食管癌组织中复制蛋白A的表达变化及意义

目的观察食管鳞癌组织中复制蛋白A（RPA）的表达水平变化,并探讨其意义。方法采用免疫组织化学法检测48例食管癌组织及40例癌旁正常组织中的RPA1和RPA2蛋白。结果食管癌组织中RPA1、RPA2蛋白阳性表达率分别为65.25%±0.21%、58.90%±0.19%,与癌旁组织的35.65%±0.16%、16.71%±0.12%相比P均〈0.05。食管癌组织中的RPA1、RPA2表达与肿瘤病理分级、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、肿瘤分期相关（P均〈0.05）。结论 食管癌组织中RPA1、RPA2的表达升高。这可能与食管癌的发生、发展有关。     

质谱技术筛选肾上腺皮质肿瘤差异蛋白研究

目的比较正常肾上腺组织、肾上腺皮质腺瘤组织和肾上腺皮质癌组织的蛋白质组学差异,探讨肾上腺皮质肿瘤的鉴别诊断和肾上腺皮质癌的发病、转移机制以及治疗靶点。方法分别提取9例正常肾上腺皮质组织、9例肾上腺皮质腺瘤标本以及9例肾上腺皮质癌标本总蛋白,蛋白经纯化后用固相p H梯度双向凝胶电泳分离肾上腺皮质癌和肾上腺皮质腺瘤组织蛋白质,银染显色,通过PDQUEST 2DE软件分析获取双向凝胶电泳图谱,找出差异表达的蛋白质点。切取差异蛋白质点进行MALDI TOF/TOF质谱鉴定,获取肽质指纹图谱并查询Swiss Prot数据库寻找匹配蛋白质。结果所获得的双向电泳银染图谱重复性较好,正常肾上腺皮质组织蛋白质点约为(2 247±87),肾上腺皮质腺瘤组织蛋白质点数约为(2 375±142),肾上腺皮质癌组织蛋白质点数约为(2 143±107)。在三组组织中,发现表达递减的蛋白有ATP合酶α亚单位(ATPA)、线粒体1Q补体结合蛋白(C1QBP)、组织蛋白酶D(CATD);而14-3-3ζ/δ在腺癌组中表达最低,在腺瘤组中表达最高;PI-PLC X蛋白结构域3在三组间依次递增(P0.01)。结论正常肾上腺组织、肾上腺皮质腺瘤和肾上腺皮质癌差异表达的蛋白与能量代谢、组织结构以及一些作用蛋白酶有关,表达差异的蛋白在肾上腺皮质肿瘤中参与肿瘤的形成及侵袭作用,其可能可作为潜在的鉴别肾上腺皮质肿瘤良恶性的分子标志,成为肿瘤的生物治疗靶点。     

人消化道癌组织HSP70的检测及其多肽复合物的分离研究

目的 分析人消化道癌组织蛋白表达谱的差异并分离纯化食管癌组织中HSP70-多肽复合物.方法 提取人食管、胃及大肠的癌组织、癌旁组织和正常组织的蛋白质,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法进行电泳分析;同时以食管癌组织为材料,通过层析柱分离纯化HSP70-多肽复合物.结果 相同器官的不同组织中不同分子量蛋白的种类基本一致,但丰度则表现出差异;同时分离到食管癌细胞的HSP70-多肽复合物.结论 不同分子量的蛋白质在不同组织中表达的丰度不同,可能与组织细胞生命活动状态相关.HSP70-多肽复合物的分离为提取肿瘤HSPT0-多肽复合物提供了具体方法,为深入研究和利用HSP70蛋白奠定了基础.     

