应用MRSA ID产色琼脂培养基等四种方法检测和鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的比较MRSAID产色琼脂培养基及其他3种方法检测和鉴定甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）。方法选择临床118株葡萄球菌用（118株葡萄球菌中金黄色葡萄球菌108株，凝固酶阴性葡萄球菌10株）细菌鉴定仪鉴定到种，用MRSAID琼脂筛选法、苯唑西林平板筛选法、头孢西丁纸片法比较MRSA的检测情况，同时检测金黄色葡萄球菌的mecA基因作为金标准，同时用大肠埃希菌ATCC25922，金黄色葡萄球菌ATCC25923，铜绿假单胞菌ATCC27853和粪肠球菌ATCC29212做干扰试验。结果金黄色葡萄球菌用PCR检测其meeA基因，共检测到80株阳性菌株；用MRSAID琼脂筛选法符合率为100％，苯唑西林平板筛选法符合率为97．5％，头孢西丁纸片法符合率为100％；有1株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）和1株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）对MRSAID琼脂的显色有干扰，出现了浅绿色的细小菌落。用标准菌株做对照均没有生长。结论MRSAID琼脂平板可以对MRSA进行主动快速监测。     

一种快速检测医务人员鼻前庭中MRSA 及MRCNS的方法评估

目的:评价一种快速检测医务人员鼻前庭中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的方法的临床应用价值.方法:对近期医院发生葡萄球菌感染较多科室(ICU、神经外科)的医务人员鼻前庭进行采样和培养后,同时用VITEK-32全自动微生物分析仪法、直接多重PCR检测法对其进行鉴定,并以常规细菌培养 + VITEK-32全自动微生物分析仪法检测结果为标准,评价直接多重PCR检测法的敏感性、特异性.结果:用仪器法从102名医务人员的鼻拭子中分离到金黄色葡萄球菌16株(MRSA14株,MSSA 2株),MRCNS 38株;直接多重PCR检测法共检测出金黄色葡萄球菌14株(MRSA 13株,MSSA 1株),MRCNS检出33株.结论:直接多重PCR法灵敏度较高、特异性强、简单快速,适用于直接快速检测医务人员鼻前庭中MRSA 和MRCNS,该方法对加强医务人员医院感染的预防与控制有重要的意义.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌产色培养基临床应用评估

目的通过头孢西丁纸片法、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）产色筛选平板法和聚合酶链反应（PCR）检测MRSA,评估MRSA产色筛选平板的敏感性和特异性。方法收集仁济医院2008年8月至9月临床分离的金黄色葡萄球菌68株,分别采用头孢西丁纸片法、MRSA产色筛选平板法和PCR检测MRSA,以PCR检测femA基因和mecA基因结果为金标准,比较MRSA产色筛选平板的敏感性和特异性。结果甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）除万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺外,对其他11种抗菌药物的敏感率明显高于MRSA。68株金黄色葡萄球菌中,头孢西丁纸片法筛选出50株MRSA,产色平板法筛选出51株MRSA,PCR检测到51株mecA基因阳性,MRSA产色筛选平板结果和mecA基因检测结果符合率为100%。结论MRSA产色筛选平板可用于临床快速检测MRSA。     

激光解析质谱联合CHROMagar显色培养技术鉴定环境表面MRSA的效果评价

摘要 目的 〖HT5"SS〗评价激光解析质谱联合CHROMagar MRSA显色培养基在鉴定环境表面耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的应用价值。方法 采用CHROMagar MRSA显色培养技术,对5家医院重症监护病房（ICU）环境表面现场采集的标本中MRSA进行培养鉴定。结果 从CHROMagar MRSA显色培养基上获得573株可疑菌落,经MALDI-TOF-MS鉴定确认MRSA菌株147株,检出率为25.7%。同时用常规PCR方法和头孢西丁药敏试验验证确认MRSA菌株分别为145株和140株,符合率分别为98.6%和95.2%。结论 MALDI-TOF-MS技术联合CHROMagar MRSA显色培养基可作为更快速、更准确的MRSA筛查方法,适用于医院感染的快速诊断与防控。     

