葛根提取物诱导人肝癌细胞分化的研究

目的 :探讨葛根提取物对Bel-740 2人肝癌细胞的作用。方法 :实验组Bel-740 2人肝癌细胞用葛根提取物处理 ,对照组用培养液处理 ,观察并对照两组AFP ,γ -GT ,ALD ,TAT ,OCT ,ALP的分泌量。结果 :治疗组AFP分泌量、γ -GT和ALD活力明显低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,而OCT ,TAT和ALP的活力则明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,差异均具有显著性。结论 :葛根提取物能有效诱导Bel-740 2人肝癌细胞的分化。     

贞芪酪蛋白肽药物血清诱导Bel-7402细胞分化的体外实验研究

目的:探讨贞芪酪蛋白复合肽对Bel-7402人肝癌细胞分化的诱导作用,及对其端粒酶活性的影响。方法:贞芪酪蛋白复合肽给正常大鼠灌胃,采血制备药物血清。以正常鼠血清为阴性对照,维甲酸(RA)为阳性对照,将药物血清温育Bel-7402人肝癌细胞。噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖,图像分析系统测定细胞核质比,放射免疫法测定甲胎蛋白(AFP)含量,动态比色法测定γ-谷氨酰转肽酶(-γGT)和碱性磷酸酶(ALP)活性,多聚酶链反应—酶联免疫吸附法(PCR-ELISA法)检测细胞端粒酶活性。结果:贞芪酪蛋白复合肽药物血清可抑制人肝癌细胞的增殖,显著降低细胞核质比,抑制细胞分泌AFP,降低细胞-γGT活性,升高ALP活性,并有显著抑制人肝癌细胞端粒酶活性的作用。结论:贞芪酪蛋白复合肽具有诱导人肝癌细胞分化的作用,其主要机理可能是抑制了Bel-7402细胞端粒酶活性。     

正肝方药物血清诱导人肝癌细胞分化的体外实验研究

目的：探讨正肝方对Bel-7402人肝癌细胞分化的诱导作用,及对其端粒酶活性的影响。方法：正肝方水煎液灌喂正常大鼠,采血制备药物血清。以正常鼠血清为阴性对照,维甲酸(RA)为阳性对照,将药血清温育Bel-7402人肝癌细胞。噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖,图像分析系统测定细胞核质比,放射免疫法测定甲胎蛋白(AFP)含量,动态比色法测定γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)和碱性磷酸酶(ALP)活性,多聚酶链反应-酶联免疫吸附法(PCR—ELISA法)检测细胞端粒酶活性。结果：正肝方药物血清可抑制人肝癌细胞的增殖,显著降低细胞核质比,抑制细胞分泌AFP,降低细胞γ-GT活性,升高ALP活性,并有显著抑制人肝癌细胞端粒酶活性的作用。结论：正肝方具有诱导人肝癌细胞分化的作用,其主要机理可能是抑制了Bel-7402细胞端粒酶活性。     

黄芩甙对人肝癌细胞BEL-7402增殖、凋亡和分化的影响

目的：研究黄芩甙对人肝癌BEL-7402细胞系增殖、凋亡和分化的影响。方法：培养BEL-7402细胞,应用MTT实验和软琼脂克隆形成实验观察黄芩甙对肝癌细胞增殖的作用,流式细胞术测定细胞凋亡率。光镜、电子显微镜观察细胞形态、超微结构,酶促反应试剂盒检测细胞浆中ALP、γ-GT活性,放免法检测细胞AFP、白蛋白分泌量和细胞内cAMP含量。结果：黄芩甙能明显抑制肝癌细胞增殖、促进其凋亡。黄芩甙作用后肝癌细胞趋于成熟分化,γ-GT降低,ALP比活力明显升高,ALP耐热型同工酶即胎盘型ALP活性显著低于对照,AFP合成和分泌量显著性降低,AIb分泌显著升高,细胞内cAMP含量增加。结论：黄芩甙能抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡,诱导肝癌细胞分化,     