食管癌组织HPV16E6蛋白表达变化及其对CyclinD蛋白表达的影响

目的观察食管癌组织中HPVl6E6蛋白表达变化,探讨其对食管癌组织细胞周期蛋白（CyclinDl）表达的影响。方法用免疫组化sP法检测40例食管鳞癌患者肿瘤组织（鳞癌组）、癌旁正常食管组织（对照组）及10例食管不典型增生患者病变组织（增生组）中的HPVl6E6蛋白表达;采用WesternNot法检测HPVl6E6阳性及阴性食管鳞癌患者肿瘤组织中的CyclinDl蛋白表达。结果鳞癌组、增生组、对照组HPVl6E6蛋白阳性表达率分别为55％（22／40）、20％（2／10）、12．5％（5／40）,鳞癌组HPVl6E6蛋白阳性表达率高于增生组和对照组（P均〈0．05）。HPVl6E6蛋白阳性、阴性者癌组织中CyclinDl蛋白表达量分别为0．892±0．057、0．327±0．02;HPVl6E6蛋白表达阳性者肿瘤组织CyclinDl蛋白表达量高于HPVl6E6蛋白阴性者（P〈0．05）。结论食管癌组织中HPVl6E6蛋白表达升高,并与CyclinDl蛋白表达有关。     

肾上腺皮质癌组织蛋白的筛选及意义

目的比较肾上腺皮质癌（ACC）与其癌旁组织的蛋白表达谱的差异,筛选新的诊断ACC的肿瘤标志物。方法分别提取12例ACC组织蛋白及其癌旁组织蛋白。蛋白定量后,采用双向凝胶电泳（2-DE）对组织蛋白表达谱进行分离,采用飞行时间质谱对差异位点进行蛋白鉴定。结果共鉴定出29个ACC相关蛋白,其中表达上调20个,下调9个。上调蛋白的分子功能主要为蛋白质结合和氧化还原酶活性功能。结论成功筛选出一组在ACC组织中表达差异的蛋白,可能为ACC的候选肿瘤标志物。     

凋亡相关基因在食管上皮癌变中的表达及其意义

目的研究细胞凋亡调控因子Fas、Fas配体（Fasl）、Fas相关的死亡结构蛋白（Fadd）和半胱氨酸蛋白酶（Caspase8）基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义。方法应用免疫组化S-P法检测60例食管癌组织，30例不典型增生组织及30例正常食管黏膜中Fas、Fasl、Fadd Caspase8的蛋白表达。应用原位杂交法检测60例食管癌组织，30例不典型增生组织及30例正常食管黏膜中Caspase8 mRNA的表达。结果从食管正常黏膜组织到不典型增生组织和食管癌组织，Fas蛋白表达率呈逐渐下降的趋势，Fasl蛋白表达率呈逐渐上升的趋势，两者在食管癌组织和正常组织之间有显著性差异（P〈0．05）。高中分化鳞癌中蛋白阳性表达率显著高于低分化鳞癌（P〈0．05）。从食管正常黏膜组织到不典型增生组织和食管癌组织，Fedd和caspase8蛋白与Caspapac8 mRNA阳性表达率呈逐渐下降的趋势，在食管癌与正常黏膜组织之间有显著性差异（P〈0．01或P〈0.05）。Caspac8蛋白与mRNA高中分化鳞癌表达率高于低分化鳞癌（P〈0．05）。结论Fas与Fasl的表达失衡与食管癌的发生、发展有密切关系，并与食管癌的分化和免疫逃避有关。Fadd与Caspase8基因表达异常在食管癌的发生发展中可能起着重要作用。     

人肺腺癌及癌旁组织的差异蛋白质组学分析

目的通过分析人低分化腺癌、中分化腺癌及癌旁远端正常组织的差异蛋白,寻找与肺腺癌发病相关的蛋白。方法利用双向凝胶电泳的方法分离肺腺癌及癌旁组织的蛋白质,通过图像扫描寻找差异蛋白点,进而应用基质辅助激光电离飞行时间质谱得到肽质量指纹图谱,对比数据库确定差异蛋白。结果人中分化腺癌及癌旁远端正常组织、低分化腺癌及癌旁远端正常组织的平均蛋白点数分别为1810±167、1704±53、2066±144、1549±33。选取差异2倍以上蛋白点进一步分析,发现与肺腺癌相关的蛋白质共14个。结论双向凝胶电泳技术结合基质辅助激光电离飞行时间质谱可鉴定肺腺癌及癌旁远端正常组织的差异蛋白,为早期诊断肺癌,判断预后奠定基础。     