实时荧光定量PCR在快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中的应用评估

目的评价实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)在快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的应用。方法采用头孢西丁纸片扩散法和mecA基因PCR检测法,将85株临床分离的金黄色葡萄球菌区分为MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),并采用实时荧光定量PCR对这些菌株进行检测,评价MRSA检测中实时荧光定量PCR与目前常规检测方法的一致性。结果根据头孢西丁纸片扩散法和mecA基因扩增结果进行分组,85株金黄色葡萄球菌中MRSA组菌株45株,MSSA组菌株40株;实时荧光定量PCR检测结果与上述结果完全一致,符合率为100%。结论实时荧光定量PCR检测MRSA的结果与常规方法一致性好,且具有操作简便、耗时短等特点。作为一种快速检测方法,实时荧光定量PCR能将金黄色葡萄球菌的鉴定和MRSA的筛选结合起来,对于指导临床用药及MRSA医院感染控制具有重要意义。     

金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

目的分析遵义地区金黄色葡萄球菌感染的耐药趋势，为临床合理使用抗菌药物提供病原学调查及实验室依据。方法收集2005年1月至2007年12月贵州航天医院住院患者送检标本中分离培养鉴定的金黄色葡萄球菌109株，经法国生物梅里埃公司API Staph进行细菌鉴定，按纸片琼脂扩散法药敏操作规程进行抗菌药物敏感试验。结果109株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）60株，甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）49株，其分离率分别为55．0％、45．0％；MRSA对青霉素、氨苄西林、氨苄西林／舒巴坦、红霉素、复方新诺明耐药率高，对利福平与呋喃妥因敏感率较高；MSSA对青霉素、氨苄西林、红霉素、复方新诺明具有较高耐药率，对庆大霉素、利福平、氨苄西林／舒巴坦、呋喃妥因的耐药率较低；MRSA和MSSA对万古霉素与替考拉宁均敏感。结论青霉素、氨苄西林、红霉素、复方新诺明对控制金黄色葡萄球菌感染已无经验使用价值，除万古霉素与替考拉宁外的其他抗菌药物可在药敏试验指导下使用。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性监测与预防对策

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）在临床的分离率及耐药情况，分析其耐药趋势。方法用Whonet 5．3软件对住院患者多种标本中分离的葡萄球菌进行统计分析。结果两年共分离葡萄球菌94株，其中MRSA44株（47％）、甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）30株（32％），万古霉素仍为目前对MRSA最敏感（耐药率为0％）和使用最多的药物，其他抗生素耐药情况不容忽视。结论认真做好微生物室内质控，及时准确地分离出MRSA，可为临床医生控制MRSA引起的耐药性传播提供依据。     

实时荧光定量聚合酶链反应快速检测MRSA的应用研究

目的研究实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床应用。方法收集2017年1月至2018年12月重庆市南川区人民医院患者体液标本分离培养的446例金黄色葡萄球菌,采用实时荧光定量PCR检测金黄色葡萄球菌nuc基因和mecA基因。结果 446例金黄色葡萄球菌均检出nuc基因,符合率为100.00%。经全自动细菌培养鉴定出的96例MRSA中均检出mecA基因,检出符合率为100.00%。在全自动细菌培养鉴定及药敏分析仪上检出的甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌中有2例检测到mecA基因,其检测正确率为97.96%(96/98)。结论实时荧光定量PCR检测MRSA耗时短,正确率高,用于临床快速鉴定MRSA有明显优势。     

应用产色培养基快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 应用ChromID MRSA产色培养基快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA).方法 将922份不同种类临床标本直接接种在ChromID MRSA产色培养基和常规血琼脂培养基,采用24、48 h两个孵育时间观察结果,血琼脂培养基疑似金黄色葡萄球菌的菌落用PC20复合板作鉴定和苯唑西林最低抑菌浓度测定(MIC),两者检出的MRSA用MRSA乳胶凝集实验确证,并进行比较.结果 产色培养基阳性率14.9%,常规血琼脂培养基阳性率13.9%,不同种类标本阳性率不同,两者对MRSA的阳性率差异无统计学意义(P>0.05),24 h产色培养基MRSA符合率100%,48 h符合率91.2%.结论 ChromID MRSA产色培养基检出MRSA比常规方法缩短24 h,可用于临床实验室快速、准确地检测MRSA.     

