14-3-3β在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

目的探讨14-3-3β在人脑星形细胞瘤中表达与肿瘤病理分级的关系。方法采用免疫组化法检测14-3-3β亚型在80例人脑星形细胞瘤和10例正常脑组织标本中的表达水平。结果在正常脑组织中，14-3-3蛋白6亚型只表达于神经元胞体和突起，在胶质细胞中未见表达。母亚型在人脑星形细胞瘤的表达阳性率及免疫反应评分（IRS）分别为60％、1．86±1．83。Ⅰ～Ⅳ级脑星形细胞瘤中β亚型表达阳性率分别为40％（8／20）、50％（10／20）、70％（14／20）和80％（16／20）。Ⅰ～Ⅳ级脑星形细胞瘤中β亚型IRS分别为0．88．4±0．27、1．15±0．28、2．19±0．37和3．23±0．47。不同恶性级别的脑星形细胞瘤中，14．3-3蛋白β亚型的阳性表达率无显著差异，但其IRS有显著差异（P〈0．05）。结论14-3-3β在人脑星形细胞瘤中高表达，且随着星形细胞瘤病理级别的增高而表达增强，14-3-3蛋白β亚型在脑星形细胞瘤的发生过程中具有重要作用。     

Olig-2在人脑胶质细胞瘤中的表达及临床意义

目的研究少突胶质细胞转录因子-2（Olig-2）在人脑胶质细胞瘤组织中的表达,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化sP法和蛋门印迹技术（Westernblot）,检测96例脑胶质细胞瘤患者的手术标本,WHO分类：Ⅰ级26例,Ⅱ级28例,Ⅲ级20例,Ⅳ级22例;组织学分类：巨细胞星形胶质细胞瘤26例,少突胶质细胞瘤28例,间变性星形胶质细胞瘤20例,多形胶质母细胞瘤10例,髓母细胞瘤12例和10例颅脑损伤内减压脑组织标本中Olig-2蛋白的表达水平：结果免疫组化结果表明：巨细胞星形胶质细胞瘤阳性表达牢为23．08％（6／26）,少突胶质细胞瘤阳性表达率为82．14％（23／28）,间变性星形胶质细胞瘤阳性表达率为40．00％（8／20）,多形胶质母细胞瘤阳性表达率为30．00％（3／10）,髓母细胞瘤阳性表达率为75．00％（9／12）和正常脑组织阳性表达率为60．00％（6／10）;Olig-2阳性率在良性（Ⅰ＋Ⅱ）和恶性（Ⅲ＋Ⅳ）中分别为53．70％（29／54）和47．62％（20／42）,统计学处理无明显差异（P〉0．05）;少突胶质细胞瘤Olig-2阳性率82．14％（23／28）和其它病理类型肿瘤阳性率38．24％（26／68）比较有明显差异（P〈0．05）;Westernblot结果显示少突胶质细胞瘤中Olig-2蛋白的表达明显高于其它类型胶质细胞瘤及正常脑组织（P〈0．05）。结论Olig-2在少突胶质细胞瘤中明显高表达,但表达水平与脑胶质细胞瘤恶性程度无明显相关,Olig-2可以作为人脑少突胶质细胞瘤与其它类型胶质细胞瘤鉴别诊断的重要标记物.     

14-3-3蛋白在人脑胶质瘤中的表达及生物学意义

目的检测14-3-3蛋白在人脑胶质瘤中的表达情况,探讨其在胶质瘤发生发展中的生物学意义。方法采用免疫组化亲和素-生物素过氧化物酶复合物(ABC)法检测5个胶质瘤细胞系(U251MG,U87MG,BT325,SHG44和C6)、121例人脑胶质瘤石蜡标本和10例正常脑组织中14-3-3蛋白的表达情况。分析14-3-3蛋白的表达在胶质瘤发生发展中的作用。结果在正常脑组织标本中,13-3-3蛋白主要表达于神经元的胞体和突起,仅在少数的胶质细胞中可见14-3-3蛋白的弱表达。然而,5个胶质瘤细胞系和绝大部分星形细胞瘤中可见14-3-3蛋白的阳性表达,其表达阳性率为:Ⅰ级78.6%(11/14),II级75%(18/24),III级76.2%(16/21),IV级80%(20/25)。不同恶性级别的星形细胞瘤中,14-3-3蛋白的阳性表达率无显著差别,但14-3-3蛋白的表达强度和范围有随肿瘤的恶性度增高而增加的趋势。其它类型的胶质瘤中也可见14-3-3蛋白的大量表达,其表达阳性率为:少突胶质细胞瘤66.7%(4/6),间变型少突胶质细胞瘤100%(4/4),室管膜瘤50%(2/4),间变型室管膜瘤66.7%(2/3),脉络从乳头状瘤100%(5/5),松果体细胞瘤100%(3/3),髓母细胞瘤66.7%(8/12)。结论14-3-3蛋白在人脑胶质瘤中有大量的表达。14-3-3蛋白表达上调可能是胶质瘤细胞对抗调亡的一种共同机制,以14-3-3蛋白为靶点有望成为一种有前景的新的胶质瘤生物学治疗方法。     

