丹参提取物改善大鼠重症急性胰腺炎肺损伤模型的ROS-NLRP3炎症小体信号通路机制

摘 要 目的：探讨活性氧簇（ROS） 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体信号通路在丹参提取物改善急性胰腺炎肺损伤大鼠的作用机制。 方法: 60只SD大鼠随机分组5组：假手术组、模型组、丹参提取物（1.5 g·kg-1）组、ROS抑制剂组[N 乙酰 L 半胱氨酸（NAC）,20 mg·kg-1]、丹参提取物+NAC组（1.5 g·kg-1＋20 mg·kg-1）,每组12只。以逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠（1 ml·kg-1）法建立急性胰腺炎肺损伤大鼠模型,各组灌胃给药,模型组和假手术组给予等量生理盐水,qd,持续5 d。处死大鼠,测量腹水量、右肺干质量、右肺湿质量,计算湿质量/干质量（W/D）比值,采用苏木精 伊红（HE）染色法对大鼠肺组织病理症状进行Holfbauer评分,以全自动血气分析检测仪检测动脉血中氧分压（PaO2）、二氧化碳分压（PaCO2）、氧合指数（OI）,用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清肿瘤坏死因子 α（TNF α）、白介素 6（IL 6）水平,ROS检测试剂盒检测肺组织中ROS水平,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶 1（caspase 1）、凋亡相关的斑点样蛋白（ASC）表达。 结果: 与假手术组比较,模型组大鼠腹水量、W/D比值、Holfbauer评分、PaCO2、TNF α、IL 6、ROS水平、NLRP3、caspase 1、ASC蛋白表达显著升高（P＜0.05）,PaO2、OI显著降低（P＜0.05）;与模型组比较,各药物处理组大鼠腹水量、W/D、Holfbauer评分、PaCO2、TNF α、IL 6、ROS水平、NLRP3、caspase 1、ASC蛋白表达显著降低（P＜0.05）,PaO2、OI显著升高（P＜0.05）;与丹参提取物组及NAC组分别比较,丹参提取物+NAC组大鼠腹水量、W/D、Holfbauer评分、PaCO2、TNF α、IL 6、ROS水平、NLRP3、caspase 1、ASC蛋白表达均显著降低（P＜0.05）,PaO2、OI显著升高（P＜0.05）。结论: 丹参提取物可以保护急性胰腺炎肺损伤大鼠的肺组织,可能通过下调ROS-NLRP3炎症小体信号实现。     

右美托咪定对失血性休克大鼠肠黏膜的保护作用

摘 要 目的：观察右美托咪定预处理对失血性休克大鼠肠黏膜的保护作用及其可能机制。 方法: 32只SD大鼠随机分为4组：对照（Control）组、失血性休克（HS）组,右美托咪定低（Dex1,5 μg·kg-1）、高（Dex2,10 μg·kg-1）剂量组。Control组和HS组通过尾静脉在20 min内用微量泵注0.5 ml生理盐水,Dex1和Dex2组给予0.5 ml包含相应剂量右美托咪定稀释液。30 min之后,除Control组外,其余3组建立失血性休克大鼠模型。检测大鼠肠黏膜中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、钙离子（Ca2+）的含量、pH（pHi）及细胞凋亡率,并观察肠黏膜组织病理学改变。 结果: 与HS组比较, 右美托咪定各剂量预处理组均显著降低MDA、NO、Ca2+含量、细胞凋亡率及组织病理学评分,显著增加SOD含量和pHi（P<0.05）;但不同剂量组间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论: 右美托咪定预处理对缺血再灌注大鼠对肠黏膜具有保护作用,其潜在作用机制可能与改善肠黏膜的抗氧化功能有关。     

