LncRNA LINC00958通过靶向miR-490-3p促进甲状腺乳头状癌细胞的增殖、侵袭和迁移

目的:研究LncRNA LINC00958对甲状腺乳头状癌细胞的影响及其作用机制。方法:TPC-1和K-1细胞分别分成Control、shRNA-NC、shRNA-LINC00958-1、shRNA-NC+inhibitor-NC、shRNA-LINC00958-1+inhibitor-NC和shRNA-LINC00958-1+miR-490-3p inhibitor组。TPC-1和K-1细胞移植的荷瘤鼠分别分为shRNA-NC、shRNA-LINC00958-1、shRNA-NC+inhibitor-NC、shRNA-LINC00958-1+inhibitor-NC和shRNA-LINC00958-1+miR-490-3p inhibitor组。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LINC00958和miR-490-3p的表达水平;CCK-8检测细胞活力;Western blot检测蛋白表达水平;细胞划痕实验检测细胞迁移水平,Transwell小室检测细胞侵袭水平,克隆形成实验检测细胞增殖水平;双荧光素酶报告实验检测LINC00958和miR-490-3p的靶向关系。测定肿瘤质量及体积。结果:相比于正常组织,LINC00958在甲状腺癌组织中高表达;相比于Nthy-ori 3-1细胞,LINC00958在TPC-1和K-1细胞中高表达,miR-490-3p低表达。LINC00958沉默后,甲状腺乳头状癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著降低。干扰miR-490-3p表达逆转LINC00958沉默对甲状腺乳头状癌细胞的增殖、迁移和侵袭效果,破坏LINC00958沉默对肿瘤生长的抑制效果。结论:抑制LINC00958表达可抑制TPC-1和K-1细胞增殖、迁移和侵袭能力,其机制与靶向miR-490-3p表达有关。     

lncRNA NONHSAT070341在宫颈癌中的差异表达及其对宫颈癌细胞生物学特性的影响

目的:探究长链非编码RNA（long noncoding RNA,lncRNA）NONHSAT070341在宫颈癌组织及细胞系SiHa和Caski中的表达及其对宫颈癌细胞生物学功能如增殖、迁移、侵袭、凋亡及细胞周期分布的影响。方法:收集2021年06月至2022年06月于山西医科大学第二临床医学院妇产科行手术切除的处于不同宫颈病变阶段的患者90例,以30例同期因子宫肌瘤行子宫全切术的正常宫颈组织作为对照,通过实时荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）检测宫颈癌组织及细胞系中lncRNA NONHSAT070341的表达情况;在SiHa及Caski细胞中瞬时转染小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰片段来靶向敲低lncRNA NONHSAT070341,并采用qRT-PCR验证转染效率;通过CCK-8和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,细胞周期实验检测对宫颈癌细胞周期分布的影响,划痕愈合实验评估细胞横向迁移能力,Transwell实验检测细胞纵向迁移及侵袭能力,流式细胞术分析细胞凋亡情况。结果:lncRNA NONHSAT070341在宫颈癌组织和细胞中高表达;NONHSAT070341 siRNA可降低SiHa和Caski细胞中NONHSAT070341的表达;敲低NONHSAT070341后,宫颈癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力明显降低,细胞停滞在G1期,影响了宫颈癌细胞周期的分布,但却增加了SiHa 和 Caski 细胞的凋亡率。结论:NONHSAT070341可促进宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭,改变了宫颈癌的生物学行为并有望成为诊断宫颈癌的一个新兴生物标志物。     

