血清肌酐二步酶法检测新技术研究

目的探讨二步酶法测定肌酐的实验方法。方法以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ,以N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐(HDAOS)和4-氨基安替比林(4-AAP)色原物作为试剂Ⅰ,建立二步酶法测定血清肌酐。通过内空白法消除内源性肌酸和改变光谱吸收方法消除脂血、溶血、黄疸干扰。采用二步酶法测定36例患者血清肌酐,并与高效液相色谱(HPLC)法和一步酶法比较;同时测定200名健康体检者血清肌酐,以建立参考范围。结果患者组肌酐二步酶法结果[(84.2±26.6)μmol/L]明显低于一步酶法[(116.6±29.6)μmol/L,t=32.12,P<0.01];与HPLC法测定结果[(83.9±26.8)μmol/L]差异无统计学意义(t=0.541 6,P>0.05),且呈良好相关性(Y二步酶法=1.042XHPLC法-0.182 1,r2=0.982 4)。二步酶法测定血清肌酐的线性范围达4 500μmol/L,平均回收率为100.8%,批内和批间变异系数(CV)分别为2.91%～4.20%和3.20%～4.60%,应用二步酶法每天测定室内质控定值血清[低(78.0μmol/L)、中(206.0μmol/L)、高(900.0μmol/L)],共测定180 d,其日间总CV分别为4.46%、5.27%、7.24%。二步酶法试剂至少能稳定180 d。健康人群血清肌酐的参考范围男性为56～132μmol/L,女性为41～109μmol/L。结论以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ和以HDAOS、4-AAP为色原物(试剂Ⅰ)的二步酶法可以消除肌酸和脂血、溶血、黄疸血的干扰,可用于临床肌酐常规测定。     

三种血清葡萄糖测定法的比较

测定葡萄糖的常用方法有己糖激酶法(HK),葡萄糖氧化酶法(GOD)和邻甲苯胺法(O-TB)。现用此三法同时进行测定,比较它们的线性范围、回收率、精密度、稀释试验和干扰试验。1.线性范围:HK最高达40.8mmol/L;GOD次之,37.5;O-TB为30.8mmol/L。     

双试剂双缩脲法测定血清总蛋白的探讨

目的将双缩脲单试剂改为双试剂法,观察高脂、高胆红素、溶血标本对血清总蛋白测定的干扰.方法用二种不同试剂对高脂,高胆红素,溶血及外观正常标本用原法及本法同在全自动生化分析仪上测定血清总蛋白.结果脂血标本对原法干扰十分明显.本法可完全消除脂血的干扰;总胆红素每增加50μ mol/L,原法总蛋白增加0.4g/L,本法不受影响;溶血标本中血红蛋白对原法结果明显影响,1g/L血红蛋白对原法总蛋白增加2.85g/L,对本法总蛋白增加0.93g/L;外观正常标本二种方法无显著差异.结论双试剂法在保持原法的反应原理的基础上,消除了脂血、黄疸的干扰,明显减少溶血的影响,有利于自动生化仪的分析.     

液体单试剂酶法测定血清碳酸氢根

目的建立一种稳定的单试剂酶法测定血清碳酸氢根(HCO3-)。方法利用自配单试剂建立了两点法的检测方法,可满足全自动和手工测定,用Bayer 1650生化仪对本方法进行方法学评价。结果本法的线性范围可达50 mmol/L,批内变异系数(CV)为2.48%,批间CV为3.24%,平均回收率102.8%,与血气分析仪(X)相关良好,Y=1.019X-0.745,r=0.990 3,黄疸、脂血、溶血标本对结果几乎无影响,健康人静脉血HCO3-浓度为21.5~32.3 mmol/L。结论本法操作简便、反应特异、灵敏准确、试剂较稳定,适用临床检测。     