右美托咪定调控Nrf2/HO-1通路对H2O2诱导心肌细胞氧化应激损伤的保护作用

摘要：目的:探讨右美托咪定通过调控核因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素氧合酶-1（HO-1）通路对过氧化氢（H2O2）诱导的心肌细胞氧化应激损伤发挥保护作用。方法:体外培养H9c2心肌细胞,选择对数生长期细胞进行实验,分为对照组、模型组、右美托咪定低、中、高剂量组。对照组不进行处理;模型组加入终浓度为200μmol·L-1的H2O2;右美托咪定低、中、高剂量组分别加入终浓度为5,10,20μmol·L-1的右美托咪定,同时给予终浓度为200μmol·L-1的H2O2,继续培养24 h后,检测各组细胞存活率、凋亡率、细胞中抗氧化指标、一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、HO-1和Nrf2蛋白变化情况。结果:与对照组相比,模型组和右美托咪定各剂量组H9c2细胞存活率、谷胱甘肽（GSH）、NO、HO-1和Nrf2蛋白水平降低（P<0.05）,凋亡率、乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）、TNF-α和IL-6升高（P<0.05）;与模型组相比,右美托咪定各剂量组H9c2细胞存活率、GSH、NO、HO-1和Nrf2蛋白水平升高（P<0.05）,凋亡率、LDH、MDA、ROS、TNF-α和IL-6降低（P<0.05）,且右美托咪定各剂量组之间上述指标呈剂量依赖性（P <0.05）。结论:右美托咪定可能通过激活Nrf2/HO-1通路,减轻心肌细胞的氧化损伤,促进细胞增殖和抑制细胞凋亡,从而发挥心肌保护作用。     

基于Nrf 2/HO 1/NF-κB通路探讨栀黄止痛散汤对急性痛风性关节炎大鼠的保护作用

摘 要 目的：探究栀黄止痛散汤对痛风性关节炎（AGA）大鼠的保护作用以及对NF E2相关因子2（Nrf 2）/血红素氧合酶 1/（HO 1）/核转录因子κB（NF-κB）通路的影响。 方法: 采用随机数字表法将90只SD大鼠分为正常对照组、模型组（踝关节腔注射尿酸钠复制AGA大鼠）、栀黄止痛散汤低（2.5 g·kg-1）、中（5 g·kg-1）、高（10 g·kg-1）剂量组、阳性对照组（秋水仙碱 1 mg·kg-1）,每组15只。酶联免疫法（ELISA）检测关节液中白细胞介素 6(IL 6)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)、白细胞介素 1β(IL 1β)、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平,造模后对大鼠步态、关节炎症指数进行分级评定,于造模前以及造模后6,12,24,48 h采用容积测定法检测裸关节肿胀度;苏木精 伊红染色法（HE）观察踝关节组织形态学变化情况,实时荧光定量PCR（RT PCR）测定关节组织中Nrf 2、HO 1mRNA表达,免疫印迹法（WB）测定关节组织中Nrf 2、HO 1、P P65、P65、P IKBa、IKBa蛋白表达。 结果: 与正常对照组相比,模型组大鼠步态、关节炎症指数分级、6,12,24,48 h关节肿胀度、关节液中TNF α、IL 6、IL 1β、MDA水平、关节组织中P P65、P IKB蛋白表达显著升高,SOD水平及Nrf 2、HO 1 mRNA和蛋白表达显著降低（P＜0.05）。与模型组相比,栀黄止痛散汤组和阳性对照组大鼠步态、关节炎症指数分级、6,12,24,48 h关节肿胀度、关节液中TNF α、IL 6、IL 1β、MDA水平、关节组织中P P65、P IKB蛋白表达显著降低,SOD水平及Nrf 2、HO 1 mRNA和蛋白表达显著升高,且栀黄止痛散汤组具有剂量依赖性（P＜0.05）。结论: 栀黄止痛散汤能够降低AGA大鼠关节炎症反应,缓解关节肿胀,其可能通过激活Nrf 2/HO 1/NF-κB通路来实现。     