表观遗传修饰介导抑制SOSTDC1表达促进宫颈癌细胞的恶性生物学行为

目的：探究含硬化蛋白域蛋白1（SOSTDC1）对宫颈癌细胞恶性生物学行为的调控及其分子机制。方法：收集2020年8 月至2022 年5 月间在福建省肿瘤医院活检或手术切除的53 例宫颈癌组织和相应的癌旁组织标本,免疫组化法检测SOSTDC1 蛋白在宫颈癌组织及相应癌旁组织中的表达,qPCR 法检测正常宫颈细胞、宫颈癌细胞中SOSTDC1 mRNA 表达;将SOSTDC1 过表达慢病毒（OE-sostdc1）和对照空病毒（NC）感染宫颈癌细胞SiHa 及CaSki,将其分为SiHa-OE-sostdc1、SiHa-NC、CaSki-OE-sostdc1、CaSki-NC 组,采用WST-1法、细胞集落形成实验、Transwell 实验和WB法检测转染各组SiHa 及CaSki 细胞的增殖、集落形成、迁移和侵袭能力和BMP、Wnt/β-catenin 信号途径相关蛋白及上皮-间充质转化（EMT）相关蛋白的表达。用DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂2''-脱氧胞苷（5''-Aza-CdR）处理宫颈癌细胞后采用qPCR和WB法检测SOSTDC1 mRNA及蛋白的表达变化,用甲基化特异性PCR（MSP）检测5 例配对宫颈癌组织与癌旁组织中SOSTDC1 基因启动子区甲基化水平,同时qPCR 检测其SOSTDC1 mRNA水平。结果：与癌旁组织比较,SOSTDC1蛋白在宫颈癌组织中呈低表达（P<0.01）,且与淋巴结转移与FIGO分期有关联（均P<0.05）;与正常宫颈HUCEC细胞比较,SOSTDC1 mRNA 在宫颈癌C33A、HeLa、SiHa、CaSki 细胞中均呈低表达（均P<0.01）。过表达SOSTDC1显著抑制SiHa 及CaSki 细胞的增殖、迁移和侵袭能力（均P<0.05）。WB法结果检测显示,过表达SOSTDC1 显著抑制 SiHa 及 CaSki 细胞中磷酸化 Smad、Dvl2/3、β -catenin、VIM、N-cadherin、Snail 蛋白的表达（均P<0.05）,5''-Aza-CdR 处理后的SiHa 及CaSki 细胞中SOSTDC1 mRNA和蛋白水平均显著增加（均P<0.05）,MSP检测结果显示,相较于癌旁组织,宫颈癌组织中SOSTDC1基因启动子区呈高度甲基化,且SOSTDC1 mRNA水平降低（P<0.01）。结论：SOSTDC1在宫颈癌组织中呈低表达且与肿瘤的恶性进展关联,其表达下调与其基因启动子区高度甲基化有关,过表达SOSTDC1 可能通过阻断BMP及Wnt/β-catenin信号通路从而抑制SiHa、CaSki细胞的增殖、侵袭和迁移能力。     

过表达lncRNA LINC00886 抑制食管鳞状细胞癌Eca109 细胞的恶性生物学行为

[摘要] 目的: 检测lncRNA LINC00886 在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织及细胞系中的表达及其对Eca109 细胞体外增殖、迁移及侵袭的影响。方法: 收集2014 年6 月至2016 年12 月河北医科大学第四医院生物标本库69 例ESCC手术患者的癌及对应的癌旁组织标本,以及ESCC细胞系Eca109、TE13、TE1、Kyse150、Yes-2 和Kyse170,用qPCR 法检测LINC00886 在ESCC组织及细胞系中的表达情况。分别用pIRES2-LINC00886、pIRES2-NC转染Eca109 细胞,用qPCR法检测pIRES2-LINC00886 转染Eca109细胞后LINC00886 的过表达效率;用MTS、克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell 侵袭实验分别检测过表达LINC00886 对Eca109 细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果: 在ESCC组织中LINC00886 表达水平明显低于癌旁组织（P<0.01）,其表达水平与肿瘤TNM分期和淋巴结转移相关（均P<0.05）。LINC00886 在ESCC 细胞中的表达水平也低于对照组（均P<0.01）。转染pIRES2-LINC00886 后,Eca109 细胞中LINC00886 的表达水平显著高于对照组（均P<0.05）。与对照组相比,过表达LINC00886 明显抑制Eca109 细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01)。结论: lncRNA LINC00886 低表达可能与ESCC的发生发展相关,过表达LINC00886可抑制ESCC细胞的增殖、迁移与侵袭能力。     

