Bax、Bcl-2和cyclin D1在非霍奇金淋巴瘤中的表达及临床意义

[目的]探讨Bax、Bcl-2和cyclin D1在非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin’s lymphoma,NHL）组织中的表达状况与临床病理特征的关系。[方法]采用免疫组织化学方法检测92例初治NHL病例肿瘤组织中Bax、Bcl-2和cyclin D1的表达状况,分析这3个基因的表达状况与NHL病理类型、疾病分期等的关系。[结果]Bax、Bcl-2和cyclin D1的阳性率分别为79.4%,93.5%和34.8%,差异有统计学意义（P〈0.05）。cyclin D1基因在B细胞性NHL中的阳性率显著高于其在T细胞性NHL中的阳性率（P〈0.05）;而Bax和Bcl-2在B细胞性和T细胞性NHL之间的阳性率的差异无统计学意义（均P〉0.05）。Bax、Bcl-2和cyclin D1表达状况与NHL的临床分期、国际预后指数（IPI）均无相关性（均P〉0.05）。[结论]Bax、Bcl-2和cyclin D1在NHL中的表达状况有显著性差异,但与NHL疾病分期和IPI均无相关性。     

Bcl-2 loop domain在Bcl-2蛋白结构中的作用初探

目的探讨B细胞淋巴瘤／白血病基因2（Bcl-2） Loop domain结构域在Bcl-2蛋白结构中的作用。方法应用PCR及Western blot方法检测Bcl-2 Loop domain结构域突变前后Bcl-2蛋白的表达情况。结果Bcl-2 Loop domain结构域突变后Bcl-2蛋白只在沉淀中检测到，在上清中未检测到。结论Bcl-2 Loop domain结构域被突变后，Bcl-2蛋白空间结构发生改变，推测Bcl-2 Loop domain结构域在Bcl-2蛋白结构中起到重要作用。     

MicroRNA-25表达下调对神经胶质瘤U87细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨microRNA-25（miR-25）表达下调对神经胶质瘤U87 细胞增殖与凋亡的影响,以及miR-25 与B 细胞淋巴瘤/ 白血病-2 基因（Bcl-2）在胶质瘤细胞增殖与凋亡过程中的调节作用。方法通过慢病毒介导反义miR-25 寡聚核苷酸转染U87 细胞;分为3 组,实验组（转染anti-miR-25）、对照组（转染negative control）和空白组（空白PBS）;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-25 和Bcl-2 的mRNA 表达水平;CCK-8 法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果实验组miR-25 和Bcl-2 的mRNA 表达量与空白组和对照组比较,差异具有统计学意义（P <0.05）,实验组降低;实验组相对于空白组和对照组,细胞增殖活性降低,细胞周期延缓,细胞凋亡率升高。结论在胶质瘤U87 细胞,miR-25 表达下调通过作用于Bcl-2 靶基因,延缓细胞周期,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。     

人端粒酶逆转录酶、B细胞淋巴瘤-2基因在宫颈鳞癌中的表达及其临床意义

目的探讨人端粒酶逆转录酶（hTERT）、B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）在宫颈鳞癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SABC法检测87例宫颈鳞癌和20例正常宫颈组织中hTERT、Bcl-2的表达。结果在正常宫颈组织和宫颈鳞癌中,hTERT表达的阳性率分别为20．0％和77．0％,其差异有高度统计学意义（P〈0．01）;Bcl-2的表达阳性率分别为35．0％和80．5％,差异也有高度统计学意义（P〈0．01）;且在宫颈鳞癌中hTERT的阳性表达与Bcl-2的阳性表达显著相关（P〈0．05）。结论hTERT和Bcl-2在宫颈鳞癌中表达显著升高,二者的表达密切相关,提示二者共同参与,并协同促进宫颈鳞癌的发生。     