萝卜硫素对肾小管上皮细胞氧化应激及Nrf2/HO 1信号通路的影响

摘 要 目的：探讨萝卜硫素（SFN）对肾小管上皮细胞（HK-2）的氧化应激及核转录因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素加氧酶（HO）-1信号通路的影响。方法: 体外培养HK-2细胞,将细胞分为空白对照组、H2O2处理组、H2O2+10 μmol·K^-1 SFN组、H2O2+20 μmol·K^-1 SFN组和H2O2+40 μmol·K^-1 SFN组;测定HK-2细胞中丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、谷胱甘肽（GSH）的含量及超氧化物歧化酶（SOD）的活性;RT-PCR和Western Blot法分别检测Nrf2和HO-1 mRNA及蛋白表达水平。结果: 与空白对照组相比,H2O2处理组中MDA、NO含量明显升高,GSH水平和SOD酶活性显著降低（P<0.05）;经高、中、低3种浓度的萝卜硫素处理后MDA、NO含量显著降低,GSH水平显著升高,SOD酶活性也显著升高,Nrf2和HO 1mRNA及蛋白表达明显上调（P<0.05）。结论:萝卜硫素有抗HK 2细胞氧化应激损伤的作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。     

右美托咪定用于眼科玻璃体手术镇静效果观察

摘 要 目的：在麻醉深度指数（CSI）指导下,评价眼科玻璃体手术中右美托咪定镇静的有效性和安全性。方法：采用前瞻性随机双盲对照试验方法,60例择期行玻璃体手术患者随机分为右美托咪定组（D组,右美托咪定以0.25 μg·kg-1·h-1输注）和咪达唑仑组（M组,咪达唑仑以25 μg·kg-1·h-1输注）。患者入手术室后行常规麻醉监测和CSI监测,术中CSI靶目标值设定为＞80。术中根据CSI值调整药物输注速率。记录术中循环、呼吸参数,术后对患者行镇痛评分、记录不良反应、评估患者和手术医生满意度。结果：D组患者手术开始35~50 min和术毕心率均低于M组（P＜0.05）,疼痛评分显著低于M组（P＜0.05）;两组患者其他血流动力学和呼吸参数、手术满意度和药品不良反应发生率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论：右美托咪定在玻璃体手术中可降低心率,镇痛起效快,且不良反应小,适于该类手术镇静。     

右美托咪啶复合麻醉对硬膜外血肿清除术患者脑保护效应

摘 要 目的:观察右美托咪啶复合麻醉对颅内硬膜外血肿清除术对患者的脑保护效应。方法：硬膜外血肿手术患者60例随机分成两组,分别给予丙泊酚复合麻醉和右美托咪啶复合麻醉,比较两组患者手术前后的神经功能、血清学指标及药品不良反应发生情况。结果：观察组患者术后24 h格拉斯哥昏迷评分(GCS评分)明显高于对照组(P<0.05),术后24 h的血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）和内皮素（ET）水平均明显低于对照组(P<0.05);观察组患者药品不良反应发生率明显低于对照组（P<0.05）。结论：硬膜外血肿清除术患者采用右美托咪定复合麻醉,术后GCS评分与血清NSE、ET水平均明显优于采用丙泊酚复合麻醉的患者,且不良反应明显较少,提示右美托咪定复合麻醉对患者的脑保护效应更佳,且安全性高。     