填精补元制剂对人肝癌细胞株HepG2的诱导分化作用实验研究

目的：研究填精补元制剂对人肝癌细胞株HepG2的诱导分化作用。方法：培养HepG2细胞，利用四唑盐比色法（MTT）检测HepG2细胞对该制剂的药物敏感性，观察细胞形态学改变，制作细胞生长曲线，并测AFP与ALb的含量及r-GT、ALP、TAT的活力。结果：该制剂（简称XY）能抑制细胞生长，降低AFP的合成与分泌量，抑制r-GT活性，促进ALb、ALP、TAT的分泌．结论：XY可以抑制HepG2细胞的增殖，有诱导HepG2细胞分化的作用。     

四藤方对Bel-7402细胞增殖和凋亡作用研究

目的:观察清热解毒中药-四藤方对肝癌细胞Bel-7402增殖和凋亡的影响。方法:不同浓度四藤方处理人肝癌细胞Bel-7402、人肝细胞HL-7702,WST-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Hoechst 33258染色检测细胞凋亡形态变化,Western Blot法检测半胱天冬酶-3(caspase-3)活化。结果:与对照组比较,四藤方对人肝细胞HL-7702增殖无明显影响;100～400μg.mL-1四藤方作用24 h可显著抑制肝癌Bel-7402细胞增殖,促使细胞Bel-7402凋亡,呈现细胞凋亡形态,并可活化Bel-7402细胞caspase-3。结论:四藤方可以抑制Bel-7402细胞增殖,促Bel-7402细胞凋亡,并可能与活化caspase-3相关。     

中药诱导肝癌细胞分化研究纂要

益气、温阳、活血化瘀与清热燥湿的单味中药及其有效成分可诱导肝癌细胞分化。补中益气与清热解毒中药复方也可诱导肝癌细胞分化，养阴、温阳等不同治法都有诱导肝癌细胞分化的作用。相互之间可能存在协同作用。中药可通过下列途径诱导肝癌细胞分化：细胞形态改变：细胞由原来的卵圆形为主转变为多边形、长梭形或树枝状；细胞核变小，核浆比例减少；细胞器成熟增多；细胞微绒毛减少。生化指标改变：AFP分泌量和γ—GT的活力下降，ALB分泌量、OCT、TAT的活力升高。细胞周期改变：人参总皂苷、苦参碱使肝癌细胞G1／G0期细胞数减少。S期细胞数增加；羟基喜树碱则使肿瘤细胞阻滞于G2／M期。信号传导变化：cAMP含量增加，cAMP／cGMP升高。基因表达改变：抑癌基因wp53、P27、P16、Rb表达增强，癌基因c—myc、c—ras、突变型P53表达降低。cyclinD1表达减弱。     

中医“发物”蟹肉对肝癌Bel-7402细胞增殖及凋亡因子Caspase-3的影响

目的探讨中医"发物"中蟹肉对肝癌Bel-7402细胞增殖以及凋亡相关因子Caspase-3的影响。方法培养肝癌Bel-7402细胞,用CCK-8测定两种肝癌细胞在蟹肉汤和猪肉汤、PBS对照组的作用下细胞增殖活性。用流式细胞仪PI染色测定各组对两种肝癌细胞增殖周期的影响,以及用Western Blotting检测肝癌细胞凋亡相关因子Caspase-3的表达情况。结果 CCK-8实验证实:三组间在低浓度梯度下(2,5,10,20,30μl)对肝癌Bel-7402细胞活性的干预没有统计学差异,(P0.05)。PBS与蟹肉汤在浓度25,35,40及45μl作用下所得的OD值具有统计学意义(P0.05)。蟹肉汤组内低浓度(2μl)与高浓度(25,30,35,40,45μl)下对肝癌Bel-7402细胞活性干预有统计学差异(P0.05)。流式细胞仪实验证实:相同浓度作用24h下,各组间对肝癌细胞的细胞增殖S期无明显的差异(P0.05)。而Western blotting证实,相同浓度下三组比较,蟹肉汤组Caspase-3表达较猪肉汤与PBS组有明显差异。结论中医"发物"蟹肉对肝癌细胞无增殖促进作用,一定浓度的蟹肉汤促进肝癌细胞凋亡。     