Moesin在人脑星形细胞瘤的表达及意义

目的探讨膜结构伸展刺突蛋白（Moesin）在人脑星形细胞瘤中的表达及意义。方法应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法（SP法）,检测56例人脑星形细胞瘤和10例正常脑组织中Moesin和磷酸化Moesin的表达,并结合临床随访资料分析表达水平与星形细胞瘤临床预后的相关性。结果Moesin的阳性表达率在人脑星形细胞瘤组96．4％（54／56）和正常脑组织对照组0％（0／10）之间有统计学差异（P〈0．01）。Ⅲ～Ⅳ级星形细胞瘤Moesin的强阳性表达高于Ⅰ～Ⅱ级,两者相比有统计学差异（χ^3=27．50,P〈0．01）,磷酸化Moesin的表达结果与Moesin的结果基本一致。Moesin强阳性表达组患者比弱阳性＋阴性表达组患者的术后无瘤生存时间短,其差异有统计学意义（χ^2=29．85,P=0．000）。结论Moesin的表达水平与人脑星形细胞瘤的恶性程度密切相关,Moesin的过度表达对星形细胞瘤发展和预后起重要作用,提示Moesin可以作为反映星形细胞瘤预后的一种有价值的分子标志物。     

PCNA和GFAP在脑星形胶质细胞瘤中表达的双重染色研究

目的研究人脑星形胶质细胞瘤中增殖细胞核抗原（PCNA）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达及其与肿瘤分级的关系。方法采用免疫组化双重染色法对41例人脑星形胶质细胞瘤进行PCNA和GFAP两重标记检测。结果脑星形胶质细胞瘤中PCNA与GFAP表达率均为100％，PCNA表达水平与肿瘤分级呈正相关（r=-0．627，P〈0．01），GFAP表达水平与肿瘤分级呈负相关（r=-0．568，P〈0．01）；Ⅰ-Ⅱ级与Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤间PCNA和GFAP表达均有显著性差异（P〈0．05）；GFAP表达和PCNA表达水平呈负相关（r=-0．332，P〈0．05）。结论PCNA与GFAP的表达有一定的相关性。PCNA与GFAP的双重表达与脑星形胶质细胞瘤的增殖活性和恶性程度有关。     

脑胶质瘤低氧诱导因子-1α的表达及其意义

目的 探讨低氧诱导因子-1α在脑胶质瘤中的表达及其意义。方法60例脑胶质瘤标本中Ⅰ级11例（毛细胞型星形细胞瘤8例、脉络丛乳头状瘤2例、黏液乳头状型室管膜瘤1例）；Ⅱ级20例（弥漫型星形细胞瘤11例、少突胶质细胞瘤5例、室管膜瘤2例、多形性黄色瘤型星形细胞瘤2例）；Ⅲ级21例（间变性星形细胞瘤12例、间变性少突胶质细胞瘤6例、间变性室管膜瘤3例）；Ⅳ级8例（均为胶质母细胞瘤）。采用免疫组织化学方法检测胶质瘤标本中低氧诱导因子-1α的表达变化，并与胶质瘤体积及患者年龄、性别进行统计学分析。结果（1）胶质瘤组织低氧诱导因子-1α表达呈阳性反应，主要位于细胞质和（或）细胞核，具有明显的异质性；肿瘤浸润边缘部的肿瘤细胞表达明显增强；而阴性对照标本和10例对照脑组织标本则无表达。胶质瘤组织中低氧诱导因子-1α阳性表达率为71．67％（43／60），其中Ⅰ级为27．27％（3／11），Ⅱ级70．00％（14／20），Ⅲ级85．71％（18／21），Ⅳ级100％（8／8）。高级别胶质瘤者低氧诱导因子-1α阳性表达率明显高于低级别者，不同级别间差异有高度统计学意义（X^2=15．907，P〈0．01）；表达强度与病理级别间呈高度正相关（rn=0．480，P〈0．01）。（2）低氧诱导因子-1α表达与患者年龄、性别及原发肿瘤体积的大小等均无相关性（均P〉0．05）。结论脑胶质瘤低氧诱导因子-1α的表达强弱与肿瘤病理分级相关。     