PTEN在食管癌中的表达及其与微血管密度和临床病理特征的关系

目的:探讨抑癌基因PTEN在食管癌及癌旁正常组织中的表达, 及其与微血管密度(MVD)和临床病理特征的关系.方法:选用食管鳞癌手术切除病理标本48例,手术远端正常食管组织标本40例. 采用免疫组织化学SP法检测PTEN编码蛋白的表达水平,CD31抗体进行血管内皮染色、计算微血管密度, 分析PTEN在不同组织中的表达与MVD和食管癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移的关系.结果:食管鳞癌组织中PTEN编码蛋白阳性表达率低于癌旁正常食管黏膜组织(52.08%vs 92.50%, P<0.01), 而其MVD值显著高于癌旁正常组织(41.72±8.67 vs 21.01±3.85, P<0.01); Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级鳞癌PTEN阳性表达率有显著差异(75.0% vs 55.0% vs 33.33%, 均P<0.05), MVD值差异无统计学意义; 癌组织侵及浅肌层以上与深肌层PTEN与MVD值的表达有显著差异(77.27% vs 42.31%; 35.49±5.89vs 46.01±6.27, 均P<0.01); 淋巴结转移组与非转移组PTEN阳性表达率无显著差异, MVD值差异则有统计学意义(46.71±7.89 vs 35.92±2.54, P<0.01).结论:抑癌基因PTEN、MVD在食管癌中表达的高低, 与肿瘤的生长、浸润和转移相关.PTEN基因表达的突变或缺失能促进肿瘤血管的形成, 可作为临床治疗和判断预后的依据.     

食管鳞癌组织诱导型一氧化氮合酶和增殖细胞核抗原的表达及意义

目的探讨食管鳞癌组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达与食管癌临床病理因素的关系。方法用免疫组化法检测2009年1至4月山东省泰安市中心医院52例食管鳞癌组织和20例癌旁正常组织iNOS与PCNA的表达,计数PCNA标记指数（PCNA LI）。食管鳞癌组织及癌旁正常组织iNOS蛋白阳性表达率、PCNA LI比较分别采用χ2检验、t检验;食管癌组织iNOS阳性表达者与iNOS阴性表达者PCNA LI比较采用t检验;不同临床病理因素食管鳞癌组织iNOS蛋白表达、PCNA LI比较分别采用χ^2检验、t检验、方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验;食管鳞癌组织iNOS蛋白与PCNA蛋白表达的关联性分析采用χ^2检验。结果食管鳞癌组织iNOS阳性表达率、PCNA LI均高于癌旁正常组织,且差异均有统计学意义[63.5%（33/52）与10.0%（2/20）比较,χ^2=14.455,P〈0.01;（53.29±14.55）与（2.65±1.82）比较,t=24.593,P〈0.05]。食管癌组织中,iNOS阳性表达者的PCNA LI高于iNOS阴性表达者,且差异有统计学意义[（60.89±9.98）与（40.08±11.53）比较,t=6.842,P=0.000]。不同临床分期、分化程度、有无淋巴结转移患者的食管鳞癌组织iNOS蛋白表达差异有统计学意义（χ^2=9.372,P=0.025;χ^2=12.784,P=0.002;χ2=6.361,P=0.012）。随着食管鳞癌组织癌细胞分化程度的降低PCNA LI升高,中分化和低分化的食管鳞癌组织PCNA LI明显高于高分化的食管鳞癌（q=6.000、7.378,P均〈0.05）。有淋巴结转移的食管鳞癌组织PCNA LI高于无淋巴结转移的食管鳞癌组织,且差异有统计学意义[（56.26±13.14）与（45.21±15.62）比较,t=2.556,P=0.014]。iNOS的表达与PCNA的表达有关联（χ^2=20.022,P=0.000）。结论 iNOS与PCNA蛋白在食管鳞癌组织中均有较高的阳性表达,且表达有关联。两者可能存在共同的激活机制,iNOS和PCNA蛋白表达与食管癌的恶性进程有关。     

