止消通脉宁对糖尿病大鼠肾组织糖化终产物受体mRNA表达的调节

观察止消通脉宁对糖尿病大鼠肾组织糖化终产物受体 (RAGE)mRNA表达的影响。以链脲佐菌素 (STZ)诱导的糖尿病大鼠为模型 ,采用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR) ,检测止消通脉宁治疗 12周糖尿病大鼠肾组织RAGEmRNA水平。结果显示糖尿病大鼠肾皮质糖化终产物(AGEs)含量、RAGEmRNA表达均高于正常大鼠 (P <0 0 1) ,止消通脉宁可降低糖尿病大鼠肾皮质AGEs含量 ,下调肾皮质RAGEmRNA过度表达 (P <0 0 1)。说明止消通脉宁可调节糖尿病大鼠肾组织RAGEmRNA的异常表达     

益气养阴活血法对糖尿病肾病大鼠肾皮质AGEs及其受体的影响

目的观察益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠肾皮质糖基化终产物(AGEs)及其受体(RAGE)mRNA表达的影响,探讨其治疗糖尿病肾病的作用机制。方法用链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病肾病大鼠模型,模型大鼠随机分为正常组、模型组、贝那普利组、益气养阴活血方组(简称中药组),并用相应的药物干预,给药8周后检测各组大鼠肾皮质中AGEs的含量,用免疫组化法检测肾皮质中AGEs的蛋白表达,用RT-PCR的方法检测肾皮质RAGEmRNA的表达。结果糖尿病肾病大鼠肾皮质AGEs含量明显增加,RAGEmRNA出现过度表达。经中药治疗8周后肾皮质AGEs含量明显减少,由(513.26±97.2)AUF/mg降为(417.35±89.9)AUF/mg;RAGEmRNA表达明显下调,由(1.51±0.01)降为(0.62±0.04),P0.01。结论益气养阴活血方能够减少AGEs在肾皮质的积累,下调糖尿病肾病大鼠肾皮质RAGEmRNA的过度表达。     

玉竹乙醇提取物和分离部位对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的探讨玉竹乙醇提取物和分离部位对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法单次ip链脲佐菌素(STZ)60mg/kg建立实验性糖尿病大鼠模型,分别ig给予玉竹乙醇提取物和三氯甲烷、正丁醇分离部位。给药80d后测定血清肌酐(Cr)、尿素(Ur)、糖化血红蛋白(GHb)、肾皮质蛋白质非酶糖基化终末产物(AGEs)、尿白蛋白(UAL)排泄率,并观察肾组织病理学改变。结果玉竹乙醇提取物和三氯甲烷分离部位降低糖尿病大鼠血中GHb水平和UAL排泄率,抑制肾皮质AGEs的形成,同时改善肾脏病理改变;正丁醇分离部位降低UAL排泄率。结论玉竹乙醇提取物和三氯甲烷分离部位对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制可能与抑制AGEs形成有关。     

补脾肾活血中药对糖尿病大鼠肾皮质糖基化终产物受体mRNA表达的影响

目的观察补脾肾活血中药对糖尿病大鼠肾皮质糖基化终产物(AGEs)含量及其受体mRNA(RAGE mRNA)表达的影响,探讨补脾肾活血中药防治糖尿病肾病(DN)的机制.方法采用链脲佐菌素(STZ)左下腹腔内单次注射造成糖尿病大鼠模型,随机分糖尿病组、中药组及氨基胍组,另设正常对照组.用荧光光谱法测定肾皮质AGEs含量,用RT-PCR的方法检测肾皮质RAGEmRNA的表达.结果糖尿病组大鼠肾皮质AGEs含量明显增加,RAGE mRNA出现过度表达.中药组治疗12周后肾皮质AGEs含量明显减少,RAGE mRNA表达明显下调,与糖尿病组比较都有显著差异(P＜0.01).结论补脾肾活血中药能够通过减少AGEs在肾皮质的积累,下调糖尿病大鼠肾皮质RAGE mRNA的过度表达,从而防治糖尿病肾病.     

