双重实时荧光PCR快速鉴别人参和西洋参＊

目的 建立一种能够快速鉴定人参和西洋参的双重实时荧光PCR方法。方法 通过对人参属及其近似种基因序列的分析比对，设计特异性的引物探针，建立双重实时荧光PCR检测方法。PCR反应体系为Premix Ex Taq （Probe qPCR） 10 μL，人参上下游引物各0.5 μL，西洋参上下游引物各0.3 μL，人参与西洋参特异性探针各0.4 μL，DNA模板2 μL，灭菌去离子水补至20 μL。反应条件为95℃预变性30 s；然后以95℃变性5 s，60℃退火延伸30 s进行40个循环。应用该方法测试了27份DNA样品，包括7份人参、6份西洋参、4份人参与西洋参混合样、10份其他人参属样品及其他常见中药材样品的DNA，以确定该方法的特异性。将人参与西洋参样品DNA混合后10倍稀释成不同浓度后进行检测，用以确定该方法的灵敏度。结果 人参及西洋参样品均在特定的荧光通道下出现典型的阳性扩增曲线，人参与西洋参混合样品均同时出现两条阳性扩增曲线，其它对照样品及空白对照均没有出现阳性扩增曲线。灵敏度检测结果显示该方法检测人参及西洋参的最低检测限均为2 pg DNA/反应。结论 本实验建立的双重实时荧光PCR方法能够同时快速、准确、灵敏地鉴别出人参和西洋参。     

艾儒棣教授运用“开鬼门”法治疗皮肤病经验

皮肤病的发生与皮肤毛窍闭塞休戚相关,运用发汗开窍的"开鬼门"法治疗皮肤病有重要意义。从上述两方面论述了艾教授重视发汗开窍法的缘由,并介绍常用药及临床应用案例。     

体外光分离置换疗法与器官移植

<正>体外光分离置换疗法(extracorporeal photopheresis,ECP)最早是由Edelson等[1]于1987年提出的针对传统疗法难治性皮肤T细胞淋巴瘤(cutaneous T-cell lymphoma,CTCL)的一种新治疗方法。该法以白细胞分离术为基础,先从患者外周血中分离白细胞,而后在体外经过补骨脂素长波紫外线(psoralen ultraviolet A,PUVA)处理,最后将处理后的白细胞回输至患者体内。ECP作为CTCL的一线     

通经理血汤治疗偏头痛104例临床观察

我们应用通经理血汤治疗偏头痛104例,并与苯噻啶之疗效作对比观察。现作如下报告:1临床资料1.1病例选择入选标准:依据国际头痛协会制定标准诊断为有先兆或无先兆偏头痛;病程10d以上;近期发作为严重或中度偏头痛;发作频度每月1次以上;持续时间数时1￣2d不等;年龄为18￣52岁;性别     

乳腺结核的外科治疗(附16例)

目的:探讨乳腺结核的诊断和外科治疗.方法:回顾性分析我院2004年7月—2011年12月收治16例乳腺结核的临床资料及高负压引流在术中应用的疗效.结果:16例病人术后均恢复良好,随访2个月~3年,无1例复发,无1例行全乳腺切除术.结论:乳腺结核的治疗应当是以手术为主的综合治疗,术前、术后加强抗感染,术中尽可能清除坏死组织,术后充分利用负压引流的作用.     

“超级卫士”的前世今生(上)

一副镜片,就是两块圆形树脂片,这是众多消费者心中真实的答案。一副镜片,除了零售价格有点差异化,其实也没什么大不了的,这是不少零售商的惯性思维。拉倒吧,如果这事儿就只有这么简单,那咱们也就不用这么费劲地挖空心思搞公司、建工厂、招聘技术研发人员,更没有现在吃香喝辣的视光培训师,镜片公司高薪挖来的产品培训、售后服务人员也就只能自娱自乐。一副常规的镜片,到底有多少工序?运用了哪些工艺?花费了多少人力、物力?如果一副要想镜片达到某些特殊的效果,研发人员又需要干哪些具体的工作?今天我们就以上海舒曼光学的     

增殖性糖尿病性视网膜病变玻璃体切割术后高眼压的研究

目的探讨玻璃体切割手术治疗增殖性糖尿病性视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)术后高眼压发生的相关危险因素及治疗方法。方法选取行玻璃体切割术的108例121眼PDR患者进行回顾性分析,观察术后高眼压的发生率,并对引起术后高眼压的相关因素进行统计学分析。术后早期高眼压的诊断标准为:术后2周内任何时间非接触性眼压计测眼压>21 mmH g(1 kP a=7.5 mmH g)。结果玻璃体切割术后33眼(27.27%)发生高眼压,眼内充填与平衡液充填者的发病率为32.63%和7.69%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。术中行全视网膜光凝与补充视网膜光凝者的发病率分别为42.22%和18.42%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。术前视网膜病变Ⅳ期、Ⅴ期、Ⅵ期组的发病率分别为12.00%、22.00%、41.30%,各组比较差异有统计学意义(P<0.05)。术前未合并视网膜脱离与合并视网膜脱离组的发病率分别为18.67%和41.30%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。术中联合晶状体切除术与术中未联合晶状体切除术组的发病率为35.21%和16.00%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。经Logistic回归分析发现,玻璃体切割术后早期高眼压的独立危险因素是术前合并视网膜脱离及术中眼内充填。结论术前合并视网膜脱离、术中联合晶状体切除、术中眼内充填、术中行全视网膜光凝与DR玻璃体切割术后高眼压相关,引起术后高眼压的独立危险因素为术前合并视网膜脱离及术中眼内充填。早期发现、个体化治疗可以最大程度地挽救患者的视力。     