P16和Bcl-2蛋白在鼻咽部鳞状细胞癌的表达及相互关系

目的探讨多发性肿瘤拟制基因（P16）和B细胞淋巴瘤/白血病基因2（Bcl-2）在不同分期鼻咽部鳞状细胞癌组织及鼻咽部炎症组织中的表达情况。方法应用免疫组化SP二步法检测40例不同分期鼻咽部鳞状细胞癌组织和16例鼻咽部慢性炎症组织中P16及Bcl-2蛋白的表达。结果 P16蛋白在鼻咽部炎症组织中高表达,癌组织中低表达,P16的表达与鼻咽癌的临床分期无明显关系,有颈部淋巴结转移的鼻咽癌患者P16基因表达较无颈部淋巴结转移者低,但差异无统计学意义（P〉0.05）。Bcl-2蛋白在癌组织中高表达,炎症组织中低表达。结论 Bcl-2是在鼻咽部鳞状细胞癌组织中高表达的凋亡抑制基因,P16是鼻咽鳞状细胞癌中低表达的抑癌基因。     

缺氧诱导因子-1α基因沉默逆转卵巢癌细胞SKOV3/DDP耐药性的机制

目的：观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)沉默后人卵巢癌细胞顺铂耐药株SKOV3/DDP 的HIF-1α、多药耐药基因1 （MDR1）和B细胞淋巴瘤/白血病-2基因（Bcl-2）mRNA及蛋白产物的表达,探讨HIF-1α逆转SKOV3/DDP耐药性的机制。方法：体外培养卵巢癌细胞株SKOV3（敏感组）及其顺铂耐药株SKOV3/DDP（耐药组）,部分耐药株转染HIF-1α干扰质粒 pshRNA-HIF（转染组）及对照质粒pshRNA-Control（对照组）。RT-PCR法检测各组细胞HIF-1α、MDR1和Bcl-2 mRNA表达量;Western blotting和免疫组织化学法测定HIF-1α、P-gp（MDR1基因编码蛋白）和Bcl-2蛋白的表达量。结果：RT-PCR检测,敏感组和转染组HIF-1α、MDR1和Bcl-2 mRNA表达量明显低于耐药组（P<0.05)。Western blotting检测,敏感组和转染组HIF-1α、MDR1和Bcl-2蛋白表达量明显低于耐药组(P<0.05) ;免疫组织化学法,敏感组和转染组HIF-1α、MDR1和Bcl-2蛋白表达量明显低于耐药组(P<0.05);MDR1、Bcl-2 mRNA及蛋白在敏感组与转染组的表达量差异无统计学意义（P>0.05）。HIF-1α表达与MDR1、Bcl-2 mRNA表达量均呈正相关关系（r=0.908,P=0;r=0.916,P=0);HIF-1α表达与P-gp、Bcl-2蛋白表达呈正相关关系(r=0.773,P=0.003;r=0.862,P=0）。结论：HIF-1α沉默逆转人卵巢癌细胞顺铂耐药株SOV3/DDP耐药性可能与MDR1和Bcl-2表达降低有关联。
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Bcl—2家族

<正>1984年Tsujimoto等从人类滤泡性淋巴细胞瘤中t(14;18)染色体易位的断裂点克隆到Bcl-2基因.在此易位中,Bcl-2基因在正常的18q21易位到14q32与免疫球蛋白重链(IgH)并列形成头尾结构,这一异常融合导致淋巴瘤细胞中Bcl-2基因的转录激活和蛋白产物过度表达.这是第一个被发现的细胞凋亡抑制基因.Bcl-2基因产物由2个外显子编码,5’端外显子由-50kb内含子与第2个外显子分开,后者含有一段很长的3’端非翻译区,因此Bcl-2开放阅读框架的大部分位于5’端外显子内.根据cDNA推测,Bcl-2编码Bcl-2-a和Bcl-2-β两种蛋白,但仅前者在细胞和组织内被发现.Bcl-2蛋白是一种跨膜蛋白,含有239个氨基酸,分子量约26kD.其羧基端附近具有19个疏水氨基酸区域.以Bcl-2的研究为基础,这一家族的新成员不断被发现.它们之间的同源性集中于2个区域,分别称为BH1和BH2.另外,这些基因的蛋白产物大多在羧基端含有一段疏水的氨基酸链,并且均为膜蛋白.Bcl-2的亲膜能力归根于它的氨基酸疏水链.这些共同特点,可能是其参与细胞凋亡调控的关键所在.下面简介一下Bcl-2家族的其他成员.     