血清β-羟丁酸酶法测定的方法学和临床应用评价

目的评价酶法测定血清β-羟丁酸的方法学性能及其在糖尿病酮症酸中毒早期预防和治疗中的作用。方法用NCCLS的评价方案对本法的精密度、准确性、线性、方法相关性和干扰作评价。并用ROC曲线评价血清β-羟丁酸诊断糖尿病酮症酸中毒的准确性。结果酶法测定β-羟丁酸具有良好的精密度(批内、批间、及总变异系数均小于3%)和准确度(回收率为97.5%),灵敏度为0.01mmol/L,检测线性范围为0.03～4.50mmol/L,与其它商品化试剂的相关性良好(R=0.937),不受溶血、黄疸和脂血干扰。糖尿病控制不良酮症酸中毒组、糖尿病控制不良但无酮症酸中毒组、糖尿病控制良好组、无糖尿病史健康人对照组四组病例的血清β-羟丁酸水平分别为2.71±1.46mmol/L、1.28±0.73mmol/L、0.21±0.16mmol/L、0.14±0.07mmol/L。用ROC曲线评价当血清β-羟丁酸水平为2.1mmol/L时诊断糖尿病酮症酸中毒的灵敏度89.2%,特异性94.3%。结论酶法测定血清β-羟丁酸快速、准确、精密度高,可用于糖尿病酮症酸中毒的早期、特异、快速诊断及治疗监测。     

总胆红素对血糖测定的影响

目前,血糖测定应用较广的是GOD-PAP法和HK法,其中GOD-PAP法所需酶(葡萄糖氧化酶和过氧化物酶)易寻找,成本低,准确度、精密度都能达到临床要求,是一般实验室常规方法.但一些还原性物质如尿酸、维生素C、胆红素等可抑制呈色反应.好在现在的商品试剂盒中,都含有抗干扰成分,能有效地排除上述物质的干扰,黄疸标本总胆红素浓度342μmol/L以下对测定结果均无显著影响[1].但实际工作中发现,重症黄疸患者的血糖测定采用GOD-PAP法常在2.8mmol/L以下,黄疸越重血糖越低,而多数患者临床并无低血糖症状,也未使用维生素C,用HK法复查后血糖常在正常范围.为给临床提供更加准确的结果特作如下试验.     

总胆红素对血糖测定的影响

目前,血糖测定应用较广的是GOD-PAP法和HK法,其中GOD-PAP法所需酶(葡萄糖氧化酶和过氧化物酶)易寻找,成本低,准确度、精密度都能达到临床要求,是一般实验室常规方法.但一些还原性物质如尿酸、维生素C、胆红素等可抑制呈色反应.好在现在的商品试剂盒中,都含有抗干扰成分,能有效地排除上述物质的干扰,黄疸标本总胆红素浓度342μmol/L以下对测定结果均无显著影响[1].但实际工作中发现,重症黄疸患者的血糖测定采用GOD-PAP法常在2.8mmol/L以下,黄疸越重血糖越低,而多数患者临床并无低血糖症状,也未使用维生素C,用HK法复查后血糖常在正常范围.为给临床提供更加准确的结果特作如下试验.     

总胆红素对血糖测定的影响

目前,血糖测定应用较广的是GOD-PAP法和HK法,其中GOD-PAP法所需酶(葡萄糖氧化酶和过氧化物酶)易寻找,成本低,准确度、精密度都能达到临床要求,是一般实验室常规方法.但一些还原性物质如尿酸、维生素C、胆红素等可抑制呈色反应.好在现在的商品试剂盒中,都含有抗干扰成分,能有效地排除上述物质的干扰,黄疸标本总胆红素浓度342μmol/L以下对测定结果均无显著影响[1].但实际工作中发现,重症黄疸患者的血糖测定采用GOD-PAP法常在2.8mmol/L以下,黄疸越重血糖越低,而多数患者临床并无低血糖症状,也未使用维生素C,用HK法复查后血糖常在正常范围.为给临床提供更加准确的结果特作如下试验.     