CXCR4拮抗剂对三阴性乳腺癌MDA MB 231细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

摘 要 目的：探讨趋化因子基质细胞衍生因子 1受体（CXCR4）拮抗剂（AMD3100）对三阴性乳腺癌MDA MB 231细胞增殖和凋亡的影响及机制。 方法: 设MCF10A细胞组、三阴性乳腺癌MDA MB 231细胞组、氟尿嘧啶组(8.0 μg·ml-1)、CXCR4拮抗剂低、高剂量组(4.0,8.0 μg·ml-1),测定各组癌细胞的细胞活力、单克隆形成数目、细胞凋亡率、穿膜孔数,及三阴性乳腺癌MDA MB 231细胞基质细胞衍生因子1（SDF 1）、CXCR4、半胱氨酸蛋白酶 3（caspase 3）、半胱氨酸蛋白酶 6（caspase 6）、血管内皮生长因子（VEGF ）mRNA、蛋白水平。 结果: 与MCF10A细胞组比较,MDA MB 231细胞组吸光度（A）值、存活率水平、细胞克隆形成数目、穿膜数、SDF 1、CXCR4、VEGF mRNA及蛋白表达水平显著升高,细胞凋亡率、caspase 3、caspase 6 mRNA及蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。与MDA MB 231细胞组比较,氟尿嘧啶组、CXCR4拮抗剂低、高剂量组的A值、存活率水平、细胞克隆形成数目、穿膜数、SDF 1、CXCR4、VEGF mRNA及蛋白表达水平显著降低,细胞凋亡率、caspase 3、caspase 6 mRNA及蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。与氟尿嘧啶组比较,CXCR4拮抗剂低剂量组的A值、存活率水平、细胞克隆形成数目、穿膜数、SDF 1、CXCR4、VEGF mRNA及蛋白表达水平显著升高,细胞凋亡率、caspase 3、caspase 6 mRNA及蛋白表达水平显著降低（P<0.05）;CXCR4拮抗剂高剂量组差异无统计学意义（P>0.05）。 结论: AMD3100能抑制三阴性乳腺癌MDA MB 231细胞增殖、侵袭,诱导其凋亡;其机制与AMD3100能特异性阻断三阴性乳腺癌MDA MB 231细胞 SDF 1、CXCR4 mRNA及蛋白的表达水平,导致其SDF 1/CXCR4信号传导受阻有关。     

右美托咪定与丙泊酚联用于老年患者无痛胃镜麻醉的临床观察

摘 要 目的： 观察右美托咪定与丙泊酚联用在老年患者无痛胃镜麻醉中的效果及安全性。方法: 拟行无痛胃镜检查的老年患者70例随机分为观察组（35例）和对照组（35例）;观察组给予右美托咪定联合丙泊酚麻醉,对照组给予丙泊酚麻醉。比较两组患者的麻醉诱导时间、苏醒时间,患者不同时点的生命体征,术中并发症、药品不良反应等指标。结果: 观察组麻醉诱导时间、苏醒时间均短于对照组（P<0.01）。两组患者平均动脉压（MAP）在T2、T3、T4阶段均明显低于T1阶段（P<0.05或P<0.01）;对照组的HR在T3阶段、R在T2阶段均低于T1阶段（P<0.05）;观察组的RR在T2阶段明显低于T1阶段（P<0.05）;观察组MAP在T2、T3阶段明显高于对照组（P<0.01）,在T4阶段低于对照组（P<0.05）;观察组的HR在T3阶段明显高于对照组（P<0.05）。观察组患者术中并发症显著低于对照组（P<0.05）。结论:右美托咪定联合丙泊酚的麻醉效果与安全性均高于单用丙泊酚,值得临床推广应用。     

基于IKK2/NF-κB信号通路探讨虫草素对大鼠创伤性脑损伤后神经元的保护作用

摘 要 目的：基于IκB激酶2/核因子κB（IKK2/NF-κB）信号通路探讨虫草素对大鼠创伤性脑损伤后神经元的保护作用。 方法: 将120只SD大鼠分为6组：正常对照组、模型组、阳性对照组（盐酸纳美芬,20.0 mg·kg-1）、虫草素低、中、高剂量组（20.0,40.0,80.0 mg·kg-1）,每组20只。除正常对照组外,其余各组建立大鼠创伤性脑损伤模型,盐酸纳美芬组及虫草素各剂量组灌胃给予相应药物,1次/d,持续1周,正常对照组及模型组给与等体积生理盐水。实验结束后,测定大鼠认知功能,制作海马病理切片,测定海马组织IKK2、NF-κB mRNA及蛋白水平,测定白细胞介素 4（IL 4）、白细胞介素 6（IL 6）、肿瘤坏死因子 α（TNF α）水平。 结果: 与正常对照组比较,模型组逃避潜伏期、IKK2、NF-κB mRNA及蛋白表达水平、IL 4、IL 6、TNF α水平显著升高（P<0.05）,经过原平台位置的次数、原平台象限停留的时间显著降低（P<0.05）;正常对照组海马区神经元细胞完整,结构正常,染色清晰,核呈卵圆形位于中央;模型组海马区可见大量坏死神经元,且细胞脱失现象明显,细胞核固缩;虫草素低、中剂量组坏死神经元细胞减少,但神经元疏松紊乱,细胞核固缩,脱失现象明显;盐酸纳美芬组、虫草素高剂量组海马区见少量坏死神经元细胞,且神经元细胞结构较为完整,神经元细胞核呈卵圆形位于中央,分布均匀。与模型组比较,盐酸纳美芬组、虫草素各剂量组逃避潜伏期、IKK2、NF-κB mRNA及蛋白表达水平、IL 4、IL 6、TNF α水平显著降低（P<0.05）,经过原平台位置的次数、原平台象限停留的时间显著升高（P<0.05）,且虫草素各剂量组呈明显的剂量 效应关系（P<0.05）。虫草素低、中剂量各检测指标与盐酸纳美芬组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论: 虫草素能减轻大鼠创伤性脑损伤后海马神经元的损伤,其机制可能与虫草素可通过抑制IKK2、NF-κB mRNA及蛋白的表达进而抑制炎性因子IL 4、IL 6、TNF α的表达有关。     