淋巴管内皮细胞微环境对卵巢癌淋巴结定向高转移细胞上皮-间质转化的影响

目的通过人卵巢癌淋巴结定向高转移的细胞株（SKOV3-PM4）与人淋巴管内皮细胞株（HLEC）的条件培养和共培养,探讨HLEC微环境对SKOV3-PM4的运动迁移能力以及上皮一间质转化（EMT）的影响。方法采用transwell小室体外侵袭法,观察经HLEC的条件培养后SKOV3．PM4的侵袭、迁移能力的改变。SKOV3-PM4经HLEC的条件培养和共培养后的爬片细胞,采用免疫组化法检测转化生长因子（TGF-β1）、E．钙黏蛋白（E．cadherin）、波形蛋白（vimentin）表达的变化。结果经HLEC培养基的条件培养后SKOV3-PM4细胞的侵袭率为（53＋11）％,单独培养的SKOV3-PM4细胞的侵袭率为（30~5）％（P〈0．05）;条件培养后SKOV3-PM4细胞的迁移率为（48＋5）％,单独培养的SKOV3-PM4细胞的迁移率为（34＋2）％（P〈0．05）。SKOV3．PM4细胞经条件培养和共培养后TGF—B。和vimentin表达上调（P均〈0．05）,E—cadherin表达下调（尸〈0．05）。结论淋巴管内皮细胞微环境可促进卵巢癌淋巴结定向高转移细胞间质化的转变,增强卵巢癌细胞的侵袭、迁移能力。     

LINC00511过表达促进宫颈癌HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:研究长链非编码RNA(LncRNA)LINC00511过表达对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响并探索其潜在机制。方法:利用荧光定量PCR（qRT-PCR）及Western blotting检测宫颈癌HeLa细胞中LINC00511 mRNA和蛋白表达;利用细胞转染试验过表达宫颈癌细胞中的LINC00511,利用CCK-8检测法、Transwell实验探究过表达LINC00511对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响;通过Western blotting检测HeLa细胞中EMT相关蛋白的表达情况,探究潜在作用机制。结果:HeLa细胞中LINC00511 mRNA和蛋白表达水平显著高于正常宫颈内皮细胞（P＜0.001）;CCK-8法及Transwell实验显示,过表达LINC00511促进了宫颈癌HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭能力（P＜0.01）;Western blotting检测显示,过表达LINC00511后宫颈癌HeLa细胞中E-cadherin蛋白表达水平显著下调,而Vimentin 和 α-SMA蛋白表达水平显著上调（P＜0.05）。结论:宫颈癌HeLa细胞中LINC00511显著高表达,可能是宫颈癌潜在的癌基因,LINC00511过表达可促进宫颈癌HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭,可能通过调控 EMT过程来调控宫颈癌细胞的生物学行为。     

GBX2过表达促进人宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移及侵袭

[摘要] 目的：探讨GBX2 基因在人宫颈癌SiHa 细胞增殖和侵袭转移中的作用及其机制。方法：应用质粒转染技术,分别将过表达GBX2 基因重组质粒pCMV6-entry-GBX2（实验组）及空载体质粒pCMV6-entry（阴性对照组）转染到宫颈癌SiHa 细胞中,用WST-1 法、集落形成实验、流式细胞术分别检测转染细胞的增殖、集落形成和细胞周期,用划痕愈合实验、Transwell 实验检测细胞的迁移、侵袭能力,用ELISA 法检测细胞培养上清中IL-6 的表达水平,用WB检测EMT相关蛋白的表达变化并探讨其可能的作用机制。结果：与SiHa/pCMV6 组相比,上调GBX2 表达后：（1）SiHa/GBX2 组细胞的增殖、集落形成、迁移和侵袭能力明显增强（均P<0.01）,G0/G1 期的细胞比例减少、S期与G2/M期的细胞比例增加（均P<0.01）;（2）SiHa/GBX2 组细胞EMT相关蛋白上皮钙黏蛋白表达水平下降,神经钙黏蛋白、波形蛋白和snail 表达水平上调（均P<0.01）;（3）SiHa/GBX2 组细胞培养上清中IL-6 的表达水平明显增高（P<0.01）;（4）SiHa/GBX2 组细胞STAT3 磷酸化水平增强,并能被STAT3 抑制剂S31-201 抑制（P<0.01）。结论：GBX2可能通过IL-6/STAT3 通路诱导宫颈癌SiHa 细胞EMT,从而促进宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。     