糖肾安对糖尿病大鼠糖基化产物形成和氧化应激的抑制作用

目的 :研究中草药复方糖肾安对糖基化产物形成和氧化应激的抑制作用。方法 :给链脲佐菌素诱发的糖尿病大鼠胃管灌服糖肾安 ( 6g· kg-1 ) 8周后 ,检查血清、肾脏糖基化产物及红细胞、肾脏抗氧化酶活性以及脂质过氧化物含量。结果 :与对照组大鼠比较 ,糖尿病大鼠血清果糖胺含量、肾脏 5 -羟甲基糠醛 ( 5 - HMF)释放量及肾组织糖基化终产物 ( AGEs)含量均明显升高 ,经糖肾安处理 8周后 ,这 3项指标均明显降低。糖尿病大鼠红细胞过氧化氢酶 ( CAT)活性、谷胱甘肽 ( GSH)含量以及肾组织超氧化物歧化酶 ( SOD)和 CAT活性均较对照组明显降低 ,糖肾安可使这些指标显著升高。糖肾安能明显降低糖尿病大鼠已升高的红细胞、肾组织和尿液丙二醛 ( MDA)含量。结论 :糖肾安对糖尿病大鼠肾脏糖基化产物形成和氧化应激有明显的抑制作用     

黄连解毒汤对体内外晚期糖基化终产物形成的影响

目的 探讨黄连解毒汤对体内外晚期糖基化终产物（AGEs）形成的影响。方法 链脲佐菌素（ip给药）建立糖尿病大鼠模型,以不同剂量（0.5、1.0 g/kg）黄连解毒汤ig给药90 d后,检测血糖、糖化血红蛋白,血浆和肾组织中的果糖胺和AGEs水平。将不同浓度的黄连解毒汤与葡萄糖和牛血清白蛋白孵育21 d,用荧光光度法测定AGEs的荧光值。结果 黄连解毒汤能明显降低糖尿病大鼠的血糖和糖化血红蛋白水平（P＜0.01）,抑制血浆和肾组织的果糖胺和AGEs的生成（P＜0.01）,并呈明显的剂量依赖性。黄连解毒汤对体外AGEs的生成也有明显的抑制作用,并有一定的剂量依赖性。结论 黄连解毒汤对体内外AGEs的生成均有明显的抑制作用,这可能是黄连解毒汤治疗糖尿病并发症的机制之一。     

糖基化终末产物对大鼠肾皮质基质金属蛋白酶-2活性的影响

目的:观察糖基化终末产物(AGEs)和氨基胍(AG)对大鼠肾皮质基质金属蛋白酶-2(MMP-2)活性的影响.方法:正常雄性Wistar大鼠23只,随机分为4组,AGE-修饰大鼠血清蛋白(AGE-RSP)组 (n=6)每日尾静脉注射AGE-RSP,AGEs+AG组(n=6)同时腹腔注射AG,天然血清组(n=6)注射天然大鼠血清蛋白,空白对照组(n=5)不施加处理,连续注射4周后,用ELISA法测定肾皮质AGEs含量,酶谱法检测肾皮质MMP-2活性.结果:与天然血清组及空白对照组比较,注射AGE-RSP的大鼠肾皮质AGEs含量明显增加,活性形式的MMP-2活性明显降低(P<0.05),而同时注射AG的大鼠MMP-2活性明显增加(P<0.05).结论:AGEs能降低大鼠肾皮质MMP-2活性,AG可抑制AGEs对MMP-2活性的影响,提示AGEs通过降低MMP-2活性减少肾小球细胞外基质(ECM)降解,可能是导致ECM积聚的原因之一.     