Efficacy of gut lavage,hemodialysis, and hemoperfusion in the therapy of paraquat or diquat intoxication

Clinical and in vitro investigations were carried out to test the efficacy of gut lavage, hemodialysis, and hemoperfusion in the treatment of poisoning with paraquat or diquat. In a patient suffering from diquat intoxication 130 times more diquat was removed by gut lavage 30 h after ingestion than was removed by complete aspiration of the gastric contents.Determination of in vitro clearances for paraquat and diquat by hemodialysis showed that, at serum concentrations of 1–2 ppm, such as are frequently encountered in poisoning in man, toxicologically relevant quantities of herbicide cannot be removed from the body. At a concentration of 20 ppm, on the other hand, hemodialysis proved to be effective, the clearance being 70 ml/min at a blood flow rate of 100 ml/min. The efficacy of hemoperfusion with coated activated charcoal was on the whole better. Especially at concentrations around 1–2 ppm, the clearance values for hemoperfusion were some 5–7 times higher than those for hemodialysis.In a patient suffering from paraquat poisoning, both hemodialysis as well as hemoperfusion were carried out. The in vitro results could be confirmed: At serum concentrations of paraquat less than 1 ppm no clearance could be obtained by hemodialysis while by hemoperfusion with activated charcoal quite high clearance values were measured and the serum level dropped down to zero.

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Zusammenfassung Klinische Untersuchungen und Laboratoriumsversuche wurden durchgeführt, um die Wirksamkeit von Darmspülung, Hämodialyse und Hämoperfusion bei Paraquat- und Deiquat-Vergiftungen zu prüfen.Bei einem Patienten wurde 30 Std nach Deiquat-Aufnahme durch Darmspülung 130mal mehr Deiquat entfernt als durch vollständige Aspiration des Mageninhaltes. In vitro-Versuche ergaben, daß bei Blutserumkonzentrationen von 1–2 ppm, die bei Vergiftungen oft gemessen werden, durch Hämodialyse keine toxikologisch relevanten Paraquat- oder Deiquat-Mengen entfernt werden können. Dagegen erwies sich die Hämodialyse bei 20 ppm und einer Blutumlaufgeschwindigkeit von 100 ml/min mit einer Clearance von 70 ml/min als wirksam. Die Hämoperfusion mit beschicheter Aktivkohle war in diesen Versuchen aber eindeutig überlegen, denn insbesondere bei Konzentrationen um 1–2 ppm waren die Clearance-Werte 5–7mal höher als bei der Hämodialyse.Die in vitro-Ergebnisse wurden bei einem Patienten mit einer Paraquat-Vergiftung bestätigt: Bei Konzentrationen unter 1 ppm war die Hämodialyse wirkungslos, während durch Hämoperfusion relativ hohe Clearance-Werte erreicht wurden, so daß der Serumspiegel rasch unter die Nachweisgrenze abfiel.

