenate was prepared,while various recombinant 14-3-3β or PrP proteins were purified.The possible molecular interaction between 14-3-3β proteins and PrP was tested by pull-down and immunoprecipitation assays.Results Both native PrPc and its protease-resistant isoform(PrPsc)formed complexes with 14-3-3β.The full-length recombinant 14-3-3β proteins interacted with PrP.The domain responsible for interacting 14-3-3β was located at N-terminal of 14-3-3β(residues 1 to 38).Conclusion The studies of the association of PrP with 14-3-3β may further provide insight into a potential role of 14-3-3β in the biological function of PrP and the pathogenesis of prion disease.     

14-3-3σ调控p27抑制Rat1-Akt细胞增殖

目的： 研究腺病毒介导14-3-3·σ（Ad-14-3-3·σ）对Akt过表达Rat1-Akt细胞增殖的影响，并探讨其作用是否通过调控p27而实现。 方法： 通过5-溴-2′脱氧尿嘧啶（BrdU）实验检测Ad-14-3-3·σ对Rat1-Akt细胞增殖的影响，并通过激酶分析法和免疫荧光实验探讨Ad-14-3-3·σ对p27磷酸化水平及其在细胞内定位的影响。 结果： Ad-14-3-3σ转染的细胞BrdU阳性率（45%）低于PBS处理组（100%）或Ad-β-gal转染的对照组细胞（98%）。14-3-3σ可降低磷酸化p27的水平和减少Akt介导的p27在胞浆中的定位。 结论： 转染14-3-3σ基因能抑制Akt过表达细胞株Rat1-Akt增殖，14-3-3σ通过降低Akt激酶磷酸化p27的活性，阻断Akt介导的p27胞浆错位，从而发挥其抑制Rat1-Akt细胞增殖。     

14-3-3β基因与胃癌淋巴结转移的相关性研究

目的：探讨敲减及过表达14-3-3β基因对胃癌细胞生物学行为的影响及临床病理改变。方法在 SGC 7901、MGC 803和 HGC 27胃癌细胞系中，利用 RNA 干扰技术抑制14-3-3β基因的表达，分别用 MTT 法、基底膜侵袭实验检测胃癌细胞的增殖和侵袭能力的变化。结果在 HGC27和 MGC803细胞系中，14-3-3β基因的缺失会影响细胞增殖（ P 值分别为0.000、0.000、0.000、0.000、0.000、0.001、0.000、0.005），14-3-3β基因表达缺失的MGC803胃癌细胞侵袭能力降低（ P 值分别为0.000、0.000）。结论14-3-3β基因参与了胃癌细胞增殖和侵袭。     

Interaction between various 14-3-3β segments and PrP In Vitro

Objective To study the potential interaction between PrP protein.Methods The supernatant of health and scrapie-infected hamsters' brain homogenate was prepared,while various recombinant 14-3-3β or PrP proteins were purified.The possible molecular interaction between 14-3-3β proteins and PrP was tested by pull-down and immunoprecipitation assays.Results Both native PrPc and its protease-resistant isoform(PrPsc)formed complexes with 14-3-3β.The full-length recombinant 14-3-3β proteins interacted with PrP.The domain responsible for interacting 14-3-3β was located at N-terminal of 14-3-3β(residues 1 to 38).Conclusion The studies of the association of PrP with 14-3-3β may further provide insight into a potential role of 14-3-3β in the biological function of PrP and the pathogenesis of prion disease.     

PrP106-126多肽抑制14-3-3β蛋白二聚体形成的研究

目的 探讨PrP蛋白和PrP106-126多肽对14-3-3蛋白二聚体形成的影响 方法 将重组表达纯化的0.25 μg、0.5 μg和1μg PrP蛋白、人工合成的PrP06-126肽分别与重组的14-3-3β共孵育,分别通过非变性聚丙烯酰胺凝胶的Western Blott检测PrP蛋白和PrP106-126肽对14-3-3β二聚体和多聚体的形成影响.将不同浓度的PrP与250 μmol/L的PrP106-126肽和14-3-3蛋白共孵育,检测PrP蛋白对PrP106-126肽对14-3-3β二聚体和多聚体的形成影响.随后,将200μmol/L、100 μmol/L、50 μmol/L的PrP106-126多肽分别作用于HeLa细胞8h后,检测细胞内的14-3-3二聚体形成.结果 PrP蛋白与14-3-3蛋白共孵育后,14-3-3二聚体和多聚体的信号随着PrP浓度的增加明显增强；PrP106-126多肽共孵育时,14-3-3二聚体和多聚体的信号随着PrP浓度的增加而减弱；不同浓度的PrP蛋白可以拮抗PrP106-126多肽对14-3-3β二聚体的形成.而且PrP106-126多肽可以干扰HeLa细胞中的二聚体形成.结论 PrP蛋白促进14-3-3二聚体的形成,而PrP106-126多肽干扰二聚体的形成,且PrP蛋白具有拮抗PrP106-126肽干扰14-3-3二聚体形成的作用.     