食管鳞癌组织中p34^cdc2的表达变化及意义

目的观察人食管鳞癌组织中细胞分裂周期蛋白p34^cdc2的表达,并探讨其临床意义。方法利用组织芯片技术结合免疫组化及蛋白免疫印迹法检测138例食管癌患者肿瘤组织和配对正常食管黏膜组织中的p34^cdc2蛋白。结果p34^cdc2在食管鳞癌组织的表达明显高于配对正常黏膜组织,P〈0.01。p34^cdc2表达与食管鳞癌临床分期、淋巴结转移有关（P均〈0.05）,与分化程度和肿瘤浸润深度等无关（P均〉0.05）。结论食管癌组织中p34^cdc2表达升高。p34^cdc2可促进食管癌的发生与发展。     

FAK在食管癌组织中的表达及临床意义

目的检测局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)在食管癌组织及正常食管组织中的表达,探讨FAK在食管癌发生、发展中的意义。方法采用免疫组化SP法检测FAK在40例食管癌组织、40例正常食管组织中的表达情况。结果免疫组化结果提示:40例食管癌组织中有16例(40.0%)FAK呈强阳性染色,15例(37.5%)FAK呈弱阳性染色,9例(22.5%)FAK表达缺失;40例正常食管组织中,3例(7.5%)FAK呈强阳性染色,7例(17.5%)FAK呈弱阳性染色,30例(75.0%)FAK表达缺失,FAK在食管癌组织的阳性表达率(77.5%)显著高于正常食管组织的阳性表达率(25.0%),两组比较差异有统计学意义(P0.05)。FAK的表达与食管癌患者的性别、年龄无关(P0.05),而与分化程度相关(P0.05),低分化食管癌组FAK蛋白表达高于高中分化组。结论 FAK在食管癌组织中表达增高,其表达量与食管癌的分化程度有关,FAK在正常食管组织中表达缺失或减少。FAK可能与食管癌的发生、发展有重要关系,其表达的高低有可能作为食管癌预后判断的一种新指标。     

HspB1在新疆哈萨克族食管癌组织中的表达

目的:寻找与新疆哈萨克族食管癌发生、发展密切相关的基因,为早期诊断和治疗提供依据.方法:利用二维凝胶电泳(2-DE)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术联用检测出新疆哈萨克族食管癌癌组织与远端正常组织的差异表达蛋白.对其中的HspB1基因进行RT-PCR验证.结果:2-DE结果显示新疆哈萨克族食管癌患者癌组织和远端正常组织在蛋白质水平有显著增高,而其mRNA表达在癌组织中为2.18±3.98,正常组织为3.06±4.69,并无显著升高(P>0.05),且与浸润深度、临床分期、分化程度无关(P>0.05),但HspB1的表达量在浸润深度组,T1-T2期T>N为7/11(63.6%),而T3-T4期T>N仅为14/37(37.8%);在分化程度组,低分化期T>N为5/9(55.6%),中高分化期T>N仅为16/39(41%).随着浸润深度和分化程度的逐步加深,由T>N向T相似文献   

内镜全程直视引导沙氏探条扩张治疗高位食管癌术后吻合口狭窄的临床分析

目的：探讨胃镜全程直视引导食管沙氏扩张探条扩张治疗高位食管癌术后吻合口狭窄的临床应用价值。方法50例高位食管癌术后吻合口狭窄病例随机分为2组各25例,一组为对照组,行非全程胃镜引导下的食管扩张术,另一组为观察组,行全程胃镜下引导的食管扩张术,并对上述两组病例在操作成功率、扩张后食管腔直径增大值等指标进行比较分析。结果对照组扩张成功率为84.00%,观察组扩张成功率为96.00%,明显高于对照组（P〈0.05）。研究显示在24例全程胃镜引导下的食管扩张术可使食管直径增大（6.7±1.3）mm,而21例非全程胃镜引导下的食管扩张术可使食管直径增大（4.1±1.1）mm,两组食管腔直径增大值比较差异显著（P〈0.05）。结论在高位食管吻合术后吻合口狭窄的扩张治疗中,全程胃镜下引导的食管扩张术可以直视扩张部位进行操作,方法较传统的非全程胃镜引导下的食管扩张术的更具优势。     