内毒素血症幼年大鼠小肠Bcl-2、Bax mRNA的变化

目的：通过内毒素血症幼年大鼠小肠Bcl-2度BaxmRNA表达的变化。探讨小儿胃肠功能障碍的机制。方法：腹腔注射内毒素制备18d龄大鼠内毒素血症模型，注射同等量生理盐水为对照组。分别取全部回肠。半定量RT-PCR法检测Bcl-2、BaxmRNA的表达。结果：正常对照和内毒素组小肠各时间点的Bcl-2 mRNA均为阴性表达，正常对照BaxmRNA表达较弱。内毒素组小肠各时间点的BaxmRNA表达均明显增强（P〈0．01）。死亡组与24h之内其他各组的表达无显著差异，比72h亚组表达明显增高（P〈0．05）。内毒素组Bax与Bcl-2mRNA表达的比值明显高于对照组。结论：内毒素通过调节基因Bcl-2、BaxmRNA表达的变化促进幼年大鼠小肠细胞凋亡可能为严重感染时胃肠功能障碍机制之一。     

Bax、Bag-l、Bcl-2在乳腺肿瘤组织中的表达及意义

目的：探讨Bcl-2相关X蛋白（Bax）、Bcl-2结合抗凋亡基因（Bag-1）、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因（Bcl-2）在乳腺肿瘤组织中的表达及临床意义。方法：选取本院乳腺浸润性导管癌及其癌旁组织各85例、乳腺导管内癌及其癌旁组织各70例,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（S-P）免疫组化法检测Bax、Bag-l、Bcl-2蛋白在各组织中的表达。结果：Bax蛋白在浸润性导管癌组织中的表达与癌旁正常组织及导管内癌组织比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;Bag-1、Bcl-2蛋白在浸润性导管癌组织中的表达高于在癌旁正常组织,差异具有统计学意义（P〈0.05）;浸润性导管癌组织中Bag-1、Bcl-2蛋白阳性表达率明显高于导管内癌癌组织,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：乳腺癌组织中Bag-1、Bcl-2蛋白表达高于癌旁正常组织,在浸润性导管癌中的表达高于导管内癌组织,Bag-1、Bcl-2高表达可作为判断乳腺疾病良、恶性及预后的指标之一。     

Bcl-2基因多态性与系统性红斑狼疮相关性的研究

目的：明确中国人群中bcl-2基因多态性是否与系统性红斑狼疮（SLE）相关,检测Bcl-2与IL－10易感等位基因间是否存在协同作用。方法：通过荧光标记微卫星分型技术对232个SLE核心家系及106例正常对照进行Bcl-2微卫星的基因分型。结果：（1）两组对象Bcl-2等位基因和主要基因型分布频率差异有显著意义（P值分别为0．001和0．003）;（2）Bcl-2等基因存在传递不平衡,Bcl-2-195bp等位基因从父母优势传递给患病子代（传递：不传递＝122：82,P＝0．0051）;（3）同时携带Bcl-2-195bp和和IL－10G138bp易感等位基因的个体较单独携带Bcl-2-195bp ak IL-10G138bp的个体,患病的危险性增加（OR值分别为3．00,1．77和1．07）,结论：Bcl-2基因多态与SLE发病相关,其可能直接参与SLE发病或与附近某个易感位点存在连锁不平衡 。Bcl-2与IL－10易感等位基因在决定SLE易感中存在协同作用。     