脂肪抑制素对宫颈癌细胞增殖、克隆形成、侵袭、迁移的抑制作用及相关机制研究

目的:探究脂肪抑制素对宫颈癌细胞增殖、克隆形成能力、侵袭及迁移能力以及细胞周期、细胞凋亡的影响。方法:选取宫颈癌细胞系SiHa,利用不同浓度脂肪抑制素进行培养。通过MTT实验、平板克隆形成实验、Transwell实验及流式细胞术检测实验分别检测脂肪抑制素对宫颈癌细胞增殖、克隆形成能力、侵袭/迁移能力以及细胞周期/细胞凋亡的影响,探究脂肪抑制素对宫颈癌细胞的抗肿瘤作用。结果:MTT实验显示,脂肪抑制素对SiHa细胞的增殖/生长具有明显抑制作用,存在时间和剂量依赖性(P＜0.05);根据细胞增殖率得出72 h时SiHa细胞的IC50为16.98 μmol/L。平板克隆形成实验显示,脂肪抑制素明显降低了SiHa细胞的克隆形成能力,具有剂量依赖性（P＜0.01）。Transwell实验显示,脂肪抑制素也明显降低SiHa细胞侵袭/迁移能力,具有剂量依赖性（P＜0.001）。流式细胞术检测实验显示,较高浓度脂肪抑制素可诱导宫颈癌细胞SiHa的细胞周期停滞在G2/M期,促进其细胞凋亡（P＜0.05）。结论:脂肪抑制素对宫颈癌细胞具有明显抗肿瘤作用,可作为宫颈癌治疗的新药物。     

LINC00997在胃贲门腺癌中表达的临床意义及其对SGC7901细胞迁移、侵袭和EMT的影响

目的： 检测LINC00997在胃贲门腺癌（GCA）组织及胃癌细胞中的表达,分析其表达与患者临床病理特征和预后的关系,探讨敲减LINC00997对胃癌SGC7901细胞迁移、侵袭及上皮间质转化（EMT）的影响。 方法： 基于TCGA和GTEx数据库分析LINC00997在胃癌组织中的表达及其与患者预后的关系。应用qPCR法检测68例GCA组织和相应癌旁组织以及胃癌细胞中LINC00997的表达水平,分析其表达与患者临床病理特征及预后的关系。通过划痕愈合、Transwell侵袭实验分别检测敲减LINC00997 对 SGC7901 细胞迁移和侵袭的影响,qPCR 法和 WB 法检测敲减LINC00997对EMT 相 关 标 志 物 E-cadherin、N-cadherin及vimentin表达的影响。 结果： LINC00997在胃癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织（P<0.05）,且LINC00997高表达组患者的OS及DFS显著低于LINC00997低表达组患者（P<0.01 或 P<0.05）。在 68例在GCA组织中,LINC00997的表达水平显著高于癌旁组织（P<0.01）,其表达与患者淋巴结转移、TNM 分期及 OS相关联（P<0.05或P<0.01）。敲减LINC00997的 SGC7901 细胞的迁移和侵袭能力均显著降低（均 P<0.01）,细胞中E-cadherin的表达显著升高,N-cadherin、vimentin的表达均显著降低（P<0.05或P<0.01）。 结论： LINC00997在GCA组织和胃癌细胞中高表达,其高表达可能促进了胃癌细胞的迁移、侵袭及EMT进程,有望成为GCA患者预后评估的分子标志物。     

