LC-MS/MS法同时测定人血浆中艾普拉唑和雷贝拉唑的浓度

目的:建立同时测定人血浆中艾普拉唑和雷贝拉唑浓度的方法。方法:人血浆样本用乙酸乙酯提取后,采用液相色谱串联质谱法进样测定,色谱柱为Zorbax SB-C18,流动相为乙腈-10 mmol/L醋酸铵(80∶20),流速为0.20 ml/min。采用三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子分别为m/z 367.5→m/z 184.1(艾普拉唑)、m/z 360.0→m/z242.0(雷贝拉唑)和m/z 383.2→m/z 266.8(内标氯雷他定)。结果:艾普拉唑和雷贝拉唑血药浓度均在5~1 500 ng/ml范围内线性关系良好(r分别为0.996 6、0.996 2),最低定量限为5 ng/ml;日内、日间RSD<15%。艾普拉唑、雷贝拉唑提取回收率分别为76.5%~78.8%、86.7%~89.3%。受试者单剂量口服艾普拉唑肠溶片5 mg的主要药动学参数中tmax分别为3、2.5 h,cmax分别为418.09、654.50 ng/ml,AUC0-24 h分别为2 028.48、3 499.18 ng·h/ml;单剂量口服雷贝拉唑肠溶片10 mg后的主要药动学参数中tmax分别为2、3.5 h,cmax分别为342.4、402.5 ng/ml,AUC0-24 h分别为1 018.0、1 196.6 ng·h/ml。结论:该方法快速、灵敏、准确、专属性强、重复性好,可适用于人血浆中艾普拉唑和雷贝拉唑浓度的同时测定。     

UFLC-MS/MS法测定氨茶碱制剂中的氨茶碱含量

目的:建立测定氨茶碱制剂(片剂和注射液)中氨茶碱含量的方法。方法:采用超快速液相色谱串联质谱(UFLC-MS/MS)法。色谱柱为Shim-packXR-ODS,流动相为乙腈-0.4%甲酸水溶液(54:46),流速为0.40ml/min;通过电喷雾离子化、采用多反应检测方式进行正离子检测,用于定量分析的检测离子为m/z181.0→124.0。结果:在3min内可完成氨茶碱定量分析;氨茶碱检测质量浓度线性范围为0.25～100ng/ml(r=0.9998),最低定量限为0.25ng/ml;平均回收率为99.75%,日内、日间RSD均<2.84%。结论:本方法灵敏、准确、专属性好、定量限低且分析时间短,适用于氨茶碱制剂的含量测定。     

LC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平的浓度及其在室间质评中的应用

目的:建立并验证测定人血浆中卡马西平(CBZ)浓度的方法,并应用于CBZ的室间质评。方法:血浆样品经乙腈沉淀后,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定。内标为氯雷他定,色谱柱为Kromasil C18,流动相为水(含0.1%甲酸)-乙腈,梯度洗脱,流速为0.6 ml/min,柱温为40℃;采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z237.1→194.0(CBZ)、m/z 383.1→267.0(内标)。结果:CBZ血药浓度在5~1 000 ng/ml范围内线性关系良好(r>0.998),定量下限为5 ng/ml;日内、日间RSD为1.00%~6.42%,相对偏差为-6.93%~0.32%;5个室间质评样品的检测结果分别为679.0、475.0、104.0、29.2、26.2 ng/ml,评价结果通过率为100%。结论:该方法灵敏、准确、专属性强,可用于CBZ血药浓度测定及其室间质评。     

LC-MS/MS法测定氨氯地平血药浓度及其片剂的生物等效性研究

目的:建立测定人血浆中氨氯地平血药浓度的方法,并评价2种苯磺酸氨氯地平片的生物等效性。方法:人血浆样本经液-液萃取后,选用ZorbaxSB-C18NarrowBore色谱柱,以甲醇-10mmol/L乙酸铵(90:10,V/V)为流动相,流速为0.3ml/min,选用API3200型三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行监测,电喷雾电离(ESI)离子化源,正离子方式,选择监测离子反应分别为m/z409.2→m/z238.2(氨氯地平)和m/z256.2→m/z167.3(苯海拉明,内标)。24名健康受试者随机于2个周期交叉口服相同剂量的苯磺酸氨氯地平片受试制剂(国产)或参比制剂(进口),考察其生物等效性。结果:氨氯地平和苯海拉明的保留时间分别约为2.79、2.43min;氨氯地平的血药浓度在0.10～10.0ng/ml范围内线性关系良好(r=0.9997),定量下限为0.10ng/ml,日内、日间RSD均<15%,相对偏差(RE)均在±15%范围以内,平均提取回收率为(84.7±5.5)%,平均基质效应因子为(76.5±8.4)%。以AUC0-120h计,受试制剂相对于参比制剂的生物利用度为(105.8±20.9)%。结论:该方法快速、灵敏、专属性强、重现性好,适用于人血浆中氨氯地平的测定,可用于苯磺酸氨氯地平片的人体生物等效性研究;2种制剂生物等效。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中卡马西平、文拉法辛、罗格列酮和硝苯地平的浓度