286株金黄色葡萄球菌临床分布及耐药性分析

目的：分析2013年住院及门诊患者送检微生物培养标本分离得到的金黄色葡萄球菌临床分布及耐药性情况。方法对2013年分离得到的金黄色葡萄球菌进行细菌培养鉴定及药敏试验,并对结果进行分析。结果共分离得到286株金黄色葡萄球菌,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率为46．85％。呼吸道标本中的金黄色葡萄球菌和MRSA检出率均为最高。金黄色葡萄球菌主要分布于ICU、神经外科、创伤骨科、呼吸内科等临床科室。金黄色葡萄球菌对青霉素和氨苄西林耐药率较高,多数抗菌药物对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（MSSA）与MRSA的耐药率存在差异。结论监测金黄色葡萄球菌耐药性,对临床合理选择抗菌药物十分重要。     

168株金黄色葡萄球菌的临床分布与耐药分析

目的 了解该院金黄色葡萄球菌的临床分布特点及耐药情况,指导临床合理用药,减少耐药菌株的产生.方法 对临床送检的合格标本进行细菌培养,采用VITEK-2 Compact全自动微生物分析系统进行鉴定和药物敏感试验.结果 从各类标本中分离出金黄色葡萄球菌168株,其中耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）59株,检出率为35.1%（59/168）,分离的金黄色葡萄球菌标本主要来源于分泌物51.2%（86/168）、痰液22.0%（37/168）、全血5.4%（9/168）、置管液5.4%（9/168）.MRSA分布的科室以神经科（30.5%）、普外泌尿科（22.0%）、骨科（15.2%）、心胸外科（8.5%）、呼吸科（8.5%）多见.对MRSA和非耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MSSA）耐药率为0的抗菌药物有万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁、奎努普汀/达福普汀、呋喃妥因,青霉素、复方磺胺甲噁唑对MRSA的耐药率分别为100%、6.8%,对MSSA的耐药率分别为91.7%、12.8%,其余9种抗菌药物对MRSA的耐药率均高于MSSA.结论 加强耐药菌株的监测,规范临床用药,有利于控制感染.     

金黄色葡萄球菌对红霉素和克林霉素诱导耐药分析

目的探讨金黄色葡萄球菌临床分离株对红霉素和克林霉素的耐药性,检测红霉素对克林霉素诱导耐药的发生率。方法采用美国临床实验室标准化研究所（CLSI）推荐的纸片扩散法,检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）以及金黄色葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,并以双纸片法（即D试验）分析红霉素对克林霉素诱导耐药表型。结果金黄色葡萄球菌中MRSA占77.2%。金黄色葡萄球菌对红霉素及克林霉素同时耐药菌株占62.4%,红霉素耐药而克林霉素敏感菌株占21.5%。红霉素耐药而克林霉素敏感的MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）中D试验阳性分别为72.0%和57.1%。D试验阳性占红霉素耐药而克林霉素敏感金黄色葡萄球菌的68.8%。结论临床微生物实验室应常规开展D试验,检测金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素的诱导耐药性,以指导临床医师合理选用大环内酯类、林可酰胺类抗菌药物。     

金黄色葡萄球菌的药敏表型和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型

目的研究从临床标本中分离的金黄色葡萄球菌（SA）的耐药性、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的发生率及其葡萄球菌盒式染体色mec（SCCmec）基因分型。方法采用纸片琼脂扩散法进行SA耐药性检测及MRSA测定,应用多重聚合酶链反应（PCR）进行SCCmec各基因型及PV杀白细胞素（PVL）基因型的检测。结果 102株SA中检出39株MRSA,检出率为38.2%（39/102）。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）对克林霉素、复方磺胺甲口恶唑、四环素3种抗菌药物耐药率较高,分别为39.7%、31.7%、22.2%;对庆大霉素及喹诺酮类耐药率较低,为6.3%~14.3%。而MRSA对克林霉素、β-内酰胺类抗菌药物100%耐药,对其他药物表现为多重耐药。未检出万古霉素耐药菌株。MRSA菌株的SCCmec基因型以SCCmecⅢ型为主,占71.2%,SCCmecⅣa占10.3%,未检测出PVL基因。结论临床分离的SA中,MRSA耐药率较MSSA高且表现为多重耐药,其SCCmec基因分型主要表现为SCCmecⅢ型,其次是SCCmecⅣa。     