2型糖尿病患者与非糖尿病者糖化血浆白蛋白及糖化血红蛋白水平比较

糖化血红蛋白(GHb)是血中葡萄糖和红细胞的血红蛋白相结合的产物,它和血中葡萄糖的水平成正比关系。因红细胞转换率较慢,故在控制糖尿病后,GHb含量并不很快下降,约2个月后可降低至正常或接近正常。因此。GHb测定可反映近2～3个月内血糖总的水平。糖化血浆白蛋白与GHb测定意义相同,因白蛋白转换率较快,故其测定反映近2～3周内血糖总的水平。本研究的目的是观察糖尿病患者的平均糖化血浆白蛋白     

糖基化终末产物对大鼠肾皮质过氧物酶体增殖体激活受体-γ mRNA表达的影响

目的：观察糖基化终末产物（AGEs）对大鼠肾皮质过氧物酶体增殖体激活受体-γ（PPAR-γ）mRNA表达的影响。方法：雄性Wistar大鼠20只随机分为4组(每组5只)，AGEs组 (给予AGEs同时尾静脉注射AGE-修饰大鼠血清蛋白)，AGEs+AG组［给予AGEs同时腹腔注射氨基胍（AG)］，天然血清组(注射天然大鼠血清蛋白)和空白对照组（不施加处理的正常大鼠)。各组大鼠每日注射1次，连续注射6周，RT-PCR 检测PPAR-γ mRNA 表达水平。结果：各组大鼠肾皮质均有PPAR-γ表达；与天然血清组及空白对照组比较，AGEs组大鼠肾皮质PPAR-γ　mRNA表达明显降低 （P＜0.01）, 而同时注射AG的大鼠PPAR-γ mRNA表达水平无明显降低。结论：大鼠肾皮质表达PPAR-γ；AGEs能降低大鼠肾皮质PPAR-γmRNA的表达水平，提示AGEs可能通过对肾脏保护性因子PPAR-γ的影响参与糖尿病肾病的发病机制。     

糖尿病大鼠肾皮质糖基化终产物含量与纤溶酶原激活物抑制物-1表达的关系

目的:研究链脲佐菌素诱发的糖尿病(DM)大鼠肾皮质糖基化终产物(AGEs)含量与纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达的关系及牛磺酸的调节作用.方法:DM大鼠用牛磺酸处理14周后,分别用荧光法、生物化学法和Northern杂交检测肾皮质AGEs含量、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)活性、PAI-1活性和PAI-1 mRNA表达.结果:与对照大鼠相比,DM大鼠肾皮质AGEs含量、PAI-1活性和PAI-1 mRNA表达明显增加,而t-PA活性下降.AGEs含量与PAI-1生物活性及PAI-1 mRNA表达均呈正相关(P<0.01).DM大鼠给予牛磺酸处理后可改善上述参数的改变.结论:DM大鼠肾皮质AGEs含量增加能明显上调PAI-1基因表达,牛磺酸可抑制AGEs形成和PAI-1基因表达的上调.     

阿托伐他汀对大鼠糖基化终末产物水平的影响

目的观察阿托伐他汀对大鼠糖基化终末产物（advallcedglyced glycation end-products,AGEs）水平的影响。方法40只雄性SD大鼠随机分为对照组、高脂组（喂予高脂饲料）、AGEs．BSA组（腹腔注射AGEs-BSA并喂予高脂饲料）和AGEs-BSA＋他汀组（腹腔注射AGEs-BSA,同时阿托伐他汀灌胃并予高脂饲料）,每组10只;分别在12、24周,测定大鼠血糖和血清AGEs、胆固醇、丙二醛（maleicdialdehyde,MDA）水平。结果12、24周时,AGEs-BSA组的血清AGEs水平较其他组显著升高,而阿托伐他汀能不依赖降脂效应地降低AGEs水平（P〈0．05）。结论阿托伐他汀能够降低血清AGEs水平。     

金钗石斛水提物对糖尿病大鼠肾组织非酶糖基化及氧化的影响

目的 观察金钗石斛(Dendrobium nobil Lindl, DNL)水提物对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾组织非酶糖基化和氧化应激的影响,探讨DNL对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法 采用链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导DM大鼠模型,分为正常对照组(N组),糖尿病对照组(DM组),金钗石斛低(DNLL)、中(DNLM)、高(DNLH)剂量组和氨基胍(aminoguanidine, AG)对照组(AG组),给药12周。分别检测血糖、血尿素、肌酐、糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs)、尿肌酐、24h尿白蛋白、血清及肾组织AGEs、肾组织总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。透射电镜观察肾组织超微结构变化。结果 DM组大鼠血糖、血尿素、24h尿白蛋白、血清及肾组织AGEs、肾组织MDA含量显著高于N组(P＜0.05);肌酐清除率、肾组织总SOD活性显著低于N组(P＜0.05);DM组大鼠系膜扩张明显异常,基底膜明显增厚。DNL明显降低DM大鼠血糖、血尿素、24h尿白蛋白、血清及肾组织AGEs、肾组织MDA含量(P＜0.05),明显增加肌酐清除率(P＜0.05)、增强肾组织总SOD活性(P＜0.05)、减轻肾系膜的扩张和基底膜的增厚。结论 DNL能降低血糖、抑制AGEs的形成、抑制氧化应激的发生,从而阻止或延缓糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)的发生发展。     