骨桥蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义

目的探讨骨桥蛋白在人脑星形胶质细胞瘤中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测58例胶质瘤和10例正常脑组织中骨桥蛋白的表达，分析其表达与肿瘤病理分级和预后的关系。结果在正常脑组织中未见骨桥蛋白的表达。Ⅰ-Ⅳ级肿瘤中骨桥蛋白的阳性细胞率分别为11.3％±6．2％、21．8％±11．2％和36．7％±18．3％和49．4％±16．5％，差异有显著性（P〈0．05）。骨桥蛋白高表达和低表达患者2年生存率分别为40．6％（13／32）和76．9％（20／26），差异显著（P〈0．05）。结论骨桥蛋白在胶质瘤的浸润性生长中可能起重要作用，其表达与肿瘤分化程度和患者预后密切相关。     

Skp2和PTEN在人脑星形细胞瘤中的表达及临床意义

目的探讨Skp2和PTEN在人脑星形细胞瘤中的表达及与病理分级的关系。方法免疫组化S-P法检测70例Ⅰ～Ⅳ级脑星形细胞瘤和8例正常脑组织标本中Skp2和PTEN的表达。结果（1）Skp2、PTEN在人脑星形细胞瘤组中阳性表达率分别为47．1％和50．0％，而在正常脑组织组中阳性表达率分别为0％和100％。从星形细胞瘤Ⅰ、Ⅱ级组，Ⅲ级组到Ⅳ级组，Skp2的阳性表达率呈增高趋势，分别为9．1％、45．5％、80．8％，而PTEN的阳性表达率呈降低趋势，分别为90．9％、50．0％、15．4％。（2）Spearman等级相关检验证实病理分级和Skp2标记指数呈正相关，和PTEN标记指数呈负相关。人脑星形细胞瘤中Skp2和PTEN的表达呈负相关。结论Skp2和PTEN蛋白的表达情况可作为人脑星形细胞瘤的诊断和恶性程度评估的参考资料，可能成为人脑星形细胞瘤治疗的新靶点。     

半乳糖凝集素-3在人脑星形细胞瘤中的表达及其与预后的关系

目的探讨半乳糖凝集素-3﹙Gal-3﹚在星形细胞瘤不同病理分级中的生物学意义及其与预后的关系。方法应用免疫组化SP法检测46例首次手术切除的星形细胞瘤标本和8例正常脑组织标本中Gal-3的表达,并将它的表达与患者各临床指标之间进行统计学分析。结果正常脑组织中无明显Gal-3的表达,随着星形细胞瘤病理分级的提高,Gal-3的阳性表达逐渐升高（P〈0.05）,且其表达与肿瘤直径有关（P〈0.05）,其阳性表达的患者2年生存率低比阴性表达者低（P〈0.01）。结论Gal-3在星形细胞瘤中的表达上调可能对肿瘤发生、发展和恶性转化具有重要的作用,对于肿瘤恶性程度分级、预后评估有一定的价值。     

TP、MVD在人脑星形胶质细胞瘤中的表达及意义

目的探讨脑星形胶质细胞瘤组织胸苷磷酸化酶（TP）和微血管密度（MVD）的表达及其与星形细胞瘤的病理分级关系。方法选取病例50例，记录病例年龄、性别、组织学类型、病理分级。正常脑组织病例5例，鼠抗人单克隆抗TP抗体选取乳腺炎石蜡标本1例（阳性对照）。鼠抗人单克隆抗CD34抗体选取扁桃体炎石蜡标本1例（阳性对照）。将上述符合条件病例蜡块每例切片3张，利用免疫组化技术SP法检测它们TP、CD34的表达。结果5例正常尸检脑组织TP表达均阴性（-）；高级别星形胶质细胞瘤TP阳性表达率及微血管密度（MVD）值明显高于低级别星形胶质细胞瘤（WHOⅠ-Ⅱ级）（P〈0．05）。且口表达与MVD明显正相关（r=0．692，P〈0．05）。结论TP及MVD可以作为星形胶质细胞瘤恶性程度病理分级及判定预后的参考指标。     