BCl-2iBax、Fas／Fasl在子宫内膜息肉中的表达及意义

目的研究凋亡相关基因B细胞淋巴瘤／白血病-2及其同源蛋白（Bcl-2／Bax）及肿瘤坏死因子和神经生长因子受体跨膜蛋白及其配体（Fas／Fasl）在子宫内膜息肉中的表达,探讨子宫内膜息肉形成的原因和机制。方法选择子宫内膜息肉患者63例作为研究组,正常子宫内膜者55例作为对照组,采用免疫组织化学二步法检测两组患者增生期及分泌期Bcl-2、Bax及Fas、Fasl的表达,作半定量分析后进行组间比较。结果（1）与对照组增生期比较,研究组增生期Bcl-2及Bcl-2／Bax均明显升高（均P〈0.05）;与对照组分泌期比较,研究组分泌期Bcl-2、Bcl-2／Bax均明显升高（均P〈0.05）,而Bax明显降低（P〈0.05）。（2）研究组和对照组增生期Fas均呈中等强度表达,而且研究组增生期Fas的表达明显低于对照组（P〈0.05）;研究组分泌期Fas及Fasl的表达减弱,均明显低于对照组（均P〈0.05）。（3）研究组Bcl-2的表达与Fas的表达无明显相关性（r=-0.083,P〉0.05）。而对照组Bcl-2的表达与Fas的表达呈显著负相关（r=-0.934,P〈0.01）。结论凋亡机制调控失常可能参与了子宫内膜息肉的发生、发展。     

Bcl-2与妇科肿瘤

<正>细胞程序性死亡（programmed cell death,PCD）或细胞凋亡（apoptosis）是组织发育形成和功能维持的必需生理现象。当PCD出现反常调控时,可促使肿瘤等多种疾病的发生。Bcl-2（B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2）是近年来发现的PCD控制因子之一,有关这方面的研究已成为分子生物学和肿瘤学领域的热门课题。本文着重描述Bcl-2基因的研究进展及其在妇科肿瘤中的表达状况。1 Bcl-2基因及其表达产物的一般特性 Bcl-2基因是最初从小鼠B细胞淋巴瘤中分离得到的原癌基因,定位于染色体18q~（21）,含有3个外显子,2个开读框架,编码由239个氨基酸组成的蛋白质。免疫组     

Bcl-2/JH基因重排与非霍奇金淋巴瘤的相关性及其相关因素

目的:建立Bcl-2/JH基因重排的检测方法,调查分析Bcl-2/JH基因重排与非霍奇金淋巴瘤的相关性及其相关因素.方法:收集西安市非霍奇金淋巴瘤患者74例的外周血单个核细胞,提取DNA后用PCR检测Bcl-2/JH基因重排.根据Bcl-2/JH基因重排结果将患者分为重排组和非重排组,调查重排的可能危险因素,进行统计学处理;采用PCR检测了74例非霍奇金患者血清中的HCV RNA.同时检测了献血员的HCV RNA和Bcl-2/JH基因重排.结果:74例非霍奇金淋巴瘤中有18例外周血检测出Bcl-2/JH基因重排,且转位均发生在Bcl-2的主要断裂点区域(MBR),HCV RNA阳性者为6例,阳性率为8.1%.110例献血员中检测出1例Bcl-2/JH基因重排,2例HCV RNA阳性,阳性率为1.8%.在非霍奇金淋巴瘤中Bcl-2/JH基因重排和HCV感染、农业暴露史有统计学关联(P＜0.01).而与吸烟、肿瘤家族史没有关联(P＞0.01).结论:Bcl-2/JH基因重排与非霍奇金淋巴瘤的发生具有一定的病因学联系;HCV感染与非霍奇金淋巴瘤Bcl-2/JH基因重排的发生有一定的统计学关联.     