小檗碱降低代谢综合征-高血压心室重构大鼠血糖血脂作用

目的观察小檗碱（berberine,Ber）和卡托普利（captopril,Cap）对高脂-高盐-高果糖诱导代谢综合征（metabolic symptom,MetS）-高血压（MetS-H）心室重构大鼠胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）、血压、血糖和血脂的影响。方法 Sprague-Dawley大鼠,♀♂各半,除空白对照组食用标准饲料和饮用蒸馏水外,其余造模动物随机喂饲富含高盐（4%）、高脂肪（25%）和高蔗糖（10%）饲料,并交替饮用5%蔗糖、1%食盐水与6%果糖水造模8周,当造模动物出现高血压,糖耐量减退,即建立MetS-H病理模型。然后将大鼠随机分为模型对照、Cap 25mg/kg以及Ber 300mg/kg和150mg/kg两个剂量组;分别灌胃给药或蒸馏水,每天1次共4周,测定大鼠血压及血清胰岛素（Fins）、血糖（FSG）、糖化血清蛋白（GSP）和糖化血红蛋白（GHb）以及血脂成分[包括总胆固醇（TC）、三酰甘油酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）],并计算胰岛素敏感指数（ISI）;光学显微镜下观察左心室心肌组织及血管的病理学改变。结果 MetS-H大鼠血压升高,TC、TG、LDL-C、FSG和Fins含量升高,HDL-C下降,ISI减弱,与正常对照组比较,差异有显著性（P〈0.05或P〈0.01）。Ber 300mg和150mg/kg以及Cap25mg/kg处理MetS-H大鼠后,降低MetS-H大鼠血压以及FSG、GHb、TC、TG、LDL-C含量,纠正高胰岛素血症,增强ISI,提高HDL-C含量,差异有显著性（P〈0.05或P〈0.01）,各组药物均能不同程度地改善左心室组织和血管的病理改变,但只有Ber 300mg/kg降低GSP含量（P〈0.01）。结论 Ber和Cap对抗MetS-H大鼠IR、增强胰岛素敏感性、纠正高胰岛素血症,改善血糖-脂代谢紊乱,抑制糖基化反应,降低血压,以及不同程度地改善左心室组织和血管的病理改变,Ber可能参与拮抗心室重构的部分作用机制。     

PPAR-γ激活减轻AGEs对大鼠肾皮质MMP-2活性的影响

目的 :观察过氧化物酶体增殖体激活受体 - γ( PPAR- γ)激活对糖基化终产物 ( AGEs)引起的大鼠肾皮质基质金属蛋白酶 - 2 ( MMP- 2 )活性降低的影响。方法 :每日给正常大鼠尾静脉注射AGE-修饰大鼠血清蛋白 ( AGEs组 ) ,其中部分大鼠同时灌胃给予 PPAR- γ激活剂罗格列酮 ( AGEs+ RSG组 ) ,注射天然大鼠血清蛋白 (天然血清组 )和不施加处理的正常大鼠 (空白对照组 )作为对照 ,6周后处死动物 ,检测大鼠肾功能 ,酶谱法分析肾皮质 MMP- 2活性。结果 :与天然血清组及空白对照组比较 ,注射 AGE-修饰大鼠血清蛋白的大鼠尿蛋白含量明显增加 ( P<0 .0 5 ) ,活性形式的MMP- 2活性明显降低 ( P<0 .0 5 ) ,而同时给予罗格列酮的大鼠尿蛋白含量明显降低 ( P<0 .0 5 ) ,MMP- 2活性明显增加 ( P<0 .0 5 )。结论 :PPAR- γ激活可以改善 AGEs引起的肾功能变化 ,减轻AGEs对大鼠肾皮质 MMP- 2活性的抑制 ,提示 PPAR- γ激活可以增加肾小球细胞外基质降解     