总胆红素对血糖测定的影响

目前,血糖测定应用较广的是GOD-PAP法和HK法,其中GOD-PAP法所需酶(葡萄糖氧化酶和过氧化物酶)易寻找,成本低,准确度、精密度都能达到临床要求,是一般实验室常规方法.但一些还原性物质如尿酸、维生素C、胆红素等可抑制呈色反应.好在现在的商品试剂盒中,都含有抗干扰成分,能有效地排除上述物质的干扰,黄疸标本总胆红素浓度342μmol/L以下对测定结果均无显著影响[1].但实际工作中发现,重症黄疸患者的血糖测定采用GOD-PAP法常在2.8mmol/L以下,黄疸越重血糖越低,而多数患者临床并无低血糖症状,也未使用维生素C,用HK法复查后血糖常在正常范围.为给临床提供更加准确的结果特作如下试验.     

总胆红素对血糖测定的影响

目前,血糖测定应用较广的是GOD-PAP法和HK法,其中GOD-PAP法所需酶(葡萄糖氧化酶和过氧化物酶)易寻找,成本低,准确度、精密度都能达到临床要求,是一般实验室常规方法.但一些还原性物质如尿酸、维生素C、胆红素等可抑制呈色反应.好在现在的商品试剂盒中,都含有抗干扰成分,能有效地排除上述物质的干扰,黄疸标本总胆红素浓度342μmol/L以下对测定结果均无显著影响[1].但实际工作中发现,重症黄疸患者的血糖测定采用GOD-PAP法常在2.8mmol/L以下,黄疸越重血糖越低,而多数患者临床并无低血糖症状,也未使用维生素C,用HK法复查后血糖常在正常范围.为给临床提供更加准确的结果特作如下试验.     

5水平冰冻混合人血清葡萄糖候选标准物质的制备研究

目的研制5水平冰冻混合人血清葡萄糖标准物质,为葡萄糖常规方法的准确度验证,提供稳定和互通性良好的真实值控制品。方法收集足量正常体检人群无肉眼溶血、脂血和黄疸的血清标本,依次采用Sartorius公司的0.8、0.45、0.2μm过滤微膜过滤除菌后分装于冻存管中。按《标准物质/标准样品生产者能力认可准则》[1]的要求,对冰冻混合人血清进行均匀性研究,短期稳定性(室温、4℃、-20℃)和长期稳定性(-80℃)研究,定值结果用"靶值±不确定度"表示,2家候选葡萄糖参考实验室测定结果均值作为靶值,不确定度包括测定变异和测定系统偏差、瓶间差及稳定性所带来的不确定度。并对冰冻混合人血清在6种进口配套检测系统中的互通性进行观察。结果共制备5水平冰冻混合人血清(C1、C2、C3、C4、C5)。C4水平血清瓶间标准偏差为0.018 mmol/L,其余4水平瓶间偏差为零,经单因素方差分析后P值全部大于0.05。稳定性研究经线性回归方差分析P值全部大于0.05。2家候选葡萄糖参考实验室测定结果的均值为3.08、5.92、13.60、9.311、8.71 mmol/L,不确定度相应为0.09、0.17、0.36、0.230、.55 mmol/L。5水平冰冻混合人血清的坐标点全部位于40份人血清标本的直线回归95%可信区间范围内,该5水平冰冻混合人血清与血清的反应性相同。结论 5水平冰冻混合人血清均匀性、稳定性、互通性良好,定值准确。     