负载食管癌抗原的DC诱导特异性CTL对食管癌细胞体外杀伤作用观察

目的观察负载食管癌抗原的树突状细胞（DC）活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）对食管癌细胞的体外杀伤作用。方法冻融法获取食管癌细胞抗原,联合应用粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）、白细胞介素4（IL-4）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导培养外周血DC并负载肿瘤抗原,激活自体T淋巴细胞,制备特异性CTLs。将其加入食管癌细胞中培养48 h,用MTT法检测食管癌细胞裂解率,ELISA法检测γ干扰素（γ-IFN）水平。结果负载食管癌抗原的DC激活的CTLs表现出对食管癌Eca109细胞的特异性杀伤作用,γ-IFN水平为（1 625±37.55）pg/ml;而对A549细胞仅有微弱的杀伤作用,γ-IFN水平为（169.04±13.81）pg/ml。未负载食管癌抗原DC刺激的CTLs对食管癌细胞几无杀伤作用。结论负载食管癌抗原的DC激活的CTLs在体外对食管癌细胞能产生高效而特异性的杀伤作用。     

Expression of the putative stem cell marker Musashi‐1 in Barrett's esophagus and esophageal adenocarcinoma

The cancer stem cell theory states that cancers contain tumor‐forming cells that have the ability to self‐renew as well as give rise to cells that differentiate. Cancer stem cells have been identified in several solid tumors, but stem cells in normal human esophagus or in Barrett's esophagus or adenocarcinoma have not been reported. Musashi‐1 is expressed by the crypt base columnar cells identified as intestinal stem cells. In other diseases of the gastrointestinal tract, local inflammation of the tunica mucosa may be an initiating factor of alteration of focal tissue ‘niches,’ where dormant stem cells locate. The present study investigated whether Musashi‐1 is expressed in the esophagus and its relation to immune inflammation of the mucosa in Barrett's esophagus and esophageal adenocarcinoma. A total of 41 esophageal tissue specimens from 41 patients were studied. Of these, 15 were esophageal adenocarcinoma, 17 were Barrett's esophagus (10 intestinal metaplasia and 7 dysplasia), and 9 were normal squamous esophagus tissue specimens from patients without esophageal pathology. Immunohistochemistry was performed using antibodies to Musashi‐1 and to a set of cell type‐specific markers. A multiplexed tandem polymerase chain reaction method was used to measure the relative mRNA expression levels of Musashi‐1 and the specific dendritic cell marker dendritic cell‐specific intercellular molecule‐3 (ICAM‐3)‐grabbing nonintegrin. Immunohistochemistry demonstrated the presence of small numbers of Musashi‐1+ cells scattered in the connective tissue stroma and within the epithelium in cardiac‐type glands in biopsies from patients without Barrett's esophagus. Musashi‐1 expression was present in Barrett's intestinal metaplasia and in dysplastic Barrett's in which the majority of epithelial cells in individual glands expressed this antigen. Expression of Musashi‐1 was highest in esophageal adenocarcinoma, where it was most intense in glands that displayed features of early stages of adenocarcinoma formation. In contrast, Musashi‐1 staining level was weaker in glands that displayed features of advanced adenocarcinoma. Double immunostaining with proliferating cell nuclear antigen showed low proliferation in the vast majority of Musashi‐1+ cells. Musashi‐1 mRNA expression levels were significantly higher in esophageal adenocarcinoma than in normal esophagus or Barrett's esophagus tissues. Dendritic cell‐specific intercellular molecule‐3 (ICAM‐3)‐grabbing nonintegrin (DC‐SIGN) mRNA expression levels were significantly increased in both Barrett's tissues and adenocarcinoma tissues. Expression of the putative stem cell marker Musashi‐1 is absent in normal squamous epithelium, weak in esophageal cardiac‐type glands and Barrett's esophagus, and markedly increased in adenocarcinoma, especially in glands displaying features of early cancer development. Musashi‐1 expressing cells may be significant in the etiology of Barrett's esophagus and adenocarcinoma, and perhaps even a cell of origin for this disease. We speculate that immune inflammation occurring in Barrett's esophagus alters the mucosal microenvironment in a manner which is favorable to the activation of dormant stem cells.     