Composition of Ophiopogon Polysaccharide, Notoginseng Total Saponins and Rhizoma Coptidis Alkaloids Inhibits Myocardial Apoptosis in Diabetic Atherosclerosis Rabbits

Objective: To investigate the effects of Composition of Ophiopogon polysaccharide, Notoginseng total saponins and Rhizoma Coptidis alkaloids (CONR) on myocardial apoptosis of diabetic atherosclerosis (DA) rabbits Methods: Sixty male New Zealand white rabbits were randomly divided into 6 groups [control group, model group, CONR high-dose group (450 mg/kg), CONR medium-dose group (150 mg/kg), CONR low-dose group (50 mg/kg), and simvastatin group] by using a completely random method, 10 in each group. DA model was established by intravenously injected alloxan combined with high-fat diet and abdominal aortic balloon injury. After mediation for 10 weeks, fasting blood glucose (FBG), glycosylated hemoglobin (GHB), glycosylated serum protein (GSP), fructoseamine (FRA), aldose reductase (AR), advanced glycation end products (AGEs) in serum were measured by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) method; the expression of receptor of AGEs (RAGE) in myocardial tissue were observed by immunohistochemical method; and p-Jun N-terminal kinase (p-JNK), caspase-3, B-cell lymphoma-2 (bcl-2) protein expression in myocardial tissue were measured by Western blotting. The myocardial apoptosis was detected by TdT-mediated dUTPnick-end labeling (TUNEL)method, and apoptosis index (AI) was calculated. Results: Compared with the control group, serum FBG, GHB, GSP, FRA, AR, AGEs and the expression of myocardium RAGE, p-JNK, caspase-3 proteins, as well as apoptosis index (AI) were significantly increased and bcl-2 protein was significantly decreased in the model group (P<0.01). Compared with the model group, the levels of serum FBG, GHB, GSP, FRA and AR showed a significant decline in CONR high- and medium-dose groups (P<0.01). FBG and GHB showed a significant decline in CONR low-dose group (P<0.01). Compared with the model group, the expression of serum AGEs and myocardium RAGE, p-JNK and caspase-3 protein as well as AI were significantly decreased and bcl-2 protein was significantly up-regulated in all treatment groups (P<0.01); high-dose CONR had the most significant effect on abovementioned indices compared with other treatment groups (P<0.01). Middle-dose CONR had better effect on serum AGEs compared with the low-dose group (P<0.01); middle-dose CONR and simvastatin groups had better effect on the expression of caspase-3, bcl-2 protein, myocardium apoptosis compared with the CONR low-dose group (P<0.01). Conclusion: CONR may effectively inhibit myocardial apoptosis on DA rabbits by intervening AGEs-RAGE and JNK, caspase-3, and bcl-2 protein expressions.     

中药复方活血通对糖尿病大鼠肾组织晚期糖基化终产物影响的研究

目的观察中药复方活血通对糖尿病大鼠晚期糖基化终产物(AGEs)的影响,探讨中药复方活血通防治糖尿病慢性并发症的作用机制。方法采用链脲佐菌素糖尿病大鼠模型,随机分为预防组和治疗组,给予中药复方活血通灌胃,并以氨基胍作为对照,治疗12周,观察中药复方活血通对糖尿病大鼠血糖和肾组织AGEs的影响。结果中药复方活血通预防组和治疗组血糖、中药复方活血通预防组、治疗组和氨基胍组肾组织AGEs均较模型组为低(P<0.01);氨基胍组血糖高于中药复方活血通预防组(P<0.05),与模型组比较,差异也有显著性(P<0.05)。结论中药复方活血通可能通过降低血糖,抑制终末期糖基化终产物在肾皮质中的形成,延缓糖尿病慢性并发症的进一步发展。