HK和GOD法检测口服葡萄糖耐量试验结果的差异研究

目的探讨己糖激酶(HK)法和葡萄糖氧化酶(GOD)法测定糖尿病患者口服葡萄糖耐量试验(OGTT)检验结果的差异及原因。方法将进行OGTT的患者分为3组,A组:将75 g葡萄糖溶于300 mL温开水中,令受检者一次服下;B组:口服150 mL 0.5 g/mL葡萄糖注射液,令受检者一次服下;C组:将75 g葡萄糖溶于300 mL温开水中,放置过夜,令受检者一次服下。3组分别于空腹及服后30、60、120、180 min采血分离血清,用HK和GOD法分别测定各时段血糖;比较2种方法血糖测定结果的差异。结果 B组和C组各时段血糖结果HK法和GOD法之间差异无统计学意义(P>0.05);A组空腹血糖2种方法测定结果差异无统计学意义(P>0.05),而在30、60、120、180 min时2种方法存在明显差异(P<0.05)。结论 GOD法对β-D型葡萄糖高度特异,实验室如采用GOD法测定OGTT时,应注意α型葡萄糖影响造成的OGTT曲线偏低的现象。     

血清葡萄糖及1，5-脱水葡萄糖醇双项同测的建立

目的建立新全酶终点法同时测定血清中1，5-脱水葡萄糖醇（1，5-AG）和葡萄糖（Glu）。方法用葡萄糖激酶（GK）和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）偶联系统使血清中Glu彻底转化为不与呋喃糖氧化酶（PROD）反应的6-磷酸葡萄糖酸内酯（6-PGA），以其吸光度变化计算出Glu浓度；以PROD氧化1，5-AG，生成1，5-脱水果糖和H2O2，用Trinders反应比色测定出1，5-AG的浓度。结果1，5-AG在550μmol／L（Y=0．001X＋0．0658，r=0．999）以内，Glu浓度在40mmol／L（Y=0．051X＋0．128，r=0．9989）以内线性良好。Glu和1，5-AG的平均批内变异系数（CV）分别为0．88％和1．05％，批间CV分别为1．40％和1．94％。Glu和1，5-AG的平均回收率分别为100．2％和101．6％。三酰甘油（TG）≤8．9mmol／L、血红蛋白（Hb）≤4g／L、总胆红素≤350μmol／L时不影响Glu和1，5-AG的测定。本法测定l，5-AG与Lana微柱法及GK法与HK法测定Glu相关性均良好（r^2=0．999）。Glu与1，5-AG的95％参考值范围分别为3．7—5．7mmol／L和83．1～240．7μmol／L。结论本法简便快速、灵敏、准确和稳定，可自动化双项同测Glu和1，5-AG，为糖尿病的检测与治疗监控提供了新的方法。     

新诊断2型糖尿病患者血糖波动与胰岛细胞功能的关系

目的：探讨新诊断2型糖尿病患者血糖波动与胰岛细胞功能的关系。方法分析51例新诊断2型糖尿病患者的临床资料,血糖波动采用OGTT 1 h与OGTT 0 h差值（GLU1）、OGTT 2 h与OGTT 0 h差值（GLU2）表示。胰岛细胞功能采用空腹血清胰岛素、空腹血清C肽、稳态模式评估法的胰岛素分泌指数（HOMA-β）及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）表示。分析患者血糖波动情况,即GLU1、GLU2与空腹血清胰岛素、空腹血清C肽、HOMA-β、HOMA-IR的相关性。结果该组患者的GLU1为（7.84±2.31）mmol/L,GLU2为（7.4±2.7）mmol/L,空腹血清胰岛素为（13.8±6.0）mU/L,空腹血清C肽为（0.85±0.26）nmol/L,HOMA-β的对数值为4.10±0.64,HOMA-IR的对数值为1.43±0.54。GLU1、GLU2与空腹血清胰岛素、空腹血清C肽、HOMA-IR的对数无相关性（P均＞0.05）,但与HOMA-β的对数值呈负相关（r值分别为-0.344、-0.498,P均＜0.05）。结论新诊断2型糖尿病患者血糖波动可能与胰岛素分泌缺陷密切相关。     