14-3-3ζ蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

为了探讨14-3-3ζ蛋白在中枢神经系统内的分布,本文采用纯化的基因重组型14-3-3ζ蛋白免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备抗14-3-3ζ蛋白单克隆抗体;Western blot及免疫组织化学法鉴定抗体。结果显示:制备的单克隆抗体能特异性识别基因重组14-3-3ζ蛋白和大鼠脑匀浆32kD蛋白。免疫组化染色结果显示,14-3-3ζ蛋白在大鼠中枢神经系统广泛分布,在皮层、海马、杏仁核和基底前脑的免疫阳性染色较强,免疫阳性产物位于神经元胞浆内。本研究结果提示,14-3-3ζ蛋白可能具有多样化的生理功能。     

3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯的血管内生物相容性

背景：可降解聚合材料3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯(3-hydroxybutyrate-co- 3-hydroxyhexanoate, PHBHHx)具有良好的机械性能和生物可降解性。 目的：在体研究PHBHHx的血管内生物相容性。 方法：采用脱细胞羊肺动脉为支架,以PHBHHx涂层,构建复合补片,植入新西兰兔腹主动脉内,以脱细胞未涂层羊肺动脉片作为对照。分别于植入后第1,4,12周取出移植补片进行组织学、免疫荧光染色、扫描电镜和钙含量测定。 结果与结论：复合补片管腔面光滑无血栓,内膜增生适度,再细胞化完全;免疫荧光染色可见新生内膜组织中类内皮细胞呈CD31阳性反应,单层连续排列,间质细胞呈平滑肌肌动蛋白阳性反应;复合补片的钙含量明显低于未涂层羊肺动脉片。说明PHBHHx的血管内生物相容性满意,是心血管组织工程较为理想的腔内涂层材料。     

Association of 14-3-3 ε gene haplotype with completed suicide in Japanese

Genetic factors have been suggested to be involved in suicide. Although some genetic factors, such as serotonergic transduction, have been associated with suicide, the results are inconsistent. There is a possibility that various signaling anomalies are involved in the biological vulnerability to suicide. We carried out a genome-wide gene-expression study in the brains of suicide victims using DNA microarrays;14-3-3 , which is related to neurogenesis, was one of the genes upregulated in the brains of suicide victims in the microarray analysis. This was confirmed by Western blot analysis. To examine the possibility of the involvement of 14-3-3 in the pathogenesis of suicide, we investigated the association of the 14-3-3 gene and completed suicide. We used three high-frequency SNPs (rs1532976, rs3752826, and rs9393) and found a significant association of two alleles (rs1532976 and rs3752826) with completed suicide (p < 0.05). Moreover, the distribution of haplotype revealed a more significant difference between completed suicide and controls (p=0.0005). This finding suggests that 14-3-3 is a potential suicide susceptibility gene and implies that dysregulation of neurogenesis may be involved in suicide.     

白细胞介素-3的分子生物学

白细胞介素-3(Interleukin-3,IL-3)是T细胞分泌的一种蛋白质因子,它除与T细胞的增殖与分化有关外、最重要的生物功能是刺激骨髓早期多能祖细胞增殖,促进多种造血祖细胞的增殖与分化,故又有多能集落刺激因子(Pluripotent CSF)之称。最近发现某些白血病的发生可能与IL-3基因的缺失有关、因此,阐明IL-3基因的结构及其表达的调节,对研究某些严重血液病,如再生障碍性贫血,急性放射病及某些白血病的发生机制,具有重要意义。     

人类14-3-3ζ和GCH1蛋白相互作用的初步研究

目的 寻找人类14-3-3ζ蛋白的相互作用蛋白,为进一步揭示14-3-3ζ的作用机理提供线索.方法 以14-3-3ζ为"诱饵",利用酵母双杂交系统筛选人脑cDNA文库得到"猎物"蛋白,通过GST pulldown技术和哺乳动物细胞内免疫共沉淀技术验证14-3-3ζ和"猎物"蛋白的特异性结合.结果 首次利用酵母双杂交cDNA文库筛选技术发现了14-3-3ζ能够与GTP环化水解酶Ⅰ(GTP cyclohydrolase 1,GCH1)相互作用,并通过了体内和体外的蛋白质结合实验证实了这两个蛋白质之间的特异性相互作用.结论 发现并验证了14-3-3ζ与GCH1之间的蛋白质相互作用,为进一步深入研究这两种蛋白质的功能及所引起的相关疾病的发病机理提供了新的线索.