目的:建立同时测定人血浆中卡马西平、文拉法辛、罗格列酮和硝苯地平浓度的方法。方法:血浆样品经甲醇(含0.1%甲酸)沉淀蛋白后,以盐酸吡格列酮为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS C_(18),流动相为含0.01%甲酸的水溶液-含0.01%甲酸的甲醇溶液(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,柱温为50℃,进样量为5μL;采用电喷雾离子源,以多反应监测模式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 237.00→194.05(卡马西平)、m/z 278.20→58.10(文拉法辛)、m/z 358.08→135.04(罗格列酮)、m/z 347.15→315.17(硝苯地平)、m/z 357.09→134.06(内标)。结果:卡马西平、盐酸文拉法辛、盐酸罗格列酮、硝苯地平血药浓度的线性范围分别为2.00~2 000.00、2.12~2 120.00、2.00~2 000.00、2.04~1 020.00 ng/mL(r分别为0.995 9、0.990 5、0.991 5、0.991 0,n=5),最低检测限分别为0.200、0.106、0.100、1.020 ng/mL;日内、日间RSD均小于15%,相对误差的绝对值小于15%;提取回收率为65.66%~96.36%(RSD<15%,n=5),基质效应为80.99%~114.33%。采用该法测得2例癫痫患者体内卡马西平的血药浓度分别为(1 500.41±169.11)、(1 159.01±59.24)ng/mL(RSD分别为11.27%、5.60%,n=3),2例高血压患者体内硝苯地平的血药浓度分别为(14.68±1.92)、(21.18±3.59)ng/mL(RSD分别为16.98%、13.10%,n=3)。结论:该方法操作简便,专属性强,灵敏度、准确度高,可用于上述药物的血药浓度监测及药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中阿折地平的浓度

目的:建立测定人血浆中阿折地平浓度的方法。方法:人血浆样本经乙腈沉淀蛋白后采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法进样测定,色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18,流动相为甲醇-10 mmol/L乙酸铵(含1%甲酸)(80∶20,V/V)。选用多重反应监测扫描方式进行质谱监测,监测离子反应分别为m/z 583.3→167.1(阿折地平)、m/z 285.1→154.0(内标地西泮)。结果:阿折地平的血药浓度在0.05~40 ng/ml范围内线性关系良好,定量下限为0.05 ng/ml。日内、日间RSD分别为3.01%~7.75%,0.99%~12.08%;平均提取回收率为110.20%~111.99%。结论:该方法简便、快速、灵敏、专属性强、重现性好,适用于人血浆中阿折地平浓度的测定。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中阿魏酸和芍药苷的含量

目的:建立一种同时测定人体血浆中阿魏酸和芍药苷的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测技术,分别以羟甲香豆素和栀子苷为内标,采用正离子方式检测,多反应监测模式扫描,检测离子通道为阿魏酸m/z 195.1→151.2和羟甲香豆素m/z 177.1→161.2、芍药苷m/z 503.1→219.2和栀子苷m/z 411.1→216.1。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18(150 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为0.5%冰醋酸-乙腈(82∶18,V/V),流速为0.3 ml/min,柱温为40℃。结果:两种成分均在3 min内完成检测。阿魏酸、芍药苷的质量浓度分别在4.5²50.0、37.5250.0、37.5² 000.0 ng/ml范围内与指标成分和内标峰面积比呈良好线性关系,定量限分别为4.5、37.5 ng/ml;高、中、低质量浓度阿魏酸平均加样回收率分别为(91.2±5.7)%、(93.8±7.6)%、(92.7±7.5)%,芍药苷平均加样回收率分别为(90.5±7.6)%、(90.2±4.4)%、(91.7±4.2)%;精密度RSD在5.3%2 000.0 ng/ml范围内与指标成分和内标峰面积比呈良好线性关系,定量限分别为4.5、37.5 ng/ml;高、中、低质量浓度阿魏酸平均加样回收率分别为(91.2±5.7)%、(93.8±7.6)%、(92.7±7.5)%,芍药苷平均加样回收率分别为(90.5±7.6)%、(90.2±4.4)%、(91.7±4.2)%;精密度RSD在5.3%⁹.4%范围内;稳定性RSD<±10%。结论:所建方法分析时间短、专属性好、准确度高,适用于同时测定人血浆中阿魏酸和芍药苷的含量。     