Enhanced expression of 14-3-3 proteins in reactive astrocytes in Creutzfeldt-Jakob disease brains

14-3-3 proteins have been reported to be detected specifically in the cerebrospinal fluid (CSF) from patients with Creutzfeldt-Jakob disease (CJD). To elucidate the role of 14-3-3 proteins in patients with CJD, we performed immunohistochemical studies on 14-3-3 proteins in autopsied brains from five patients with sporadic CJD (sCJD), three patients with Alzheimers disease (AD), and seven normal control subjects. Formalin-fixed, paraffin-embedded sections from all cases were immunostained with several types of specific anti-14-3-3 antibodies. In the normal control brains, 14-3-3 immunoreactivity was localized mainly in the neuronal somata and processes; in contrast, glial cells showed no or faint immunoreactivity. In the brains from the patients with AD, 14-3-3 immunoreactivity was observed in the surviving neurons as well as some neurofibrillary tangles. In the brains from the patients with sCJD, 14-3-3 immunoreactivity was well preserved in the remaining neurons. Furthermore, the glial cells, especially the reactive astrocytes, were intensely immunostained in the brains affected by sCJD. Our findings suggest that 14-3-3 proteins may be up-regulated in the glial cells, particularly in reactive astrocytes, and that the enhanced expression of 14-3-3 proteins in these glial elements may be associated with the pathogenesis of sCJD.     

人脑星形细胞瘤中Gal-3和Bcl-2蛋白的表达及相关性研究

目的研究人脑星形细胞瘤中Gal-3和Bcl-2蛋白的表达及相互关系。方法 46例标本取自首次行星形细胞瘤切除的患者,8例正常脑组织标本取自颅脑外伤行内减压的患者,应用SP法免疫组化检测标本中Gal-3和Bcl-2蛋白在正常脑组织和不同病理分级的星形细胞瘤中表达。结果正常脑组织中无明显Gal-3和Bcl-2表达,Gal-3的阳性表达与星形细胞瘤的病理分级之间呈显著相关性,不同病理分级星形细胞瘤中Bcl-2阳性表达的差异无统计学意义。Gal-3与Bcl-2在星形细胞瘤中的表达呈正相关。结论 Gal-3在星形细胞瘤中的表达可能对肿瘤发生、发展有重要的作用,它有可能通过调节Bcl-2蛋白的水平来发挥抑制细胞凋亡的作用。     

Expression of Ki‐67, Topoisomerase IIα and c‐MYC in astrocytic tumors: Correlation with the histopathological grade and proliferative status

Astrocytomas represent the most frequent primary tumors of the central nervous system. Recently, the determination of the proliferative index of astrocytic tumors by different methods has been proposed as a valuable tool for tumor grading and also as a prognostic marker. The aim of the present study was to evaluate the expression of cell proliferation‐related proteins in human astrocytic tumors of different histopathological grades (WHO). An immunohistochemical study of the Ki‐67, Topoisomerase IIα (Topo IIα) and c‐MYC proteins using the avidin‐biotin‐peroxidase method was performed in 55 astrocytomas (13 grade I, 14 grade II, 7 grade III and 21 grade IV) and five samples of non‐tumor brain tissue (control group). Ki‐67, Topo IIα and c‐MYC positive indices tended to increase according to malignant progression, were absent in non‐tumor brain tissue and showed maximum values in high‐grade astrocytomas (III and IV). A gradual increase in Ki‐67 antigen expression was observed in agreement with mitotic index and histopathological classification. The same was not observed for Topo IIα and c‐MYC. Ki‐67 antigen detection in more than 8.0% of the tumor cells distinguished astrocytoma grade IV, while a labeling index between 1.5 and 8.0% characterized astrocytomas grade III and values below 1.5% discriminated low‐grade tumors (I and II). These results indicate that Topo IIα and c‐MYC expression is associated with cell proliferation in astrocytomas, although not in an exclusive way. Moreover, Ki‐67 antigen was found to be the best marker of cellular proliferation, and its expression predicts the grade of astrocytic tumors.     