枸杞多糖对人肝癌细胞Bel-7402的抑制作用及凋亡的研究

目的 研究枸杞多糖诱导人肝癌细胞Bel-7402的凋亡作用及其作用机制.方法 体外培养的人肝癌细胞Bel-7402,细胞经不同剂量枸杞多糖(LBP)处理后,采用MTT法测定细胞的增殖情况,流式细胞仪分析LBP对Bel-7402细胞周期和凋亡的影响,用RT-PCR技术检测Bel-7402细胞SurvivinmRNA的表达.结果 LBP可明显抑制人肝癌细胞Bel-7402的生长,并能诱导Bel-7402细胞凋亡,凋亡率(%)分别为(6.20±0.62),(12.80±0.47)和(18.10±0.70),与对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01);各剂量药物处理组的肿瘤细胞Survivin mRNA表达水平均明显降低(P<0.01).结论 枸杞多糖可抑制Bel-7402细胞增殖,诱导细胞凋亡,该作用可能与下调细胞Survivin 表达有关.     

华蟾素对人肝癌细胞Bel-7402细胞增殖及周期的影响

目的:观察华蟾素注射液对人肝癌Bel-7402细胞增殖及周期的影响.方法:将不同浓度的华蟾素注射液作用于Bel-7402细胞,应用噻唑蓝还原法(MTT比色法)检测华蟾素注射液对Bel-7402细胞增殖的影响;应用流式细胞术(FCM)检测Bel-7402细胞周期分布.结果:华蟾素注射液可以抑制Bel-7402细胞增殖,其抑制作用与作用时间和剂量呈正相关,并可使细胞阻滞于G2/M期.结论:华蟾素注射液能够抑制人肝癌细胞Bel-7402的增殖,并可使细胞阻滞于G2/M期,诱导细胞凋亡.     

中药诱导肝癌细胞分化研究纂要

益气、温阳、活血化瘀与清热燥湿的单味中药及其有效成分可诱导肝癌细胞分化,补中益气与清热解毒中药复方也可诱导肝癌细胞分化,养阴、温阳等不同治法都有诱导肝癌细胞分化的作用,相互之间可能存在协同作用.中药可通过下列途径诱导肝癌细胞分化:细胞形态改变:细胞由原来的卵圆形为主转变为多边形、长梭形或树枝状;细胞核变小,核浆比例减少;细胞器成熟增多;细胞微绒毛减少.生化指标改变:AFP分泌量和γ-GT的活力下降,ALB分泌量、OCT、TAT的活力升高.细胞周期改变:人参总皂苷、苦参碱使肝癌细胞G1/G0期细胞数减少,S期细胞数增加;羟基喜树碱则使肿瘤细胞阻滞于G2/M期.信号传导变化:cAMP含量增加,cAMP/cGMP升高.基因表达改变:抑癌基因wp53、P27、P16、Rb表达增强,癌基因c-myc、c-ras、突变型P53表达降低,cyclinD1表达减弱.     

姜黄素/5-FU对肝癌细胞的生长抑制作用

目的研究姜黄素(CU)/5-氟尿嘧啶(5-FU)对肝癌细胞(SMMC-7721、Bel-7402)的生长抑制作用。方法MTT法用于检测CU和5-FU单用及联合应用对肝癌细胞的生长抑制作用。结果 CU和5-FU单用时能明显抑制肝癌SMMC-7721及Bel-7402细胞的增殖,并呈现浓度依赖性,两药单独作用于肝癌SMMC-7721细胞48 h的IC_(50)值分别为(89.06±11.85)μmol·L~(-1)和(21.90±1.54)μmol·L~(-1),作用于肝癌Bel-7402细胞48 h的IC_(50)值分别为(94.74±4.03)μmol·L~(-1)和(38.48±2.27)μmol·L~(-1)。当CU和5-FU联合应用比例为1∶1(mol∶mol)时,两药联合应用时对肝癌SMMC-7721和Bel-7402细胞呈协同抑制作用(CI1),作用48 h的IC_(50)值分别为(4.95±1.20)μmol·L~(-1)和(19.30±2.29)μmol·L~(-1)。结论 CU与5-FU联合应用对肝癌SMMC-7721及Bel-7402细胞的增殖具有协同抑制作用,并且明显优于单药。     