     

In vitro studies on sterically stabilized liposomes (SL) as enzyme carriers in organophosphorus (OP) antagonism

This study describes a new approach for organophosphorous (OP) antidotal treatment by encapsulating an OP hydrolyzing enzyme, OPA anhydrolase (OPAA), within sterically stabilized liposomes. The recombinant OPAA enzyme was derived from Alteromonas strain JD6. It has broad substrate specificity to a wide range of OP compounds: DFP and the nerve agents, soman and sarin. Liposomes encapsulating OPAA (SL)* were made by mechanical dispersion method. Hydrolysis of DFP by (SL)* was measured by following an increase of fluoride ion concentration using a fluoride ion selective electrode. OPAA entrapped in the carrier liposomes rapidly hydrolyze DFP, with the rate of DFP hydrolysis directly proportional to the amount of (SL)* added to the solution. Liposomal carriers containing no enzyme did not hydrolyze DFP. The reaction was linear and the rate of hydrolysis was first order in the substrate. This enzyme carrier system serves as a biodegradable protective environment for the recombinant OP-metabolizing enzyme, OPAA, resulting in prolongation of enzymatic concentration in the body. These studies suggest that the protection of OP intoxication can be strikingly enhanced by adding OPAA encapsulated within (SL)* to pralidoxime and atropine.     

Steroidal sapogenin contents in some domestic plants

In order to find out the values of the steroid resources for the future use. the compositions and contents of steroidal sapogenins from 13 domestic plants have been investigated. As a result,Dioscorea nipponica, D. quinqueloba andSmilax china were found to have large amount of diosgenin. And pennogenin inTrillium kamtschaticum andParis verticillata, yuccagenin inAllium fistulosum, hecogenin inAgave americana and neochlorogenin inSolanum nigum were appeared to be major steroidal sapogenins.     

Synthesis,Cytotoxicity and Antileishmanial Activity of Some N-(2-(indol-3-yl)ethyl)-7-chloroquinolin-4-amines

We report herein the condensation of 4,7-dichloroquinoline (1) with tryptamine (2) and D-tryptophan methyl ester (3) . Hydrolysis of the methyl ester adduct (5) yielded the free acid (6) . The compounds were evaluated in vitro for activity against four different species of Leishmania promastigote forms and for cytotoxic activity against Kb and Vero cells. Compound (5) showed good activity against the Leishmania species tested, while all three compounds displayed moderate activity in both Kb and Vero cells.     

Aquatic Insects and Trace Metals: Bioavailability,Bioaccumulation, and Toxicity

Abstract

The uptake of metals from food and water sources by insects is thought to be additive. For a given metal, the proportions taken up from water and food will depend both on the bioavailable concentration of the metal associated with each source and the mechanism and rate by which the metal enters the insect. Attempts to correlate insect trace metal concentrations with the trophic level of insects should be made with a knowledge of the feeding relationships of the individual taxa concerned. Pathways for the uptake of essential metals, such as copper and zinc, exist at the cellular level, and other nonessential metals, such as cadmium, also appear to enter via these routes. Within cells, trace metals can be bound to proteins or stored in granules. The internal distribution of metals among body tissues is very heterogeneous, and distribution patterns tend to be both metal and taxon specific. Trace metals associated with insects can be both bound on the surface of their chitinous exoskeleton and incorporated into body tissues. The quantities of trace meals accumulated by an individual reflect the net balance between the rate of metal influx from both dissolved and particulate sources and the rate of metal efflux from the organism. The toxicity of metals has been demonstrated at all levels of biological organization: cell, tissue, individual, population, and community. Much of the literature pertaining to the toxic effects of metals on aquatic insects is based on laboratory observations and, as such, it is difficult to extrapolate the data to insects in nature. The few experimental studies in nature suggest that trace metal contaminants can affect both the distribution and the abundance of aquatic insects. Insects have a largely unexploited potential as biomonitors of metal contamination in nature. A better understanding of the physico-chemical and biological mechanisms mediating trace metal bioavailability and exchange will facilitate the development of general predictive models relating trace metal concentrations in insects to those in their environment. Such models will facilitate the use of insects as contaminant biomonitors.