C-藻蓝蛋白抑制TGF-β1诱导的宫颈癌Caski细胞上皮-间充质转化

目的：探究C-藻蓝蛋白（C-phycocyanin，C-PC）对转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1，TGF-β1）诱导的 宫颈癌Caski细胞上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）的影响。方法：根据处理方法不同将Caski细胞分为 3组即10 ng/ml TGF-β1处理组、 10 ng/ml TGF-β1+300 μg/ml C-PC共处理组和对照组（未加药处理），处理24 h后观察细胞的形态 变化；采用划痕实验及Transwell实验分别检测TGF-β1和C-PC对Caski细胞迁移和侵袭的影响；Western blotting方法检测C-PC 对TGF-β1诱导的Caski细胞上皮表型标志蛋白E-cadherin、间质表型标志蛋白N-cadherin表达水平的影响；qPCR 法检测间质表 型相关锌指转录因子Snail、Zeb1、Twist mRNA的表达。结果：TGF-β1处理组Caski细胞失去原有的上皮表型的特征， 而TGF-β 1+C-PC共处理组细胞保持正常的上皮表型的特征；TGF-β1处理组Caski细胞的迁移率[（60.0±1.4） % vs（33.5±2.2） %、（40.0± 2.8） %， 均P<0.05]和侵袭穿膜细胞数[（108.2±6.2）vs（25.2±3.1）、（39.8±5.4）个， 均P<0.01]较共处理组和对照组显著升高；与对照 组相比，TGF-β1处理组Caski细胞中E-cadherin表达显著降低（P<0.05），Twist、Snail、Zeb1的mRNA表达水平显著升高（P<0.01）， 而加入C-PC共处理可逆转上述改变（P<0.05或P<0.01），同时显著降低N-cadherin的蛋白表达水平（均P<0.05）。结论：C-PC处 理能够抑制TGF-β1诱导的Caski细胞侵袭转移能力进而影响EMT过程，其机制可能与C-PC处理降低Twist、Snail、Zeb1的 mRNA表达有关。     

宫颈癌细胞株和宫颈上皮组织中Pin1和Cyclin D1的表达及临床意义

背景与目的：肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1在人类多种肿瘤中过表达,Pin1过表达可增强Cyclin D1表达,在肿瘤发生发展中起重要作用。本研究拟探讨宫颈癌细胞株及宫颈上皮组织中Pin1、Cyclin D1的表达及其临床意义。方法：应用RT-PCR、Western blot法检测HeLa、SiHa、C33a、Caski细胞中Pin1和Cyclin D1基因蛋白表达,免疫组化法检测10例正常宫颈、21例宫颈上皮内瘤样病变、57例浸润癌组织中Pin1和Cyclin D1的表达状况,评价其临床意义。结果：HeLa、SiHa、C33a、Caski细胞存在不同程度Pin1 mRNA及蛋白过表达（P〈0．05）。正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变、浸润癌组织中Pin1蛋白表达逐渐增强,分别为0％、47．62％、64．91％（P〈0．05）。Pin1蛋白过表达与宫颈癌临床分期、病理分级、淋巴结转移无关（P〉0．05）;但宫颈腺癌组织中Pin1表达明显高于鳞癌（P〈0．05）。Pin1过表达与Cyclin D1表达呈显著正相关（P〈0．05）。结论：Pin1在宫颈癌细胞株及宫颈癌组织中存在mRNA及蛋白水平上的过表达。Pin1过表达与Cyclin D1表达密切相关．Pin1和Cyclin D1异常表达可能参与宫颈癌的发生发展。     

VEGF-C及其受体Flt-4在乳腺癌细胞增殖及转移中的作用

背景与目的:血管内皮细胞生长因子-C(vascularendothelialgrowthfactor-C,VEGF-C)是VEGF家族成员之一,是惟一可与淋巴管内皮细胞表面受体VEGFR-3(即fms-liketyrosinekinase-4,Flt-4)结合并调节淋巴管生理功能的因子。目前发现VEGF-C/Flt-4系统在多种肿瘤的转移中起调控作用,但对该系统在乳腺癌方面的研究国内外报道很少。本实验旨在探讨VEGF-C/Flt-4在乳腺癌增殖及转移中的作用和意义。方法:采用免疫组织化学方法对101例乳腺癌组织切片染色,观察乳腺癌组织中VEGF-C、Flt-4、增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的表达情况。结果:101例乳腺癌组织中,VEGF-C阳性率为93.1%(94/101),Flt-4阳性率为86.1%(87/101),且Flt-4阳性指数随VEGF-C表达的增强而增加(r=0.816,P<0.001);PCNA的阳性率为88.8%(89/101),且随着VEGF-C表达强度增强,肿瘤细胞增殖活性也随之增强(r=0.673,P<0.001)。VEGF-C阳性指数在转移组(61.89±17.79)明显高于未转移组(44.28±17.87)(P<0.05)。随着癌细胞VEGF-C表达强度增强,Flt-4阳性脉管数也随之增加,各组间均有显著性差异(P<0.001)。乳腺癌中Flt-4阳性脉管数在淋巴结转移组(15.55±3.63)明显高于未转移组(10.71±2.90)(P<0.05)。结论:VEGF-C及其受体Flt-4在人乳腺癌细     

TFESB调控lncRNA LINC00858/miR-324-5p通路抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:探讨半枝莲总黄酮提取物(total fiavonoids extract from Scutellaria barbata D.Don,TFESB)调控长链非编码RNA(lncRNA) LINC00858/miR-324-5p通路对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制.方法:qRT-PCR检测20例宫颈癌组织...     