冠心病患者血糖水平与冠状动脉病变Gensini评分的相关性研究

目的探讨冠心病患者血糖水平与冠状动脉病变Gensini评分的相关性。方法入选经冠状动脉造影确诊冠心病,并排除糖尿病的患者328例,行口服葡萄糖耐量（OGTT）试验,根据OGTT试验结果,将患者分为5组,血糖正常组、单纯空腹血糖受损（IFG）组、单纯糖耐量受损（IGT）组、复合糖耐量受损组、新诊断糖尿病组,通过Gensini评分系统对其冠状动脉病变程度进行评分,进行组间冠心病危险因素和冠状动脉病变程度比较,同时对FPG、2hPG水平与冠状动脉病变Gemini进行单因素和多因素分析。结果单纯空腹血糖受损组、单纯糖耐量受损组、复合糖耐量受损组及新诊断糖尿病组的冠状动脉病变总积分均高于血糖正常组（P均〈0．05）;尤以IGT组、复合糖耐量受损组、新诊断糖尿病组增高显著;空腹血糖受损、糖耐量受损、复合糖耐量受损组、新诊断糖尿病组的组间冠状动脉病变总积分无显著差异（P均〉0．05）。2hPG与冠状动脉病变Gensini积分（r=0．358;P〈0．001）呈正相关,FPG与冠状动脉病变Gemini积分（r=0．232;P=0．046）呈正相关。多元逐步回归分析显示2hPG与冠状动脉病变总积分（β=0．358,P=0．000）独立相关。结论IGT、IFG、新发糖尿病与冠状动脉粥样硬化密切相关,加重冠状动脉病变程度,尤其以餐后血糖升高对冠状动脉病变的影响显著。     

两种抗凝血作为POCT血糖仪比对物的评价

[目的]探讨肝素和EDTA抗凝血POCT血糖仪血糖（Glu）检测结果是否存在差异。[方法]采集两种抗凝血,用八台POCT血糖仪（以下简称“仪器1—8”）和全自动干化学仪（以下简称“干化学仪”）检测血糖,以干化学仪检测值为目标“靶值”,将两种抗凝血POCT血糖仪检测结果与之比对,计算偏差,以体外诊断检验系统自测用血糖监测系统通用技术条件（简称“通用技术条件”,GB／T19634—2005）为依据,Glu〉4．2mmo]／L,相对偏差≤20％结果为合格。Glu≤4．2mmo]／L,绝对偏差〈0．83mmol／L为合格,本次比对以每台仪器I〉80％检测结果合格为该血糖仪合格判断标准。然后对每台POCT血糖仪肝素和ED—TA抗凝血检测结果作相关分析。[结果]Glu〉4．2mmol／L时,仪器1—8肝素抗凝血与“靶值”最小偏差0．9％,最大偏差28．6％。EDTA抗凝血与“靶值”最小偏差0．2％,最大偏差30．1％。Glu≤4．2mmol／L时,各台仪器两种抗凝剂检测值与目标“靶值”均小于0．83mmol／L。仪器1—8肝素抗凝静脉血（Y）和EDTA抗凝静脉血（x）相关系数T2〉0．95（P〈0．01）。[结论]本次结果提示,肝素和EDTA抗凝血POCT血糖仪检测血糖没有明显差异。两种抗凝血均可作为POCT血糖仪与强生干化学分析仪性能评价比对物。     