染色体1q23.2区域存在与中国人群系统性红斑狼疮发病相关基因位点

目的：明确中国人群中Bcl-2基因多态是否与系统性红斑狼疮（SLE）相关,检测Bcl-2与IL－10易感等位基因是否存在协同作用。方法：通过荧光标记微卫星分型技术对232个SLE核心家系及106例正常对照进行Bcl-2微卫星的基因分型。结果：（1）两组对象Bcl-2等位基因和主要基因型分布频率差异有显著意义（P值分别为0．001和0．003）;（2）Bcl-2等位基因和主要基因型分布频率差异有显著意义（P值分别为0．001和0．003）;（2）Bcl-2等位基因存在传递不平衡,Bcl-2－195bp等位基因从父母优势传递给患病子代（传递：不传递＝122：82,P＝0．0051）;（3）同时携带Bcl-2－195bp和IL－10G138bp易感等位基因的个体较单独携带Bcl-2-195bp或IL－10G138bp的个体,患病的危险性增加（OR值分别为3．00,1．77和1．07。结论：Bcl-2基因多态与SLE发病相关,其可能直接参与SLE发病或附近某个易感位点存在连锁不平衡。Bcl-2与IL－10易感等位基因在决定SLE易感中存在协同作用。     

弥漫大B细胞淋巴瘤中Bcl-2基因表达的临床意义

目的探讨Bcl-2基因表达在弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中表达的临床意义。方法利用免疫组织化学方法检测Bcl-2在弥漫大B细胞淋巴瘤细胞中的表达,研究它的表达与弥漫大B细胞淋巴瘤临床分期、全身症状及治疗效果的关系。结果弥漫大B细胞淋巴瘤临床分期为Ⅲ／Ⅳ期、疗效差、全身症状明显者,Bcl-2表达阳性率高。结论检测Bcl-2在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达对评估弥漫大B细胞淋巴瘤分期、疗效及不良临床过程有一定意义,Bcl-2的高表达可以作为弥漫大B细胞淋巴瘤不良临床特征、疗效差的标志之一。     

Bcl-6与Ki-67在非霍奇金淋巴瘤中的表达及临床意义

目的：研究Bcl-6癌基因和Ki-67抗原在非霍奇金淋巴瘤（non—Hodgkin＇s lymphoma,NHL）组织中的表达水平及相互关系,评价Bcl-6和Ki67作为NHL患者预后指标的价值。方法：采用免疫组织化学PV-9000两步法检测Bcl-6和Ki-67抗原在84例NHI,肿瘤组织和18例淋巴结反应性增生（reactive hyperplasia of lymphnode,RH）组织中的表达水平。结果：Bcl-6、Ki67在NHL组织中阳性表达率分别为53．57％（45／84）和61．90％（52／84）,与淋巴结反应性增生组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。Bcl-6的表达与临床分期、免疫分型及血清乳酸脱氢酶水平有关（P〈0．05）,Ki-67的表达与恶性程度、临床分期、血清乳酸脱氢酶水平及近期疗效有关（P〈0．05）。Bcl-6与Ki-67表达无相关性（x^2=0．955,P〉0．05）。结论：Bcl-6与Ki-67的异常表达与NHL临床分期及血清乳酸脱氢酶水平有关,两者与NHL的发生、发展有关,并可为预后判断提供参考依据。     

淋巴瘤Bcl-2/IgH融合基因实时定量PCR检测方法的研究

目的建立Bcl-2/IgH融合基因实时定量PCR检测方法。方法以淋巴瘤患者Bcl-2/IgH融合基因的纯化DNA作为标准品,淋巴瘤患者骨髓和外周血为样本,建立SYBR GreenⅠ荧光染料实时定量PCR（Real-time Quantitative PCR,RQ-PCR）,并对方法的灵敏性、稳定性、重复性进行测定。结果构建的RQ-PCR方法检测Bcl-2/IgH融合基因的敏感性达10^-7水平;标准曲线的斜率和相关系数分别为-3.13,0.99;管间变异和批间变异分别为6.54%,6.73%,1.90%和3.59%,6.30%,5.49%。结论建立的SYBR GreenⅠ荧光染料RQ-PCR方法灵敏,标准曲线的相关性好,方法的稳定性和重复性较好。     