金黄色葡萄球菌临床分离株spa分型和耐药特征研究

目的研究临床分离金葡菌的耐药性和分子特征。方法对2011年511月在成都某医院分离的56株金葡菌进行抗菌药物敏感性检测,检测菌株携带mecA基因和pvl基因情况,并进行spa基因分型分析。结果56株金葡菌中,共检出耐甲氧两林金葡菌（MRSA）21株（37．5％）,其中mecA基因阳性20株（95．2％）;甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）35株（62．5％）。与MSSA相比,MRSA对利福平、左氧氟沙星、莫西沙星、环丙沙星、庆大霉素和四环素的敏感率显著降低（P〈0．05）,MRSA对万古霉素、利奈唑胺、替加环素、喹奴普丁达福普汀和呋喃妥因全部敏感。MRSA分为6个spa型别,以t030（66．7％）为主,MRSA～t030、MRSA—t002具有突出的多药耐药特征。MSSA共分为18个spa型别,以t189、t377和t034列前3位,分别占14．3％、／4．3％和1I．4％,并在脓液标本榆出I株新spa基因型new1。检出5株杀白细胞毒素（PVL）阳性菌株,其中3株为MSSA—t189。结论t030是医院MRSA临床分离株中的spa优势型别,具有突出的多药耐药特征,在医院内广泛传播。MSSA遗传多样性高,以t189、t377和t034列前3位。     

132株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性变迁分析

目的：了解本院临床标本中分离出的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的科室分布及耐药性变迁情况。方法：收集本院2009年1月-2011年1月共3年间临床分离到的MRSA,统计分析MRSA的分布及药敏试验结果。结果：3年内共分离出金黄色葡萄球菌（SA）249株,其中MRSA132株。分离出SA的标本中以呼吸道标本为主,占51．5％,其次为分泌物和脓液。检出率较高的科室是外科,占36．9％,其次为呼吸内科和老年科。除万古霉素、利福平、复方新诺明及呋喃妥因外,MRSA对其余的抗茵药物的耐药率均高于MSSA（对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌）,耐药率均保持在40％以上,而且耐药率呈逐年上升趋势。结论：MRSA对大部分抗菌药物仍维持较高的耐药率,应定期监测临床标本中分离的MRSA耐药率,合理使用抗茵药物,延缓临床株耐药性的增长,控制医院感染的发生及暴发流行。     

靶向mecA基因纳米胶体金探针快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的建立

目的 用以纳米胶体金颗粒为载体的DNA探针杂交技术,建立快速、简便和特异的检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法.方法 以直径60 nm的胶体金纳米颗粒与巯基修饰的2条mecA基因特异性寡核苷酸探针共价结合,制备成纳米胶体金探针.直接提取金黄色葡萄球菌的基因组DNA,经超声破碎后与纳米胶体金探针进行液相杂交.杂交产物经高速离心后再用反向色谱反应盘检测有无胶体金颗粒沉淀产生.用该法和PCR扩增试验同时检测临床分离株的mecA基因,以PCR法为金标准,评价纳米胶体金探针液相杂交法的准确性.结果 在95株临床试验菌株中PCR法共检出71株MRSA,24株MSSA.在71株MRSA中,纳米胶体金探针杂交试验有69株为阳性,敏感度为97.2%,最低检测限为4.72 fmol/L.而在24株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)中,纳米胶体金探针杂交试验无一株阳性,特异度为100%.95株临床试验菌株中纳米胶体金探针杂交试验正确检出93株,准确度97.9%.结论 纳米胶体金探针杂交试验与PCR检测MRSA具有很好的一致性.应用胶体金探针杂交技术检测MRSA具有快速、简便、准确的特点,有望成为MRSA的快速诊断的新方法.     