LC-MS/MS法测定人血浆中加巴喷丁的浓度

目的:建立测定人血浆中加巴喷丁(GBP)浓度的方法。方法:血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以磺胺甲噁唑为内标,采用液相色谱-串联质谱法测定。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为水(含0.05%甲酸)-甲醇,梯度洗脱,流速为1 m L/min,柱温为30℃,进样量为20μL。采用电喷雾离子源,以多反应监测进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 172.0→154.1(GBP)、m/z279.0→124.0(内标)。结果:GBP血药浓度在13.4~10 720.4 ng/m L范围内线性关系良好(r=0.992 3,n=5),定量下限为13.4ng/m L,最低检测限为4.0 mg/m L;日内、日间RSD均小于10%,相对误差为-4.93%~5.10%;提取回收率为86.2%~90.3%(RSD<5%,n=6),基质效应为87.6%~92.1%。采用该法测得10例癫痫患者体内GBP的血药浓度为2 075.19~4 078.87 ng/m L(n=20)。结论:本方法灵敏度高、专属性好、适用性强,可用于癫痫患者体内GBP的血药浓度监测及药动学研究。     

低剂量甲氨蝶呤给药类风湿性关节炎病人血浆浓度的测定

目的 建立一种快速、灵敏地测定类风湿性关节炎病人血浆中低浓度甲氨蝶呤(MTX)的方法.方法 采用高效液相色谱(HLPC)串联质谱电喷雾检测(LC/MS/MS)法,色谱柱为Ultimate XB-C18柱,流动相为乙腈(1%甲酸):甲酸铵水溶液(20 mmol/L)＝30 ︰ 70,流速为0.2 ml/min,柱温为25℃.样品提取采用液-液萃取的方法,即先用三氟乙酸沉淀蛋白,再用乙酸乙酯提取.提取的样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用多反应监测(MRM)对甲氨蝶呤(m/z 455.2→308.2)和内标多索茶碱(m/z 267.1→181.1)进行测定.结果 甲氨蝶呤血药浓度在1～100 ng/ml范围内线性关系良好(r =0.9998),分析方法的最低检测限为0.5 ng/ml,其高、中、低(50、10、2 ng/ml)3 个浓度的平均提取回收率分别为41.2%、49.2%和43.4%, 日内(n = 5)、日间(n = 3)相对标准偏差值(RSD)均<15 %.结论 本方法简单快捷、灵敏、准确、重现性好,可用于低剂量给药的类风湿性关节炎病人的临床血药浓度监测和药动学研究.     

阿德福韦酯类似物M1和M2在犬体内的生物利用度研究

目的:研究阿德福韦酯类似物M1和M2在犬体内的生物利用度。方法:将犬随机分为阿德福韦酯组、M1组和M2组,每组6只,灌服相应药物7mg/kg,采用高效液相色谱-质谱法检测各组犬给药后0.33、0.67、1、2、3、4、8、12、24、36、48h阿德福韦的血药浓度,用3p97药动学软件计算药动学参数。色谱柱:Phenomenex C18(2)100d,预柱:Luna C18(2),流动相:1%甲酸水溶液-甲醇(98:2,V/V),流速:0.2ml/min;质谱条件:电喷雾电离选择性正离子检测,阿德福韦测定离子质荷比(m/z)为274[M+H]+,内标更昔洛韦测定离子m/z为256[M+H]+。结果:阿德福韦酯、M1和M2的药动学参数分别为tmax:(0.69±0.14)、(1.30±0.98)、(1.23±1.00)h,cmax:(143.19±56.79)、(48.11±18.45)、(79.76±41.68)ng/ml,AUC0-48h:(2559.80±896.64)、(966.91±668.36)、(954.16±1405.65)ng·h/ml,M1和M2的生物利用度分别为37.77%和37.27%。结论:M1和M2的生物利用度未达临床需求,其原因可能是合成或纯化过程中杂质过多,或者其体内转化有限,尚待进一步探究。