动态血糖监测新发2型糖尿病患者糖耐量试验时的血糖变化

目的 探讨2型糖尿病患者口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)时的血糖变化特点.方法 采用动态血糖监测系统(continuous glucose monitoring system,CGMS)对35例新诊断的2型糖尿病患者和24例糖代谢正常者进行动态血糖监测,同时进行75 g葡萄糖的OGTT,比较两组在不同糖代谢状态下糖负荷后3小时内平均血糖值(MBG)、血糖峰值(PPG)、血糖达峰时间(△t)、血糖波动幅度(PGE)和血糖的曲线下面积增值(IAUC)变化.结果 2型糖尿病组OGTT 3小时的MBG、PPG、△t、PGE和IAUC显著高于对照组,分别为 (11.6±13.16) mmol/L vs (7.66±0.80) mmol/L、(14.21±3.79) mmol/L vs (9.09±1.09) mmol/L、(117.09±36.84) min vs (84.04±34.17) min、(6.30±2.87) mmol/L vs (2.96±0.87) mmol/L、(3.22±1.97) mmol·L-1·d vs (1.69±0.71) mmol·L-1·d(均P<0.01).2型糖尿病患者OGTT 2小时血糖达到诊断标准的占68.6%(24/35),与未达该标准的31.4%(11/35)相比,MBG、PPG、PGE和IAUC均明显增高(均P<0.01),分别为(12.99±2.70) mmol/L vs (8.46±0.82) mmol/L、(15.97±3.24) mmol/L vs (10.41±1.15) mmol/L、(7.49±2.44) mmol/L vs (3.70±1.89) mmol/L、(4.02±1.73) mmol·L-1·d vs (1.47±1.21) mmol·L-1·d;△t的差异无统计学意义(P＞0.05).2型糖尿病组在不同糖化血红蛋白水平时,OGTT时除MBG有显著差异外(P<0.05),PPG、PGE和IAUC的差异均无统计学意义(均P＞0.05);而在不同空腹血糖状态时,OGTT的血糖波动指标差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 新发2型糖尿病患者在糖负荷状态下血糖波动加剧,达峰时间延迟;筛查2型糖尿病时,对OGTT 2小时血糖接近标准值上限或糖耐量异常者应复查OGTT以减少漏诊.     

糖化血红蛋白联合空腹血糖筛查2型糖尿病高危人群的临床意义

目的了解糖化血红蛋白(HbA1c)筛查糖尿病和糖代谢受损的敏感性并与空腹血糖(FBG)进行比较。方法对400例无糖尿病病史的糖尿病高危人群同时检测FBG和HbA1c,据空腹血糖水平分为三组:A1组:FBG<6.1 mmol/L,计336例,A2组:FBG 6.1-6.9 mmol/L,45例,A3组FBG≥7.0 mmol/L,19例。结果 (1)400例人群中,HbA1c≥6.0%,88例,异常率为22.0%;FBG≥6.1mmol/L,54例,异常率13.5.%,HbA1c的异常率高于FBG,P<0.05。(2)A1组HbA1c>≥6.0%,29例,占8.6%;A2组HbA1c≥6.0%,41例,占91.1%;A3组HbA1c≥6.0%,18例,占94.7%;(3)400例人群中,HbA1c≥6.0%或FBG≥6.1mmol/L,93例,异常率23.3%%。结论 HbA1c筛查糖尿病高危人群血糖异常的敏感性高于空腹血糖,两者联合检查有助发现更多糖代谢异常的患者。     

血糖和血白细胞变化在急性心脑血管疾病中的临床意义

目的和方法:通过检测急性心脑血管疾病患者血糖和外周血白细胞,观察血糖和外周血白细胞在急性心脑血管疾病发病时的变化及其临床意义。结果:①病变较重、并发症多与病变较轻、并发症少的心脑血管疾病患者相比较,急性发作时,白细胞总数(13.73±3.2)109/L,中性粒细胞分类的百分比均明显升高(83.88±6.47)%;②2组血糖水平也有显著差异;③2组患者发病时血压均明显升高,心率也有增加的表现。但不管是收缩压还是舒张压,2组均无显著差别;但心率水平却有显著性差异,2组分别为(98.21±26.95)次/min和(82.95±14.74)次/min;④2组患者病情稳定的时间也有显著的差别。结论:急性心脑血管疾病发病时,血糖及外周血白细胞的变化与患者的病情轻重和病情稳定时间有关。