Role of vascular endothelial growth factor C expression in the development of lymph node metastasis in gastric cancer.

Neogenesis of lymphatic vessel and lymphatic invasion is frequently found in the stroma of cancers, but the mechanisms of this phenomenon remain unclear. Vascular endothelial growth factor C (VEGF-C) is known to be the only growth factor for the lymphatic vascular system, and its receptor has been identified as Flt4. To clarify the mechanism of lymphatic invasion in cancer, we studied the expression of VEGF-C and flt4 genes in gastric cancer tissues. VEGF-C mRNA was mainly expressed in primary tumors (15 of 32; 47%), but the frequency of VEGF-C mRNA expression was low in normal mucosa (4 of 32; 13%). In primary tumors, there was a significant relationship between VEGF-C and flt4 mRNA expression. In contrast, Flt4 was mainly expressed on the lymphatic endothelial cells but not in cancer cells. A strong correlation was found between VEGF-C expression and lymph node status, lymphatic invasion, venous invasion, and tumor infiltrating patterns. Cancer cells in the lymphatic vessels frequently showed intracytoplasmic VEGF-C immunoreactivity. Furthermore, there was a close correlation between VEGF-C tissue status and the grade of lymph node metastasis. Patients with high expression of VEGF-C protein had a significantly poorer prognosis than did those in low VEGF-C expression group. By the Cox regression model, depth of wall invasion, lymph node metastasis, and VEGF-C tissue status emerged as independent prognostic parameters, and the VEGF-C tissue status was ranked third as an independent risk factor for death. These results strongly suggest that cancer cells producing VEGF-C may induce the proliferation and dilation of lymphatic vessels, resulting in the development of invasion of cancer cells into the lymphatic vessel and lymph node metastasis.     

抑制LINC00958表达调控miR-422a促进结直肠癌细胞凋亡及放射敏感性的机制

目的 探讨lncRNA LINC00958对结直肠癌细胞凋亡及放射敏感性的影响以及其作用机制。方法 将pcDNA、pcDNA-LINC00958、si-NC、si-LINC00958、miR-NC和miR-422a质粒分别转染到SW480细胞中,并分别记为pcDNA组、pcDNA-LINC00958组、si-NC组、si-LINC00958组、miR-NC组和miR-422a组;将anti-miR-NC和anti-miR-422a质粒分别与si-LINC00958共转染到SW480细胞中,并分别记为si-LINC00958+anti-miR-NC组和si-LINC00958+anti-miR-422a组;分别将miR-NC和miR-422a分别转染到WT-LINC00958和MUT-LINC00958组细胞中,检测荧光活性;转染均用脂质体法。采用qRT-PCR检测miR-422a和LINC00958的表达;Western blot检测蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞克隆形成实验检测对结直肠癌细胞放射敏感性的影响;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果 结直肠癌细胞中LINC00958高表达,miR-422a低表达;抑制LINC00958表达和过表达miR-422a,可促进结直肠癌细胞凋亡,并增加细胞放射敏感性。LINC00958可靶向调节miR-422a表达;抑制miR-422a,逆转了抑制LINC00958表达对结直肠癌细胞的放射增敏和细胞凋亡促进的作用。结论 抑制LINC00958表达,增加结直肠癌细胞的放射敏感性,并促细胞凋亡,其机制可能与调控miR-422a有关,将为结直肠癌治疗提供新靶点和新思路。     

Inhibiting lncRNA LINC00958 expression promotes apoptosis of colorectal cancer cells and increases the radiosensitivity throuth targeting miR-422a