泛素结合酶基因UbcH10在脑星形胶质细胞瘤组织中的表达及意义

目的 探讨泛素结合酶基因UbcH10在脑星形胶质细胞瘤组织中mRNA和蛋白表达水平及其与星形胶质细胞瘤病理级别的相关性. 方法 应用实时荧光定量PCR、免疫组织化学染色和蛋白印迹实验检测UbcH10 mRNA和蛋白在32例不同级别脑星形胶质细胞瘤和6例正常脑组织中的表达,并检测UbcH 10蛋白表达与增殖抗原Ki-67蛋白表达的相关性. 结果实时荧光定量PCR结果、免疫组织化学染色结果和蛋白印迹实验结果提示:与正常脑组织(1.00±1.57;O%;0.43±0.42)比较.UbcH10 mRNA和蛋白表达水平在高级别星形胶质细胞瘤(64.33±60.98;9.65%±5.75%;0.69±0.38)和低级别星形胶质细胞瘤(8.36±8.15;4.82%±3.30%;0.10±0.08)中明显上调,差异均有统计学意义(P<0.05);且高、低级别星形胶质细胞瘤之间比较差异也有统计学意义(P<0.05).UbcH10阳性细胞表达率与增殖抗原Ki-67阳性细胞表达率呈显著的正相关关系(r=0.67,P=0.000). 结论 泛素结合酶基因UbcH10可能在星形胶质细胞瘤的发生发展恶变过程中具有重要作用.     

MGMT、Caspase-3蛋白在胶质瘤中的表达及预后分析

目的探讨MGMT、Caspase-3蛋白表达水平与胶质瘤患者生存预后的关系。方法运用免疫组织化学方法检测75例不同病理级别胶质瘤组织和10例正常脑组织MGMT、Caspase-3表达情况,分析两者与胶质瘤患者临床病理特征及预后的相关性。结果 MGMT、Caspase-3在胶质瘤中的表达均高于正常脑组织,差异有统计学意义。MGMT、Caspase-3表达水平与患者的年龄、性别、术前KPS评分、病理级别无关联。两者表达情况与恶性胶质瘤患者的生存期关系用KaplanMeier生存曲线表示,结果表明MGMT表达水平与患者预后呈负相关(P0.05),Caspase-3表达水平与患者预后无相关性(P0.05)。MGMT和Caspase-3两者表达呈负相关(r=-0.230,P=0.047)。结论 MGMT表达与胶质瘤预后有关,可作为胶质瘤预后的生物学指标之一,Caspase-3表达与胶质瘤预后无关,但与MGMT有关联。     

Increased 14-3-3 immunoreactivity in glial elements in patients with multiple sclerosis

14-3-3 proteins have been shown to be increased in the cerebrospinal fluid from patients with several kinds of neurological diseases, including multiple sclerosis (MS). To investigate whether 14-3-3 proteins are closely related to the pathogenesis of MS, we performed immunohistochemical studies for 14-3-3 in autopsied brains from ten patients with MS, five patients with progressive multifocal leukoencephalopathy (PML), and seven normal control subjects. Formalin-fixed, paraffin-embedded sections from all cases were immunostained with a specific anti-14-3-3 antibody, and some sections from the MS cases were double-immunostained with antibodies raised against 14-3-3 and glial markers. In the normal control brains, 14-3-3 immunoreactivity was localized mainly in the neuronal somata and processes, and some glial cells showed only weak immunoreactivity. In the plaque lesions from the MS cases, the astrocytes and oligodendrocytes were intensely immunostained, and strong immunoreactivity was also found in some microglia and macrophages, most of which were located in the perivascular areas. In the PML brains, a similar immunolabeling pattern was observed in the demyelinated lesions, in which the astrocytes and oligodendrocytes exhibited dense 14-3-3 immunoreactivity. Our results suggest that 14-3-3 may be up-regulated in the glial cells, especially in astrocytes and oligodendrocytes, in patients with MS or PML. The exaggerated 14-3-3 accumulation in these glial elements may be associated with the pathogenesis of both demyelinating disorders.