BAFF与Bcl-2mRNA水平对多发性骨髓瘤发生、发展及预后的影响

目的：探讨B细胞活化因子（BAFF）及B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）mRNA表达水平对多发性骨髓瘤临床诊断和预后评估的应用价值。方法：选取本院2011年4月～2013年1月收治的多发性骨髓瘤患者37例,以11例同期健康志愿者为对照组,以密度梯度离心法分离各组骨髓的单个核细胞,采用RT—PCR技术测定BAFF及Bcl-2的mRNA表达水平;同时,采取各组的空腹静脉血,以ELISA试剂盒测定肿瘤负荷标记物β2-微球蛋白（β2-MG）的水平,分析BAFF及Bcl-2的mRNA表达与血清β2-MG含量的相关性。结果：多发性骨髓瘤患者的BAFF及Bcl-2mRNA表达水平显著高于对照组（P〈0．05）;同时,各分期患者之间亦有显著差异,随着分期的递增,BAFF及Bcl-2的mRNA表达水平依次升高（P〈0．05）。直线回归分析结果显示,BAFFmRNA表达水平与血清J32-MG含量呈直线正相关（R^2-7587,P〈0．05）;Bcl-2的mRNA表达水平与血清β2-MG含量亦呈直线正相关（R^2-837,P〈0．05）。结论：BAFF及Bcl-2的mRNA表达水平不仅与多发性骨髓瘤的发病和进程密切相关,且能够较为准确地反映患者机体的肿瘤负荷程度,对多发性骨髓瘤的临床诊断和预后评估均有重要预测价值。     

广西壮族食管癌患者FHIT基因表达及与Bcl-2表达的相关性研究

目的探讨FHIT基因在广西壮族食管癌发生、发展中的作用及其与Bcl-2表达的关系。方法应用免疫组化SP法检测FHIT基因和Bcl-2在广西壮族10例正常食管黏膜组织、80食管癌组织中的表达。结果FHIT基因在食管癌组织中的阳性表达显著低于正常食管黏膜组织（P〈0．01）;FHIT基因低表达与食管癌组织学类型无关（P〉0．05）,而与分化程度、浸润程度、有无淋巴结转移有关（P〈0．05）;食管癌中FHIT基因表达与Bcl-2蛋白表达有显著相关性（P〈0．05）。结论FHIT基因表达缺失在广西壮族食管癌中是频发事件,FHIT基因参与食管癌的发生发展,是一个候选抑癌基因。在广西壮族食管癌患者FHIT基因的表达与Bcl-2的表达密切相关,FHIT基因和Bcl-2广西壮族食管癌发生、发展中起协调作用。     

粒细胞集落刺激因子对脑出血Bcl-2、Bax表达的影响

目的 通过探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）作用于脑出血后凋亡调控基因的变化,评价G-CSF对脑出血细胞凋亡的影响机制.方法 将SD大鼠分为对照（Sham）组、脑出血（ICH）组、干预（CSF）组,每组各25只,后两组分为5个亚组,每亚组5只.采用自体尾动脉血造大鼠脑出血模型,TUNEL法及免疫组织化学法检测凋亡细胞及凋亡调控基因Bcl-2、Bax的表达.结果 ICH组凋亡细胞及Bcl-2、Bax较Sham组均增多（P〈0.01）;CSF组的凋亡细胞、Bax阳性细胞较ICH组均减少（P〈0.01）,Bcl-2阳性细胞增多（P〈0.01）;ICH组TUNEL细胞与Bax/Bcl-2表达呈负相关.结论 G-CSF可能通过控制凋亡调控基因Bax/Bcl-2的比率变化来调节脑出血血肿周围的细胞凋亡,为治疗脑出血提供可靠的分子靶点.