146例金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药分析

目的了解金黄色葡萄球菌(SA)对红霉素和克林霉素的耐药性,检测红霉素对克林霉素诱导耐药的发生率及诱导耐药基因。方法采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的纸片扩散法,用头孢西丁纸片检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)并以红霉素、克林霉素双纸片法(D试验)分析红霉素对克林霉素诱导耐药表型,用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因。结果 146株SA中MRSA占57.5%。SA对红霉素及克林霉素同时耐药的有82株,占56.2%,红霉素耐药而克林霉素敏感或中介的有34株,其中D试验阳性26株,红霉素诱导克林霉素耐药率76.5%。红霉素耐药而克林霉素敏感或中介的MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)中D试验阳性分别为80.0%和71.4%。克林霉素耐药菌株主要由erm基因决定,结构型耐药菌株主要耐药基因为ermA,诱导型耐药菌株的主要耐药基因为ermC。结论临床微生物实验室应加强对SA中克林霉素诱导耐药的检测,以指导临床医师合理选用大环内酯类、林可酰胺类抗菌药物。     

金黄色葡萄球菌致病毒素基因与耐药性的相关性研究

目的研究金黄色葡萄球菌的致病毒素基因与耐药性的关系.方法对临床收集的74株金黄色葡萄球菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因 mecA 和致病毒素基因中毒休克综合征毒素‐1(TSST‐1)、杀白细胞毒素(PVL),采用纸片扩散法进行药敏试验,对红霉素耐药和克林霉素敏感的菌株做 D‐试验.结果74株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为55.4%. MRSA 除对万古霉素、呋喃妥因敏感外,对其他抗菌药物均高度耐药,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对抗药物的耐药性较轻,两组间的耐药性差异有统计学意义(P<0.05). PVL 基因阳性的 MRSA 耐药性与 PVL 基因阴性的 MRSA 比较,两组间耐药性差异无统计学意义(P>0.05). PVL 基因阳性的 MSSA 耐药性比不携带 PVL 基因的 MSSA 强,两者间差异有统计学意义(P<0.05).携带 TSST‐1基因的 MRSA 除对万古霉素、呋喃妥因无耐药菌株外,对其他16种抗菌药物100%耐药. D‐试验阳性菌株占所检菌株的10.8%,占红霉素耐药、克林霉素敏感菌株的88.9%.只有1株 PVL 基因阳性的 MRSA D‐试验阳性.结论MRSA 的耐药性非常严重,表现为对多种抗菌药物同时耐药,并且具有较高的红霉素诱导克林霉素耐药率;PVL 和 TSST‐1可增强金黄色葡萄球菌的致病力及 MSSA 的耐药性,增加了临床抗感染治疗的难度.     

金黄色葡萄球菌肠毒素的检测及结果分析

目的了解引起临床感染的金黄色葡萄球菌(SA)携带肠毒素(SE)的情况。方法对从临床标本中分离出的260株SA,用反向间接血凝试验检测其肠毒素,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测按2005年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的检测头孢西丁方法进行。结果260株SA中有172株携带肠毒素,占66.2%,主要为SEA型10.8%(28/260)、SEB型14.6%(38/260)、SEC型10.0%(26/260),同时携带二种或二种以上肠毒素的占23.8%(62/260);其中MRSA134株,全部携带肠毒素,且以SEA、SEB、SEC为主,分别为19.4%、16.4%、13.4%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)126株,携带肠毒素率为30.0%(38/126),以SEB为主,占9.5%。结论临床上SA分离株大部分都携带肠毒素,且以SEA、SEB、SEC为主,MRSA的带毒率高于MSSA。     

梅里埃VTIEK MS 质谱仪在甲氧西林耐药及敏感的金黄色葡萄球菌快速鉴定的应用研究

目的　探讨梅里埃VTIEK MS 质谱仪快速鉴定甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）及甲氧西林敏感的金 黄色葡萄球菌(MSSA) 的可行性。方法　对广州市番禺区中心医院2018 ～ 2019 年各个病区住院患者在不同部位分离的 30 株MRSA 及20 株MSSA,用VITEK 2 Compact 的药敏卡AST-P639 进行耐药性检测,用VTIEK MS 对所有菌株进 行鉴定。结果　用VITEK MS 的Launch pad 软件对30 株MRSA 及20 株MSSA 所产生的质谱峰图m/z 进行分析,质谱 峰m/z 的 3 009,5 624 和6 887 为金黄色葡萄球菌的特征峰,质谱峰m/z 2 637 及4 308 为区分MRSA 及MSSA 最主要 的特征峰,其中质谱峰m/z 2 637 MSSA 组较MRSA 组低,质谱峰m/z 4 308 则MRSA 组较MSSA 组高,不同菌株质谱 峰略有不同。结论　梅里埃VTIEK MS 可快速准确鉴别MRSA 及MSSA,且具有耗时短、灵敏度高、特异性好等特点。