Survivin和Ki67在食管鳞癌组织中的表达及意义

目的探讨Survivin和Ki67蛋白表达在食管鳞癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组化SP法检测40例食管鳞癌患者癌组织中Survivin和Ki67蛋白表达情况,并分析其与临床特征的关系以及二者的相关性。结果食管鳞癌患者癌组织中Survivin和Ki67蛋白的阳性表达率分别为72．5％和75．0％。两种蛋白表达与肿瘤组织分化程度、浸润程度相关,而与性别、年龄、淋巴结转移情况无关。二者表达呈显著正相关（r=0．420,P〈0．05）。结论Survivin和Ki67蛋白与食管鳞癌组织的分化和恶性进展有关,Survivin在抑制细胞凋亡的同时可能促进了细胞增殖。     

血清CA19—9、CEA、CA125联合检测诊断食管癌的价值

目的探讨多抗原联合检测诊断食管癌的价值。方法应用全自动化学免疫分析检测254例食管癌患者、40例食管炎患者和100例健康体检者血清CA19-9、CEA、CA125的表达。结果三项指标联合检测诊断食管癌的灵敏度和特异度均明显高于单独检测及任两项联合检测（P均〈0．01）。结论三项指标联合检测可提高诊断食管癌的灵敏度和特异度,有利于早期诊断食管癌。     

EphA2、hMSH2 mRNA在新疆维吾尔族和汉族食管鳞癌中的表达及意义

目的探讨新疆维吾尔族和汉族食管鳞状细胞癌（鳞癌）基因EphA2和hMSH2 mRNA的表达情况及其与临床病理特征之间的关系。方法采用RT-PCR技术检测EphA2和hMSH2 mRNA在30例新疆维吾尔族和30例汉族食管鳞癌组织及其对应的远隔无癌食管组织中的表达。结果 EphA2在食管癌组织和远隔无癌组织中的相对表达量分别为0.269±0.040和0.153±0.023,P=0.013;hMSH2分别为0.674±0.039和0.797±0.035,P=0.022。在汉族和维吾尔族食管鳞癌组织中EphA2的阳性表达率分别为50%和63.3%,P=0.297;hMSH2的阳性表达率分别为40%和50%,P=0.436。EphA2与hMSH2的表达之间呈负相关。结论 EphA2和hMSH2在两民族食管鳞癌中的表达无差异;EphA2高表达和hMSH2低表达可能共同促进食管鳞癌的发生发展。     

CD31、CD34和CD105蛋白在食管鳞状细胞癌组织微血管中的表达及意义

目的探讨CD31、CD34和CD105蛋白表达在食管鳞状细胞癌（ESCC）发生、发展中的作用。方法应用免疫组化SP法对50例ESCC和10例正常食管黏膜组织标本进行标记染色,按Weidner法计算三种蛋白标记物的肿瘤组织微血管密度（MVD）。结果在ESCC及正常食管黏膜组织中MVD-CD31、MVD—CD34及MVD-CD105均依次降低,组间比较尸〈0．01;MVD-CD31、MVD—CD34与ESCC的浸润深度及淋巴结转移密切相关（P〈0．05）,MVD—CD105与ESCC的TNM分期、浸润深度及淋巴结转移密切相关（P〈0．01）;ESCC组织中MVD—CD31、MVD—CD。均显著高于MVD-CD105（P〈0．01）。结论CD31、CD34和CD105蛋白表达在ESCC发生、发展和转移中起重要作用;联合检测三者可望为判断ESCC发展及利用血管抑制剂治疗提供理论依据。