Objective To investigate the effect of lncRNA LINC00958 on the apoptosis and radiosensitivity of colorectal cancer cells and its underlying mechanism. Methods The pcDNA, pcDNA-LINC00958, si-NC, si-LINC00958, miR-NC, and miR-422a plasmids were transfected into SW480 cells and assigned into the pcDNA group, pcDNA-LINC00958 group, si-NC group, si-LINC00958 group, miR-NC group, miR-422a group, respectively. Anti-miR-NC and anti-miR-422a plasmids were co-transfected into SW480 cells with si-LINC00958, and assigned into the si-LINC00958+anti-miR-NC group and si-LINC00958+anti-miR-422a group. miR-NC and miR-422a were transfected into the WT-LINC00958 and MUT-LINC00958 cells, respectively. The fluorescence activity was detected. Cell transfection was performed by liposome method. The expression levels of miR-422a and LINC00958 were measured by qRT-PCR. The expression levels of proteins were detected by Western Blot. Cell apoptosis was assessed by flow cytometry. The radiosensitivity of colorectal cancer cells was evaluated by cell clone formation assay. The fluorescence activity was detected by dual luciferase reporter assay. Results High expression of LINC00958 and low expression of miR-422a were observed in colorectal cancer cells. Inhibition of LINC00958 expression and overexpression of miR-422a could promote cell apoptosis and increase cell radiosensitivity of colorectal cancer cells. LINC00958 could target the regulation of miR-422a expression. Inhibition of miR-422a reversed the effect of inhibiting the expression of LINC00958 on increasing the radiosensitization and promoting cell apoptosis of colorectal cancer cells. Conclusions Inhibition of LINC00958 expression increases the radiosensitivity and promotes the apoptosis of colorectal cancer cells. The mechanism may be related to the regulation of miR-422a, which will provide new targets and new ideas for the treatment of colorectal cancer.     

VEGF-C在宫颈癌细胞中的表达及与细胞增殖的关系

目的:研究VEGF-C在宫颈癌细胞中的表达及其对宫颈癌细胞增殖的影响。方法:采用反义技术,脂质体介导VEGF-C反义寡核苷酸转染人宫颈癌Hela细胞。应用荧光定量RT-PCR法、间接免疫荧光标记法,检测转染后细胞内VEGF-C在mRNA、蛋白水平的变化。MTT比色法检测细胞生长的变化。结果:脂质体介导VEGF-C反义寡核苷酸,转染宫颈癌Hela细胞的转染效率大于90％。转染了反义寡核苷酸的反义组VEGF-C在mRNA和蛋白水平上,较未转染组和正义组均明显下降（P<0.05）。MTT法检测转染了VEGF-C反义寡核苷酸的细胞,明显看到反义组细胞的生长受到明显抑制。结论:VEGF-C可影响人宫颈癌Hela细胞增殖,本实验通过抑制VEGF-C,进而可阻断宫颈癌的淋巴转移,为实现靶向性基因治疗的可行性,提供了实验依据。     

宫颈癌中VEGF-C及其受体mRNA的表达及其临床意义

背景与目的：血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor C，VEGF-C）是一个较为特异的淋巴内皮细胞生长刺激因子，通过其受体VEGFR-2（KDR）及受体VEGFR-3（Flt-4）分别作用于血管和淋巴管上皮促进肿瘤的生长和转移。研究宫颈癌组织及癌旁组织中血管内皮生长因子C及其受体mRNA的表达情况，分析其在肿瘤转移中的作用。方法：采用RT-PCR法分析48例新鲜宫颈癌组织及癌旁组织标本中VEGF-C／KDR／Flt-4mRNA的表达情况，并分析其与各临床病理参数之间的关系。结果：48例宫颈癌组织与瘤旁组织中的VEGF-C及其受体mRNA表达率明显高于正常宫颈组织，肿瘤组织中VEGF-C mRNA表达与flt-4 mRNA的表达呈显著正相关，癌旁组织（PT）中VEGF-C mRNA表达与KDR mRNA的表达显著相关（P〈0．001）。宫颈癌组织的VEGF-C、KDR或Flt-4 mRNA表达与肿瘤的病理类型及临床病理分期无明屁的相关；而与肿瘤的病理分化程度、淋巴结转移、肿瘤直径、深肌层浸润间差异有显著性（P〈0．05）。结论：VEGF-C可能在宫颈癌转移尤其是淋巴转移中起重要作用，是一个反映患者淋巴转移和预后的良好指标。