2013年济南市居民卒中和冠心病急性发病情况分析

目的了解2013年济南市居民卒中和冠心病急性发病情况。方法参照山东省疾病监测系统报告的济南市居民脑卒中、冠心病急性病例监测资料,分析2013年济南市居民脑卒中、冠心病急性发病情况。采用Excel软件建立数据库,SPSS 13.0统计软件进行描述性分析,P≤0.05为差异有统计学意义。结果 12013年济南市7个项目区居民卒中累计报告发病12 175例,监测区户籍人口发病率为272.4/10万;死亡2 342例,户籍人口死亡率为52.4/10万;根据2000年中国标准人口计算,标化发病率和死亡率分别为187.6/10万和34.5/10万。卒中男性发病率和死亡率均高于女性(χ2=138.20、P<0.01,χ2=15.31、P<0.01);50岁以上年龄组发病率和死亡率均较50岁以下年龄组增加(χ2=24 393.54、P<0.01;χ2=5 006.89、P<0.01)。2 2013年济南市居民累计报告冠心病急性发病4 531例,监测区户籍人口发病率为101.4/10万;累计死亡2 121例,户籍人口死亡率为47.5/10万;标化发病率和死亡率分别为68.3/10万和30.7/10万。冠心病急性发病发病率男性高于女性(χ2=8.87、P<0.01),死亡率男性、女性比较差异无统计学意义(χ2=2.34、P=0.128);50岁以上年龄组发病率和死亡率均高于50岁以下(χ2=9 192.48、P<0.01;χ2=4 558.84、P<0.01)。结论 2013年济南市居民脑卒中合计大于300/10万,冠心病急性病例粗发病率较高,发病率有随年龄增加而增长的趋势。     

G蛋白偶联受体激酶4对氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究G蛋白偶联受体激酶4(GRK4)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响。方法以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A10细胞)为靶细胞,检测在不同浓度的ox-LDL(10、20、30、40、60、80 mg/L)刺激下A10细胞的增殖情况;观察ox-LDL(40 mg/L)刺激下A10细胞GRK4表达变化;用siRNA干扰A10细胞GRK4表达后,检测ox-LDL对A10细胞增殖的影响。Western blot检测GRK4蛋白表达,CCK-8检测细胞增殖活力。结果用不同浓度ox-LDL刺激A10细胞,发现ox-LDL(40 mg/L)刺激下细胞增殖幅度可达78.3%(P<0.05),且细胞GRK4蛋白表达增加[实验组(0.367 9±0.049 1),对照组(0.193 0±0.038 5),P<0.05];与对照组相比,用siRNA干扰A10细胞GRK4表达后ox-LDL对A10细胞增殖的影响明显减弱[对照组(1.050 1±0.302 9),ox-LDL刺激组(1.929 1±0.390 0),siRNA组(1.403 2±0.164 4),P<0.05]。结论 ox-LDL可增强GRK4表达,干扰细胞GRK4表达后可减弱ox-LDL诱导的大鼠平滑肌细胞的增殖。     

G蛋白偶联受体激酶4对内皮素B型受体的异常调节在原发性高血压发生中的作用

目的探讨G蛋白偶联受体激酶4(G protein-coupled receptor kinase 4,GRK4)对内皮素B型受体(endothelin receptor B,ETB)的异常调节在原发性高血压中的作用及机制。方法选用12~14周龄,体质量300 g左右的雄性自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHRs)及其对照鼠(Wistar-Kyoto,WKY)各10只,通过无创鼠尾测压仪测定血压,采用右肾上腺静脉插管灌注ETB受体特异性激动剂BQ3020后观察尿流速及尿钠排泄率,荧光定量PCR检测大鼠肾脏GRK4 mRNA水平,Western blot测定大鼠肾脏GRK4及ETB受体的蛋白表达差异,免疫共沉淀法检测ETB受体磷酸化情况,在动物水平观察高血压状态下ETB受体的功能情况。结果 ETB受体激动剂BQ3020对WKY大鼠有明显利尿排钠作用,且这种利尿排钠作用可以被ETB受体抑制剂BQ788阻断,但在SHR大鼠BQ3020的利尿排钠作用受损[尿流速:(11.23±2.16)vs(3.49±1.32),P<0.05];尿钠排泄率:[(1 551.43±393.47)vs(601.16±128.15),P<0.05];在SHR大鼠肾皮质GRK4的蛋白水平及mRNA水平均较WKY大鼠高[蛋白:(1.38±0.10)vs(0.85±0.07),P<0.05];mRNA:[(2.23±0.15)vs(0.78±0.16),P<0.05],SHR大鼠ETB受体总蛋白水平与WKY大鼠相比差异无统计学意义(P>0.05),但ETB受体磷酸化水平增高。结论 GRK4可能通过对内皮素B型受体的异常调节,参与了原发性高血压发生与发病。