绞股蓝总皂苷对人肝癌细胞Bel-7402增殖与凋亡的影响

目的:探讨绞股蓝总皂苷(gypenosides,Gyp)对人肝癌细胞Bel-7402增殖与凋亡的影响.方法:采用MTT法检测Gyp对体外培养的人肝癌细胞Bel-7402的增殖抑制作用;单细胞凝胶电泳法检测Gyp对人肝癌细胞Bel-7402 DNA损伤的影响;RT-PCR技术从分子水平上检测Gyp对人肝癌细胞Bel-7402的诱导凋亡作用机制.结果:100 ～400 μg· mL-1的Gyp对人肝癌细胞Bel-7402增殖生长有抑制作用,Gyp(182 μg·mL-1)作用4,8,12,16,24 h后,单细胞凝胶电泳观测到DNA损伤,12h时DNA损伤最大,达到(81.15±14.23)％,且有时间依赖性;Gyp组细胞caspase-8大量表达,对照组细胞无表达.结论:Gyp能抑制人肝癌细胞Bel-7402增殖且促进其凋亡,其作用机制与DNA损伤以及caspase-8的大量表达有关.     

犀黄丸诱导人肝癌细胞凋亡及其机制的研究

观察犀黄丸含药血清诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用,并对其机制进行初步的探讨,目的:研究犀黄丸含药血清诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用,并对其机制进行初步探讨.方法:犀黄丸含药血清对肝癌细胞生长的影响,检测对肿瘤Bel-7402杀伤率.在用不同浓度犀黄丸含药血清作用Bel-7402细胞不同时间后,用TUNEL法检测凋亡,用SASB法检测细胞bcl-2、c-myc、p53蛋白表达.结果:犀黄丸含药血清能明显抑制Bel-7402细胞生长,其肿瘤细胞Bel-7402杀伤率最高达75%,与对照组比较有显著性差异(P＜0.01).TUNEL法显示,细胞凋亡率明显提高,与对照组比较有显著性差异;Bel-7402细胞的bcl-2、c-myc基因蛋白表达降低,而p53基因蛋白表达增强.     

姬松茸多糖抗肿瘤作用研究

目的:研究姬松茸多糖(ABP)对肝癌细胞生长的抑制作用。方法:采用MTT法检测ABP体外与肝癌细胞Bel-7402作用48小时的直接细胞毒作用、ABP与小鼠脾细胞共培养上清(ABP-SL-CM)体外与Bel-7402细胞作用48小时的抑制作用;用流式细胞仪分析诱导肿瘤细胞凋亡情况;腹腔注射给药观察对移植性H22小鼠腹水型肝癌模型的抑瘤率。结果:ABP体外无直接细胞毒作用;不同浓度的ABP-SL-CM体外对Bel-7402细胞生长均有抑制作用,其中低剂量组(ABP-SL-CM-L)作用最显著,抑制率为39.65%;诱导Bel-7402细胞凋亡率为21.68%,DNA直方图上可见到亚二倍体峰;体内实验对肿瘤的生长的抑瘤率为45.83%。结论:姬松茸多糖对肝癌细胞生长有一定的抑制作用,其作用机制不是直接的细胞毒作用,而是通过增强小鼠的细胞免疫功能诱导肿瘤细胞凋亡实现的。     

雷公藤甲素对GSDME依赖性肝癌细胞焦亡的影响

目的:探究雷公藤甲素对肝癌细胞Bel-7402焦亡的影响及其分子机制。方法:体外培养肝癌细胞Bel-7402,CCK-8检测不同浓度的雷公藤甲素(2.5、5.0、10.0μg/mL)对肝癌细胞活力影响;PI/DAPI染色观察细胞焦亡形态变化;ELISA试剂盒检测IL-1β和IL-18释放量;Western blotting检测Caspase-3、GSDME、IL-1β和IL-18表达;转染GSDME siRNA 24 h后PI/DAPI染色检测细胞焦亡形态变化。结果:CCK-8检测发现,随着雷公藤甲素浓度增加,Bel-7402细胞活力明显降低(P<0.01);给予雷公藤甲素(10.0μg/mL)能够明显促进细胞焦亡,升高细胞上清液中IL-1β和IL-18含量,促进Caspase-3、GSDME-N、IL-1β和IL-18表达(P<0.05或P<0.01);siGSDME能够明显抑制细胞焦亡形态变化,降低细胞焦亡数目。结论:雷公藤甲素能够促进GSDME依赖性细胞焦亡,抑制肝癌细胞增殖。     

麝黄消瘤汤诱导人肝癌细胞系(Bel-7402)凋亡的研究

目的:研究麝黄消瘤汤对人肝癌细胞系(Bel-7402)的诱导凋亡作用.方法:制备含药血清,孵化人肝癌细胞系(Bel-7402),用电子显微镜观察法、荧光显微镜观察法研究凋亡细胞超微结构,用流式细胞仪检测凋亡细胞DNA直方图及凋亡率.结果:电子显微镜及荧光显微镜下,麝黄消瘤汤含药血清诱导人肝癌细胞系(Bel-7402)出现凋亡征象,最大凋亡率为50.96%.流式细胞仪检测凋亡细胞DNA直方图上出现亚二倍体峰,细胞周期分布频率与对照组有显著区别(P≤0.05).结论:麝黄消瘤汤对人肝癌细胞系(Bel-7402)有显著的诱导凋亡作用.     

重楼皂苷Ⅰ激活IGFBP1信号通路抑制肝癌细胞生长和增殖的作用机制

目的:探讨中药单体重楼皂苷Ⅰ抑制肝癌细胞生长和增殖的分子作用机制.方法:采用MTT和EDU法检测肝癌Bel-7402细胞的生长和增殖情况;Western Blot法检测Bel-7402细胞中肿瘤相关特异蛋白1(Sp1)和胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)的表达水平;采用细胞瞬间转染技术将Sp1过表达质粒或IGF...     

四君子汤对肝癌细胞株Bel-7402生长抑制作用的研究

目的:探讨四君子汤对人肝癌细胞株Bel-7402的生长抑制作用,为临床上应用该药治疗恶性肿瘤提供实验依据.方法:以3种不同剂量的四君子汤药物分别作用于不同实验组培养中的人肝癌Bel-7402细胞株24小时,用基于酶标仪的MTT法检测活细胞中甲瓒形成所产生的光密度值,从而判断四君子汤药物对癌细胞生长的影响.结果:四君子汤对人肝癌细胞株Bel-74002的生长具有明显的抑制作用,而且这种抑制效应呈现浓度的依赖性.结论:四君子汤能抑制肝癌细胞株Bel-7402的生长,并在一定浓度范围内呈现出剂量效应.     

白花蛇舌草多糖对人宫颈癌Hela细胞和人肝癌Bel-7402细胞生长的影响

目的研究白花蛇舌草多糖对体外培养的人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞生长的影响。方法常规法体外培养人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞,设空白对照组、阳性对照组和供试药物组(大、中、小剂量),分别采用MTT法和流式细胞仪检测白花蛇舌草多糖对人宫颈癌Hela细胞和人肝癌Bel-7402细胞的生长抑制率和凋亡率;采用倒置显微镜观察细胞形态学变化。结果白花蛇舌草多糖可抑制人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞的生长,并促进其凋亡,其作用效果与其浓度正相关,与空白对照组相比具均有显著性差异(P﹤0.01)。结论本研究结果提示,白花蛇舌草多糖具有较好的抗肿瘤活性。